一种治疗动脉粥样硬化的药物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种治疗动脉粥样硬化的药物。由0.3份～99.7重量份的工业大麻火麻仁提取物和99.7份～0.3重量份的工业大麻火麻素混匀制成。实验证明该药物能明显降低血脂、提高血清NO含量、降低ET?1含量，并抑制斑块进展，效果优于大麻二酚，具有明确的治疗动脉粥样硬化的作用，市场应用前景良好。
【专利说明】
一种治疗动脉粥样硬化的药物
技术领域
[0001] 本发明属于动脉粥样硬化治疗药物领域，具体地说是涉及一种以工业大麻为主要 原料制备的治疗动脉粥样硬化的药物组合物。
【背景技术】
[0002] 大麻的种植历史悠久，古代大麻主要用于制作加工绳索、渔网、服装和造纸原料， 以及油脂、食品等。随着社会的发展和进步，人们发现大麻中含有一种毒性成分（四氢大麻 酚)可使人致幻成瘾，欧美许多国家曾在相当长时期内禁种大麻。由于大麻的经济利用价值 高，到20世纪80年代，一些欧洲国家研究培育出了低毒大麻品种并获得推广种植。1990年欧 共体率先紧急修订农业政策，废除了禁种大麻的禁令，开始恢复大麻的生产和研究。随后美 国、加拿大、澳大利亚等国解除了大麻种植的禁令，全球大麻种植面积和纤维产量有了迅速 增长，欧美国家对工业大麻的开发利用再次掀起，国际市场对生态大麻的需求也在迅速增 长。根据大麻的经济属性，为充分利用其为人类服务，1988年联合国明确规定不具备提取毒 性成分（四氢大麻酚THC)价值或直接作为毒品吸食的，专供工业用途的原料大麻，工业大麻 (其生长期大麻花叶中的四氢大麻酚含量小于0.3%)，可以合法进行规模化种植与工业化 开发利用。
[0003] 工业大麻是独具特色、比较优势突出的生物资源。工业大麻与传统有毒大麻具有 本质差别，工业大麻是一类无毒化的工业原料产品，具有极高的经济利用价值。到2003年末 世界各国先后一共选育出25个工业大麻品种，而且欧盟的法、德、英等七国也都成为工业大 麻主要种植生产国，以工业大麻纤维和麻籽及其花、叶、根、茎为原料进行系列产品研发与 产业化综合开发，已在工业大麻初级加工主产品麻皮纤维、杆芯纤维、麻籽油脂和籽柏蛋 白、药用标准化提取物实现产业化生产的基础上，进一步进行深加工利用，派生出来的产品 已达到二万五千种以上，包含了人类的衣、食、住、行、用各大类产品。工业大麻产业的研究、 开发和生产主要集中在欧洲、加拿大、美国等技术发达国家。工业大麻产业的发展，首先是 从选育无毒或低毒化的工业大麻新品种开始的，并以此为基础实现了规模化的种植和高技 术产业化的综合开发利用，形成了一个"新兴绿色产业群"和新型工业经济的快速增长点。
[0004] 火麻仁为大麻干燥成熟果实，古代通常将火麻仁入药，食疗亦有记载。国家卫生部 已将火麻仁纳入"既是药品又是食品"一一"药食两用"名单。火麻仁的药性及药理为:甘， 平。归脾、胃、大肠经。功能主治：润燥，滑肠，通淋，活血。治肠燥便秘，消渴，热淋，风痹，痢 疾。月经不调，疥疮，癣癞。在医书中有详细疗效记载，如《本经》："补中益气。"；《唐本草》： "主五劳。"；《肘后方》："治大渴，日食数斗，小便赤涩者:麻子一升，水三升，煮三、四沸，取汁 饮之。"；《日华子本草》："补虚劳，长肌肉，下乳，止消渴，催生。治横逆产。"；《本草拾遗》："下 气，利小便，去风痹皮顽，炒令香捣碎，小便浸取汁服；妇人倒产吞二七枚。"；《食疗本草》： "取汁煮粥，去五脏风、润肺。治关节不通、发落，通血脉。"。
