一种α-淀粉酶抑制剂及其提取方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种α-淀粉酶抑制剂及其提取方法与应 用。
【背景技术】
[0002] 阻止产生热量来源的淀粉的消化吸收，对肥胖和相关疾病将有很大改善。a_淀粉 酶可对淀粉的进行水解，因此，研究开发对a-淀粉酶具有抑制作用的物质，是一种预防和 治疗肥胖的有效途径。现在市场上占有率较高的减肥药物主要是一些化学类药物，但化学 类药物通常伴随着一定的副作用。而天然产物具有高效、低毒、无副作用等优势。部分植物 多酚类化合物能抑制淀粉酶，阻碍机体对淀粉的消化吸收，减少热量的摄入，从而促进减轻 体重，在很大程度上减少碳水化合物的摄入量，因此淀粉酶抑制剂具有帮助减肥和保持体 重的药理潜力。此外，淀粉酶抑制剂将降低碳水化合物的摄入，影响了碳水化合物的吸收， 从而抑制餐后血糖升高，降低餐后血糖对胰岛素的影响。这种调制机制可被用于糖尿病的 临床治疗。抑制a-淀粉酶还可增加回肠未消化的碳水化合物的积累而延迟胃排空。因此， 抑制淀粉酶还可以调节胃肠道功能和肠肽释放，加强饱腹感，减少食物摄入量。由于植物来 源的天然多酚类化合物具有结构多样性、低毒性、来源广泛等特点，因此从植物中筛选新的 副作用小的α-淀粉酶抑制剂一直是研究热点。
[0003] 因此，现有技术还有待于改进和发展。
【发明内容】
[0004] 鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种α-淀粉酶抑制剂及其提 取方法与应用，旨在解决现有减肥药物主要是一些化学类药物，而化学类药物有一定副作 用的问题。
[0005] 本发明的技术方案如下： 一种α-淀粉酶抑制剂，其中，所述α-淀粉酶抑制剂为苯丙素苷，所述苯丙素苷的结 构通式如下：
其中，当R2=H时，1^=1?3=0!1;当R2=rha时，1^=1?3=0!1 ;当R2=rha时，1^=1?3=!1;当R2=H时，R!=OH，R3=H;当R2=H时，R!=R3=H。
[0006] 所述的α-淀粉酶抑制剂，其中，所述苯丙素苷来源于紫茎女贞干叶。
[0007] -种如上所述的α-淀粉酶抑制剂的提取方法，其中，包括步骤：取紫茎女贞干 叶，捣碎，热回流提取，静置过滤，减压浓缩，得提取物，反复操作2~3次，将所得上清液合 并，合并的上清液经Diaion柱层析分离，得到苯丙素苷。
[0008] 所述的α-淀粉酶抑制剂的提取方法，其中，所述热回流提取的溶剂为乙醇。
[0009] 所述的α-淀粉酶抑制剂的提取方法，其中，反复操作3次。
[0010] -种如上所述的α-淀粉酶抑制剂的应用，其中，将所述苯丙素苷用于抑制α-淀 粉酶的活性。
[0011] 所述的α-淀粉酶抑制剂的应用，其中，所述苯丙素苷用于抑制α-淀粉酶时，所 述苯丙素苷的半抑制浓度为1.〇2mg/mL。
[0012] 有益效果：本发明上述结构的苯丙素苷是一种天然化合物，而非化学合成物。所述 苯丙素苷对α-淀粉酶有显著的抑制效果，从而有效抑制α-淀粉酶对淀粉的分解催化作 用，阻碍机体对淀粉的消化吸收、减少热量的摄入，从而促进减轻体重。与其他减肥化学药 物不同，本发明所述苯丙素苷不作用于机体的中枢神经，副作用小。
【具体实施方式】
[0013] 本发明提供一种α-淀粉酶抑制剂及其提取方法与应用，为使本发明的目的、技 术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具 体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0014] 本发明提供一种α-淀粉酶抑制剂，其中，所述α-淀粉酶抑制剂为苯丙素苷，所 述苯丙素苷的结构通式如下：
