一种活血止痛胶囊及其制备方法
【专利摘要】本发明提供一种活血止痛胶囊的制备方法，取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片11g、土鳖虫111g、煅自然铜67g，以上六味，加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过滤，药渣再加入药材8倍重量的水，煎煮1小时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60℃相对密度为1.05，加乙醇使含醇量的体积百分比达75％，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25，并回收乙醇，得浓缩液，使用超临界萃取，得超临界萃取物，继续浓缩，将浓缩液进行干燥,制粒，灌胶囊，得活血止痛胶囊，并采用特有的浓缩和干燥设备，制备得到的活血止痛胶囊中阿魏酸含量高，并发现在制备抑制非洲绿猴肾Vero?E6细胞增殖药物中的应用。
【专利说明】
一种活血止痛胶囊及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及中药提取技术领域，具体涉及一种活血止痛胶囊及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 活血止痛胶囊，活血散瘀、消肿止痛。用于跌打损伤，瘀血肿痛。现有技术中的制备 方法，工艺粗糙、落后，杂质多，有效成分含量低，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响 了本品在临床上应用。
【发明内容】
[0003] 发明目的：为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种活血止痛胶囊及其制 备方法。
[0004] 技术方案:本发明的目的是通过如下的方案实现的：
[0005] -种活血止痛胶囊，制备方法为：取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片llg、土鳖 虫111g、煅自然铜67g，以上六味，加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过滤，药渣再 加入药材8倍重量的水，煎煮1小时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60°C相对密度为 1.05，加乙醇使含醇量的体积百分比达75%，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65°C时相对密度 为1.25,并回收乙醇，得浓缩液，使用超临界萃取，得超临界萃取物，继续浓缩，将浓缩液进 行干燥，制粒，灌胶囊，得活血止痛胶囊。
[0006] 所述活血止痛胶囊，上述制备方法中超临界萃取方法为:将水提醇沉浓缩液加入 到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取 压力15-30MPa，温度30-50°C，C02流量l-3ml/g生药· min，萃取时间150-180min，得超临界 萃取物，优选条件为:所述C02超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，所述 C02超临界萃取的萃取压力20MPa，温度40°C，C02流量2ml/g生药· min，萃取时间160min。
[0007] 所述活血止痛胶囊，上述制备方法中三次浓缩使用装置，包括罐体，设置在所述罐 体上的进料口和设置在所述罐体底部的出料管，在所述出料管上设有出料阀门和过滤器， 在所述罐体内设有搅拌轴，在所述搅拌轴上设有搅拌桨，在所述罐体的顶部设有与所述搅 拌轴相连接的搅拌电机，在所述罐体内的底壁设有震动腔，在所述震动腔内设有震动板，在 所述震动板与所述震动腔之间设有震动器，在所述罐体内的侧壁上设有凹腔，在所述震动 板的顶面设有刮板，在所述刮板与所述凹腔之间设有伸缩气缸，所述刮板在所述伸缩气缸 的作用下实现对震动板表面的刮擦，在所述震动板的中心设有与所述出料管相连通的出料 □ 〇
[0008] 所述活血止痛胶囊，上述制备方法中浓缩装置所述震动板与所述震动腔的连接处 设有密封金属条，在所述罐体上设有与所述震动器相连接的震动控制器。
[0009] 所述活血止痛胶囊，上述制备方法中浓缩装置所述刮板的底部设有金属刮丝层， 所述金属刮丝层抵压在所述震动板上，在所述罐体上设有与所述伸缩气缸相连接的伸缩控 制按钮。
[0010]所述活血止痛胶囊，上述制备方法中浓缩装置所述罐体内设有水份测试仪，在所 述出料管内设有冷却器。