[0005] 大麻的花叶均供药用。麻叶的药性及药理为:辛;有毒。归肺;膀胱;大肠经。功能主 治：止痛，定喘，驱蛔。主治气喘，跌扑疼痛，蛔虫病。麻花的药性及药理为:苦；辛；性温;有 毒。功能主治:祛风;活血;生发。主风病肢体麻木;遍身瘙痒;妇女经闭。
[0006] 动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是一种常见的严重危害人类健康的心脑血 管疾病。流行病学调查，我国每年遭受动脉粥样硬化困扰的患者超过7000万，并且患病率和 发病率呈逐年上升趋势，在40-49岁的人群中，检出率分别为58.36%和88.31%，已成为中 老年人死亡的主要杀手之一。
[0007] 动脉粥样硬化是一种侵犯全身动脉系统的疾病，可有数十年的无症状期，病因复 杂、病程漫长，包括内皮损伤，低密度脂蛋白（LDL)氧化修饰，高密度脂蛋白浓度(HDL)增高， 单核细胞粘附，平滑肌细胞增值及纤维斑块形成。在多种危险因素(高血压、高胆固醇含量、 高脂血症等）的作用下，动脉内皮损伤坏死剥落，产生和释放细胞粘附因子和生长因子，使 得血小板和单核细胞在该处粘附，进而单核细胞进入皮下间隙转为巨噬细胞；中膜平滑肌 细胞移行至内膜处增殖或凋亡；巨噬细胞和平滑肌细胞摄取胆固醇转成泡沫细胞，形成AS 的早期病变即脂纹。在此基础上，逐步发展为由坏死细胞碎片、胆固醇及其酯、血管平滑肌、 巨噬细胞以及致密的纤维组织构成的纤维斑块。斑块形成后不稳定因素导致纤维帽破裂形 成血管堵塞，淤滞等。动脉粥样硬化与高血压、冠心病、中风有着密切联系，严重威胁着人类 的健康，也给社会和家庭带来了巨大的经济和生活负担。因此，加强动脉粥样硬化的治疗是 我国乃至全球亟待解决的问题，广泛寻找治疗药物具有极其深远的理论和实际意义。
[0008] 大麻二酚(CBD)是从大麻花叶中萃取的一种无毒的可用于药品、化妆品、保健食品 的一种高附加值的酚类物质。目前，以色列、美国、英国等发达国家已用其做原料并开发出 多种特效药品和化妆品。CBD是大麻中的非成瘾性成分，能阻碍THC对人体神经系统影响，并 具有抗痉挛、抗风湿性关节炎、抗焦虑等药理活性，亦有在治疗动脉粥样硬化方面的报道， 但单独使用大麻二酚(CBD)的治疗效果并不理想。因此开发新的活性高，毒副作用小的治疗 药物显得非常必要。
【发明内容】
[0009] 本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种以工业大麻为主要原料制备的 治疗动脉粥样硬化的药物组合物。
[0010] 本发明的目的通过以下技术方案予以实现。
[0011] 除非另有说明，本发明所采用的百分数均为质量百分数。
[0012] -种治疗动脉粥样硬化的药物，其特征在于，由下述重量份的原料混匀制成:工业 大麻火麻仁提取物0.3份~99.7份，工业大麻火麻素99.7份~0.3份。
[0013] 所述的治疗动脉粥样硬化药物的原料组成优选为工业大麻火麻仁提取物40份和 工业大麻火麻素60份。
[0014] 其中，所述的工业大麻火麻仁提取物通过以下方法制备而成：
[0015] (1)取成熟的工业大麻火麻仁，经烘干、除杂，粉碎后备用；
[0016] (2)在20~85°C条件下，用乙醇对粉碎火麻仁料进行提取，乙醇浓度为95%~ 100% (V/V)，料液比为 1:5~1:20;
[0017] (3)滤出浸提液，减压浓缩后即为工业大麻火麻仁提取物。
[0018]在用乙醇对工业大麻火麻仁进行提取时，可采用以下多种方式进行：如室温下浸 提，每批物料浸提2次，每次7~10天;在60~85 °C条件下，加热提取2次，每次1~3小时;超声 波辅助提取，超声波频率30~60kHz，功率100~1000W，提取时间30~60min，浸提温度25~ 50°C ;亦可采用微波辅助提取等其它现有技术。
