一种负载黄连素磷脂复合纳米微粒的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于药物纳米技术领域，具体涉及一种负载黄连素磷脂复合纳米微粒的制备方法。
【背景技术】
[0002]小檗碱又名黄连素，是广泛存在于毛茛科等植物中的一种异喹啉生物碱。其在自然界中多以本身季铵盐的形式存在。作为一种传统中药有效成分，临床上一直作为清热解毒以及抗感染药物用于胃肠道感染的治疗。近些年来，随着对黄连素深入研宄，黄连素的其他临床功效被广泛报道，现有的研宄已经证实其在神经官能症，心血管疾病以及糖尿病有很好的临床治疗效果。除此之外，黄连素与其他商品化的药物联用进行治疗心律失常、糖尿病、胃肠炎、高血脂等疾病有很好的协同作用。在增加药效的同时还能明显的降低毒副作用，减少药物的不适反应。
[0003]然而，黄连素水中溶解度低脂溶性差，以至于在胃肠道中很难被充分吸收，在人体中商品化的口服黄连素片剂的生物利用度很低，这大大限制了其在临床上的广泛应用。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种负载黄连素磷脂复合纳米微粒的制备方法。
[0005]本发明的具体技术方案如下:
[0006]一种负载黄连素磷脂复合纳米微粒的制备方法，包括如下步骤:
[0007](I)将大豆卵磷脂溶解于二氯甲烷中，制得浓度为I?12mg/mL的大豆卵磷脂溶液；
[0008](2)将黄连素溶解于热乙醇中，制得浓度为I?8mg/mL的黄连素乙醇溶液；
[0009](3)将上述黄连素乙醇溶液加入到上述大豆卵磷脂溶液中，进行旋转蒸发得到磷脂单层膜，其中黄连素与大豆卵磷脂的质量比为1:2?8 ;
[0010](4)将上述磷脂单层膜用非质子性反应试剂复溶，再加入超纯水进行二次旋蒸，得到纳米微粒悬浮液，非质子性反应试剂与超纯水的体积比为I?30:1?30 ;
[0011 ] (5)将喷雾干燥保护剂加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为I?10% ;
[0012](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器(为CN 202823728U所公开)雾化，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于O?4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，其中单线微射流雾化器的参数为:进样流量2.5?6.5g/mL，共振频率16?18kHz，喷嘴大小为80?100 μ m。
[0013]在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(I)为:将大豆卵磷脂溶解于二氯甲烷中，制得浓度为I?10mg/mL的大豆卵磷脂溶液。
[0014]在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(2)为:将黄连素溶解于热乙醇中，制得浓度为I?6mg/mL的黄连素乙醇溶液。
[0015]在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(3)为:将上述黄连素乙醇溶液趁热迅速加入到上述大豆卵磷脂溶液中，进行旋转蒸发得到磷脂单层膜，其中黄连素与大豆卵磷脂的质量比为1:2?6。
[0016]在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(4)为:将上述磷脂单层膜用非质子性反应试剂复溶，再加入超纯水进行二次旋蒸，得到纳米微粒悬浮液，非质子性反应试剂与超纯水的体积比为15?30:10?25。
[0017]在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(5)为:将喷雾干燥保护剂加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为1.5?6%。
[0018]在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤￠)中所述喷雾干燥塔的喷嘴距离塔底的高度为3?4m。
[0019]在本发明的一个优选实施方案中，所述喷雾干燥保护剂为甘露糖。
[0020]在本发明的一个优选实施方案中，所述非质子性反应试剂为乙醇、甲醇、乙腈、甲醇-二氯甲烷混合有机溶液、乙醇-丙酮混合有机溶液、乙醇乙腈混合有机溶液、甲醇-丙酮混合有机溶剂。
[0021]本发明的有益效果是:
[0022]1、本发明制备的纳米微粒所携带得黄连素的复合分子在水中分散时，复合分子有序排列成外观类似于脂质体的多层囊，该纳米微粒能显著的增加药物脂溶性，明显的提高口服药物的生物利用度。
[0023]2、本发明将原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化，进入喷雾干燥塔中干燥，得所述纳米微粒，包封率在85 %以上，粒径均一，复溶于水后粒径变化不大，黄连素体外释放未受影响，长期储存稳定性好。
【附图说明】
[0024]图1为本发明实施例1所制得的负载黄连素磷脂复合纳米微粒的透射显微镜表征图。
