一种用于同步放疗化疗的温敏原位复合凝胶及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种用于同步放疗化疗的溫敏原位复合凝胶及其制备方法与应用，具 体是一种用于同步放化疗的负载疏水性化疗药物的两亲性嵌段共聚物纳米粒、放射性同位 素标记的透明质酸与水组成的溫敏原位复合凝胶及其制备方法和应用，属于溫敏原位凝胶 技术。
【背景技术】
[0002] 目前，癌症（即恶性肿瘤）是世界上发病率和死亡率都比较高的疾病之一。在众 多治疗癌症的手段中，化疗与放疗是临床上最重要的治疗手段。首先，就化疗而言，由于体 循环的清除作用、肿瘤组织低渗透性、肿瘤细胞耐药性等问题，严重阻碍了抗肿瘤药物向肿 瘤细胞的递送效率，导致疗效差。此外，现有抗肿瘤药物在杀伤肿瘤细胞的同时对正常组织 也产生严重的毒副作用，导致临床治疗往往因毒副作用而失败，或因毒副作用的限制无法 提高剂量而达不到理想治疗效果。其次，外部放疗作为临床上另一主要的治疗手段，虽然能 够实现剂量和强度的准确控制，但是当高能粒子束穿透皮肤杀伤肿瘤组织的同时，不可避 免的对粒子束经过的组织和肿瘤组织临近组织造成严重损伤。另外，肿瘤细胞对放疗的耐 受性，也使得放疗达不到理想的治疗效果。可见，要提高放化疗效果、降低毒副作用，必须提 高治疗剂的祀向作用效率，优化递送方法，促进不同治疗剂之间的协同作用。
[0003] 两亲性聚合物自组装胶束型纳米粒自20世纪末开始被用于包裹疏水性药物，为 解决疏水性药物溶解性运一药剂学难题提供了有效的手段，大大提高了运类药物的生物利 用度，引起了广泛的关注。尤其是WPEG为亲水段的嵌段共聚物，作为难溶药物纳米载体， 具有防止蛋白质吸附、逃避网状内皮系统和巨隧细胞吞隧的性能，可W携带药物较长时间 在体内循环，大大延长了药物的半衰期，降低了毒副作用，提高了疗效，呈现出很好的应用 前景。因此，两亲性可降解聚合物具有多方面的应用领域，发展前景较好。此外，由两亲性 聚合物或其纳米粒形成的原位凝胶也呈现特有的应用性能。不同于传统的亲水凝胶，原位 凝胶是指W溶液状态给药后立即在用药部位发生相转变，形成的非化学交联的半固体制 剂。原位凝胶具有凝胶制剂的亲水性和=维网络结构及良好的组织相容性。同时，独特的 溶胶-凝胶转变性质使其兼有制备简单、使用方便、滞留时间长，多种治疗剂负载与控释等 优点，原位凝胶给药系统已成为药剂学和组织工程领域的一个研究热点。
[0004] 因此，考虑癌症治疗中种种挑战，赋予递送体系更多的功能性W及多种功能性 之间的协同发挥作用，提高肿瘤抑制效率的同时降低毒副作用。在前期工作（专利号为 ZL201010200249. 9)中，通过引入1，4,8-^氧杂螺[4. 6]-9-^烧酬灯0SU0)制备了含环 酸侧基聚醋/聚乙二醇/含环酸侧基聚醋S嵌段共聚物（PECT)，阳CT载药纳米粒可W在水 中分散形成浓度为10 %~50 %的具有流动性的纳米粒水分散液，溶胶-凝胶的相转变溫度 范围为20°C~45°C，凝胶窗口包含了体溫。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种用于同步放化疗的负载疏水性化疗药物的两亲性嵌 段共聚物纳米粒、放射性同位素标记的透明质酸与水组成的溫敏原位复合凝胶及其制备方 法和应用。由负载疏水性化疗药物的含环酸侧基聚醋-聚乙二醇-含环酸侧基聚醋两亲性 S嵌段共聚物（PECT)纳米粒、放射性同位素标记的透明质酸与水形成的组合物具有溫敏 原位凝胶性质，在溫度升高或降低的过程中，能够发生溶胶-凝胶可逆相转变，从而为化疗 药物和放疗剂的同步递送提供适宜的方法。
[0006] 本发明是通过W下技术方案加W实现的：
[0007] 本发明所述的一种用于同步放化疗的溫敏原位复合凝胶，其特征在于，凝胶由负 载疏水性化疗药物的含环酸侧基聚醋-聚乙二醇-含环酸侧基聚醋两亲性=嵌段共聚物 (PECT)纳米粒、放射性同位素标记的透明质酸与水组成，其中负载疏水性化疗药物的PECT 纳米粒占凝胶的质量百分含量为10%~50%，放射性同位素标记的透明质酸占凝胶的质 量百分含量为0. 5%~10%。
