Vegfr3抑制剂的制作方法
【专利说明】VEGFR3抑制剂
[0001] 本发明涉及抑制血管内皮生长因子受体3 (VEGFR3)(又称为Fms相关酪氨酸激酶 4 (FLT4))的2，4, 5-取代嘧啶、其制备方法或含有所述化合物的药剂或组合物。本发明还涉 及一种使用所述化合物来治疗增殖性疾病（如癌症）以及治疗通过控制和/或抑制淋巴管 发生来改善的疾病的方法。
[0002] 背景
[0003] 在21世纪，癌症仍然是死亡的主要原因。因此，目前将相当大的药物研宄和开发 努力放在发现可为癌症患者提供寿命延长或治愈选择的治疗剂上。
[0004] 虽然存在许多不同种类的癌症，每种癌症表现出不同组的遗传和生长特性，但许 多实体癌类型的共同点是能够转移。肿瘤局限于身体的一个区域并且可通过手术介入和/ 或放射疗法来控制，直到发生转移。然而，转移导致癌细胞扩散至身体的不同部分并且虽然 手术介入可去除原发性肿瘤病变，但所有转移性病变的去除极难控制。
[0005] 肿瘤转移为多阶段过程，其涉及分解细胞外基质、浸润局部组织实质、内渗到局部 血管（regionalbloodvessel)和淋巴管中、在循环中存活并且最后在次生组织部位中外 渗、存活和生长（Front.Biosci.(Elite编著）。2012 ;4 :1888-1897)。
[0006] 可通过血管或淋巴管发生转移。在若干方面，淋巴管不同于血管。大集合淋巴管 在其壁中含有血管平滑肌细胞以及瓣膜，所述瓣膜防止淋巴液回流。然而，不像典型的毛 细血管，毛细淋巴管缺乏周皮细胞和连续基膜并且含有大的内皮间瓣膜样开口（J.Theor. Med. 2003 ;5 :59-66)。由于其更大的渗透性，毛细淋巴管比毛细血管在允许肿瘤细胞穿 过上更有效。实验证据表明正在生长的肿瘤病变内的淋巴管发生（新淋巴管的形成）促 进通过淋巴管的转移。淋巴管发生的控制为预防淋巴结转移呈现具有吸引力的治疗策略 (J.Clin.One. 2007 ;25 :4298-4307)。
[0007] 淋巴系统由毛细管和由内皮细胞连续排列的较大的集合管构成，其使外渗的流体 和大分子从胞间隙返回至血液循环。通过淋巴管转移至区域淋巴结是许多癌症类型共同的 肿瘤进展过程。淋巴结累及程度为许多类型癌症分期的主要决定因素并且为用作受影响的 淋巴结的手术介入和放射治疗介入的基础的重要预后因素。
[0008] 通过生长因子VEGFC或VEGFD结合至其膜受体VEGFR3的分子信号传导已显示在 淋巴管发生过程中起到核心作用（Brit.J.Cancer2006 ;94 :1355-1360)。VEGFR3受体的 刺激通过磷酸化其细胞内区域发生并且触发驱动淋巴内皮细胞增殖、迀移和分化从而导致 淋巴管形成的下游信号传导级联（Exp.CellRes. 2006 ;312 :575-583)。VEGFC或VEGFD的 表达增加已显示促进肿瘤相关的淋巴管发生，从而使淋巴介导的向区域淋巴结的转移成为 可能。已针对若干不同肿瘤类型报道了这些观察，包括结肠直肠癌（Oncol.Rep. 2009 ;22: 1093-1100)、肺癌（Ann.Oncol. 2010;21:223-231)、胃癌（Surgery2009;146:896-905)、 肾癌（Oncol.R印? 2008 ;20 :721-725)、前列腺癌（Clin.CancerRes. 2004 ; 10 :5137-5144) 以及卵巢癌（Cancer2004;101:1364-1374)。在啮齿动物中的若干肿瘤实验模型中，阻断 VEGFC、VEGFD/VEGFR3介导的信号传导已显示抑制淋巴管发生并且遏制淋巴结转移（Ann. N.Y.Acad.Sci. 2008 ；113 ： ,225-234 ；Int.J.Cancer2009 ；125 :2747-2756)〇
[0009]VEGFR3为在胚胎发生过程中广泛表达于内皮细胞中的跨膜酪氨酸激酶受体 (Biochem.J. 2011 ;437 :169-183)。在发育后期，VEGFR3表达变得局限于发育淋巴管。在 成人中，VEGFR3表达主要局限于淋巴内皮和⑶34+造血细胞的子集。另外，某些内分泌器 官中的有孔毛细血管和静脉以及单核细胞、巨噬细胞和一些树突细胞（DC)在成人中继续 表达VEGFR3。小鼠胚胎中VEGFR3基因的破坏导致血管网络形成失败并且在胚胎第9. 5天 之后死亡（Biochem.J. 2011 ;437 :169-183)。这项观察表明VEGFR3在胚胎脉管系统的发育 中起到关键作用。在癌症中，VEGFR3在转移性淋巴结和淋巴管瘤中的淋巴窦中过表达。此 外，在许多情况下，癌细胞自身表达VEGFR3。表达VEGFR3的癌细胞已显示出其增殖依赖于 VEGFR3/VEGFC信号传导（Eur.J.Canc. 2011 ;47 :2353-2363)。
