一种维生素k1胶束注射液及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种维生素K1胶束注射液及其制备方法，属于胶束注射液及其制备领域。本发明首先公开了一种维生素K1胶束，包括以下各组分：维生素K1、胆酸盐、磷脂、pH调节剂和注射用水。其制备方法采用有机溶剂冻干法，以磷脂和胆酸盐两种材料组成的混合胶束为载体，将维生素K1包载在混合胶束的疏水核中。由于维生素K1在水中不溶，通过胆盐/磷脂混合胶束制备技术显著增加了维生素K1在水中的溶解度，该产品未加入聚山梨酯?80和丙二醇，仅以具有“生理赋形剂”之称的磷脂和胆盐作为辅料，跟目前上市销售产品维生素K1注射液相比，该制剂可减少药物的不良反应，增加该药在临床应用的安全性。
【专利说明】
一种维生素K1胶束注射液及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及所述维生素 K1胶束注射液的制备方法，属于胶束注射制剂及其制备领 域。
【背景技术】
[0002] 维生素 K1是一种黄色至橙黄色透明粘稠的液体，无臭或几乎无臭，遇光易分解;折 光率：1.525~1.528;在三氯甲烷、乙醚或植物油中易溶，在乙醇中略溶，在水中不溶;其化 学名称为:2_甲基-3-(3,7,11，15-四甲基-2-十六碳烯基)-1，4_萘二酮的反式和顺式异构 体的混合物;其分子式:C31H46O2;分子量:450.71，结构式为：
[0003]
[0004] 维生素 K为促凝血因子活性药物，其作用主要是参与肝合成凝血因子II、VII、IX、 X。在有维生素 K参与下，可使上述凝血因子的谷氨酸残基的γ-羟基化，而活化为能与Ca2+结 合的具有凝血活性的凝血因子，从而发挥促凝血作用。维生素 K是一组甲萘醌衍生物，其中 维生素心是从植物苜蓿中获得的天然型维生素 K类药。维生素 K缺乏可引起这些凝血因子合 成障碍或异常，临床可见出血倾向和凝血酶原时间延长。维生素心为脂溶性，口服后依赖胆 汁吸收，口腹6~12小时起效;注射1~2小时起效，3~6小时止血效果明显，12~14小时后凝 血酶原时间恢复正常。其在肝内代谢，经肾脏和胆汁排出。
[0005] 维生素 K1的缺乏可致使血液不凝固，临床中因维生素 K1缺乏出血的病人多为新生 儿。新生儿出生1~2天饮食有限，维生素 K的摄入量少，母乳中维生素含量低，加之肠道内无 菌，影响维生素 K的合成，导致维生素 K缺乏，肝脏不够成熟，肝脏合成凝血因子II、VII、IX、X 的过程受阻，凝血时间延长，导致出血，这种疾病为新生儿出血性疾病。早在1952年Dam等就 描述了新生儿出血性疾病(HDN)的发生与维生素缺乏的关系。根据发病时间可分为三种： 早发型出血症、典型出血症、迟发型。新生儿刚出生时体内缺乏维生素 K1，纯母乳喂养时间 较长的新生儿会快速发展到严重的维生素 K1缺乏:小儿可在出生后第一周发生典型的或在 2个月内出现迟发型出血症，这两种情况发病急、易引起颅内出血损伤、致残率高、死亡率亦 高。我国的发病率高达到0.5~2%，烟台地区的发病率高达9.03%，我国是维生素 K缺乏性 出血疾病的高发地区。医学研究表明，新生儿出生给予维生素 K1可预防维生素 K1缺乏性出 血性疾病。维生素 K1的给药途径也影响药效。口服维生素 K1仅能预防典型出血症，对迟发型 出血症无效，Longhan发现维生素 K1以2mg肌注药效可持续2个月以上，口服相对较差。2000 年，我国广西横县推广新生儿出生24h内常规应用维生素 K1肌注一次，研究结果表明：婴儿 维生素 K缺乏住院人数明显减少，维生素 K缺乏患者下降。另外，因人体肝脏可合成凝血酶 原，肝功能不良者或外科大手术者，均需给予一定量的维生素 K1可防止出血症。