[0011]所述活血止痛胶囊，上述制备方法中干燥使用装置，包括机体，设置在所述机体内 的中轴，设置在所述中轴外壁上的旋转盛放盘，在所述中轴的下端设有震动电机，在所述机 体的顶部设有热蒸汽输送管道，其特征在于:在所述中轴内设有空腔，在所述中轴的顶部设 有圆盘，所述圆盘设置在所述旋转盛放盘的顶部，在所述圆盘上设有上下通透的细孔，在所 述圆盘内设有与所述空腔相连接的导热柱杆，在所述空腔内设有电加热块，所述导热柱杆 上设有导热刺柱，所述导热刺柱伸入所述细孔内，在所述机体内设有温度传感器、在所述空 腔内设有与所述温度传感器相连接的驱动器，所述驱动器与所述电加热块的控制开关相连 接。
[0012] 所述活血止痛胶囊，上述制备方法中干燥使用装置所述细孔为顶部大底部小的喇 叭状孔，所述导热刺柱伸入所述喇叭状孔的中部，在所述喇叭状孔上设有上下通透的传导 网孔。
[0013] 所述活血止痛胶囊，上述制备方法中干燥使用装置所述机体的底面设有箱门，所 述箱门设置在旋转盛放盘的最底端，所述导热柱杆为银或铝或铜质柱杆。
[0014] 所述活血止痛胶囊在制备抑制非洲绿猴肾Ver〇-E6细胞增殖药物中的应用。
[0015] 现有技术中，活血止痛胶囊采用水提的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用 量过大，不方便服用，本发明制备的活血止痛胶囊中阿魏酸得率增加，含量高，本发明中的 浓缩设备结构简单、操作便捷，其设有震动板和震动器，而还设有刮板和与所述刮板相连接 的伸缩气缸，可有效防止罐体底部结块，一定程度上可大大提高加热效率，有效解决了传统 技术中药浓缩设备中容易出现底部结块而影响加热效率的技术不足，使用稳定性好且适用 性强，药物的有效成分稳定不被破坏。本干燥设备结构简单，操作便捷，在中轴的顶部设有 圆盘，并且在圆盘上设有细孔，可以使热蒸汽通过圆盘，并且在中轴内设有电加热块和导热 柱杆，可以根据需要启动电加热块，并通过导热柱杆实现温度传递，并与通过圆盘的热蒸汽 进行混合，从而可以保证热蒸汽的温度，调节性能好，使用稳定性强，有效解决了传统技术 中热蒸汽加热干燥机中温度无法控制的技术不足。并发现所述活血止痛胶囊在制备抑制非 洲绿猴肾Ver〇-E6细胞增殖药物中的应用。
【附图说明】
[0016] 为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据具体实施例并结合附图，对 本发明作进一步详细的说明，其中：
[0017] 图1为本发明浓缩装置的结构示意图。
[0018] 图2为本发明干燥装置的结构示意图。
【具体实施方式】
[0019] 以下通过实施例形式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此 理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均 属于本发明的范围。
[0020] 实施例1
[0021] 取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片llg、土鳖虫lllg、煅自然铜67g，以上六味， 加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过滤，药渣再加入药材8倍重量的水，煎煮1小 时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60°C相对密度为1.05，加乙醇使含醇量的体积百分 比达75%，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65°C时相对密度为1.25，并回收乙醇，得浓缩液，使 用超临界萃取，得超临界萃取物，继续浓缩，将浓缩液进行干燥，制粒，灌胶囊，得活血止痛 胶囊。
[0022] 所述活血止痛胶囊的制备方法，所述超临界萃取方法为:将水提醇沉浓缩液加入 到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%，萃取压 力30MPa，温度30°C，C02流量3ml/g生药· min，萃取时间150min，得超临界萃取物。
[0023]见图1:所述活血止痛胶囊的制备方法，上述三次浓缩装置，包括罐体1，设置在所 述罐体1上的进料口 2和设置在所述罐体1底部的出料管3,在所述出料管3上设有出料阀门4 和过滤器5，在所述罐体1内设有搅拌轴6，在所述搅拌轴6上设有搅拌桨7，在所述罐体1的顶 部设有与所述搅拌轴6相连接的搅拌电机8，在所述罐体1内的底壁设有震动腔9，在所述震 动腔9内设有震动板10,在所述震动板10与所述震动腔9之间设有震动器11，通过震动器可 以使震动板震动，从而可有效防止药物颗粒集结在震动板上，从而可防止药物颗粒在震动 板上结块，在所述罐体1内的侧壁上设有凹腔12,在所述震动板10的顶面设有刮板13,在所 述刮板13与所述凹腔12之间设有伸缩气缸14,可以根据需要控制伸缩气缸，使刮板在震动 板的表面刮动，从而将部分集结在震动板表面的药物颗粒刮动，所述刮板13在所述伸缩气 缸14的作用下实现对震动板10表面的刮擦，在所述震动板10的中心设有与所述出料管3相 连通的出料口 15。
