高治疗设备的利用率，降低治疗成本，减少患者的经济负担。
【附图说明】
[0022]图1是本发明中细胞的存活率图；
[0023]图中所示:氯喹浓度为1(^1;碳离子束剂量为267，LET = 75keV/μ m，其中，1为对照组，2为氯喹处理组，3为碳离子照射组，4为氯喹和碳离子照射联合处理组。
[0024]图2为本发明中所涉及的细胞凋亡图；
[0025]图中所示:氯喹浓度为1(^1;碳离子束剂量为267，LET = 75keV/μ m，其中，1为对照组，2为氯喹处理组，3为碳离子照射组，4为氯喹和碳离子照射联合处理组。
[0026]图3为本发明中小鼠体重随时间的变化图；
[0027]图中所示:氯喹浓度为1(^1;碳离子束剂量为267，LET = 75keV/μ m，其中，1为对照组，2为氯喹处理组，3为碳离子照射组，4为氯喹一次给药，碳离子照射组，5为氯喹连续给药，碳离子照射组。
[0028]图4为本发明中肿瘤组织的外貌图；
[0029]图中所示:氯喹浓度为10 μ Μ ;碳离子束剂量为2Gy，LET = 75keV/ym
[0030]图5为本发明中肿瘤组织体积比图；
[0031]图中所示:氯喹浓度为1(^1;碳离子束剂量为267，LET = 75keV/μ m，其中，1为对照组，2为氯喹处理组，3为碳离子照射组，4为氯喹一次给药，碳离子照射组，5为氯喹连续给药，碳离子照射组。
[0032]图6为本发明中肿瘤组织重量图；
[0033]图中所示:氯喹浓度为1(^1;碳离子束剂量为267，LET = 75keV/μ m，其中，1为对照组，2为氯喹处理组，3为碳离子照射组，4为氯喹一次给药，碳离子照射组，5为氯喹连续给药，碳离子照射组。
[0034]图7为本发明中肿瘤组织的病理学变化图；
[0035]图中所示:氯喹浓度为1(^1;碳离子束剂量为267，LET = 75keV/μ m，其中，1为对照组，2为氯喹处理组，3为碳离子照射组，4为氯喹和碳离子照射联合处理组。
[0036]图8为本发明中TUNEL法检测肿瘤组织凋亡图；
[0037]图中所示:氯喹浓度为1(^1;碳离子束剂量为267，LET = 75keV/μ m，其中，1为对照组，2为氯喹处理组，3为碳离子照射组，4为氯喹和碳离子照射联合处理组。
【具体实施方式】
[0038]以下结合附图对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
[0039]如图1所示，所述的一种利用自噬抑制剂氯喹提高离子束治疗肿瘤疗效的方法，其特点是使用氯喹类自噬抑制剂和离子束照射，其采用的氯喹类自噬抑制剂对肿瘤进行预处理，再进行离子束照射，抑制肿瘤的生长；具体包括如下步骤:
[0040](1)药物配制:将氯喹类自噬抑制剂溶解在生理盐水中，制成药物溶液，将该溶液过滤待用；
[0041](2)药物注射:通过注射给药，剂量为2?50 μ Μ或者20?500mg kg 'day \注射后4小时进行离子束照射；
[0042](3)离子束照射:采用离子束治疗装置，通过离子加速器将离子源产生带电离子加速到速度约为光速的70%，通过束流输运线传输到治疗室，再使用照射设备调整照射野与肿瘤形状一致，进行肿瘤治疗。
[0043](4)监测:照射完毕后，持续监测进食情况和体重，并测量肿瘤体积。
[0044]所述的第二步骤中的氯喹类自噬抑制剂包括氯喹、羟氯喹和4-氨基喹啉，氯喹类自噬抑制剂用药量为2?50 μ Μ或20?500mg kg May ^
[0045]所述的第二步骤和第三步骤中的离子束包括质子束和重离子束，所述的重离子束包括氦(He)、锂(Li)、铍(Be)、硼⑶、碳(C)、氮(N)、氧(0)、氟(F)、氖(Ne)、娃(Si)、氩(Ar)、铁(Fe)、铜(Cu)、铂(Pt)、金(Au)离子，离子束照射使用剂量范围:单次照射剂量为2?8Gy，总照射剂量为30?80Gy。
[0046]所述的重离子束优选碳离子束和氧离子束。
[0047]所述的离子束照射的次数为1?35次，优选4?20次。
