治疗或预防呼吸病症的方法
【专利说明】治疗或预防呼吸病症的方法
[0001] 相关申请信息
[0002] 本申请要求于2012年12月12日提交的名称为"治疗或预防呼吸病症的方法"的 第61/736352号美国专利申请的优先权。该申请的全部内容通过引用并入本文。 发明领域
[0003] 本公开涉及用于治疗或预防呼吸病症的方法，如IgE-介导的过敏性呼吸病症。
[0004] 引言
[0005] 呼吸病症被公认为涵盖侵袭参与气体交换的器官和组织的病理状态，并且包括上 呼吸道、气管、支气管、细支气管、肺泡、胸膜和胸膜腔、及呼吸的神经和肌肉的病症。慢性呼 吸病症在世界范围内引起大约全部死亡的7%，并且代表约4%的全球疾病负担。仅在美 国，估计慢性呼吸病症的花费每年约1540亿美元，包括直接和间接的费用。可将呼吸病症 分成几组，包括：
[0006]?炎症性肺部病症，如哮喘、囊肿性纤维化、肺气肿、慢性阻塞性肺疾病或急性呼吸 窘迫综合征，其以个体肺中的中性粒细胞和/或炎症性细胞因子水平增加为特征；
[0007]?阻塞性肺部病症，如慢性阻塞性肺病和哮喘，其以气道容量减少或自由气流阻塞 为特征；以及
[0008]?限制性肺部病症（又被称为间质性肺病），如婴儿呼吸窘迫综合征，其以肺顺应 性损失导致肺膨胀不完全和/或增加肺硬度为特征。
[0009] 哮喘是以可变且复发的症状，可逆的气道阻塞，气道（如支气管）高反应性和潜在 的炎症为特征的常见慢性呼吸病症。哮喘的急性症状包括咳嗽、喘息、呼吸短促和夜间觉 醒。这些症状通常由支气管痉挛引起，需要且响应于支气管扩张剂治疗。对哮喘的病理生 理学关键的是存在由招募和激活多种细胞类型介导的潜在气道炎症存在，所述多种细胞类 型包括肥大细胞、嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞、巨噬细胞、树突细胞和中性粒细胞。影响气道 高反应性的机制是多样的且包括炎症、神经调节功能失调和气道重塑。气道重塑涉及结构 变化，包括基膜下增厚，上皮下纤维化，气道平滑肌肥大和增生，血管增生以及扩张，随之发 生气道阻塞增加且通过当前疗法无法预防或完全逆转的气道永久变化。
[0010] 哮喘的当前标准疗法是组合皮质类固醇和β2-激动剂（抗炎症和支气管扩张药 物）。这些药物对许多哮喘症状提供了可接受的控制。然而，据估计，尽管用皮质类固醇 和β2-激动剂的这种组合治疗，仍有5至10%的哮喘患者患有有症状的病症（Chanezet al,JAllergyClinImmunol119:1337-1348(2007))〇
[0011]慢性阻塞性肺病（COPD)是与显著发病率和死亡率相关的最常见的慢性肺部病 症。在美国，C(PD是第四大死亡原因，且每年医疗保健费用超过300亿美元。估计1600万 成人受coro影响，并且每年约120, 〇〇〇美国人死于该病症。coro被定义为以气道/肺泡/ 全身炎症为特征的慢性疾病，有测量的气道阻塞（预测FEV1/FVC〈70 %和FEVi〈80 % )，所述 气道阻塞用支气管扩张剂疗法部分改善。通过肺部细胞局部和全身释放炎症性介质导致气 道疾病（慢性阻塞性支气管炎），并且在少数患者中导致破坏实质组织（肺气肿），此二者 都会导致具有coro特征的气流限制。通过肺细胞释放这些炎症介质还可使其他器官系统 中的炎症加剧，如在冠状动脉、脑血管和周围血管病症中所观测到的。
[0012] 治疗C0PD的当前疗法包括支气管扩张剂，特别是有助于在某种程度上减少高度 膨胀从而增加吸气容量并缓解呼吸困难的抗胆碱能类药物。虽然皮质类固醇对于大部分哮 喘病例是有效的治疗，但是C0PD中的炎症性细胞和介质对用全身或吸入的皮质类固醇的 治疗不敏感，使得用这些药物的治疗在C0PD中的有效性受限制。