[0024] 在所述震动板10与所述震动腔9的连接处设有密封金属条16,在所述罐体上设有 与所述震动器相连接的震动控制器17。
[0025] 在所述刮板的底部设有金属刮丝层18,所述金属刮丝层抵压在所述震动板上，在 所述罐体上设有与所述伸缩气缸相连接的伸缩控制按钮19。
[0026] 在所述罐体内设有水份测试仪21，在所述出料管内设有冷却器20。
[0027] 见图2,所述活血止痛胶囊的制备方法，上述干燥使用装置，包括机体1，设置在所 述机体1内的中轴2,设置在所述中轴2外壁上的旋转盛放盘3,在所述中轴2的下端设有震动 电机4，在所述机体1的顶部设有热蒸汽输送管道5，在所述中轴2内设有空腔6，在所述中轴2 的顶部设有圆盘7,所述圆盘7设置在所述旋转盛放盘3的顶部，在所述圆盘7上设有上下通 透的细孔8,热蒸汽经过圆盘，进入旋转盛放盘，在所述圆盘7内设有与所述空腔6相连接的 导热柱杆9,在所述空腔6内设有电加热块10,所述导热柱杆9上设有导热刺柱11，所述导热 刺柱11伸入所述细孔8内，可以大大提高热蒸汽与电加热块之间的温度混合，提高温度控制 的效率，在所述机体1内设有温度传感器12、在所述空腔6内设有与所述温度传感器12相连 接的驱动器13,所述驱动器13与所述电加热块10的控制开关相连接。本实施例中温度传感 器和驱动器为市面上已存在的产品，其在使用时只需要按照对应的产品说明进行连接即 可。
[0028] 所述细孔为顶部大底部小的喇叭状孔，所述导热刺柱伸入所述喇叭状孔的中部， 在所述喇叭状孔上设有上下通透的传导网孔14。
[0029]在所述机体的底面设有箱门15，所述箱门设置在旋转盛放盘的最底端。
[0030] 所述导热柱杆为银或铝或铜质柱杆。
[0031] 实施例2
[0032] 取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片llg、土鳖虫lllg、煅自然铜67g，以上六味， 加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过滤，药渣再加入药材8倍重量的水，煎煮1小 时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60°C相对密度为1.05，加乙醇使含醇量的体积百分 比达75%，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65°C时相对密度为1.25，并回收乙醇，得浓缩液，使 用超临界萃取，得超临界萃取物，继续浓缩，将浓缩液进行干燥，制粒，灌胶囊，得活血止痛 胶囊。
[0033] 所述活血止痛胶囊的制备方法，所述超临界萃取方法为:将水提醇沉浓缩液加入 到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为6%，萃取压 力15MPa，温度50°C，C02流量lml/g生药· min，萃取时间180min，得超临界萃取物。
[0034]浓缩和干燥装置同上。
[0035] 实施例3
[0036] 取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片llg、土鳖虫lllg、煅自然铜67g，以上六味， 加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过滤，药渣再加入药材8倍重量的水，煎煮1小 时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60°C相对密度为1.05，加乙醇使含醇量的体积百分 比达75%，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65°C时相对密度为1.25，并回收乙醇，得浓缩液，使 用超临界萃取，得超临界萃取物，继续浓缩，将浓缩液进行干燥，制粒，灌胶囊，得活血止痛 胶囊。
[0037]所述活血止痛胶囊的制备方法，所述超临界萃取方法为:将水提醇沉浓缩液加入 到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，所述 C02超临界萃取的萃取压力20MPa，温度40°C，C02流量2ml/g生药· min，萃取时间160min，得 超临界萃取物。
[0038]浓缩和干燥装置同上。
[0039]上述实施例中药物均符合药典标准。
[0040] 实施例4:本发明活血止痛胶囊提取物中阿魏酸含量测定实验研究资料
[0041] 1.1实验药物：本发明活血止痛胶囊：按实施例1-3方法制备。对照组采用药典标 准，普通浓缩方法制备活血止痛胶囊。
[0042] 1.2仪器:高效液相色谱仪系统包括高效液相色谱仪(Waters 515) ;P200高压栗； Waters2487紫外检测器及GJ605型高压六通进样阀；色谱柱为Hypersil 0DSC18柱(4.6mmX 250mm，5ym);数据采集及处理采用HS色谱数据工作站V4.0+(杭州英谱科技）