其中，当R2=H时，1^=1?3=0!1;当R2=rha时，1^=1?3=0!1 ;当R2=rha时，1^=1?3=!1;当R2=H时，R!= 0H，R3=H;当R2=H时，R!=R3=H。
[0015] 具体地，当R2=H时，1^=1?3=0!1，苯丙素苷为Acteoside;当R2=rha时，1^=1?3=0!1，苯 丙素苷为1^8即11印111'〇81(16 4;当1?2=1'113时，1?1=1?3=!1，苯丙素苷为1^8即11印111'〇81(16 13;当 R2=H时，R!= 0H，R3=H，苯丙素苷为LigupurpurosideC;当R2=H时，R!=R3=H，苯丙素苷为 Osmanthuside。
[0016] 本发明上述结构的苯丙素苷是一种天然化合物，而非化学合成物。所述苯丙素苷 对α-淀粉酶有显著的抑制效果，从而有效抑制α-淀粉酶对淀粉的分解催化作用，阻碍机 体对淀粉的消化吸收、减少热量的摄入，从而促进减轻体重。与其他减肥化学药物不同，本 发明所述苯丙素苷不作用于机体的中枢神经，副作用小。
[0017] 植物中多酚类化合物可作为获取α-淀粉酶抑制剂的重要来源，将获取的α-淀 粉酶抑制剂用于抑制α-淀粉酶的活性，减少机体对淀粉的消化吸收，从而减轻体重。且植 物来源的天然多酚类化合物具有结构多样性、低毒性、来源广泛等特点，因此，本发明从植 物中筛选新的副作用小的α-淀粉酶抑制剂。优选地，本发明从小叶苦丁茶中提取α-淀粉 酶抑制剂，小叶苦丁茶是一种保健茶饮料，具有清热解暑、消渴、化食解腻，降压减肥和活血 化瘀等营养保健功效，为木樨科属紫莖女贞（Ligustrumpurpurascens)的植物叶。因此， 本发明从紫茎女贞干叶中提取α-淀粉酶抑制剂，即本发明的苯丙素苷来源于紫茎女贞干 叶，紫茎女贞干叶中提取的上述苯丙素苷是一种天然化合物，而非化学合成物。
[0018] 基于上述α-淀粉酶抑制剂，本发明还提供一种如上任一所述的α-淀粉酶抑制 剂的提取方法，其中，包括步骤： 取紫茎女贞干叶，捣碎，热回流提取，静置过滤，减压浓缩，得提取物，反复操作2~3次， 将所得上清液合并，合并的上清液经Diaion柱层析分离，得到苯丙素苷。
[0019] 优选地，所述热回流提取的溶剂可以为乙醇，也可以为甲醇、丙酮等。本发明静置 过滤和减压浓缩过程反复操作2~3次，优选地，反复操作3次，以提高提取效率。
[0020] 基于上述α-淀粉酶抑制剂，本发明还提供一种如上所述的α-淀粉酶抑制剂的 应用，其中，将所述苯丙素苷用于抑制α-淀粉酶的活性。本发明的苯丙素苷是一种非竞 争性抑制剂，能与α-淀粉酶非共价结合，导致酶蛋白构象发生变化，从而影响α-淀粉酶 的活性。优选地，苯丙素苷的半抑制浓度（IC5。）为1.02mg/mL，所述半抑制浓度是指被测量 的α-淀粉酶抑制剂在抑制50%α-淀粉酶时所对应的浓度，所述半抑制浓度也称为半抑制 率。
[0021] 下面以具体实施例对本发明进行详细描述。 实施例
[0022] (1)苯丙素苷的提取 取紫茎女贞干叶，捣碎，乙醇热回流提取，静置过滤，减压浓缩，得提取物，反复操作3 次，将所得上清液合并，合并的上清液经Diaion柱层析分离，得到苯丙素苷。
[0023] (2)酶活力的测定 α-淀粉酶酶活力测定采用Bernfeld法，以可溶性淀粉作底物，取浓度为2mg/mL的a_淀粉酶溶液0. 25mL在37°C水浴孵化lOmin后，加入质量浓度为1. 5%可溶性淀粉0. 5mL， 37°C反应5min后加入lmL3, 5-二硝基水杨酸（DNS试剂），沸水浴加热lOmin，迅速冷却， 在520nm波长测定吸光度值。
