一种复方鹅绒藤提取物及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种复方鹅绒藤提取物及其制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(1)按复方鹅绒藤配方选取相应质量的鹅绒藤和白花菜籽药材(二者质量比例范围为10∶3～10∶30)，采用水或乙醇?水混合溶媒进行提取，浓缩；所得复方鹅绒藤提取液用大孔树脂进行吸附，用水洗后，再用40?95％乙醇?水混合溶媒进行洗脱，洗脱液浓缩，干燥，即得。所述复方鹅绒藤提取物中含有小麦黄素?7?O?葡萄糖醛酸苷，含量不低于20mg/g；同时含有芹菜素，含量不低于2.0mg/g。本发明所述复方鹅绒藤提取物的制备工艺路线经济合理、效率高，容易实现工业化生产。
【专利说明】
一种复方鹅绒藤提取物及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种复方鹅绒藤提取物，本发明同时涉及该提取物的制备方法，属生 物医药领域。 技术背景
[0002] 复方鹅绒藤是发明人研制的民间验方，由鹅绒藤、白花菜籽等药材组成，用于治疗 肩周炎、腰肌劳损等多种外周关节炎性疼痛。该方中鹳绒藤(Cynanchum chinense R.Br.) 为萝摩科鹅绒藤属植物地上茎叶，发明人在前期研究中，发现鹅绒藤提取物具有一定的抗 炎活性，其中主要有效成分为小麦黄素-7-0-葡萄糖醛酸苷、山奈酚-3-0-吡喃葡萄糖苷、小 麦黄素等黄酮类成分，并建立了其制备方法(刘江云等，一种鹅绒藤提取物及其制备方法， 专利号ZL201210384712.9)。白花菜籽为白花菜科植物白花菜（Cleome gynandra L.)的种 子，具有祛风散寒、活血止痛等功效[吕帮玉等，白花菜的研究进展，现代农业科技，2014，
[3] :74]，和鹅绒藤具有协同作用，但其中的化学成分研究较为少见。本发明在对鹅绒藤、白 花菜籽主要化学成分进行分离鉴定的基础上，首次研制了复方鹅绒藤提取物的制备工艺及 其质量控制方法，从而完成了本发明。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种工艺和质量可控的复方鹅绒藤提取物。
[0004] 本发明提供的复方鹅绒藤提取物制备方法包括以下工艺步骤：
[0005] (1)按复方鹅绒藤配方选取相应质量的鹅绒藤和白花菜籽药材，采用水或乙醇-水 混合溶媒进行提取，浓缩为浓缩液，加适量水稀释，过滤，得复方鹅绒藤提取液；
[0006] (2)由（1)所得复方鹅绒藤提取液，采用预处理好的大孔树脂进行吸附，先用水或 0-20 %乙醇洗脱，再用40-95 %乙醇洗脱，收集40-95 %乙醇洗脱液，合并后经浓缩，干燥，即 得。
[0007] 所述工艺步骤(1)中，复方鹅绒藤配方相应药材包括鹅绒藤和白花菜籽，二者质量 比例为10:3~10:30。所述鹅绒藤选自鹅绒藤属植物(参见苟占平，杨永建，赵汝能.甘肃鹅 绒藤属药用植物资源调查.中草药，2001,32:69-71)地上茎叶部位。鹅绒藤药材采用本发明 所述分析方法检测，应含有小麦黄素-7-0-葡萄糖醛酸苷。所述白花菜籽为市售品，该药材 采用本发明所述分析方法检测，应含有芹菜素。提取溶媒可采用常规的水或乙醇一水混合 溶媒提取，其中优选40-80 %乙醇混合溶媒提取。
[0008] 所述工艺步骤(2)中，所述大孔树脂可选用非极性或弱极性大孔树脂。洗脱时先用 水洗或0-20%乙醇洗脱除去杂质，再用40-95%乙醇洗脱，其中优选采用50-80%乙醇进行 洗脱。所述复方鹅绒藤提取物中，含有小麦黄素-7-0-葡萄糖醛酸苷，其含量不低于20mg/g; 同时含有芹菜素，其含量不低于2. Omg/g。
[0009] 本发明在前期鹅绒藤提取物研究基础上，继续深入研究了白花菜籽中的主要成 分，并首次建立了复方鹅绒藤提取物的制备工艺和质量控制方法。所述研究结果具有独创 性，并可应用于白花菜籽药材和复方鹅绒藤提取物的生产和相关产品的质量控制。以下述 具体实施例进行说明。
【附图说明】
[0010] 附图1-4依次为实施例3中混合对照品溶液5(附图1)、鹅绒藤药材(附图2)、白花菜 籽药材(附图3)、复方鹅绒藤提取物（附图4)的液相色谱图（紫外检测波长330nm)。图中，色 谱峰1、2依次为小麦黄素-7-0-葡萄糖醛酸苷、芹菜素。
【具体实施方式】
[0011] 本发明所述的复方鹅绒藤提取物是按以下实施例所表示的方法制造，所涉及到的 方法是本领域的技术人员能够掌握和运用的技术手段。但以下实施例不得理解为任何意义 上的对本领域发明权利要求的限制。
[0012] 实施例1:白花菜籽化学成分的提取分离
[0013] 白花菜籽中主要含有黄酮、生物碱等成分，具有抗炎镇痛、抗菌等作用，但未见相 关主要化学成分和含量测定报道。本发明首先对白花菜籽中的主要成分进行液相分析和分 离纯化。
