/重量。
[0098]表 3*
[0099]
[0100] $制剂可以通过在70至75°C加热下在烧杯中混合所述成分直到均匀来制备。然 后，可以将所述制剂冷却到标准室温（20至25°C)。另外，如果希望的话，例如可以添加另 外的成分来改变组合物的流变特性。
[0101] **可以使用本说明书中所描述的任何另外的成分（或其组合）。
[0102] ***例如可以添加赋形剂以改变组合物的流变特性。或者，可以改变水的量，只要 组合物中水的量为至少30 %重量/重量，优选40 %至55 %重量/重量。
[0103]表 4*
[0104]
[0105] $制剂可以通过在70至75°C加热下在烧杯中混合所述成分直到均匀来制备。然 后，可以将所述制剂冷却到标准室温（20至25°C)。另外，如果希望的话，例如可以添加另 外的成分来改变组合物的流变特性。
[0106] **可以使用本说明书中所描述的任何另外的成分（或其组合）。
[0107] ***例如可以添加赋形剂以改变组合物的流变特性。或者，可以改变水的量，只要 组合物中水的量为至少35 %重量/重量，优选40 %至55 %重量/重量。
[0108] 表 5*
[0109]
[0110] $制剂可以通过在70至75°C加热下在烧杯中混合所述成分直到均匀来制备。然 后，可以将所述制剂冷却到标准室温（20至25°C)。另外，如果希望的话，例如可以添加另 外的成分来改变组合物的流变特性。
[0111] **可以使用本说明书中所描述的任何另外的成分（或其组合）。
[0112] ***例如可以添加赋形剂以改变组合物的流变特性。或者，可以改变水的量，只要 组合物中水的量为至少35 %重量/重量，优选40 %至55 %重量/重量。
[0113] 实施例2
[0114] 分析
[0115] 本说明书和权利要求全文所公开的成分的组合的功效可以通过使用以下分析来 确定。
[0116] 红斑分析：测量皮肤发红减少的分析可以使用MinoltaChromometer进行评估。 皮肤红斑可以通过在受试者前臂施用0. 2%的十二烷基硫酸钠溶液来引发。该区域用封闭 的贴片保护24小时。24小时后，除去贴片，可以使用MinoltaChromaMeter的a*值对刺 激引发的发红进行评估。f值测量肤色在红色区域的变化。测定之后，立即用本发明的组 合物处理该区域。定期进行重复测量以确定制剂减少发红和刺激的能力。
[0117] 皮肤水分/水合分析：皮肤水分/水合的益处可以通过利用以Nova Dermal Phase Meter进行的阻抗测量进行测量。阻抗计测量皮肤水分含量的变化。皮肤外层具有不同的 电性质。当皮肤干燥时，其导电很差。当其变得更加含水时，产生增加的导电性。因此，皮 肤阻抗（与导电性有关）的变化可以用于评价皮肤水合的变化。装置可以根据仪器说明针 对每个测试日进行校准。还可以对温度和相对湿度进行标记。对受试者可以进行如下评 估：测量前其可以在具有确定湿度（例如30-50%)和温度（例如68-72°C)的室内进行平 衡。在脸的每一侧进行三个独立的阻抗测定，并对其进行记录和平均。阻抗计可以使用T5 设定，其对施用到脸上每五秒的阻抗值进行平均。变化可以以统计方差和显著性进行报道。
[0118] 皮肤清透度和雀斑与老年斑减少的分析：皮肤清透度和雀斑与老年斑减少使用 MinoltaChromometer进行评价。肤色的变化可以使用MinoltaChromaMeter的a*值进 行评估以确定由于产品处理引起刺激的可能性。f值测量肤色在红色区域的变化。这用来 确定组合物是否导致刺激。测量可以在脸的每一侧进行并进行平均，作为左边和右边脸的 值。皮肤清透度也可以使用MinoltaMeter进行测量。测量是MinoltaMeter的a*、b、和 L值的组合，并与皮肤的亮度有关，而且非常好的对应皮肤的光滑度和水合。皮肤测定如上 进行。在一个非限制性方面，皮肤清透度可以描述为L/C，其中C是色度并定义为（a2+b2)1/2。
[0119] 皮肤干燥、表面细纹、皮肤光滑度和肤色分析：皮肤干燥、表面细纹、皮肤光滑度和 肤色可以用临床评分技术进行评估。例如，皮肤干燥的临床评分可以通过五点标准Kligman scale进行确定：（0)皮肤是柔软和湿润的；（1)皮肤呈现正常而没有可见的干燥；（2)皮肤 触摸感觉轻微干燥而没有可见的剥落；(3)皮肤感觉干燥、坚韧并且具有有些鳞肩的发白 的外观；以及（4)皮肤感觉非常干燥、粗糙并且具有有鳞肩的发白的外观。评估可以由两个 临床医师独立进行并进行平均。