[0013] 特发性肺纤维化（IPF)是下呼吸道的慢性渐进性纤维化病症，一般影响40岁以上 的成人。IPF被认为是通过环境因素如吸烟烟雾最初损伤肺部从而导致将中性粒细胞、淋 巴细胞和巨噬细胞招募至肺泡而造成的。通过肺泡上皮细胞释放诸如TGF-β的纤维发生 细胞因子导致成纤维细胞增殖、迀移和纤维化。这些成纤维细胞不仅填充呼吸腔，还应答许 多细胞因子分泌胶原和基质蛋白，导致实质组织重塑（Shimizuetal.，AmJRespirCrit CareMed163:210-217(2001))。成纤维细胞的这种分化很可能是IPF慢性性质的关键。这 些事件导致咳嗽和渐进的呼吸短促。IPF患者具有受损的肺功能并且显示限制性肺容积和 容量。虽然已提出将皮质类固醇、免疫抑制剂、中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂、肝细胞生长 因子以及干扰素γ-lb用作IPF的治疗剂，除了肺移植术之外，已知尚未有其他治疗来延长 存活，而IPF仍然是具有3至6年中值存活范围的致命疾病。尚未建立IPF的第一线治疗。
[0014] 其他呼吸病症包括但不限于，肺动脉高压（PAH)、肺血管收缩，淋巴管肌瘤病 (LAM)、结节性硬化症（TSC)、急性呼吸窘迫综合征（ARDS)和呼吸机所致肺损伤（VILI)。
[0015] 由前述公开内容，对本领域技术人员显而易见的是，呼吸病症是治疗选择有限的、 流行且使人衰弱的一类病症。因而，对这些病症的新疗法是期望的。
[0016] 发明简述
[0017] 本发明人现已证明利用STRO-Γ细胞制剂，其能够以剂量依赖的方式在人呼吸病 症（如哮喘，例如过敏性哮喘）的公认动物模型中降低TH2介导的过敏反应（如，减少嗜酸 性粒细胞和/或IL-4水平和/或IgE水平），例如IgE-介导的过敏反应，以及支气管高反 应性。本发明人发现它们能抑制早期过敏反应和/或晚期过敏反应任一（或二者）。该剂 量反应表明提供疗效的是STR0-Γ细胞制剂。
[0018] 另外，STRO-Γ细胞制剂减少嗜酸性粒细胞在气道腔和支气管肺泡灌洗液中的细 胞浸润以及支气管肺泡灌洗液中嗜中性粒细胞的数量，表明这些制剂抑制个体肺部炎症的 能力，例如患有炎症性呼吸病症如哮喘的个体。
[0019] 另外，STRO-Γ细胞制剂降低受治疗动物中过敏原特异性IgE的水平。
[0020] 本发明人还观测到在接受STRO-Γ细胞制剂的个体中，改善延迟相哮喘反应，例如 由嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞迀移至呼吸系统导致的。这些观测结果表明STR0-Γ细胞 制剂对于减少或预防对呼吸系统的损伤（如由嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞导致的炎症 和/或重塑）是有用的。
[0021] 本发明人的发现为治疗或预防个体呼吸病症的方法提供了基础，所述方法包括给 予个体富集STRO-Γ细胞的细胞群和/或其后代和/或源自它们的可溶性因子。
[0022] 本公开另外提供了治疗或预防个体中IgE-介导的过敏症（或TH2-介导的过敏症） 的方法，所述方法包括给予个体富集STRO-Γ细胞的细胞群和/或其后代和/或源自它们 的可溶性因子。
[0023] 本公开另外提供了用于减轻对过敏原的过敏反应和/或用于诱导对过敏原的无 反应性的方法，所述方法包括给予个体富集STRO-Γ细胞的细胞群和/或其后代和/或源 自它们的可溶性因子。
[0024] 本公开另外提供了用于预防或治疗对屋尘螨过敏原（HDM)的过敏反应或者用于 减轻对HDM的过敏反应和/或用于诱导对HDM的无反应性的方法，所述方法包括给予个体 富集STRO-Γ细胞的细胞群和/或其后代和/或源自它们的可溶性因子。
