流雾化器雾化(进样流量:3g/min、共振频率:16kHz、喷嘴大小:100 μ m)，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，将制得的纳米微粒复溶于水后，所得到的溶液用动态光散射测定后与干燥后的粒径比值为?1.8。
[0058]实施例6
[0059](I)?(3)同实施例1 ;
[0060](4)将上述磷脂单层膜用30mL乙醇-甲醇混合有机溶剂复溶，再加入12mL超纯水进行二次旋蒸15min，得到纳米微粒悬浮液；
[0061](5)将甘露糖加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为6 % ；
[0062](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化(进样流量:4g/min、共振频率:16kHz、喷嘴大小:100 μ m)，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，将制得的纳米微粒复溶于水后，所得到的溶液用动态光散射测定后与干燥后的粒径比值为?1.1，扫描显微镜表征图如图3所示，该复合纳米微粒的复溶后的体外释放和新制的体外释放对比结果如图4所示，该复合纳米微粒复溶于水后得到的纳米粒透射电镜图如图5所示。
[0063]实施例7
[0064](I)?(3)同实施例1 ；
[0065](4)将上述磷脂单层膜用30mL乙腈复溶，再加入25mL超纯水进行二次旋蒸15min，得到纳米微粒悬浮液；
[0066](5)将甘露糖加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为4.5% ;
[0067](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化(进样流量:3g/min、共振频率:16kHz、喷嘴大小:100 μ m)，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，将制得的纳米微粒复溶于水后，所得到的溶液用动态光散射测定后与干燥后的粒径比值为?1.3。
[0068]实施例8
[0069](I)?(3)同实施例1 ;
[0070](4)将上述磷脂单层膜用30mL丙酮复溶，再加入15mL超纯水进行二次旋蒸15min，得到纳米微粒悬浮液；
[0071](5)将甘露糖加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为2.5% ;
[0072](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化(进样流量:3g/min、共振频率:16kHz、喷嘴大小:100 μ m)，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，将制得的纳米微粒复溶于水后，所得到的溶液用动态光散射测定后与干燥后的粒径比值为?1.5。
[0073]实施例9
[0074](I)?(3)同实施例1 ;
[0075](4)将上述磷脂单层膜用30mL甲醇-丙酮混合有机溶剂复溶，再加入15mL超纯水进行二次旋蒸15min，得到纳米微粒悬浮液；
[0076](5)将甘露糖加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为2.5% ;
[0077](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化(进样流量:3g/min、共振频率:16kHz、喷嘴大小:100 μ m)，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，将制得的纳米微粒复溶于水后，所得到的溶液用动态光散射测定后与干燥后的粒径比值为?1.4。
[0078]本领域普通技术人员可知，本发明的技术参数在下述范围内变化时，可预计得到与上述实施例相同或相近的技术效果:
[0079](I)将大豆卵磷脂溶解于二氯甲烷中，制得浓度为I?12mg/mL的大豆卵磷脂溶液(优选 I ?10mg/mL)；
[0080](2)将黄连素溶解于热乙醇中，制得浓度为I?8mg/mL的黄连素乙醇溶液(优选I ?8mg/mL)；
[0081](3)将上述黄连素乙醇溶液趁热迅速加入到上述大豆卵磷脂溶液中，进行旋转蒸发得到磷脂单层膜，其中黄连素与大豆卵磷脂的质量比为1:2?8 (优选1:2?6);
[0082](4)将上述磷脂单层膜用非质子性反应试剂复溶，再加入超纯水进行二次旋蒸，得到纳米微粒悬浮液，非质子性反应试剂与超纯水的体积比为I?30:1?30 (优选
[0083]15 ?30:10 ?25);
[0084](5)将喷雾干燥保护剂加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为I?10% (优选1.5?6%。);
[0085](6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于O?4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，喷雾干燥塔的喷嘴距离塔底的高度为3?4m，单线微射流雾化器的参数为:进样流量2.5?6.5g/mL，共振频率16?18kHz，喷嘴大小为80?100 μ m。
