生成的效果非常优 秀，能够应用于保护关节、预防或治疗关节炎中。
[0151] 实施例5.大鼠关节腔内基于蒲公英提取物的透明质酸浓度增加
[0152] 购入体重200g左右的雄性SD大鼠（samtako,韩国），在调整为温度23±1°C、湿 度55±5%的恒温恒湿饲育装置（Dae Jong Instrument Company，韩国）内适应一周后用 于实验。作为试样处理组（η = 8)，将蒲公英提取物稀释于生理盐水后，以大鼠体重lkg为 100mg、500mg的量，每天口服给药一次，连续给药15天。作为对照组（η = 8)，以相同的方 法仅给药溶剂。然后，为了测定透明质酸浓度，同时摘取大腿骨和胫骨后，向左侧膝关节腔 内注射生理盐水0. 5mL而进行洗涤，采集洗净后滑液100 μ L以上，并在-70°C冷冻保存，直 至检查。通过透明质酸（Hyaluronan) ELISA试剂盒（R&D Systems)测定滑液内透明质酸浓 度，并示于表5中。
[0153] 【表5】
[0154]
[0155] *以对照组的透明质酸浓度为基准（100% )，对试样处理组的透明质酸浓度进行 数值化。
[0156] 其结果，蒲公英提取物在正常大鼠关节腔内提高了透明质酸的生成。
[0157] 由此可确认，蒲公英提取物在作为体内（in vivo)的大鼠关节腔内促进透明质酸 生成的效果非常优秀，能够有效应用于保护关节、预防或治疗关节炎中。
[0158] 实施例6. HaCaT细胞中基于蒲公英提取物的透明质酸浓度增加
[0159] 将人角质细胞HaCaT细胞，在包含10% FBS的DMEM培养基中以2X104cells/ mL制备，然后，在24-孔板中每孔各分注lmL。培养24小时后，用不包含牛血清的DMEM 培养基lmL替换，添加蒲公英提取物达到30ppm。作为阴性对照组，通过等量乙醇处理， 作为阳性对照组，通过已知具有促进透明质酸生成效果的盐酸氨基葡萄糖（Glucosamine hydrochloride，Sigma-aldrich) lOOppm处理。培养48小时后，回收细胞培养液，利用透明 质酸（Hyaluronan)ELISA试剂盒（R&D Systems)测定透明质酸浓度，将结果示于表6中。
[0160] 【表6】
[0161]
[0162] *重复数=4
[0163] *以阴性对照组的透明质酸浓度为基准（100% )，对蒲公英提取物处理实验组的 透明质酸浓度进行数值化。
[0164] 其结果，蒲公英提取物在人角质细胞中提高了透明质酸的生成。
[0165] 由此确认了蒲公英提取物在人角质细胞中促进透明质酸生成的效果非常优秀，能 够有效应用于改善皮肤弹性、预防老化、预防或治疗皮肤皱纹、以及皮肤保湿中。
[0166] 实施例7.基于蒲公英提取物的皮肤水分量增加
[0167] 为了将含有蒲公英提取物的化妆材料对皮肤水分量增加效果适应于人皮肤，根据 下述制剂例2的营养霜的组成进行制备，在温度22°C和相对湿度50%的恒温恒湿环境中， 对30名健康成人的前臂里侧涂敷规定量（2mg/cm 2)，并测定了涂敷前，涂敷1小时后和涂敷 2小时后的皮肤水分含量。作为对照组，以乙醇代替蒲公英提取物，通过相同的方法制造了 含有等量乙醇的营养霜并进行涂敷，将没有进行任何处理的正常皮肤用作无处理组。作为 水分保持能力，通过皮肤测试仪（Courage+Khazaka，GmbH，Germany)测定了皮肤表面的电 导率。将其结果示于表7中。
[0168] 【表7】
[0169]
[0170] *n = 30
[0171] 其结果，含有蒲公英提取物的营养霜提高了人皮肤的水分量，涂敷2小时后也显 示出了优异的水分保持能力。
[0172] 由此确认了蒲公英提取物的皮肤水分量增加效果和水分保持能力非常优秀，能够 有效应用于改善皮肤弹性、预防老化、预防或治疗皮肤皱纹、以及皮肤保湿中。
[0173] 实施例8.基于蒲公英提取物的皮肤弹性增加
[0174] 为了将含有本发明的蒲公英提取物的化妆材料对皮肤弹性增加效果适应于人皮 肤，根据下述制剂例2的营养霜的组成进行制备，在温度22°C和相对湿度50%的恒温恒湿 环境中，对30名健康成人的颈部涂敷4周后，测定涂敷前、涂敷后的弹性，评价了皮肤弹性 的改善效果。
[0175] 在被测试者的颈部左侧部位，涂敷含有蒲公英提取物的营养霜，而在右侧部位，则 涂敷以等量乙醇替代蒲公英提取物而制成的营养霜，每天早晚洗脸后涂敷两次，连续使用4 周。然后，利用皮肤弹性测试仪（Cutometer，C+K，Germany)，测定了各部位的弹性改善程度。 改善程度是以Ur/Uf作为参数，将结果示于表8中。
[0176] 【表8】
[0177]
[0178] *n = 30
[0179] 结果，含有蒲公英提取物的营养霜改善了人皮肤弹性，其对皮肤没有任何的副作 用。