[0025] 本公开另外提供了用于改善个体肺功能的方法，所述方法包括给予个体富集 STRO-Γ细胞的细胞群和/或其后代和/或源自它们的可溶性因子，其中所述个体患有过敏 症、IgE-介导的过敏症或对HDM的过敏反应。
[0026] 在一实例中，呼吸病症与过度的细胞增殖、重塑、炎症、血管收缩、支气管狭窄、气 道高反应性和/或水肿相关。例如，本公开提供了用于治疗或预防病症的方法，所述病症如 哮喘、慢性阻塞性肺病、肺动脉高压、急性呼吸窘迫综合征、呼吸机诱导的肺损伤、囊性纤维 化、支气管扩张、α-1-抗胰蛋白酶缺乏症、鼻炎、鼻窦炎、原发性纤毛运动障碍、肺炎、支气 管炎、间质性肺疾病包括淋巴管肌瘤病、特发性肺纤维化、闭塞性细支气管炎或闭塞性细支 气管炎、非特异性间质性肺炎、隐源性机化性肺炎、急性间质性肺炎、呼吸性细支气管炎相 关性间质性肺病或肺结节病。
[0027] 在一实例中，肺部病症为急性肺损伤。例如，急性肺损伤为一种或多种物理性创 伤、化学性损伤如化学性灼伤、烟尘吸入、或暴露于有毒物质。在另一具体实施方案中，所述 肺部疾病、障碍或病症为由肿瘤或副肿瘤性疾病引起的损伤。
[0028] 在一实例中，呼吸病症为慢性的。在此方面，可将本公开的方法用于治疗早期阶段 或晚期阶段或二者的慢性呼吸病症。
[0029] 在一实例中，呼吸病症为炎症性呼吸病症、阻塞性呼吸病症或限制性呼吸病症。
[0030] 在一实例中，呼吸病症或过敏症为可逆性气道阻塞。
[0031] 在一实例中，呼吸病症或过敏症为阻塞性呼吸病症，如C0PD、哮喘、闭塞性细气管 炎或囊肿性纤维症。在一实例中，呼吸病症为哮喘。
[0032] 在一实例中，呼吸病症为限制性呼吸病症，如限制性肺部病症（如外源性过敏性 肺泡炎、纤维化性肺泡炎、石棉肺或嗜酸细胞性肺炎）或限制性胸膜病症（例如，胸腔积液、 气胸或支气管扩张）。
[0033] 在一实例中，呼吸病症并非由于感染或癌症。
[0034] 在一实例中，呼吸病症为炎症性病症。例如，病症与气道高敏性和/或支气管高敏 性和/或气道腔和支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞浸润有关。在这方面，在一实例中，本 公开的方法包括给予富集STRO-Γ细胞的细胞群和/或其后代和/或源自它们的可溶性因 子，使得气道高敏性和/或支气管高敏性和/或气道腔和/或支气管肺泡灌洗液中嗜酸性 粒细胞浸润和/或嗜中性粒细胞降低。
[0035] 在一实例中，病症为哮喘，如慢性哮喘或急性哮喘或过敏性哮喘。例如，病症为慢 性哮喘或过敏性哮喘。
[0036] 在一实例中，病症与肺重塑有关，如哮喘或肺纤维化，如特发性肺纤维化。
[0037] 在一实例中，哮喘为重度哮喘和/或难治性哮喘。
[0038] 在一实例中，病症为类固醇难治性哮喘。例如，患有哮喘的个体为用类固醇难治 的，例如，皮质类固醇，如氟尼缩松，糠酸莫米松，曲安西龙，氟替卡松，布地奈德，二丙酸倍 氯米松或前述两种或更多种的任意组合。
[0039] 在另一实例中，病症为长效β激动剂（LABA)难治性哮喘。例如，患有哮喘的个体 为用长效β激动剂难治的，例如，如沙美特罗，福莫特罗，班布特罗或双氯醇胺。
[0040] 在另一实例中，病症为LABA和类固醇难治性哮喘。
[0041] 在一实例中，所述方法减缓或预防早期阶段的过敏反应或哮喘反应。
[0042] 在另一实例中，所述方法减缓或预防晚期阶段的过敏反应或哮喘反应。
[0043] 在一实例中，病症为纤维化病症。肺部的纤维化疾病可为间质性肺病（弥漫性肺 实质疾病）。在另一实例中，间质性肺病是矽肺，石棉肺，铍中毒，全身性硬化症，多肌炎或皮 肌炎。在其它实例中，间质性肺疾病是由抗生素、化疗药物、抗心律失常药物或感染而引起 的。
[0044] 在另外的实例中，病症为特发性肺纤维化。
[0045] 在一实例中，本文在任一实例中所描述的方法包括给予富集STR0-116细胞的细胞 群和/或其后代和/或源自它们的可溶性因子。
