聚丙烯网片/静电纺丝纳米纤维膜及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医疗器械领域，涉及聚丙烯网片/静电纺丝纳米纤维膜及其制备方法 和应用。
【背景技术】
[0002] 二次世界大战至阿富汗与伊拉克局部战争中的战伤救治经验与教训表明，腹部战 伤发生率始终无明显下降，而且始终是第三位致死性战伤。爆炸伤所致的腹部损伤可导致 不同程度的腹壁毁损，腹腔脏器暴露、肠管脱出。失血性休克与创伤性休克复苏后合并的腹 腔高压可导致腹部切口裂开，导致腹腔被动开放。为治疗休克合并的腹腔间隙综合征（ACS) 常需采用主动的腹腔开放。无论是腹腔主动开放还是被动开放，均会成腹壁的相对缺损。 [0003]目前应用于腹部战创伤合并的腹壁毁损与缺损的材料均为临时关腹材料。这些临 时关闭腹材料包括早期的碗、盆，后期的涤纶布、塑料袋。近来则采用聚丙烯网片、猪浆肌层 网片和脱细胞基质的人皮或猪皮，这些人工合成全成材料不可降解，关腹后均会不同程度 的磨损腹腔脏器。迄今为止，在腹腔开放领域，尚无一种修补材料既能保护裸露的肠管，又 能促进机体组织增生，同能又能提供足够的修补作用。理想的创面保护材料应该能够模拟 机体的有机组织，具有促进患者自身机体组织增生、良好的生物相容性、利于细胞长入，并 且提供足够的强度，甚至具有防粘连效果。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供聚丙烯网片/静电纺丝纳米纤维 膜。
[0005] 本发明的另一目的是提供该用于腹腔开放创面保护的聚丙烯网片/纳米纤维膜 的制备方法，将聚丙烯网片与静电纺丝相结合，并以水凝胶为粘合剂，纳米纤维膜中亦加入 含生长因子的微球，实现药物控释。
[0006] 本发明的又一目的是提供聚丙烯网片/静电纺丝纳米纤维膜的应用。
[0007] 本发明的上述目的可通过以下技术方案实现：
[0008] -种聚丙烯网片/静电纺丝纳米纤维膜的制备方法，包括以下步骤：
[0009] (1)制备壳聚糖-聚乙二醇水凝胶；
[0010] (2)制备包埋碱性成纤维因子bFGF的聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA微球；
[0011] (3)制备静电纺丝液；
[0012] (4)电纺丝法制备聚丙烯网片/静电纺丝纳米纤维膜。
[0013] 其中，所述的制备壳聚糖-聚乙二醇水凝胶方法优选如下步骤：
[0014] 1)聚乙二醇PEG于20 -28°C氮气环境下溶解在二氯甲烷中，溶液中PEG终浓度为 8 - 12% (g/100ml)；
[0015] 2)将4 -二甲氨基吡啶与三乙胺溶解在的二氯甲烷中得混合溶液A，使混合溶液A 中4 -二甲氨基吡啶和三乙胺浓度均为0. 35 - 0. 4mol/L，然后将混合溶液A加入到上一步 制备的含PEG的二氯甲烷溶液中搅拌10 - 15min得混合溶液B，所述的混合溶液A与含PEG的二氯甲烷溶液的体积比是1:3 - 8 ;
[0016] 3)将混合溶液B逐滴加入到含p-氨甲酸苯酯的二氯甲烷溶液中，在室温氮气环 境下反应20 -24h;其中，所述的含p-氨甲酸苯酯的二氯甲烷溶液中p-氨甲酸苯酯的浓度 为0. 1 - 0. 5mol/L，所述的含p-氨甲酸苯酯的二氯甲烷溶液与步骤2)中所述的含PEG的 二氯甲烷溶液的体积比是1:1 - 2 ;
[0017] 4)将上述溶液在冷乙醚中蒸干沉淀析出，将沉淀过滤然后在真空中干燥，最终获 得PNC-PEG-PNC;
[0018] 5)将PNC-PEG-PNC在室温氮气环境下溶解在二甲亚砜中使其终浓度为5 - 10% (g/100ml)；
[0019] 6)取酪胺溶解在二甲亚砜中，得到浓度为3 - 5mol/L的酪胺二甲亚砜溶液，然后 将酪胺二甲亚砜溶液逐滴加入到上一步制备的PNC-PEG-PNC溶液中，在氮气环境下反应 5 - 7h，形成PNC-PEG-TA溶液；其中，酪胺二甲亚砜溶液与PNC-PEG-PNC溶液的体积比 为 1:1 - 2 ;