[0180] 由此确认了蒲公英提取物的皮肤弹性改善效果非常优秀，能够有效应用于改善皮 肤弹性、预防老化以及预防或治疗皮肤皱纹中。
[0181] 根据上述效果实验的结果，具体地说明本发明组合物的各种制剂例。但是，这些制 剂例仅仅是本发明组合物的示例，本领域技术人员应该明白本发明的组合物的范围并不限 定于这些剂型。
[0182] 制剂例1.健康饮料的制造
[0183] 蒲公英提取物0. lmg
[0184] 柠檬酸 lOOOmg
[0185] 低聚糖 100g
[0186] 梅子浓缩液2g
[0187] 牛磺酸lg
[0188] 添加纯净水使总量达到900mL
[0189] 根据通常的健康饮料制造方法混合上述成分后，在85°C加热搅拌约1小时，然后， 将所得到的溶液过滤，装入2L杀菌容器，进行密封杀菌后冷藏保管，用于本发明的健康饮 料组合物的制造中。
[0190] 上述组成比中，是将适合大众饮料的成分以优选的实施例进行混合，但也可以根 据所需阶层、所需国家、使用用途等地域性、民族性的喜好度，任意改变其配合比而实施。
[0191] 制剂例2.营养霜的制造
[0192] 按照下述组成，并根据通常的方法制造了作为有效成分含有蒲公英提取物的营养 霜。
[0193] 蒲公英提取物1.0重量％
[0194] β -1，3-葡聚糖 5. 0 重量 ％
[0195] 蜜蜡10. 0重量％
[0196] 聚山梨醇酯60 1.5重量％
[0197] PEG-60氢化蓖麻油2. 0重量％
[0198] 山梨糖醇酐倍半异硬脂酸酯0. 5重量％
[0199] 流动石錯（paraffin) 10. 0 重量 ％
[0200] 角鲨烷5.0重量％
[0201] 辛酸/癸酸甘油三酯5.0重量％
[0202] 甘油5.0重量％
[0203] 丁二醇 3.0 重量 ％
[0204] 丙二醇3.0重量％
[0205] 三乙醇胺0.2重量％
[0206] 防腐剂0.05重量％
[0207] 色素0.05重量％
[0208] 香料0.05重量％
[0209] 添加纯净水至100重量％
[0210] 制剂例3 :局部给药用药剂（凝胶软膏剂）的制造
[0211] 按照下述组成，采用通常的方法制造了作为有效成分含有蒲公英提取物的凝胶软 膏剂。
[0212] 蒲公英提取物0.5重量％
[0213] β-1，3-葡聚糖 10.0 重量 ％
[0214] 聚丙烯酸（卡波普940) 1.5重量％
[0215] 异丙醇5.0重量％
[0216] 己二醇25.0重量％
[0217] 三乙醇胺1.7重量％
[0218] 添加脱离子水至100重量％
[0219] 制剂例4 :颗粒的制造
[0220] 蒲公英提取物2mg
[0221] 大豆提取物50mg
[0222] 葡萄糖 200mg
[0223] 淀粉 600mg
[0224] 将上述成分混合后，添加30%乙醇100mg，在60°C进行干燥而形成颗粒后，装入包 装袋。
[0225] 从以上的说明中本领域技术人员应该理解，在不改变本发明的技术思想和必要特 征的前提下，本发明还可以通过其它具体方式实施。而且，应该理解以上记载的实施例在所 有方面仅是例示性而不是限定性的。应该理解本发明的保护范围包括所附的权利要求书的 含义以及从其等价概念推导出的所有变更或变形。
【主权项】
1. 一种透明质酸生成促进用组合物，其作为有效成分含有蒲公英提取物或其分馏物。2. -种用于保护关节、预防或治疗关节炎的组合物，其作为有效成分含有权利要求1 所述的组合物。3. -种用于改善皮肤弹性、预防老化、预防或改善皮肤皱纹的组合物，其作为有效成分 含有权利要求1所述的组合物。4. 一种皮肤保湿用组合物，其作为有效成分含有权利要求1所述的组合物。5. 根据权利要求1~4中任一项所述的组合物，其作为选自于由化妆材料组合物、食品 组合物、药物组合物和医药辅料组合物所组成的组中的一种组合物使用。6. 根据权利要求1~4中任一项所述的组合物，其中，蒲公英提取物或其分馏物相对于 组合物总重量的含量为0. 00001~10重量％。
【专利摘要】蒲公英提取物或者其分馏物有效促进透明质酸的生成以及透明质酸合成酶的表达，因此，能够有效应用于保护关节、预防或治疗关节炎、改善皮肤弹性、预防老化、预防或治疗皮肤皱纹和皮肤保湿中。
【IPC分类】A61P29/00, A61K8/97, A61P19/02, A61P17/00, A61Q19/08, A61K36/288, A23L33/105, A61Q19/00
【公开号】CN105582036
【申请号】CN201510751111
【发明人】李宝永, 金允善, 赵浩成, 李相和
【申请人】株式会社Lg生活健康
【公开日】2016年5月18日
【申请日】2015年11月6日