[0046] 在一实例中，本文在任一实例中所描述的方法包括给予富集STRO-Γ和组织非特 异性碱性磷酸酶+ (TNAP)+细胞的细胞群和/或其后代和/或源自它们的可溶性因子。
[0047] 在一实例中，本文在任一实例中所描述的方法包括给予富集组织非特异性碱性磷 酸酶+ (TNAP)+细胞的细胞群和/或其后代和/或源自它们的可溶性因子。如本文所示，这 样的细胞为STRO-Γ，例如STR0-116。在一实例中，细胞为富集STR0-3+的细胞。
[0048] 在一实例中，富集STRO-Γ细胞的细胞群和/或其后代和/或源自它们的可溶性 因子被全身性给予。
[0049] 例如，所述细胞群和/或后代和/或可溶性因子通过静脉注射给予。
[0050] 在另一实例中，所述细胞群和/或后代和/或可溶性因子通过鼻内或吸入给予。
[0051] 在一实例中，所述细胞群和/或后代和/或可溶性因子被多次给予。在这方面，本 发明人已表明本文所述的细胞群能够提供多达四周或至少四周的治疗益处。因此，在一实 例中，每三周或更多周给予一次所述细胞群和/或后代和/或可溶性因子。例如，每四周或 更多周给予一次所述细胞群和/或后代和/或可溶性因子。例如，每五周或更多周给予一 次所述细胞群和/或后代和/或可溶性因子。例如，每十周或更多周给予一次所述细胞群 和/或后代和/或可溶性因子。例如，每十二周或更多周给予一次所述细胞群和/或后代 和/或可溶性因子。
[0052] 在一实例中，所述方法包括监测个体并在以下一种或多种状况出现时给予另外剂 量的所述细胞群和/或后代和/或可溶性因子：
[0053] (i)个体开始持续喘息和/或咳嗽和/或具有胸闷和/或呼吸困难；
[0054] (ii)通过肺活量计评估时个体显示以下中的一种或多种：
[0055] a)持续至少2周，每周至少三天20 %差异；
[0056] b)治疗之后最大流量提尚多20%，例如：
[0057] 吸入β-激动剂（如，沙丁胺醇）10分钟；
[0058] 吸入皮质类固醇（如，倍氯米松）6周；
[0059] 30mg氢化泼尼松14天；
[0060]C)暴露于触发剂（如，运动）之后最大流量降低彡20%
[0061] (iii)支气管镜检显示个体呼吸道中异常细胞和/或外源物质和/或阻塞；或者[0062] (iv)胸部CT扫描显示肺部血管畸形，肺部血液或流体聚集，支气管扩张，胸腔积 液或肺炎。
[0063] 在一实例中，根据任一实例，本文所描述的方法包括给予剂量足以实现以下的一 种或多种的所述细胞群和/或后代和/或可溶性因子：
[0064] (i)改善支气管高反应性，如利用支气管激发测试来评估；
[0065] (ii)改善气道高反应性；
[0066] (iii)减少肺或支气管肺泡灌洗液的嗜酸性粒细胞浸润；
[0067] (iv)减少肺或支气管肺泡灌洗液的嗜中性粒细胞浸润；
[0068] (V)减少晚期哮喘反应，如通过肺活量计来评估；
[0069] (vi)减少早期哮喘反应，如通过肺活量计来评估；和/或
[0070] (vii)减少肺重塑/纤维化，如通过胸部CT扫描来评估。
[0071] 在一实例中，所述剂量足以实现前述至少两种、三种、四种、五种或全部效应。
[0072] 在一实例中，根据任一实例，本文所描述的方法包括给予IX106至150X10 6个 STRO-Γ细胞和/或其后代。
[0073] 在一实例中，根据任一实例，本文所描述的方法包括给予25X106至150X10 6个 STRO-Γ细胞和/或其后代。例如，所述方法包括给予约25X10 6或75X10 6或150X10 6个 STRO-Γ细胞和/或其后代。
[0074] 在一实例中，根据任一实例，本文所描述的方法包括每千克给予约2. 5X104细胞 至4. 5X106个STR0-1 +细胞和/或其后代。