[0006] 维生素 K1注射液是临床常用药物之一，2004年1月1日至2011年5月31日，国家药品 不良反应监测中心病例报告数据库中有维生素 Κ1注射液严重不良反应/事件报告893例，其 中过敏性休克328例（占36.7%)，严重过敏反应是维生素 Κ1最为突出的不良反应，2011年12 月26日国家食品药品监督管理局发布公告提醒关注维生素 Κ1注射液的严重过敏反应。
[0007] 目前临床上使用的维生素 Κ1注射液存在严重的不良反应，有研究者认为其不良反 应可能与注射剂中含有助溶剂吐温-80、丙二醇等有关。因此，有必要开发一种新剂型使得 维生素 Κ1溶解度增加的同时，减少或避免其不良反应的发生。胆盐/卵磷脂混合胶束(BS/ PC-MMS)是国外广泛用于难溶性药物增溶的胶体溶液系统，已成功用于、紫杉醇、地西泮、劳 拉西泮等药物的增溶。大量实验证实胆盐/卵磷脂混合胶束系统不仅可以显著提高难溶性 药物的溶解性，还能够提高药物疗效，是一种生物相容性溶媒，被称为"生理赋形剂"。
[0008] 现有技术中虽然已有胆盐/卵磷脂混合胶束系统广泛应用的技术启示，但是不同 活性的物质以及不同的胆盐/卵磷脂的组合使用并非显而易见地。由于胆盐/卵磷脂混合胶 束系统的性质如稳定性、起效时间、在体内的循环时间、生物利用度和毒副作用等与其组成 直接地密切相关，而胆盐/卵磷脂混合胶束系统的组成与所要包封的药物性质直接地密切 相关，因此，选择什么样的成分形成具有良好品质的维生素 Κ1的胆盐/卵磷脂混合胶束系统 是亟待解决的课题。
[0009] 为了形成品质优良的维生素 Κ1的胆盐/卵磷脂混合胶束系统，重要的是寻找能与 维生素 Κ1良好相容从而将其良好包封且提高其生物利用度的的胆盐/卵磷脂，以便形成品 质优良的维生素 Κ1的胆盐/卵磷脂混合胶束系统。
[0010] 本发明的目的是克服维生素 Κ1的难溶性，口服生物利用度低，静脉给药副作用大 等缺点，制备一种能大大提高其生物利用度且成本低，制备工艺简单，适于工业化生产，安 全有效的维生素 Κ1胶束注射液。
【发明内容】
[0011] 本发明所要解决的技术问题是提供一种维生素 Κ1胶束注射液的制备方法。
[0012] 为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：
[0013] 本发明首先公开了一种维生素 Κ1胶束注射液，包括以下各组分：维生素 Κ1、胆酸 盐、磷脂、pH调节剂和注射用水。
[0014] 各组分的重量百分含量为：维生素 K10.5~5%、胆酸盐2~15%、磷脂3~20%、pH 调节剂微量，余量为注射用水。
[0015] 优选的，各组分的重量百分含量为:维生素 K1 0.9%，胆酸盐5.1%、磷脂6.6%、pH 调节剂微量，余量为注射用水。
[0016] 其中，所述胆盐为甘氨胆酸钠、牛黄胆酸钠、甘氨脱氧胆酸钠、牛黄脱氧胆酸钠、甘 氨鹅脱氧胆酸钠、牛黄鹅脱氧胆酸钠中的任意一种或任意两种按照任意比例组成的混合 物，优选为甘氨胆酸钠;所述的磷脂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂的任意一种或两种按照任意 比例组成的混合物，优选大豆卵磷脂。
[0017] 本发明还公开了一种所述维生素 K1胶束注射液的制备方法，包括以下步骤：
[0018] (1)按照所述配比称取各组分，将维生素 K1、胆酸盐、磷脂加入有机溶剂中，搅拌， 溶解至澄清；