[0019] 所述的工业大麻火麻素通过以下方法制备而成：
[0020] (1)取工业大麻的花、叶、麻糠或三者的混合物，经烘干、除杂、粉碎至10~60目；
[0021] (2)超临界二氧化碳萃取:将上述粉碎好的工业大麻原料投入超临界二氧化碳萃 取装置中，控制萃取温度40~50°C，萃取时间30~90min，萃取压力25~35Mpa，二氧化碳流 量40kg/h，分离釜出口收集萃取物；
[0022] (3)萃取物用0 · 2~10倍体积的95 %~100 % (V/V)的乙醇洗脱，洗脱次数为1~3 次；
[0023] (4)收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，粉碎后即得工业大麻火麻素。
[0024]所述的工业大麻的花、叶、麻糠三者混合物的优选配比为1:3:2。
[0025] 普通的麻叶、麻花均具有毒性(含有四氢大麻酚THC-毒品大麻的至幻物质）。为排 除原料药的毒性，本发明优选采用云南生长的工业大麻品种一一"云麻1号"的花、叶、麻糠 和火麻仁作为原料。按我国相关法律文件规定，"云麻1号"只能在云南境内种植，并且其花、 叶、麻糠只能在云南境内加工。
[0026] 本发明的药物组合物可进一步制成不同的药物制剂，包括口服剂和针剂，其中口 服剂包括胶囊剂、口服液、片剂、滴丸、颗粒剂等，针剂包括注射液剂型及注射用冻干粉针剂 型等。在制备口服制剂时可选用的辅型剂可以是淀粉、糊精或环糊精、蔗糖、硬脂酸盐等常 规充填剂。冻干粉针剂可以通过无菌喷雾干燥、低温真空干燥、冷冻干燥等方法制备。各制 剂的后期制备工艺及设备均属制药领域的常规技术，本发明对此不作限定，故在此不予详 述。
[0027]本发明的药物组合物能明显降低血脂、提高血清NO含量、降低ET-I含量，并抑制斑 块进展，效果优于大麻二酚，具有明确的治疗动脉粥样硬化的作用。
【具体实施方式】
[0028] 下面通过实施例对本发明作进一步的详细说明，但实施例并不是对本发明技术方 案的限定。
[0029] 实施例1
[0030] 采用云南生长的工业大麻品种--"云麻1号"的花、叶、麻糠和火麻仁作为原料。 取成熟的工业大麻火麻仁，经烘干、除杂，粉碎后备用；用乙醇对粉碎火麻仁料进行提取(在 60~85 °C条件下，加热提取2次，每次1~3小时），乙醇浓度为95 %~100 % (V/V)，料液比为 1:5~1:20;滤出浸提液，减压浓缩后即为工业大麻火麻仁提取物。
[0031] 取工业大麻的花、叶、麻糠1:3:2质量比的混合物，经烘干、除杂、粉碎至10~60目； 超临界二氧化碳萃取:将上述粉碎好的工业大麻原料投入超临界二氧化碳萃取装置中，控 制萃取温度40~50°C，萃取时间30~90min，萃取压力25~35Mpa，二氧化碳流量40kg/h，分 离釜出口收集萃取物;萃取物用〇. 2~10倍体积的95 %~100% (V/V)的乙醇洗脱，洗脱次数 为1~3次;收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，粉碎后获得工业大麻火麻素。
[0032] 取工业大麻火麻仁提取物40份，工业大麻火麻素60份，混匀，得本发明药物B。
[0033] 实施例2
[0034] 重复实施例1，有以下不同点：在用乙醇对工业大麻火麻仁进行提取时，室温下浸 提，每批物料浸提2次，每次7~10天。取工业大麻的花、叶、麻糠1: 1:1质量比的混合物作为 工业大麻火麻素的提取原料。
[0035]取工业大麻火麻仁提取物0.3份，工业大麻火麻素99.7份，混匀，得本发明药物A。