[0024] 抑制率和半抑制率IC5。:在消化酶反应体系中加入不同浓度的苯丙素苷，按照酶 活力测定方法，测定抑制率和半抑制率； 抑制率％ = (A52。对照-A52。苯丙素苷）/A52。对照XIOOo
[0025]A52。为520nm波长下的吸光度值。
[0026] 结果表明：苯丙素苷对α-淀粉酶有显著的抑制效果，在苯丙素苷浓度为3mg/mL 时对α-淀粉酶的抑制率达到72%。，半抑制浓度为1. 02mg/mL。
[0027] 综上所述，本发明提供的一种α-淀粉酶抑制剂及其提取方法与应用，本发明所 述苯丙素苷是一种天然化合物，而非化学合成物。所述苯丙素苷对α-淀粉酶有显著的抑 制效果，从而有效抑制肠道中α-淀粉酶对淀粉的分解催化作用，达到减少淀粉吸收、控制 和治疗肥胖的目的。与其他减肥化学药物不同，本发明所述苯丙素苷不作用于中枢神经，副 作用小。
[0028] 应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可 以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保 护范围。
【主权项】
1. 一种a-淀粉酶抑制剂，其特征在于，所述a-淀粉酶抑制剂为苯丙素巧，所述苯丙 素巧的结构通式如下：其中，当Rz=H时，Ri=Rs=OH;当R2=rha时，Ri=Rs=OH;当R2=rha时，Ri=Rs=H;当Rz=H时，Ri= 0H，Rs=H;当Rz=H时，Ri=Rs=Hd2. 根据权利要求1所述的a-淀粉酶抑制剂，其特征在于，所述苯丙素巧来源于紫茎女 贞干叶。3. -种如权利要求1所述的a-淀粉酶抑制剂的提取方法，其特征在于，包括步骤：取 紫茎女贞干叶，捣碎，热回流提取，静置过滤，减压浓缩，得提取物，反复操作2~3次，将所得 上清液合并，合并的上清液经Diaion柱层析分离，得到苯丙素巧。4. 根据权利要求3所述的a-淀粉酶抑制剂的提取方法，其特征在于，所述热回流提取 的溶剂为乙醇。5. 根据权利要求3所述的a-淀粉酶抑制剂的提取方法，其特征在于，反复操作3次。6. -种如权利要求1所述的a-淀粉酶抑制剂的应用，其特征在于，将所述苯丙素巧用 于抑制a-淀粉酶的活性。7. 根据权利要求6所述的a-淀粉酶抑制剂的应用，其特征在于，所述苯丙素巧用于抑 制a-淀粉酶的活性时，所述苯丙素巧的半抑制浓度为1. 02mg/mL。
【专利摘要】本发明公开一种α-淀粉酶抑制剂及其提取方法与应用，所述α-淀粉酶抑制剂为苯丙素苷，所述苯丙素苷的结构通式如下：其中，当R2=H时，R1=R3=OH；当R2=rha时，R1=R3=OH；当R2=rha时，R1=R3=H；当R2=H时，R1=OH，R3=H；当R2=H时，R1=R3=H。本发明上述结构的苯丙素苷是一种天然化合物，而非化学合成物。所述苯丙素苷对α-淀粉酶有显著的抑制效果，从而有效抑制α-淀粉酶对淀粉的分解催化作用，阻碍机体对淀粉的消化吸收、减少热量的摄入，从而促进减轻体重。与其他减肥化学药物不同，本发明所述苯丙素苷不作用于机体的中枢神经，副作用小。
【IPC分类】C07H15/18, A61P3/04, C07H1/08, A61K31/7032
【公开号】CN105362281
【申请号】CN201510704829
【发明人】吴序栎, 贺震旦, 吴海强
【申请人】深圳大学
【公开日】2016年3月2日
【申请日】2015年10月27日