[0019] (2)将步骤（1)中溶液放入冻干机中，降温至-40°C±2°C，保温2h~4h，然后抽真空 至冷冻干燥箱压强低于l〇Pa，然后以4°C/h的速率升温至-25°C±2°C升华干燥，保温10h，升 温至30°C~35°C，保温2h，冷冻干燥结束，得疏松干燥。
[0020] (3)将粉末加处方量纯化水，室温搅拌，至样品澄清透明，用pH调节剂调节pH值为 5.5~6.5加0.05 % (W/V)的活性炭，脱炭30min，抽滤，得澄清液体。
[0021] (4)将澄清液体灌装至安瓿瓶中，熔封。至灭菌柜中，121°C，灭菌15min。
[0022] 其中，步骤（1)所述有机溶剂选自2-甲基-2-丙醇、2-甲基-2-丁醇、任意一种或两 种按照任意比例或任意一种与不同比例水组成的混合物；最优选为2-甲基-2-丙醇与水按 照体积比4:1组成的混合物；
[0023] 步骤（1)按照g/ml计，维生素 K1、胆酸盐、磷脂的总质量:溶剂=1:10-30,优选为1: 20；
[0024]步骤(3)中pH调节剂选自盐酸、醋酸、柠檬酸任意一种或两种按照任意比例，优选 为盐酸。
[0025] 本发明所制备的维生素 K1胶束注射液粒径为l-50nm，包封率为60%-96%。
[0026] 本发明中所述胆酸盐、磷脂、pH调节剂、有机溶剂的不同种类及其不同用量对维生 素 K1胶束注射液平均粒径、zeta电位、包封率起重要影响作用。其中，维生素 K1与甘氨胆酸 钠，大豆卵磷脂、2-甲基-2-丙醇和水制备的维生素 K1胶束注射液质量评价较好;优选的，维 生素 K10.9%，胆酸盐5.1%、磷脂6.6%、pH调节剂微量，余量为注射用水所制得的维生素 K1 胶束注射液平均粒径为5.4nm，包封率为85.9 %，质量评价最好。因为，维生素 K1胶束注射液 的粒径越小、包封率越高，其制得的胶束注射液的靶向性越好;单位投药量包封率越大，效 果越好。
[0027] 改变胆酸盐、磷脂、pH调节剂的种类或用量，或者改变有机溶剂种类，所制备的维 生素 K1胶束注射液的粒径增大、包封率显著降低。例如，在其他条件均一致的情况下，仅改 变胆酸盐的种类，磷脂为大豆卵磷脂，有机溶剂为2-甲基-2-丙醇与水按照体积比4:1，所制 得的维生素 K1胶束注射液的质量评价存在明显差异，平均粒径为12.4nm，包封率为65.3%。
[0028] 本发明技术方案与现有技术相比，具有以下有益效果：
[0029] 1.使用本方法制备的维生素 K1胶束注射液在保证维生素 K1稳定性的条件下具有 较高的包封率，可以保持体内最佳的药物浓度，并且延长药物作用的时间；同时减少了药物 在临床使用的不良反应。
[0030] 2.该制备方法具有工艺简便、制备成本低、工艺重现性好、样品需要量少，试验筛 选的处方和工艺也可放大到生产应用，因而对产业化的应用具有指导意义。
【具体实施方式】
[0031] 下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而 更为清楚。但是应理解所述实施例仅是范例性的，不对本发明的范围构成任何限制。本领域 技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和 形式进行修改或替换，但这些修改或替换均落入本发明的保护范围。
[0032] 实施例1
[0033]每瓶含维生素 K1 10mg，1000瓶维生素 K1胶束注射液的组成为： 维生素kl 10g 甘氨胆酸钠 57.2g
[0034] 大豆卵磷脂 73.3g 盐酸微量 纯化水 定容至1000ml
[0035] 具体操作过程如下：
[0036] (1)按照所述配比称取各组分，将维生素 K1、甘氨胆酸钠、大豆卵磷脂加入2-甲基_ 2_丙醇与水按照(体积比4:1)中，搅拌，溶解至澄清；
