通过抗-cd3免疫毒素的免疫调节治疗没有均一地含有表面cd3的癌症的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种治疗患癌病人的方法，所述癌细胞不含表面CD3表位或没有均一 地含有表面CD3表位。特别地，本发明所述的方法涉及一种给药抗-CD3免疫毒素以调节所 述病人的免疫系统从而达到长期的抗非-CD3癌症的免疫保护。
【背景技术】
[0002] 治疗癌症有两种重要的工具，分别为免疫毒素和免疫调节剂。免疫毒素是一种抗 人类重组融合蛋白，其靶向并杀死特定类型的癌细胞。靶向一般是通过蛋白质的靶向部分 (例如用于结合目标特定表位的修饰后的抗体或抗体片段）介导的；而杀死则一般由连接 靶向部分的毒素部分进行的。给药后，免疫毒素直接靶向并结合到表面有目标表位的癌细 胞，然后该分子的毒素部分将结合的细胞杀死。因此，免疫毒素可以在它们处于循环期间并 在相对短的时间内破坏癌细胞，例如给药后数小时或数天内。
[0003] 相比之下，免疫调节剂的作用模式完全不同。与立刻杀灭癌细胞不同，它们通过 "重置"免疫系统使得自身能够识别并破坏癌细胞。在成熟的癌细胞中，个体的免疫系统不 能破坏癌细胞，可能是因为它们来自于机体原本存在的细胞，因此被识别为无害的"自体" 细胞而不是潜在的危险的"外来者"入侵者。免疫调节剂通过改变现存的免疫细胞来作用， 从而为免疫细胞的复制以及能够将癌细胞识别为"外来者"的新免疫细胞系的形成提供机 会。换句话说，机体对癌细胞抗原的免疫耐受被免疫调节剂破坏了。这种作用模式的结果 就是，采用免疫调节剂治疗后，机体的肿瘤退化动力学不同于用免疫毒素治疗的机体。所述 效应一般会被延迟，并能够经历数月甚至数年才能达到它们的最高水平。在此期间，免疫系 统会自我重构，如果条件适宜，免疫系统将被"再训练（retrained)"以将癌细胞识别为外来 者，如果再次复发，免疫系统将会增加针对癌细胞的免疫反应。用免疫调节剂治疗之后，由 于机体免疫系统识别肿瘤后对肿瘤增加免疫反应，因此肿瘤退化的过程可能不是线性的， 而是在退化之后由于形成新的肿瘤细胞而被打断。
[0004] 理想地，在一些癌症治疗方案中，"短效"抗癌剂往往和"长效"免疫调节剂联合使 用，前者导致癌细胞迅速被杀死，后者能够引发长期抗癌保护。这两种类型的一些制剂是已 知的并已经应用成功。然而，考虑到癌症的多种类型和疾病的复杂性，以及现存制剂的局限 性及疗效的不稳定性，该治疗策略并不能一直成功，因此，在寻找新的抗癌制剂和/或现存 制剂新的使用方案方面仍然存在持续的需求。此外，现在已知的免疫调节剂一般都有不良 副作用，例如导致自身免疫疾病的发展。这可能是由于在重建期间，除了癌细胞，机体对自 身抗原的耐受性被破坏，该免疫系统被视为反常的。
[0005] 能够得到另外一种免疫调节剂将会是一种福音，该免疫调节剂能够用于引发如上 所述的机体自身的抗癌能力，特别是随着时间的推移，防止或治疗癌症的复发或转移。进一 步地，高度期望发现一种在病人体内不会引起自身免疫病的免疫调节剂。
[0006] 美国专利7,696,338和8,217，158(恥対116，介.，6七&1.)的全部内容以引用的方 式包含在本申请中，上述专利描述了使用抗体-DT突变免疫毒素治疗自身免疫病和含CD3 的T细胞白血病或淋巴瘤的方法，所述抗体-DT突变免疫毒素由抗-⑶3通路循环。然而， 这些专利没有公开这些免疫毒素作为免疫调节剂的用途。
【发明内容】
[0007] 本发明提供了一种美国专利7, 696, 338和8, 217, 158中所述的抗-⑶3免疫毒素 的新用途。该免疫毒素包含抗-CD3抗体的抗原结合区域和白喉毒素蛋白的一部分。该类 型中的一种典型免疫毒素已经成功应用于临床实验用来治疗含CD3的（即T细胞）淋巴瘤 和白血病。在这些情况中，给药免疫毒素的机理是靶向并破坏机体现存的含CD3表位的癌 细胞，从而提供一种短期的防御疾病的前线。