[0036] 实施例3
[0037]重复实施例1，有以下不同点：在用乙醇对工业大麻火麻仁进行提取时，采用超声 波辅助提取，超声波频率30~60kHz，功率100~1000W，提取时间30~60min，浸提温度25~ 50°C。取工业大麻的花、叶、麻糠3:2:1质量比的混合物作为工业大麻火麻素的提取原料。 [0038]取工业大麻火麻仁提取物99.7份，工业大麻火麻素0.3份，混匀，得本发明药物C。 [0039] 实施例4
[0040]取实施例1所得药物100克(过80目筛），加入60克微晶纤维素，过80目筛三遍，混合 均匀，喷入95%乙醇溶液，制软材，过40目筛制粒，60°C干燥半小时，分装于3#胶囊中，错塑 复合包装，制得治疗动脉粥样硬化药物胶囊剂。
[0041 ] 实施例5
[0042] 取实施例2所得药物，加入物料量5~20 %的干淀粉及1~5 %的硬脂酸镁等，经混 合，制粒，干燥，压片，制得治疗动脉粥样硬化药物片剂。
[0043] 实施例6
[0044] 取实施例3所得药物，加入蔗糖水及常规量的防腐剂，稳定剂等辅料。过滤、灭菌， 分装入IOmL瓶中，制成治疗动脉粥样硬化药物口服液。
[0045] 实施例7
[0046] 取实施例1所得药物，加入注射用水溶解，加入2.0%。活性炭，搅拌，过滤，继以用 0.45μηι、0.22μηι微孔滤膜分级过滤，补充注射用水，分装于西林瓶中，冷冻干燥，回充高纯度 氮气，加塞，压盖，包装，制得治疗动脉粥样硬化药物注射液。
[0047] 应用实施例1本发明对实验性动脉粥样硬化兔的影响
[0048] 取健康新西兰兔，体重2.0-2.5kg，雌雄各半，颗粒饲料平衡喂养1周后，随机取10 只作为正常对照组，用普通饲料喂养，其余为高脂造模组，给予高脂饲料喂养（按1%胆固 醇、5%猪油、10%蛋黄粉、84%普通饲料比例制作），各组每兔每天进食总量相等，限制为 150g，自由饮水。12周后高脂造模组取2只实验家兔处死，光镜下观察主动脉内膜明显增厚， 伴有大量泡沫细胞，内皮细胞排列紊乱、不连续，大量平滑肌细胞迀移内膜，视为造模成功。
[0049] 将高脂造模组家兔随机分为5组，每组10只，即正常对照组、模型组、大麻二酚组、 本发明A、B、C组。除正常对照组仍然喂养普通饲料外，其余各组喂养上述高脂饲料。本发明 组和大麻二酚组分别灌胃给予20mg/kg;其余组给予相应量生理盐水。所有动物自由饮水， 每天给药1次给药共8周。所有动物在给药8周后空腹抽取耳静脉血5mL，供检测各组家兔血 清1'(：36、〇^、!101^、勵41'-1使用；抽血结束后以空气栓塞法处死所有实验动物，无菌取出主 动脉根部至主动脉穿膈肌处动脉段作为标本，清除外膜附着组织，沿动脉长轴剪开，取斑块 最显著部位动脉段lcm，置于10%福尔马林溶液中浸泡固定后修剪成约IcmXO . 15cmX 0 · 15cm的组织块，用于病理组织学观察。
[0050] 采用酶法测定血清TC、TG、LDL、HDL水平;NO测定采用硝酸还原酶法;ET-1采用放射 免疫分析法。测量斑块面积:病理组织块经切片机按4μπι的厚度切割，采用HE染色制作病理 切片，计算斑块面积占整条主动脉面积的百分比。
[0051]按以下规定进行病变分级:①0级:无病变;②I级:病变占1~25%;③II级:病变占 26~50%;④III级：病变占51~75%;⑤IV级：病变占76~100%。记分方法:①0级：计0分； ②I级:计1分;③II级:计2分;④III级:计3分;⑤IV级:计4分。
[0052] 1、本发明对AS模型兔血脂的影响