[0043] 1.3测定条件：采用高效液相色谱法，采用色谱柱Hypersil 0DSC18柱（4.6mmX 250mm，5μπι);流动相：甲醇：水=75:25 ;流速为1.2mL/min;柱温为30 °C ;检测波长为268~ 270nm〇
[0044] h 4实验结果
[0045] 各实施例制备的活血止痛胶囊中阿魏酸含量测定结果
[0047]根据上表的试验结果可知，本发明实施例1-3制备的活血止痛胶囊中宁阿魏酸含 量明显高于对照组。
[0048]实施例5:本发明活血止痛胶囊抑制非洲绿猴肾Ver〇-E6细胞增殖的实验研究资料
[0049] 1实验材料
[0050] 1.1实验用细胞株
[0051] 非洲绿猴肾Ver〇-E6细胞，南京医科大学实验室细胞库，DMEM+10%FBS常规培养。
[0052] 1.2实验药物
[0053]研究药物:本发明活血止痛胶囊:按实施例1方法制备。
[0054] 药液储液:称取IOOmg活血止痛胶囊，溶于5ml无水乙醇中，0.2μπι滤器过滤，500μ1 doff管分装，_20°C存储，同时0.2μπι滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。
[0055] 1.3实验试剂
[0056] DMEM(GIBC0公司Cat .No · 12100-061Lot .No · 758137);胎牛血清（浙江天杭生物科 技有限公司Lot. No. 100419) ;NaHC03(上海久亿化学试剂有限公司Cat. No. 11810-033Lot.No. 1088387) ;Trypsin(AMRES ⑶公司批号：2010/04) ;EDTA(AMRESC0 公司批号： 2009/10) !Penicillin G Sodium Salt(AMRESCX)公司批号：2010242) !Streptomycin Sulfate (AMRESC0公司批号：2010382);无水乙醇（南京化学试剂有限公司批号： 080310182) ;MTT(Biosharp批号：0793) ;PBS(实验室自配）；1.4实验器材
[0057]莱卡倒置显微镜(德国Leica型号:DMlL);可见-紫外光微孔板检测仪(美国MD公司 型号:SPECTRA MAX 190) ;C02培养箱(FORMA型号:3111);超净台（苏净集团安泰公司制造型 号：SW-CJ-ZFD);纯水仪(美国Spring公司型号：S/N 020579);精密移液器(法国吉尔森公司 型号:P2);电子天平(德国赛多利斯有限公司型号:BT323S);全自动高压灭菌锅（日本SANYO 公司型号:MLS-3020);台式电热鼓风干燥箱(上海精密实验设备公司型号:DHG9123A);冰箱 (西门子公司型号:KG18V21TI);液氮罐(CBS型号:2001);低速离心机(上海安亭科学仪器厂 型号：KA-1000);0 · 2μπι滤器(MILLIP0RE型号：SLGP033RB); IOcm培养皿（NEST公司）、96孔培 养板(NEST公司）；细胞计数板;离心管、移液管、Tips若干。
[0058] 2实验方法
[0059] 1)非洲绿猴肾Ver〇-E6细胞用DMEM+10%FBS于37°C、5%C02进行常规培养（10cm培 养皿），当细胞生长至对数期时，收集细胞，弃去培养液，PBS轻洗3遍，加入3ml0.25%胰蛋白 酶-0.04 %EDTA，37 °C消化2min后，向其中加入5ml完全培养基中和反应，吹打细胞后将其转 入离心管中，1000 rpm离心5min，调整细胞悬液浓度3 X 104个/ml。
[0060] 2)将细胞种入96孔培养板中，每孔加入细胞悬液180μ1，培养板放入细胞培养箱中 (37°C，5%C02)常规培养。
[0061] 3)根据细胞生长情况，一般长至50 %-70 %，加入活血止痛胶囊溶液，继续培养 Mh0
[0062] 4)24h 后加入 20μ1 MTT 溶液（5mg/ml，即0·5%ΜΤΤ)，继续培养 4h。
[0063] 5)4h后扣板法倒去上清，用吸水纸轻轻拍干，每孔加入200μ1二甲基亚砜，置摇床 上低速振荡lOmin，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。
[0064] 6)同时设置本底(不加细胞，只加培养液），对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介 质、培养液、MTT、二甲基亚砜），每组设定6个复孔。
[0065] 7)结果以药物对细胞的抑制率表示：
[0066] 细胞增值抑制率（％ )=(对照孔OD值-给药孔OD值)/对照孔OD值X 100%。实验重 复3次。
[0067] 3统计处理
[0068] 米用Microsoft Excel 2003软件中的相关分析和Student t检验，数据以mean土 S.D.表示。
[0069] 4实验结果