[0048]所述的一种抑制自噬提高离子束治疗肿瘤疗效的氯喹类药物，其具体的实验过程有如下实例:
[0049]实施例1:细胞实验
[0050](1)细胞培养
[0051]S180肉瘤细胞系在含10 %胎牛血清、1X105U/L青霉素、100mg/L链霉素的RPM1-1640培养液中，置于37°C的5% C02孵箱中，保持饱和湿度培养。传代时将细胞悬液500?lOOOrpm离心5分钟，吸弃上清，加入培养基，用吸管轻轻吹打成细胞悬液，按照1:3比例进行传代，培养至对数生长期时用于实验。
[0052](2)细胞存活检测
[0053]S180细胞达到对数生长期后，分为对照(Control)、氯喹处理(CQ)、照射(IR)、氯喹和照射联合处理(IR+CQ) 4组，照射组用重离子照射2Gy (LET = 75keV/ μ m)，照前4小时给药10 μ Μ，分别在处理后第5天和第7天进行细胞计数，检测不同处理对细胞存活的影响，结果发现，联合处理组显著降低了 S180细胞的存活率(如图1所示)。
[0054](3)细胞凋亡检测
[0055]S180细胞达到对数生长期后，分为对照(Control)、氯喹处理(CQ)、照射(IR)、氯喹和照射联合处理(IR+CQ) 4组，照射组用重离子照射2Gy (LET = 75keV/ μ m)，照前4小时给药10 μ M。约1000?2000rpm离心5分钟，弃上清收集细胞，用PBS小心重悬，1000?2000rpm离心5分钟，弃上清，加入195 μ 1 Annexin V-FITC结合液轻轻重悬细胞；加入5 μ 1Annexin V-FITC，轻轻混匀，再加入10 μ 1碘化丙啶(ΡΙ)染色液，轻轻混匀；室温避光孵育10?20分钟，置于冰浴中，随即进行流式细胞仪检测。Annexin V/PI双染结果发现，联合处理组的凋亡率都高于对照组和单独处理组，并且联合处理组与对照组差异极显著(如图2所示)。
[0056](4)蛋白表达检测
[0057]S180细胞达到对数生长期后，分为对照(Control)、氯喹处理(CQ)、照射(IR)、氯喹和照射联合处理(IR+CQ) 4组，照射组用重离子照射2Gy (LET = 75keV/ μ m)，照前4小时给药10 μ Μ，分别在照后第4、12、24小时提取蛋白，用Western-blot检测与自噬或凋亡相关的蛋白的表达情况，结果发现，联合处理降低了自噬早期标志蛋白LC3的表达，提高了自噬晚期标志蛋白p62的表达，同时抑制了抗调亡蛋白Bcl_2的表达，提尚了促调亡蛋白Bax的表达水平。
[0058]实施例2:动物实验
[0059]将S180细胞培养到对数生长期，离心收集后用PBS稀释，向雌性昆明鼠腹腔注射200 μ 1 (约1 X 106个细胞)，约7天后抽取腹水，离心收集细胞，用PBS稀释后向雌性昆明鼠背部注射，使其荷瘤，当瘤体达到0.5?1cm时，用于实验。
[0060]将荷瘤鼠随机分为对照(Control)、氯喹处理(CQ)、照射(IR)、氯喹和照射联合处理(IR+CQ)4组，处理前测量小鼠体重和肿瘤体积(肿瘤体积=短径2X长径X0.5);照射组小鼠用重离子射线通体照射，LET = 75keV/ μπι，剂量2Gy ;CQ组小鼠照前4小时给药，剂量30mg kg May \ 200 μ 1腹腔注射。照后隔日测量小鼠体重和肿瘤体积，分别在照后第3天或15天处死小鼠，取肿瘤组织称重并测量大小，然后取部分肿瘤组织放入2.5%戊二醛中，4°C保存，用于电子显微镜观察，另一部分放入4%多聚甲醛中用于石蜡切片，其余部分提取组织蛋白，分步开展后续实验。
[0061]组织切片制备:将预处理的组织置于包埋盒中，用蒸馏水冲洗30分钟，按照标准程序进行组织脱水、石蜡包埋、切片(厚度4 μπι)、摊片、烤片等步骤，制好的切片在4°C冰箱中保存。
[0062]1.氯喹联合重离子照射对肿瘤形态的影响
[0063]与对照组相比，照射后第15天，单纯照射组(IR)和连续