[0020] 7)壳聚糖用pH5的盐酸溶液然后加入到二甲亚砜中形成壳聚糖浓度为0. 5 -0. 7% (g/100ml)的溶液，然后将上述PNC-PEG-TA溶液加入到该溶液中在室温氮气环境下搅拌 24h混合反应；其中，壳聚糖溶液与上一步酪胺二甲亚砜溶液的体积比为10 - 15:1 ;
[0021] 8)将上述溶液用氧化铝垫过滤，去除PNC盐，然后用0. 01M，pH7. 4的PBS溶液透 析三天再用蒸馏水透析2天，来截留分子量为12 - 14kDa的材料；
[0022] 9)将透析液冻干，获得Chitosan-PEG-TA冻干粉末，其中Chitosan-PEG-TA浓 度为 7 - 10wt% ;
[0023] 10)将Chitosan-PEG-TA冻干粉末溶解在含HRP0? 002 - 0? 063mg/ml和 H2020. 04 - 0? 08wt. %的0? 01M，pH7. 4的PBS溶液中得到壳聚糖-聚乙二醇水凝胶。
[0024] 所述的制备壳聚糖-聚乙二醇水凝胶方法进一步优选如下步骤：
[0025] 1)PEG于20 - 28°C氮气环境下溶解在二氯甲烷中，溶液中PEG终浓度为10% (g/100ml)；
[0026] 2)将4 -二甲氨基吡啶与三乙胺溶解在的二氯甲烷中得混合溶液A，使混合溶液A 中4 -二甲氨基吡啶和三乙胺浓度均为0. 375mol/L，然后将混合溶液A加入到上一步制备 的含PEG的二氯甲烷溶液中搅拌10 - 15min得混合溶液B，所述的混合溶液A与含PEG的二 氯甲烷溶液的体积比是1:5;
[0027] 3)将混合溶液B逐滴加入到含p-氨甲酸苯酯的二氯甲烷溶液中，在室温氮气环 境下反应24h;其中，所述的含p-氨甲酸苯酯的二氯甲烷溶液中p-氨甲酸苯酯的浓度为 0. 125mol/L，所述的含p-氨甲酸苯酯的二氯甲烷溶液与步骤2)中所述的含PEG的二氯甲 烷溶液的体积比是1:2;
[0028] 4)将上述溶液在冷乙醚中蒸干沉淀析出，将沉淀过滤然后在真空中干燥，最终获 得PNC-PEG-PNC;
[0029] 5)将PNC-PEG-PNC在室温氮气环境下溶解在二甲亚砜中使其终浓度为8% (g/100ml)；
[0030] 6)取酪胺溶解在二甲亚砜中，得到浓度为4mol/L的酪胺二甲亚砜溶液，然后将酪 胺二甲亚砜溶液逐滴加入到上一步制备的PNC-PEG-PNC溶液中，在氮气环境下反应6h，形 成PNC-PEG-TA溶液；其中，酪胺二甲亚砜溶液与PNC-PEG-PNC溶液的体积比为1:2 ;
[0031] 7)壳聚糖（低分子量，75 - 85%脱乙酰化）用pH5的盐酸溶液然后加入到二甲亚 砜中形成壳聚糖浓度为〇. 667% (g/100ml)的溶液，然后将上述PNC-PEG-TA溶液加入到 该溶液中在室温氮气环境下搅拌24h混合反应；其中，壳聚糖溶液与上一步酪胺二甲亚砜 溶液的体积比为12:1 ;
[0032] 8)将上述溶液用氧化铝垫过滤，去除PNC盐，然后用0? 01M，pH7. 4的PBS溶液透 析三天再用蒸馏水透析2天，来截留分子量为12 - 14kDa的材料；
[0033] 9)将透析液冻干，获得Chitosan-PEG-TA冻干粉末，其中Chitosan-PEG-TA浓 度为10wt% ;
[0034] 10)将Chitosan-PEG-TA冻干粉末溶解在含HRP0? 002 - 0? 063mg/ml和 H2020. 06wt. %的0? 01M，pH7. 4的PBS溶液中得到壳聚糖-聚乙二醇水凝胶。
[0035] 所述的包埋碱性成纤维因子bFGF的聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA微球制备方法 优选如下步骤：将水溶性的碱性成纤维因子bFGF按90 - 120ng/ml溶于生理盐水中作为内 水相W1，聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA溶于二氯甲烷中作为油相0,油相中PLGA浓度为 8