[0070] MTT法实验后统计结果显示，与对照组比较，当剂量达到5mg/ml时，对非洲绿猴肾 Ver〇-E6细胞增殖抑制有差异(P〈0.05)，剂量在lOmg/ml时该差异具有显著性(P〈0.01)，当 剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异(P〈0.001)。
[0071] 活血止痛胶囊对非洲绿猴肾Vero_E6细胞增殖抑制影响研究(X士顔)
[0073] 注：与对照组比较，*P〈0 · 01;林P〈0 · 001
[0074] 5实验结论
[0075] 活血止痛胶囊可以抑制非洲绿猴肾Ver〇-E6细胞增殖，减少非洲绿猴肾Ver〇-E6细 胞的细胞生长数目，该作用呈剂量依赖性。
【主权项】
1. 一种活血止痛胶囊，其特征在于制备方法为：取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片 11 g、土鳖虫111g、煅自然铜67g，以上六味，加药材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小时，过 滤，药渣再加入药材8倍重量的水，煎煮1小时，药液滤出，合并两次煎煮液，浓缩至60°C相对 密度为1.05，加乙醇使含醇量的体积百分比达75%，搅拌，静置，过滤，滤液浓缩至65°C时相 对密度为1.25,并回收乙醇，得浓缩液，使用超临界萃取，得超临界萃取物，继续浓缩，将浓 缩液进行干燥，制粒，灌胶囊，得活血止痛胶囊。2. 根据权利要求1所述活血止痛胶囊，其特征在于所述制备方法中超临界萃取方法为： 将水提醇沉浓缩液加入到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体 积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30-50°C，C0 2流量l-3ml/g生药· min，萃取时间 150-180min，得超临界萃取物，优选条件为:所述C02超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体 积百分比为5%，所述C0 2超临界萃取的萃取压力20MPa，温度40°C，C02流量2ml/g生药· min， 萃取时间160min。3. 根据权利要求1所述活血止痛胶囊，其特征在于所述制备方法中三次浓缩使用装置， 包括罐体，设置在所述罐体上的进料口和设置在所述罐体底部的出料管，在所述出料管上 设有出料阀门和过滤器，在所述罐体内设有搅拌轴，在所述搅拌轴上设有搅拌桨，在所述罐 体的顶部设有与所述搅拌轴相连接的搅拌电机，在所述罐体内的底壁设有震动腔，在所述 震动腔内设有震动板，在所述震动板与所述震动腔之间设有震动器，在所述罐体内的侧壁 上设有凹腔，在所述震动板的顶面设有刮板，在所述刮板与所述凹腔之间设有伸缩气缸，所 述刮板在所述伸缩气缸的作用下实现对震动板表面的刮擦，在所述震动板的中心设有与所 述出料管相连通的出料口。4. 根据权利要求3所述活血止痛胶囊，其特征在于所述制备方法中浓缩装置所述震动 板与所述震动腔的连接处设有密封金属条，在所述罐体上设有与所述震动器相连接的震动 控制器。5. 根据权利要求3所述活血止痛胶囊，其特征在于所述制备方法中浓缩装置所述刮板 的底部设有金属刮丝层，所述金属刮丝层抵压在所述震动板上，在所述罐体上设有与所述 伸缩气缸相连接的伸缩控制按钮。6. 根据权利要求3所述活血止痛胶囊，其特征在于所述制备方法中浓缩装置所述罐体 内设有水份测试仪，在所述出料管内设有冷却器。7. 根据权利要求1所述活血止痛胶囊，其特征在于所述制备方法中干燥使用装置，包括 机体，设置在所述机体内的中轴，设置在所述中轴外壁上的旋转盛放盘，在所述中轴的下端 设有震动电机，在所述机体的顶部设有热蒸汽输送管道，其特征在于:在所述中轴内设有空 腔，在所述中轴的顶部设有圆盘，所述圆盘设置在所述旋转盛放盘的顶部，在所述圆盘上设 有上下通透的细孔，在所述圆盘内设有与所述空腔相连接的导热柱杆，在所述空腔内设有 电加热块，所述导热柱杆上设有导热刺柱，所述导热刺柱伸入所述细孔内，在所述机体内设 有温度传感器、在所述空腔内设有与所述温度传感器相连接的驱动器，所述驱动器与所述 电加热块的控制开关相连接。8. 根据权利要求7所述活血止痛胶囊，其特征在于所述制备方法中干燥使用装置所述 细孔为顶部大底部小的喇叭状孔，所述导热刺柱伸入所述喇叭状孔的中部，在所述喇叭状 孔上设有上下通透的传导网孔。9. 根据权利要求7所述活血止痛胶囊，其特征在于所述制备方法中干燥使用装置所述 机体的底面设有箱门，所述箱门设置在旋转盛放盘的最底端，所述导热柱杆为银或铝或铜 质柱杆。10. 根据权利要求1所述活血止痛胶囊在制备抑制非洲绿猴肾Ver〇-E6细胞增殖药物中 的应用。
【文档编号】A61K31/045GK106074658SQ201610543508
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年7月11日
【发明人】李洋
【申请人】南京多宝生物科技有限公司