[0008] 然而，现在已经惊奇地发现所述免疫毒素能够有效地用作免疫调节剂，因此能够 用于提供长期的、影响深远的抗癌效应，所述抗癌效应和它们的免疫毒素活性无关（独立 或远离）。不受理论的限制，当给药后，这些制剂攻击和杀死正常的含有CD3表位的免疫细 胞（即T细胞），从而耗尽免疫细胞群。在新的、周边易于被再训练（retraining)的T细胞 重建（平衡重建）之后，该耗尽是短暂的或临时的。当暴露于癌细胞抗原时，免疫细胞的新 骨架能够学会识别抗原，从而癌细胞被视作非正常的，免疫细胞的新骨架将它们从无害的 自体或其他健康组织中辨别出来。换句话说，这些制剂的使用导致了病人免疫系统的重置 或再训练，从而当随后再次遇到癌细胞时，利用他/她自身的免疫防御系统为病人提供了 抗争疾病的"天然"能力。这些此前未被意识到的免疫毒素分子的性质的发现，导致了那些 源自T细胞以外的治疗癌症的方法的形成，即破坏或杀灭没有CD3表位或CD3表位分布不 均匀的癌细胞的方法。特别地，如果/当它们出现转移或疾病期间和疾病复发之后，所述制 剂常常用于调节病人的免疫系统使其能够将癌细胞识别为非正常的并破坏它们。显著地， 和其他免疫调节剂相比，本发明的免疫毒素破坏了肿瘤的免疫耐受，而没有破坏对自身抗 原的免疫耐受，也没有引起自身免疫疾病。
[0009] 本发明的一个目的在于为患癌病人提供一种给予免疫调节的方法，所述癌没有 CD3表位或CD3表位分布不均匀。该方法包含：1)向病人给药抗-CD3特异性免疫毒素，其 药量足以耗尽所述病人体内现存的T细胞；以及2)在所述非-CD3癌细胞抗原的存在下，允 许新的T细胞在病人体内的重建和成熟。在一些方面，通过采用释放抗原的抗癌治疗，例如 放射治疗，使得所述非-CD3癌细胞抗原释放进入血液循环中。在其他方面，给药步骤没有 破坏所述病人对自身抗原的免疫耐受。在所述允许步骤之后的期间，所述方法可进一步包 含为病人提供所述非-CD3癌细胞抗原的步骤，以增强病人对非-CD3癌细胞抗原的免疫反 应。上述所提供的步骤在所述癌症复发之后执行。在本发明的一些方面，所述抗-CD3特异 性抗毒素是A-dmDT390-bisFv(UCHT1)。
[0010] 本发明也提供一种延长患癌病人存活时间的方法，所述癌没有⑶3表位或⑶3表 位分布不均匀。该方法包含：1)向病人给药抗-CD3特异性免疫毒素，其药量足以耗尽所述 病人体内现存的T细胞；2)在所述非-CD3癌细胞抗原的存在下，允许新的T细胞在病人体 内的重建和成熟。
[0011] 本发明还提供一种使病人的免疫系统准备识别和杀死转移性和/或复发性癌的 方法，其中该病人患有癌症，所述癌没有CD3表位或CD3表位分布不均匀。该方法包含：1) 向病人给药抗-CD3特异性免疫毒素，其药量足以耗尽所述病人体内现存的T细胞；2)在所 述非-CD3癌细胞抗原的存在下，允许新的T细胞在病人体内的重建和成熟。
[0012] 本发明的其他特征和优点将在本发明的说明书部分随后列出，并且部分可根据本 说明书是显而易见的，或者是可以通过本发明的实践认识到的。本发明将通过本说明书和 权利要求书中所特别指出的组合物和方法来实现和得到。
【附图说明】
[0013] 图1是在治疗4天后，初始改进的严重性加权评估工具（mSWAT)的分数与时间的 百分比％jSWAT的分数代表了皮肤肿瘤负荷，其通过测定涉及的皮肤表面积％与一个乘数 相乘而测量得到的，其中点（patch)的乘数为1 ;斑（plaque)的乘数为2 ;肿瘤（tumor)的 乘数为4。
[0014]图 2 是A-dmDT390-bisFv(UCHTl)的氨基酸序列（SEQIDN0:1)。
[0015] 图3A和B是典型融合蛋白的氨基酸序列，所述融合蛋白可用于本发明（SEQID NOS:2 和 3)。
[0016] 具体说明
[0017] 本发明提供了美国专利7, 696, 338和8, 217, 158 (Neville)中所述的免疫毒素分 子的新用途，上述专利的全部内容以引用的方式包含在本申请中。该新用途包含给药能够 为患癌病人带来免疫调节的分子，所述癌不含CD3抗原或没有均一地含有CD3抗原。在本 发明之前，这些制剂不能给药于这类病人，因为这些制剂被设计为抗-⑶3毒素，并且个体 的癌细胞不含CD3抗原或没有均一地含有CD3抗原。
[0018] 美国专利7, 696, 338和8, 217, 158详细公开了这些免疫毒素的各种实施例。所 述免疫毒素是嵌合或融合蛋白，它们包含连接抗体部分的重组毒素部分，所述抗体部分能 够特异性结合CD3表位。该