[0037] (2)将步骤（1)中溶液放入冻干机中，降温至_40°C±2°C，保温2h~4h，然后抽真空 至冷冻干燥箱压强低于l〇Pa，然后以4°C/h的速率升温至-25°C±2°C升华干燥，保温10h，升 温至30°C~35°C，保温2h，冷冻干燥结束，得疏松干燥。
[0038] (3)将粉末加处方量纯化水，室温搅拌，至样品澄清透明，用盐酸调节pH值为5.5~ 6.5加0.05 % (W/V)的活性炭，脱炭30min，抽滤，得澄清液体。
[0039] (4)将澄清液体灌装至安瓿瓶中，熔封。至灭菌柜中，121°C，灭菌15min。
[0040] 检测:维生素 K1胶束注射液平均粒径为5.4nm，包封率为85.9%。
[0041 ] 实施例2
[0042]每瓶含维生素 Kl 10mg，1000瓶维生素 K1胶束注射液的组成为：
[0043] 维生素 kl I0g 牛黄胆酸钠 57.2g 大豆卵磷脂 73.3g
[0044] 盐酸 微量 纯化水 定容个:1000m丨
[0045] 具体操作过程如下：
[0046] (1)按照所述配比称取各组分，将维生素 K1、牛黄胆酸钠、大豆卵磷脂加入2-甲基_ 2_丙醇与水按照(体积比4:1)中，搅拌，溶解至澄清；
[0047] (2)将步骤（1)中溶液放入冻干机中，降温至_40°C±2°C，保温2h~4h，然后抽真空 至冷冻干燥箱压强低于l〇Pa，然后以4°C/h的速率升温至-25°C±2°C升华干燥，保温10h，升 温至30°C~35°C，保温2h，冷冻干燥结束，得疏松干燥。
[0048] (3)将粉末加处方量纯化水，室温搅拌，至样品澄清透明，用盐酸调节pH值为5.5~ 6.5加0.05 % (W/V)的活性炭，脱炭30min，抽滤，得澄清液体。
[0049] (4)将澄清液体灌装至安瓿瓶中，熔封。至灭菌柜中，121°C，灭菌15min。
[0050] 检测:维生素 Kl胶束注射液平均粒径为12.4nm，包封率为65.3%。
[0051 ] 实施例3
[0052]每瓶含维生素 Kl 10mg，1000瓶维生素 K1胶束注射液的组成为： 维生素kl IQg 甘氨胆酸钠 57.2g
[0053] 大豆卵磷脂 73.3g 盐酸 微量 纯化水 定容个.lOOOml
[0054] 具体操作过程如下：
[0055] (1)按照所述配比称取各组分，将维生素 K1、甘氨胆酸钠、大豆卵磷脂加入2-甲基-2_丙醇与水按照(体积比3:1)中，搅拌，溶解至澄清；
[0056] (2)将步骤（1)中溶液放入冻干机中，降温至-40°C±2°C，保温2h~4h，然后抽真空 至冷冻干燥箱压强低于l〇Pa，然后以4°C/h的速率升温至-25°C±2°C升华干燥，保温10h，升 温至30°C~35°C，保温2h，冷冻干燥结束，得疏松干燥。
[0057] (3)将粉末加处方量纯化水，室温搅拌，至样品澄清透明，用盐酸调节pH值为5.5~ 6.5加0.05 % (W/V)的活性炭，脱炭30min，抽滤，得澄清液体。
[0058] (4)将澄清液体灌装至安瓿瓶中，熔封。至灭菌柜中，121°C，灭菌15min。
[0059] 检测:维生素 K1胶束注射液平均粒径为8.5nm，包封率为78.3%。
[0060] 实施例4
[00611每瓶含维生素 Kl 10mg，1000瓶维生素 K1胶束注射液的组成为： 维生素kl 10g 甘氨胆酸钠 40g
[0062] 大豆卵磷脂 73.3g 盐酸 微量 纯化水 定荇个.1000ml
[0063] 具体操作过程如下：