[0120] 肤色临床评分分析：肤色的临床评分可以通过十点模拟数值刻度实施：（10)平滑 的均匀的皮肤、粉红棕色的颜色。手持放大镜检查时没有暗的、发红的或有鳞的斑块。皮肤 的微观纹理摸上去非常均匀；（7)不用放大镜观察均匀的肤色。没有鳞状区域，但是有由于 色素淀积或红斑引起的疹斑。没有直径大于lcm的疹斑；（4)轻易地注意到皮肤疹斑和不 均匀的纹理。少量鳞片。某些区域摸上去粗糙的皮肤；以及（1)不均匀的皮肤着色和纹理。 多个区域的鳞片和疹斑，色素减退型、发红的或黑色的斑点。大面积的直径超过lcm的不均 匀着色。评估由两个临床医师独立进行并进行平均。
[0121] 皮肤平滑度的临床评分分析：皮肤光滑度的临床评分可以通过一个十点模拟数值 刻度进行分析：（10)光滑的，皮肤是湿润的和闪光的，手指划过表面时没有阻力；（7) -定 程度光滑的，微小的阻力；(4)粗糙的、可见地改变的，摩擦时有摩擦力；以及（1)粗糙的、片 状的、不均匀的表面。评估由两个临床医师独立进行并进行平均。
[0122] 用Packman等人（1978)公开的方法进行的皮肤光滑度和皱纹减少的分析：皮肤光 滑度和周围的减少也可以通过使用Packman等人（1978)公开的方法进行可视化评估。例 如，每一受试者就诊时，对每一受试者的表面面线（SFL)的深度、浅度和总数量都可以进行 认真的评分和记录。通过将数量因子乘以深度/宽度/长度因子得到数字的分数。获得眼 睛区域和嘴巴区域（左侧和右侧）的分数，加到一起作为总的皱纹分数。
[0123] 用HargensBallistometer进行的皮肤紧致度分析：皮肤紧致度可以用Hargens Ballistometer，一种通过在皮肤上落下一个小物体并记录前两个反弹峰来评估皮肤弹性 和紧致度的装置，进行测量。ballistometry是使用相对钝的探头（4平方毫米-接触面积） 的小的轻量探测器。探测器轻轻地穿透进入皮肤，导致依赖于皮肤外层性质的测量，所述皮 肤外层包括角质层和外表皮以及部分真皮层。
[0124] 用GasBearingElectrodynamometer进行的皮肤柔软度/柔韧性分析：皮肤柔软 度/柔韧性可以使用GasBearingElectrodynamometer，一种测量皮肤压力/张力性质的 仪器，进行评估。皮肤的黏弹性与皮肤保湿有关。可以通过用双面胶将探测器附着在皮肤 表面实现对脸颊区域特定位点的测量。大约3. 5gm的力平行施加于皮肤表面，精确地测量 皮肤的位移。然后可以计算皮肤的柔韧性，并表达为DSR(动态弹簧刚度，以gm/mm计）。
[0125] 用复制品进行的线条和皱纹的显现分析：皮肤上线条和皱纹的显现可以使用复制 品进行评估，所述复制品是皮肤表面的印模。可以使用如硅橡胶的材料。复制品可以通过 图像分析进行分析。线条和皱纹可见性的变化可以通过利用硅复制品形成受试者的脸并用 计算机图像分析系统分析复制品图像进行客观地定量。复制品可以从眼睛区域和颈部区域 获得，并用数码相机以低照明入射角进行拍摄。数字图像可以用图像处理程序进行分析并 确定复制品被皱纹和细线条覆盖的区域。
[0126] 用表面光度仪/记录针的方法进行的皮肤表面轮廓分析：皮肤表面轮廓可以通过 使用表面光度仪/记录针的方法进行测量。这包括闪光或拖动记录针穿过复制品表面。记 录针的垂直位移通过距离传感器可以录入计算机，在扫描复制品的一定距离后，皮肤轮廓 的分析可以以二维曲面产生。该扫描可以沿着固定的轴重复任意次数以产生模拟的皮肤 3-D图像。使用记录针技术可以获得十个随机的复制品截面，并组合产生平均值。感兴趣的 值包括Ra，其为通过积分相对于平局轮廓高度的轮廓高度计算得到的所有粗糙度（高度） 值的算术平均数。Rt，其为最高峰和最低谷之间的最大垂直距离，以及Rz，其为平均峰振幅 减去平均峰高度。数值以用mm为单位标定的数值给出。设备应在每次使用前通过扫描已 知数值的金属标准物进行标准化。Ra值可以通过下式计算：Ra=标准化粗糙度；lm =横向 (扫描）长度；以及y=轮廓位置相对于平均轮廓高度的绝对值（X-轴）。
[0127] MELAN0DERM?分析：在其他非限制性方面，本发明的组合物的功效可以通过使用 皮肤类似物，例如举例来说MELAN0DERM?，进行评估。黑素细胞，皮肤类似物中细胞的一 种，当暴露于L-二羟苯基丙氨酸（L-D0PA)(黑色素的前体）时明确地污染。皮肤类似物 MELAN0DERM?可以用各种含有本发明的组合物和增白剂的赋形剂进行处理，或仅使用赋形 剂作为对照物。或者，未处理的皮肤类似物样品可以用作对照物。