[0025]图2为本发明实施例1所制得的负载黄连素磷脂复合纳米微粒的粒径表征图。
[0026]图3为本发明实施例6制得的的负载黄连素磷脂复合纳米微粒的扫描显微镜表征图。
[0027]图4为本发明实施例6制得的的负载黄连素磷脂复合纳米微粒的复溶后的体外释放和新制的体外释放对比图。
[0028]图5为本发明实施例6所制得的负载黄连素磷脂复合纳米微粒复溶于水后得到的纳米粒透射电镜图。
【具体实施方式】
[0029]以下通过【具体实施方式】结合附图对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
[0030]下述实施例制备的负载黄连素磷脂复合纳米微粒的包封率在85%以上，粒径均一，复溶于水后粒径变化不大，黄连素体外释放未受影响，长期储存稳定性好。
[0031]实施例1
[0032](I)将大豆卵磷脂溶解于二氯甲烷中，制得浓度为I?10mg/mL的大豆卵磷脂溶液；
[0033](2)将黄连素溶解于热乙醇中，制得浓度为I?6mg/mL的黄连素乙醇溶液；
[0034](3)将上述黄连素乙醇溶液趁热迅速加入到上述大豆卵磷脂溶液中，进行旋转蒸发得到磷脂单层膜，其中黄连素与大豆卵磷脂的质量比为1:2?6 ;
[0035](4)将上述磷脂单层膜用30mL乙醇复溶，再加入15mL超纯水进行二次旋蒸15min，得到纳米微粒悬浮液；
[0036](5)将甘露糖加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为2.5% ;
[0037](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化(为CN202823728U所公开，进样流量:5.5g/min、共振频率:16kHz、喷嘴大小:100 μ m)，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，将制得的纳米微粒复溶于水后，所得到的溶液用动态光散射测定后与干燥后的粒径比值为?1.6，透射显微镜表征图和粒径表征图分别如图1和图2所示。
[0038]实施例2
[0039](I)?(3)同实施例1 ;
[0040](4)将上述磷脂单层膜用20mL乙醇复溶，再加入1mL超纯水进行二次旋蒸15min，得到纳米微粒悬浮液；
[0041 ] (5)将甘露糖加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为3.5% ;
[0042](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化(进样流量:6g/min、共振频率:16kHz、喷嘴大小:100 μ m)，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，将制得的纳米微粒复溶于水后，所得到的溶液用动态光散射测定后与干燥后的粒径比值为?1.5。
[0043]实施例3
[0044](I)?(3)同实施例1 ;
[0045](4)将上述磷脂单层膜用25mL乙醇复溶，再加入1mL超纯水进行二次旋蒸15min，得到纳米微粒悬浮液；
[0046](5)将甘露糖加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为4% ；
[0047](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化(进样流量:5g/min、共振频率:16kHz、喷嘴大小:100 μ m)，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，将制得的纳米微粒复溶于水后，所得到的溶液用动态光散射测定后与干燥后的粒径比值为?1.3。
[0048]实施例4
[0049](I)?(3)同实施例1 ;
[0050](4)将上述磷脂单层膜用20mL乙醇-丙酮混合有机溶剂复溶，再加入12mL超纯水进行二次旋蒸15min，得到纳米微粒悬浮液；
[0051](5)将甘露糖加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为5% ；
[0052](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化(进样流量:2.5g/min、共振频率:16kHz、喷嘴大小:100 μ m)，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，将制得的纳米微粒复溶于水后，所得到的溶液用动态光散射测定后与干燥后的粒径比值为?1.1o
[0053]实施例5
[0054](I)?(3)同实施例1 ;
[0055](4)将上述磷脂单层膜用15mL乙醇-乙腈混合有机溶剂复溶，再加入15mL超纯水进行二次旋蒸15min，得到纳米微粒悬浮液；
[0056](5)将甘露糖加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为1.5% ;
[0057](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射