一种抗肿瘤提高免疫力河豚鱼油中草药保健口服液及制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种抗肿瘤提高免疫力河豚鱼油中草药保健口服液，特别是一种以河豚鱼油和植物中草药为原料制成的保健口服液，属保健领域。
【背景技术】
[0002]河豚鱼(Fugu rubripes)中含有剧毒物质河豚鱼毒素，这种毒素具有极高的经济价值和医疗价值。人们对河豚鱼毒素的研究较深入％、细致，却忽略了河豚鱼其它方面的价值。随着无毒河豚鱼养殖及加工脱毒技术的发展，我国无毒河豚鱼的产量逐年上升，年出口率90%以上，现已成为国外河豚鱼供给的主要来源。河豚营养价值高，是一种极名贵的高档水广品。经国家水广品质量监督检验中心鉴定:河膝的蛋白质含量尚达17.71%，脂肪含量仅为0.62%，不饱和脂肪酸含量超过20%，其中DHA(脑黄金的主要成分)占15.36%，EPA为6.19%。河豚鱼油主要是指从河豚肝脏、卵巢等下脚料中去毒后的提取物，具有抑瘤、增强免疫力、戒除各种上瘾性的功能，目前常用于食品、保健品、医药等，具有较好的应用开发价值。
【发明内容】
[0003]为克服现有抗肿瘤提高免疫力保健产品技术的不足，本发明的目的在于提供一种具有抗肿瘤提高免疫力功效的中草药保健口服液。
[0004]本发明上述目的是通过以下技术方案予以实现的:
本发明提供一种抗肿瘤提高免疫力河豚鱼油中草药保健口服液，其特征在于:1000份口服液中中药原料及质量配比为:河豚鱼油4?6份、牛蒡子10?15份、鱼腥草8?12份、葛根10?15份、川考15?20份、黄柏10?13份、穿心莲8?12份、蒲公英10?15份、枸t己10?16份、贯众10?18份、虎杖5?10份、牛膝5?10份、甘草10?15份、小球藻10?15份。
[0005]本发明的优选技术方案是:一种抗肿瘤提高免疫力河豚鱼油中草药保健口服液，其特征在于:其中药原料及质量配比为:河豚鱼油5份、牛蒡子13份、鱼腥草12份、葛根12份、川；16份、黄柏12份、穿心莲10份、蒲公英14份、枸杞15份、贯众15份、虎杖7份、牛膝7份、甘草12份、小球藻13份。
[0006]本发明提供一种抗肿瘤提高免疫力河豚鱼油中草药保健口服液，其特征在于通过以下步骤制备:
(1)分拣称量:将所用中草药分拣，去除杂质等，按照上述比例称重；
(2)原料预处理:根据原料特性不同分别进行原料预处理:
①将牛蒡子、鱼腥草、葛根、川芎、穿心莲、黄柏、蒲公英、贯众、虎杖、牛膝、甘草、小球藻混合后进行粉碎处理，过40目筛；
②向枸杞中加入2?3倍纯净水，打浆，然后加入I?2%果胶酶，在40?50°C条件下酶解10?20min;
(3)超声波辅助酶解:原料混合后加入原料质量比3?5倍纯净水，然后加入原料质量比2?3%纤维素酶、I?2%非淀粉多糖酶，在超声波辅助条件下酶解30?60min，酶解温度控制在 40 ?50°C;
(4)离心:离心分离浸提液和中药草残渣；
(5)蒸馏:向中草药残渣中加入3?5倍量的纯净水，收集挥发油8?10h，挥发油单独收集放置，水溶液过滤，与浸提液合并；
(6)挥发油乳化:将收集的挥发油中加入1.5?2.0%的助溶剂吐温-80，加热乳化；
(7)水煎:将蒸馏后的中草药残渣中加入2?3倍量的水，煎煮3次，每次1.5?2h，水煎液与浸提液合并；
(8)减压浓缩:将合并后的水溶液浓缩至lg/ml的清膏，放冷；
(9)醇沉:向清膏中加入95%的乙醇使含醇量达到60?70%，4°C条件下放置48h以上
(10)醇提:向水煎后的中草药残渣中加入4?6倍量的50%乙醇，加热提取2次，提取时间I?I.5h;
(11)合并抽滤:将醇沉后的液体与醇提液合并抽滤；
(12 )减压回收:将抽滤液进行减压回收乙醇至无醇味；
(13)混合:趁热向浓缩液中加入河豚鱼油和乳化好的挥发油，搅拌均匀；
(14)添加辅料:加入0.10?0.15%的山梨酸钾和I?2%的甜味剂，加水搅拌定容；
(15)静置:将口服液半成品常温下静置48h以上；
(16)离心:将口服液半成品3000r/min离心5?1min;
(17)定容分装:将离心后的口服液定容、分装即得口服液成品。
[0007]上述甜味剂选用的是木糖醇、低聚异麦芽糖、蜂蜜中的一种或几种的混合物。