[0128] 0RAC分析：芳香的皮肤活性成分和组合物的氧自由基吸收（或吸收率）能力 (0RAC)还可以通过测量这类成分或组合物的抗氧化活性进行分析。该分析可以定量抑制氧 化剂，例如已知导致损害细胞（例如皮肤细胞）的氧自由基，的活动的程度及所用时间。芳 香的皮肤活性成分和组合物的0RAC值可以通过本领域普通技术人员已知的方法进行确定 (参见U.S.公开号2004/0109905和2005/0163880 ;Cao等人（1993)，其全部内容通过引用 并入）。总之，Cao等人（1993)描述的分析测量了抗氧化化合物在测试材料中抑制氢过氧 自由基生成物AAPH引起的B-藻红蛋白荧光（B-PE)下降的能力。
[0129] 基质金属蛋白酶活性（MMP3 ;MMP9)分析：体外的基质金属蛋白酶（MMP)抑制分 析。MMP是胞外蛋白酶，其凭借宽的底物特异性在许多正常的和疾病状态起作用。MMP3底物 包括胶原蛋白、纤维粘连蛋白和层粘连蛋白；而MMP9底物包括胶原蛋白VII、纤维粘连蛋白 和层粘连蛋白。使用来自BioMolInternational的用于MMP3(AK-400)和MMP-9(AK-410) 的比色药物发现试剂盒，该分析设计用于测量MMP的蛋白酶活性，使用含硫多肽作为显色 底物（Ac-PLG-[2-巯基-4-甲基-戊酰基]-LG-0C2H5) 5, 6。MMP裂解位点的肽键由含硫多 肽中的硫酯键替代。该键被MMP水解产生巯基，其与DTNB[5, 5'-二硫代双（2-硝基苯甲 酸），埃尔曼试剂]反应生成2-硝基-5-硫代苯甲酸，可以通过其在412nm处的吸光度进行 检测（在pH6. 0 和高于 7 时，ε= 13600M-lcm-l)。
[0130]B16色素沉着分析：黑素生成是黑素细胞产生黑色素的过程，黑色素是一种天然 产生的给予皮肤、毛发和眼睛颜色的色素。抑制黑素生成有益于预防皮肤变黑和减轻与老 化有关的黑斑。该生物分析采用B16-F1黑素细胞（ATCC)，一种永生化的小鼠黑色素瘤细胞 系，来分析化合物对黑素生产的效果。该分析的终点是黑色素产生和细胞活性的分光光度 测量。可以在37°(：下10%的0) 2中利用10%的胎牛血清（]^(^3七6(*)在标准01^]\1生长培 养基中培养B16-F1黑素细胞，然后用本说明书中所公开活性成分、成分的组合或具有所述 组合的组合物中的任一种处理6天。培育之后，通过在405nm处的吸收测量黑色素分泌，定 量细胞活性。
[0131] 胶原蛋白刺激分析：胶原蛋白是对皮肤结构关键的一种细胞外基质蛋白。增加的 胶原蛋白合成帮助改善皮肤坚实度和弹性。该生物分析可以用来检测本说明书中所公开活 性成分、成分的组合或具有所述组合的组合物中的任一个对人类表皮纤维母细胞生成前胶 原肽（胶原蛋白的前体）的影响。该分析的终点是反映前胶原肽的存在和细胞活性的分光 光度测量。该分析采用定量的三明治酶免疫分析技术，因此对前胶原肽特异的单克隆抗体 预先涂覆在微孔板上。可以将标准品和样品移液到孔中，存在的所有前胶原肽由固定化的 抗体结合。冲走所有未结合的物质后，将对前胶原肽特异的酶联多克隆抗体添加到孔。冲 洗以去除所有未结合的抗体-酶反应物之后，可以将底物溶液添加到孔，显色与最初步骤 中结合的前胶原肽的量成比例，使用酶标仪在450nm处检测。可以停止显色，并测量颜色的 强度。可以将在37°C下10%的C02中利用10%的胎牛血清（Mediatech)在标准DMEM生长 培养基中培养的亚融合正常人类成熟表皮成纤维母细胞（CascadeBiologies)用本说明书 中所公开的成分的组合或具有所述组合的组合物的每一种处理3天。培养之后，可以收集 细胞培养基，并可以使用Takara的三明治酶联免疫吸附分析（ELISA) (#MK101)定量前胶原 肽分泌的量。
[0132] 肿瘤坏死因子-a(TNF-α)分析：TNF超家族的原型配体，TNF-α，是一种在炎症 中起主要作用的多效细胞因子。其表达的增加与促炎活性上调有关。该生物分析可以用来 检测本说明书中所公开活性成分、成分的组合或具有所述组合的组合物中的任一种对人类 表皮角化细胞生成TNF-α的影响。该分析的终点可能是反映TNF-α的存在和细胞活性的