[0010] 基于上文，显而易见，VEGFR3信号传导的抑制具有作为用于哺乳动物受试者的治 疗策略的强烈可能，所述哺乳动物受试者已被诊断患有特征在于表达这个受体的内皮细胞 的增殖的疾病。在癌症的情况下，靶向VEGFR3可能通过遏制淋巴转移和遏制表达VEGFR3 的癌细胞的生长而产生治疗益处。
[0011] 有趣的是，并且从VEGFR3轴线内的靶选择观点来看可能重要的是，在其中VEGFC 和VEGFD基因纯合缺失的小鼠中，血液脉管系统正常发育，不像VEGFR3纯合敲除小鼠的 胚胎心血管表型：即，这两个配体的缺失与受体的缺失不相同（Mol.Cell.Biol. 2008 ;28 : 4843-4850)。这些数据提高了以下可能性：存在VEGFR3的另一个配体或VEGFR3可能够通 过不依赖于其配体VEGFC和VEGFD的尚且未知的方式起作用。上文表明与单独靶向VEGFC 或VEGFD相比，靶向VEGFR3对阻断VEGFC/D-VEGFR3信号传导更有利。
[0012] 虽然存在许多涉及具有各种水平的VEGFR3活性和选择性的酪氨酸激酶抑制剂 的已报道的研宄（Nat.Rev.DrugDiscov. 2006 ;5 :835-844 ;Mol.CancerTher. 2007 ;6 : 2012-2021;CancerRes. 2009 ;69 :8009-8016 ;Mol.CancerTher. 2012 ;11 :1637-1649)，但 这些研宄在其它酪氨酸激酶上具有一些至少部分由抑制导致的限制。
[0013] 尽管如此，总体来说这些研宄加强了以下结论：VEGFR3的抑制可遏制或减少淋巴 管发生和/或淋巴引起的转移。
[0014] 因此，选择性抑制VEGFR3的化合物将有用于治疗增殖性疾病，如癌症。
[0015] 如上所述，VEGFR3在淋巴管发生的控制上起到重要作用。因此，VEGFR3的抑制剂 可用于治疗其中淋巴管发生的控制/抑制具有治疗益处的除癌症以外的疾病。淋巴系统在 慢性炎症性疾病和移植排斥中起主要作用。通过遏制VEGFR3功能来抑制淋巴管发生可在 这些病状中提供可行的治疗策略。
[0016]例如，临床前研宄已表明，VEGFR3在角膜和眼部表面中的表达在角膜新血管形成 过程中调节并且VEGFR3介导角膜树突细胞至淋巴结的迀移和对角膜移植的免疫性的诱 导。其中在发炎和高度血管化的宿主床上进行移植的高危角膜移植具有非常低的成功率， 其中排斥率高达90% (J.LeukocBiol. 2003 ;74 :172-178)。在临床前模型中，用VEGFR3抗 体治疗导致角膜移植排斥的显著遏制（Nat.Med. 2004 ; 10 :813-815)。
[0017] 在眼睛的脉络膜层中产生新血管的脉络膜新血管形成（CNV)导致慢性炎症， 所述慢性炎症涉及年龄相关黄斑变性（AMD)的发病机理并且由包括血管内皮生长因 子（VEGF)家族成员VEGFA和VEGFC的非控制表达的因素驱动（J.Cell.Physiol. 2012; 227(1) :116-26)。已开发了靶向VEGFA的用于AMD的治疗剂，例如抗VEGFA抗体兰尼单抗 (ranibizumab)和贝伐单抗（bevacizumab)以及抗VEGF适体哌加他尼，但迄今为止还没有 治疗剂被临床评价为通过调节VEGFC及其同源受体VEGFR3来介导作用。
[0018] 因此，抑制VEGFR3的化合物可有用于预防和/或治疗眼睛疾病，例如角膜移植排 斥和年龄相关黄斑变性。
[0019] 此外，有越来越多的证据表明淋巴管对皮肤的慢性炎症具有积极作用。淋巴内皮 细胞增殖和淋巴增生已在小鼠的慢性皮肤炎症中有所描述并且已针对牛皮癣患者的皮肤 病变有所报道（Blood2004 ; 104 :1048-1057)。
[0020] 因此，抑制VEGFR3的化合物可有用于预防和/或治疗皮肤炎症，如患有牛皮癣的 患者的皮肤病变。
[0021] 还发现淋巴管发生与肾移植排斥相关。产生VEGFC的巨噬细胞诱导新淋巴管的 形成，所述新淋巴管形成诱导和支持在肾移植物中维持同种异体免疫应答（Nat.Med. 2006; 12 :230-234)〇
[0022] 因此，抑制VEGFR3的化合物可有用于预防和/或治疗肾移植中的排斥。
[0023] 共同未决申请PCT/GB2012/000175公开了抑制FAK和VEGFR3的化合物。
[0024] 概述
[0025] 本发明人发现了有效作为VEGFR3抑制剂的特定种类的化合物。这些化合物可对 VEGFR3表现出比对如FAK和/或VEGFR2的激酶更高的选择性。
[0026] 在第一方面，本发明提供以下式（I)的化合物或其异构体、盐、溶剂合物或前药：
[0027]
【主权项】
1. 一种式（I)化合物或其异构体、盐、溶剂合物或前药： 其中：
A为通过芳环碳原子连接至所述NH基团的任选取代的5-10元杂芳基，其中所述杂芳基 环系统含有1至4个选自N、O和S的杂原子，并且； A可带有不在所述NH基团的α位的取代基Ria并且可任选地进一步带有不在所述NH 基团的α位的一个、