[0008] 本发明所述的溫敏原位复合凝胶的制备方法，其特征在于，将负载疏水性化疗药 物的PECT纳米粒分散在水中形成纳米粒水分散液，加入放射性同位素标记的透明质酸，形 成具有流动性的溶胶，溶胶-凝胶的相转变溫度范围为20°C~45°C。
[0009] 本发明所述的负载疏水性化疗药物的PECT纳米粒的载药量为0. 5%~10%。
[0010] 本发明所述的放射性同位素选自于P粒子发射体，包括错-177(177Lu)、 锭-90 (90Y)、鍊-188 (188Re)、铜-64(64Cu)或舰-131 (1311)，在透明质酸上进行放射性标 记，放射性核素的标记率为71. 6%~98. 5%。
[0011] 本发明所述的含环酸侧基聚醋嵌段为1，4,8-S氧杂螺[4.6]-9-十一烧酬 (T0SU0)与己内醋或丙交醋或乙交醋或它们的混合物的共聚物，平均相对分子质量为400 至45000,聚醋嵌段占阳CT的质量百分含量为30 %~80 %，而T0SU0占聚醋嵌段的质量百 分含量为1 %至100%;所述的聚乙二醇嵌段的平均相对分子质量为200至30000,占PECT 的质量百分含量为20 %至70 %。
[0012] 本发明所述的透明质酸的分子量为5000~1000000。
[0013]本发明所述的化疗药物选自于疏水性药物包括阿霉素值0讶、紫杉醇（PTX)、多西 他赛灯XT)、喜树碱（CPT)、径基喜树碱（HCPT)、长春花碱（VLB)、地塞米松值XM)、姜黄素 (CUR)、博来霉素度LM)中的一种或多种的组合。
[0014] 本发明所述的溫敏原位复合凝胶的应用，其特征在于，负载疏水性化疗药物的 PECT纳米粒和放射性同位素标记的透明质酸与水形成的具有流动性的溶胶，通过溫度变化 于20°C~45°C形成凝胶，用于同步控制化疗药物的释放和放射性同位素的福射。
[0015] 本发明所述的溫敏原位复合凝胶的应用，其特征在于，在凝胶的溶胶态时加载各 种性质的物质，如亲水性或疏水性化疗药物、蛋白质、多肤、多糖、酶、细胞等，形成液体状态 组合物，通过溫度变化于20°C~45°C形成凝胶，用于同步控制多种治疗剂的释放，或细胞、 酶的固定和培养。
[0016] 总之，本发明是基于具有良好生物相容性、可生物降解性的两亲性嵌段共聚物和 透明质酸构建的溫敏原位复合凝胶，在溫度升高或降低的过程中，能够发生溶胶-凝胶相 转变，从而为同步控制多种治疗剂的释放，或细胞和酶的固定和培养提供适宜的材料和技 术。为化疗药物和放疗剂w及其它多种治疗剂的同步递送提供适宜的方法。
【附图说明】
[0017]图1阳CT共聚物P-11的核磁共振谱图。
[001引 图2阳CT/D0X纳米粒N-11的粒径分布。
[001引图3 (A)键合咪挫的透明质酸的核磁共振谱图；度）丫-计数仪检测放射性舰-131 标记的透明质酸H-5的标记率与似纯化。
[0020] 图4PECT/D0X纳米粒N-11水分散液与放射性标记的透明质酸H-5的流变曲线。 [002。 图5阳CT/D0X纳米粒N-11与放射性标记的透明质酸H-5共同作用下的克隆存活 分析。
【具体实施方式】
[0022] 下面结合实施例对本发明作进一步说明。
[0023] 实施例1 :
[0024] 将相对分子质量1500的聚乙二醇（1. 50g)加入反应器，加热使聚乙二醇烙融，抽 真空除水后自然冷却；依次加入e-化(3. 23g)、T0SU0(0. 98g)和辛酸亚锡（14mg)，反应 物加完后，抽真空、充氮气，真空密封后在磁力揽拌下于140°C下反应12h;反应结束后，用 二氯甲烧溶解聚合物，将聚合物倒入冷正己烧中沉淀，放入冰箱中，冷冻，抽滤，干燥，得到 PECT共聚物P11，采用核磁共振表征聚合物结构并计算相对分子质量，核磁氨谱示例如图1 所示。
[002引实施例2 :
[0026] 装置与操作同实施例1，改变聚乙二醇的相对分子质量W及调节聚醋段单体组成 和比例，制备出表1中的嵌段共聚物。
[0027] 表1含环酸侧基可生物降解两亲性阳CT嵌段共聚物
[0028]
[0029]
[0030]M。代表聚乙二醇嵌段的相对分子质量;Mb代表疏水性聚醋嵌段的相对分子质量; Mp代表嵌段共聚物的相对分子质量；m。代表疏水性聚醋嵌段占PECT聚合物的质量百分含 量;1%代表T0SU0单元占聚醋嵌段的质量百分含量；化代表己内醋；LA代表丙交醋；GA代 表乙交醋