[0075] 在一实例中，根据任一实例，本文所述的方法包括每千克给予约4. 5X105至 4. 5X106个STRO-Γ细胞和/或其后代。例如，所述方法包括每千克给予约4. 5X10 5或约 5. 5X106或约 1. 7X10 6或约 1. 9X10 6或约 3. 5X10 6或约 4. 5X10 6个STRO-Γ细胞和 / 或 其后代。
[0076] 在一实例中，根据任一实例，本文所述的方法包括给予全身剂量的STRO-Γ细胞和 /或其后代和/或源自它们的可溶性因子。例如，当多次给予细胞或可溶性因子时，全身剂 量保持不变。
[0077] 例如，所述方法包括给予个体在10mL中的150X106个STR0-1 +细胞和/或其后 代，即每毫升1. 5X106个STR0-1 +细胞和/或其后代。
[0078] 在一实例中，根据任一实例，本文所描述的方法包括给予患有类固醇难治性哮喘 或LABA难治性哮喘或者类固醇和LABA难治性哮喘的个体150X106个STRO-Γ细胞和/或 其后代，例如在10mL中给予个体，即每毫升1. 5X106个STR0-1 +细胞和/或其后代。
[0079] 在一实例中，根据任一实例，本文所描述的方法包括给予患有特发性肺纤维化的 个体150X106个STRO-Γ细胞和/或其后代，例如在10mL中给予个体，即每毫升1. 5X10 6 个STRO-Γ细胞和/或其后代。
[0080] 在一实例中，所述细胞群和/或后代细胞为自体的或同种异体的，和/或所述可溶 性因子可源自自体或同种异体细胞。在一实例中，所述细胞群和/或后代细胞为同种异体 的，和/或所述可溶性因子来自同种异体细胞。
[0081] 根据以上实例，所述方法可另外包括获得细胞群和/或后代细胞和/或可溶性因 子，或者可另外包括分离所述细胞群和/或后代细胞和/或可溶性因子。在一实例中，所述 细胞群和/或后代细胞是基于STR0-1和/或TNAP的表达。
[0082] 在一实例中，所述细胞群和/或后代细胞和/或可溶性因子获自受治疗的个体。在 另一实例中，所述细胞群和/或后代细胞和/或可溶性因子获自同一物种的不同个体。
[0083] 在一实例中，所述富集STRO-Γ细胞的细胞群和/或后代细胞在给予之前和/或 获得可溶性因子之前经培养扩增。
[0084] 根据以上实例，本文所述根据任一实例的方法可另外包括培养所述细胞群和/或 后代细胞。
[0085] 在一实例中，以组合物的形式给予所述STRO-Γ细胞和/或其后代细胞和/或源 自它们的可溶性因子，所述组合物包含所述STRO-Γ细胞和/或其后代细胞和/或源自它 们的可溶性因子以及载体和/或赋形剂。
[0086] 根据以上实例，本文所述根据任一实例的方法可另外包括将所述细胞群和/或后 代和/或可溶性因子配制成组合物。
[0087] 在一实例中，所述个体在治疗时正在遭受呼吸病症或其恶化（如，哮喘发作），例 如，所述个体需要治疗。
[0088] 在一实例中，所述个体患有呼吸病症，然而在治疗时未遭受活跃的呼吸病症或其 恶化（如，哮喘发作），即，所述方法是预防病症或其恶化的方法。
[0089] 本公开还提供了在治疗或预防呼吸病症中应用的富集STRO-Γ细胞的细胞群和/ 或其后代和/或源自它们的可溶性因子。
[0090] 本公开还提供了富集STRO-Γ细胞的细胞群和/或其后代和/或源自它们的可溶 性因子在制备用于治疗或预防个体的呼吸病症的药物中的应用。
[0091] 本公开还提供了在本文按照任一实例所描述的方法中应用的试剂盒，所述试剂盒 包括富集STRO-Γ细胞的细胞群和/或其后代和/或源自它们的可溶性因子，并包装有说 明书。
[0092] 例如，本公开提供了包装有产品信息的试剂盒，所述试剂盒包括包含所述细胞群 体和/或后代和/或可溶性因子的组合物，所述产品信息指示所述组合物在本文按照任一 实例所描述的方法中的应用。
【附图说