[0086]在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(5)中所述喷雾干燥塔的喷嘴距离塔底的高度为3?4m。
[0087]所述非质子性反应试剂为乙醇、甲醇、乙腈、甲醇-二氯甲烷混合有机溶液、乙醇-丙酮混合有机溶液、乙醇乙腈混合有机溶液、甲醇-丙酮混合有机溶剂。
[0088]以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。
【主权项】
1.一种负载黄连素磷脂复合纳米微粒的制备方法，其特征在于:包括如下步骤: (1)将大豆卵磷脂溶解于二氯甲烷中，制得浓度为I?12mg/mL的大豆卵磷脂溶液； (2)将黄连素溶解于热乙醇中，制得浓度为I?8mg/mL的黄连素乙醇溶液； (3)将上述黄连素乙醇溶液加入到上述大豆卵磷脂溶液中，进行旋转蒸发得到磷脂单层膜，其中黄连素与大豆卵磷脂的质量比为1:2?8 ; (4)将上述磷脂单层膜用非质子性反应试剂复溶，再加入超纯水进行二次旋蒸，得到纳米微粒悬浮液，非质子性反应试剂与超纯水的体积比为I?30:1?30 ; (5)将喷雾干燥保护剂加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为I?10% ; (6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化，进入喷雾干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于O?4°C储存，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒，其粒径为10nm?200nm，其中单线微射流雾化器的参数为:进样流量2.5?6.5g/mL，共振频率16?18kHz，喷嘴大小为80?100 μ m。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述步骤(I)为:将大豆卵磷脂溶解于二氯甲烷中，制得浓度为I?10mg/mL的大豆卵磷脂溶液。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述步骤⑵为:将黄连素溶解于热乙醇中，制得浓度为I?6mg/mL的黄连素乙醇溶液。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述步骤(3)为:将上述黄连素乙醇溶液趁热迅速加入到上述大豆卵磷脂溶液中，进行旋转蒸发得到磷脂单层膜，其中黄连素与大豆卵磷脂的质量比为1:2?6。5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述步骤(4)为:将上述磷脂单层膜用非质子性反应试剂复溶，再加入超纯水进行二次旋蒸，得到纳米微粒悬浮液，非质子性反应试剂与超纯水的体积比为15?30:10?25。6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述步骤(5)为:将喷雾干燥保护剂加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液，喷雾干燥保护剂在纳米微粒悬浮液中的浓度为1.5 ?6% ο7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述步骤￠)中所述喷雾干燥塔的喷嘴距离塔底的高度为3?4m。8.如权利要求1至7中任一权利要求所述的制备方法，其特征在于:所述喷雾干燥保护剂为甘露糖。9.如权利要求1至7中任一权利要求所述的制备方法，其特征在于:所述非质子性反应试剂为乙醇、甲醇、乙腈、甲醇-二氯甲烷混合有机溶液、乙醇-丙酮混合有机溶液、乙醇乙腈混合有机溶液、甲醇-丙酮混合有机溶剂。
【专利摘要】本发明公开了一种负载黄连素磷脂复合纳米微粒的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)制得大豆卵磷脂溶液；(2)制得黄连素乙醇溶液；(3)将上述黄连素乙醇溶液加入到上述大豆卵磷脂溶液中，进行旋转蒸发得到磷脂单层膜；(4)将上述磷脂单层膜用非质子性反应试剂复溶，再加入超纯水进行二次旋蒸，得到纳米微粒悬浮液；(5)将喷雾干燥保护剂加入到上述纳米微粒悬浮液中，得原始药液；(6)将上述原始药液在一定压力下通过单线微射流雾化器雾化，进入喷雾干燥塔中干燥，即得所述负载黄连素磷脂复合纳米微粒。本发明制得的产品的包封率在85％以上，粒径均一，复溶于水后粒径变化不大，黄连素体外释放未受影响，生物利用度高，长期储存稳定性好。
【IPC分类】A61P3/10, A61K31/4375, A61P31/04, A61P1/00, A61P9/00, A61P9/06, A61P3/06, A61K9/51, A61P25/00
【公开号】CN104940167
【申请号】CN201510306904
【发明人】陈晓东, 于飞, 车黎明
【申请人】厦门大学
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年6月5日