[0008]本发明提供一种抗肿瘤提高免疫力河豚鱼油中草药保健口服液，其优势在于:一是在传统中医理论和实践指导下精选药方，科学配伍河豚鱼油和多种中草药，药物组分经辨证配伍，在作用上相互佐助，能显著抗肿瘤提高免疫力;二是在口服液的制备过程中采用“超声波辅助浸提+蒸馏挥发油+水煎+醇提”的工艺，充分糅合中草药中的抗肿瘤提高免疫力的功能活性成分，提高保健效果;三是口服液安全无副作用，饮用方便。
[0009]本发明提供一种抗肿瘤提高免疫力河豚鱼油中草药保健口服液，通过动物试验进行保健口服液的毒理学试验及安全性评价。小鼠急性经口毒性试验结果表明，本保健口服液对小鼠急性经口最大耐受剂量大于高剂量组75mg/kg.bw；遗传毒性试验小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验两项试验结果均为阴性，表明该保健口服液无致突变作用；由大鼠30d喂养试验可知，大鼠体征行为正常、体态健康、血液及血液生化指标也无异常变化，因此75mg/kg.bw的剂量(人体推荐量的150倍)属于安全剂量;遗传毒性试验和大鼠30d喂养试验结果均为阴性，因此确定本保健饮料属无毒类食品，人可以安全放心食用。
[0010]本发明提供一种抗肿瘤提高免疫力河豚鱼油中草药保健口服液，不同的中草药性味各异，功效存在着巨大的差异，不同的中草药组合后存在复杂的相互作用关系，且中草药之间的配比比较密切，不同配比也将使君臣佐使关系发生实质性的变化，从而使复合中草药的关系发生实质性改变。本申请通过河豚鱼油、牛蒡子、鱼腥草、葛根、川芎、黄柏、穿心莲、蒲公英、枸杞、贯众、虎杖、牛膝、甘草、小球藻等中草药彼此间存在复杂的相互作用关系，合理配比，取得了预料不到的技术效果，使抗肿瘤提高免疫力中草药保健口服液的关系发生实质性改变。根据《保健食品功能学评价程序和检验方法》对本申请产品进行了功能性评价，研究保健口服液对S18Q荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖功能的影响，结果表明保健口服液能显著提高淋巴细胞的增殖活性(增幅91.32%)，也能明显增强ConA刺激的淋巴细胞增殖(增幅52.84%)，较对照组差异显著(p〈0.01);研究保健口服液对对318()荷瘤小鼠吞噬细胞吞噬活性的影响，结果表明保健口服液实验组吞噬活性都有显著提高(增幅93.25%)，较对照组差异显著(P〈0.01)，从而提高了小鼠的非特异性免疫功能；比较S18q荷瘤小鼠肿瘤体积，保健口服液实验组显著较小;说明产品具有较好的抗肿瘤提高免疫力活性;此外，试验结果表明，改变河豚鱼油和中草药的组成及比例会显著降低产品的功效，结果差异显著(P〈0.01)，说明河豚鱼油和中草药之间的协同作用起到了显著提升口服液功能活性的作用。
【具体实施方式】
[0011 ]下面结合实施例对本发明做进一步说明。
[0012]实施例1:
一种抗肿瘤提高免疫力河豚鱼油中草药保健口服液，通过以下步骤制备:
(1)分拣称量:将所用中草药分拣，去除杂质等，按照每1000份口服液中河豚鱼油5份、牛蒡子13份、鱼腥草12份、葛根12份、川芎16份、黄柏12份、穿心莲10份、蒲公英14份、枸杞15份、贯众15份、虎杖7份、牛膝7份、甘草12份、小球藻13份比例称重；
(2)原料预处理:根据原料特性不同分别进行原料预处理:
①将牛蒡子、鱼腥草、葛根、川芎、穿心莲、蒲公英、贯众、黄柏、虎杖、牛膝、甘草、小球藻混合后进行粉碎处理，过40目筛；
②向枸杞中加入2.5倍纯净水，打浆，然后加入1.5%果胶酶，在40?50°C条件下酶解15min；
(3)超声波辅助酶解:原料混合后加入原料质量比4倍纯净水，然后加入原料质量比2.5%纤维素酶、1.5%非淀粉多糖酶，在超声波辅助条件下酶解45min，酶解温度控制在40?50°C；
(4)离心:离心分离浸提液和中药草残渣；
(5)蒸馏:向中草药残渣中加入4倍量的纯净水，收集挥发油9h，挥发油单独收集放置，水溶液过滤，与浸提液合并；
(6)挥发油乳化:将收集的挥发油中加入1.8%的助溶剂吐温-80，加热乳化；
(7)水煎:将蒸馏后的中草药残渣中加入2.5倍量的水，煎煮3次，每次1.8h，水煎液与浸提液合并；
(8)减压浓缩:将合并后的水溶液浓缩至lg/ml的清膏，放冷；
(9)醇沉:向清膏中加入95%的乙醇使含醇量达到60?70%，4°C条件下放置48h以上
(1 )醇提:向水煎后的中草药残渣中加入5倍量的50%乙醇，加热提取2次，提取时间1.2h；
(11)合并抽滤:将醇沉后的液体与醇提液合并抽滤；
(12 )减压回收:将