[0053] 试验结果见表1，结果表明，与空白组相比，模型组的TC、TG、LDL明显升高（P< 0.01)、HDL明显降低(P<0.01)，表明造模成功。与模型组相比，本发明能显著降低AS模型兔 血中TC、TG、LDL水平(P<0.01);升高AS模型兔血中HDL水平(P<0.01)，效果优于大麻二酚。 [0054] 表1本发明对AS模型兔血脂的影响（?士s，n = 10)
[0056] 注：与模型组比较:*P<0 · 05，林P<0 · 01。
[0057] 2、本发明对AS模型兔NO、ET-1的影响
[0058]试验结果见表2,结果表明，与模型组相比，本发明能显著降低AS模型兔血中ET-I 水平，提高NO水平，且均具有显著性意义(P<0.01 )，效果优于大麻二酚。
[0059] 表2本发明对AS模型兔NO、ET-I的影响（，n = 10)
[0062] 注：与模型组比较:*P<0 · 05，#P<0 · 01。
[0063] 3、本发明对AS模型兔动脉斑块的影响
[0064] 试验结果见表3,结果表明，与模型组相比，本发明能显著降低AS模型兔斑块面积 (P<0.01)，效果优于大麻二酚。
[0065] 表3本发明对AS模型兔动脉斑块的影响(^士s，n = 10)
[0067] 注：与模型组比较:*P<0 · 05，林P<0 · 01。
[0068] 综上所述，本发明能明显降低血脂、提高血清NO含量、降低ET-I含量，并抑制斑块 进展，上述作用是其治疗动脉粥样硬化的药理学基础。
【主权项】
1. 一种治疗动脉粥样硬化的药物，其特征在于，由下述重量份的原料混匀制成:工业大 麻火麻仁提取物0.3份~99.7份，工业大麻火麻素99.7份~0.3份。2. 根据权利要求1所述的治疗动脉粥样硬化的药物，其特征在于:所述药物的原料组成 优选为工业大麻火麻仁提取物40份和工业大麻火麻素60份。3. 根据权利要求1所述的治疗动脉粥样硬化的药物，其特征在于:所述的工业大麻火麻 仁提取物通过以下方法制备而成： (1) 取成熟的工业大麻火麻仁，经烘干、除杂，粉碎后备用； (2) 在20~85°C条件下，用乙醇对粉碎火麻仁料进行提取，乙醇浓度为95 %~100% (V/ V)，料液比为1:5~1:20; (3) 滤出浸提液，减压浓缩后即为工业大麻火麻仁提取物。4. 根据权利要求1所述的治疗动脉粥样硬化的药物，其特征在于:所述的工业大麻火麻 素通过以下方法制备而成： (1) 取工业大麻的花、叶、麻糠或三者的混合物，经烘干、除杂、粉碎至10~60目； (2) 超临界二氧化碳萃取:将上述粉碎好的工业大麻原料投入超临界二氧化碳萃取装 置中，控制萃取温度40~50°C，萃取时间30~90min，萃取压力25~35Mpa，二氧化碳流量 40kg/h，分离釜出口收集萃取物； (3) 萃取物用0.2~10倍体积的95 %~100 % (V/V)的乙醇洗脱，洗脱次数为1~3次； (4) 收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，粉碎后即得工业大麻火麻素。5. 根据权利要求4所述的治疗动脉粥样硬化的药物，其特征在于：所述的工业大麻的 花、叶、麻糠三者混合物的优选配比为1:3:2。6. 根据权利要求1或2或3或4或5所述的治疗动脉粥样硬化的药物，其特征在于:所述的 工业大麻的品种优选为〃云麻1号〃。
【文档编号】A61P9/10GK105963357SQ201610415112
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年6月14日
【发明人】陈天睿, 胡瀞月
【申请人】云南瑞酚生物科技有限公司