[0064] (1)按照所述配比称取各组分，将维生素 K1、甘氨胆酸钠、大豆卵磷脂加入2-甲基_ 2_丙醇与水按照(体积比4:1)中，搅拌，溶解至澄清；
[0065] (2)将步骤（1)中溶液放入冻干机中，降温至-40°C±2°C，保温2h~4h，然后抽真空 至冷冻干燥箱压强低于l〇Pa，然后以4°C/h的速率升温至-25°C±2°C升华干燥，保温10h，升 温至30°C~35°C，保温2h，冷冻干燥结束，得疏松干燥。
[0066] (3)将粉末加处方量纯化水，室温搅拌，至样品澄清透明，用盐酸调节pH值为5.5~ 6.5加0.05 % (W/V)的活性炭，脱炭30min，抽滤，得澄清液体。
[0067] (4)将澄清液体灌装至安瓿瓶中，熔封。至灭菌柜中，121°C，灭菌15min。
[0068] 检测:维生素 Kl胶束注射液平均粒径为10.3nm，包封率为63.8%。
[0069] 实施例5
[0070]每瓶含维生素 Kl 10mg，1000瓶维生素 K1胶束注射液的组成为： 维生素kl 10g 甘氨胆酸钠 57.2g
[0071] 大豆卵磷脂 l()0g 盐酸 微量 纯化水 定容个.lOOOml
[0072] 具体操作过程如下：
[0073] (1)按照所述配比称取各组分，将维生素 K1、甘氨胆酸钠、大豆卵磷脂加入2-甲基_ 2_丙醇与水按照(体积比4:1)中，搅拌，溶解至澄清；
[0074] (2)将步骤（1)中溶液放入冻干机中，降温至_40°C±2°C，保温2h~4h，然后抽真空 至冷冻干燥箱压强低于l〇Pa，然后以4°C/h的速率升温至-25°C±2°C升华干燥，保温10h，升 温至30°C~35°C，保温2h，冷冻干燥结束，得疏松干燥。
[0075] (3)将粉末加处方量纯化水，室温搅拌，至样品澄清透明，用盐酸调节pH值为5.5~ 6.5加0.05 % (W/V)的活性炭，脱炭30min，抽滤，得澄清液体。
[0076] (4)将澄清液体灌装至安瓿瓶中，熔封。至灭菌柜中，121°C，灭菌15min。
[0077] 检测:维生素 K1胶束注射液平均粒径为9. lnm，包封率为72.3%。
[0078] 实施例6
[0079]每瓶含维生素 Kl 10mg，1000瓶维生素 K1胶束注射液的组成为： 维生素 id lOg 甘氨胆酸钠 57.2g
[0080] 蛋黄卵磷脂 _73..3_g 盐酸 微量 纯化水 定荇乍1000ml
[0081 ] 具体操作过程如下：
[0082] (1)按照所述配比称取各组分，将维生素 K1、甘氨胆酸钠、蛋黄卵磷脂加入2-甲基_ 2_丙醇与水按照(体积比4:1)中，搅拌，溶解至澄清；
[0083] (2)将步骤（1)中溶液放入冻干机中，降温至-40°C±2°C，保温2h~4h，然后抽真空 至冷冻干燥箱压强低于l〇Pa，然后以4°C/h的速率升温至-25°C±2°C升华干燥，保温10h，升 温至30°C~35°C，保温2h，冷冻干燥结束，得疏松干燥。
[0084] (3)将粉末加处方量纯化水，室温搅拌，至样品澄清透明，用盐酸调节pH值为5.5~ 6.5加0.05 % (W/V)的活性炭，脱炭30min，抽滤，得澄清液体。
[0085] (4)将澄清液体灌装至安瓿瓶中，熔封。至灭菌柜中，121°C，灭菌15min。
[0086] 检测:维生素 Kl胶束注射液平均粒径为8.9nm，包封率为76.2%。
[0087] 实施例7
[0088]每瓶含维生素 Kl 10mg，1000瓶维生素 K1胶束注射液的组成为： 维 Ψ/??!< 丨 i〇g
[0089] 甘氨胆酸钠 57.2g 大豆卵磷脂 73,3g 盐酸 微量
[0090] 纯化水 定容个:丨000m丨
[0091] 具体操作过程如下：