[0014] 白花菜籽(批号BZ140301，购自湖北武汉市）药材800g，用5倍量70%乙醇溶液回流 提取2次，每次2h，合并两次提取液，过滤，滤液减压浓缩至约2L，用2L石油醚萃取两次，取下 层水溶液，上预处理好的AB-8大孔树脂柱，先用水洗4L，后依次用30 %乙醇、75 %乙醇、95 % 乙醇各3L洗脱;收集75 %乙醇洗脱部位，浓缩，上反相ODS柱，用40 % -70 %甲醇梯度洗脱，通 过液相检测后合并化合物A流分，浓缩，干燥，得到化合物A(66mg)。化合物A经匪R鉴定并与 相关化合物文献数据对照，确证为芹菜素。
[0015] 实施例2:复方鹅绒藤提取物的制备
[0016] 复方鹅绒藤提取物的制备:分别称取鹅绒藤茎叶(批号ER130901，采自新疆维吾尔 自治区石河子市郊）5kg、白花菜籽药材10kg，混合，用75%乙醇100L加热回流提取两次，提 取液合并，减压浓缩至约50L，静置过夜，过滤，滤液上样于AB-8大孔树脂柱，依次用水100L、 70 %乙醇50L洗脱，收集70 %乙醇洗脱液，减压浓缩，60度真空干燥，即得复方鹅绒藤提取 物。
[0017] 实施例3:复方鹅绒藤提取物的含量测定
[0018] 药材供试品溶液:参照复方鹅绒藤提取物相应工艺进行制备。分别精密称定鹅绒 藤药材9.94g、白花菜籽药材1148g，各用75%乙醇100mL加热回流提取两次，提取液合并，减 压浓缩至约40ml，上样于AB-8大孔树脂柱，依次用水200ml、70%乙醇100mL洗脱，收集70% 乙醇洗脱液、减压浓缩至约25ml，转移至50ml容量瓶中，用甲醇定容，得储备液;分别精密量 取该储备液2ml至25ml容量瓶中，用甲醇定容，即得到相应鹅绒藤、白花菜籽供试品溶液。 [0019] 对照品溶液:分别精密称取对照品小麦黄素-7-〇-i3_D-葡萄糖醛酸苷10.0 Img、芹 菜素9.98mg于IOml容量瓶中，用甲醇定容制成相应对照品储备液A、B。分别依次精密量取对 照品储备液AO·2、0·4、0·8、1·2、1·6、2·Oml，对照品储备液BO.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.01111于 50ml容量瓶中，甲醇定容配制成系列小麦黄素-7-〇-i3-D-葡萄糖醛酸苷和芹菜素混合对照 品溶液1-6。
[0020]色谱条件:Agilentl260高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；色谱柱为Cosmosi I 5&8-厶1?-11(4.6\250111111，54111);流动相为0.1%乙酸溶液以)-乙腈(8)，梯度洗脱(0~151^11， 18%-25%B ;15~16min，25%-45%B;16~25min，45%;B-60%B ;25~30min，60%-80%B); 紫外检测波长330nm;流速1.0 ml/min，柱温30°C ;进样量20μ1。在此条件下，小麦黄素-7-0-葡萄糖醛酸苷和芹菜素的线性方程分别为7=17.72#9.062(1?2 = 0.9996)、7 = 29.37^ 23 · 52，（R2 = O · 9990)，线性范围依次为4 ·004-40 ·04、1 · 996-19 · 96yg。
[0021]样品测定:取实施例2中复方鹅绒藤提取物和上述相应鹅绒藤、白花菜籽供试品溶 液，经HPLC分析，测定结果见表1。液相色谱图见附图1-4。
[0022]表1样品测定结果(n = 3)
[0024]根据测定结果，暂定复方鹅绒藤提取物中小麦黄素 -7-0-葡萄糖醛酸苷和芹菜素 的含量依次不得低于20mg/g、2. Omg/g。
【主权项】
1. 一种复方鹅绒藤提取物，特征在于所述复方鹅绒藤提取物由以下步骤制备获得： (1) 按复方鹅绒藤配方选取相应质量的鹅绒藤和白花菜籽药材，采用水或乙醇-水混合 溶媒进行提取，浓缩为浓缩液，加适量水稀释，过滤，得复方鹅绒藤提取液； (2) 由（1)所得复方鹅绒藤提取液，采用预处理好的大孔树脂进行吸附，先用水或0-20 %乙醇洗脱，再用40-95 %乙醇洗脱，收集40-95 %乙醇洗脱液，合并后经浓缩，干燥，即 得;所述复方鹅绒藤提取物中含有小麦黄素-7-0-葡萄糖醛酸苷和芹菜素。2. 根据权利要求1的复方鹅绒藤提取物，特征在于所述步骤（1)中鹅绒藤和白花菜籽药 材的质量比例范围为10:3~10:30。3. 根据权利要求2的复方鹅绒藤提取物，特征在于所述复方鹅绒藤提取物中含有小麦 黄素-7-0-葡萄糖醛酸苷，其含量不低于20mg/g;同时含有芹菜素，其含量不低于2. Omg/g。
【文档编号】A61K36/27GK106074648SQ201610444240
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月20日
【发明人】刘江云, 王增尚, 王川, 陈虹
【申请人】苏州大学