[0092] (1)按照所述配比称取各组分，将维生素 K1、甘氨胆酸钠、大豆卵磷脂加入2-甲基_ 2_丙醇中，搅拌，溶解至澄清；
[0093] (2)将步骤（1)中溶液放入冻干机中，降温至-40°C±2°C，保温2h~4h，然后抽真空 至冷冻干燥箱压强低于l〇Pa，然后以4°C/h的速率升温至-25°C±2°C升华干燥，保温10h，升 温至30°C~35°C，保温2h，冷冻干燥结束，得疏松干燥。
[0094] (3)将粉末加处方量纯化水，室温搅拌，至样品澄清透明，用盐酸调节pH值为5.5~ 6.5加0.05 % (W/V)的活性炭，脱炭30min，抽滤，得澄清液体。
[0095] (4)将澄清液体灌装至安瓿瓶中，熔封。至灭菌柜中，121°C，灭菌15min。
[0096]检测：甘氨胆酸钠溶解非常缓慢，操作困难，维生素 K1胶束注射液平均粒径为 5.8nm，包封率为80.1%。
【主权项】
1. 一种维生素 K1胶束注射液，其特征在于，包括以下各组分:维生素 κι、胆酸盐、磷脂、 pH调节剂和注射用水。2. 按照权利要求1所述的维生素 K1胶束注射液，其特征在于，各组分的重量百分含量 为:维生素 K1 0.5~5%、胆酸盐2~15%、磷脂3~20%、pH调节剂微量，余量为注射用水。3. 按照权利要求2所述的维生素 K1胶束注射液，其特征在于，各组分的重量百分含量 为:维生素 K1 0.9%，胆酸盐5.1 %、磷脂6.6%、pH调节剂微量，余量为注射用水。4. 按照权利要求1至3任何一项所述的维生素 K1胶束注射液，其特征在于:所述胆盐为 甘氨胆酸钠、牛黄胆酸钠、甘氨脱氧胆酸钠、牛黄脱氧胆酸钠、甘氨鹅脱氧胆酸钠、牛黄鹅脱 氧胆酸钠中的任意一种或任意两种按照任意比例组成的混合物，优选为甘氨胆酸钠;所述 的磷脂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂的任意一种或两种按照任意比例组成的混合物，优选大 豆卵磷脂。5. -种权利要求1至4任何一项所述维生素 K1胶束注射液的制备方法，其特征在于，包 括以下步骤： (1) 按照所述配比称取各组分，将维生素 K1、胆酸盐、磷脂加入有机溶剂中，搅拌，溶解 至澄清； (2) 将步骤（1)中溶液放入冻干机中，降温至-40°C±2°C，保温2h~4h，然后抽真空至冷 冻干燥箱压强低于l〇Pa，然后以4°C/h的速率升温至-25°C±2°C升华干燥，保温10h，升温至 30 °C~35 °C，保温2h，冷冻干燥结束，得疏松干燥； (3) 将粉末加处方量纯化水，室温搅拌，至样品澄清透明，用pH调节剂调节pH值为5.5~ 6.5，加0.05 % (W/V)的活性炭，脱炭30min，抽滤，得澄清液体； (4) 将澄清液体灌装至安瓿瓶中，熔封。至灭菌柜中，121°C，灭菌15min。6. 按照权利要求5所述制备方法，其特征在于:步骤（1)所述有机溶剂选自2-甲基-2-丙 醇、2-甲基-2-丁醇任意一种或两种按照任意比例或任意一种与不同比例水组成的混合物； 最优选为2-甲基-2-丙醇与水按照体积比4:1组成的混合物； 其中，步骤（1)按照g/ml计，维生素 K1、胆酸盐、磷脂的总质量:溶剂=1:10-30,优选为 1:20； 步骤(3)中pH调节剂选自盐酸、醋酸、柠檬酸任意一种或两种按照任意比例，优选为盐 酸。
【文档编号】A61P7/04GK105997869SQ201610444660
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月17日
【发明人】杨贤龙, 何勇, 张亮亮
【申请人】合肥华方医药科技有限公司