专利名称：1－芳甲基－3－芳基－1h－吡唑－5－碳酰肼衍生物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及吡唑碳酰肼衍生物及其制备方法与应用，尤其涉及1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物及其合成、分离、纯化方法与应用。
背景技术：
吡唑衍生物和碳酰肼衍生物是两类非常重要的化合物，在新药开发中受到广泛关注。
吡唑类化合物具有消炎、止痛、退热、抑菌、杀菌、抗高血糖、抗癌、抗凝血剂等药理活性，例如在专利JP5017470、US5134142、WO96/03385中描述的吡唑衍生物具有消炎、抗风湿、抗细菌、抗病毒的药理活性；专利US4000281所涉及的4，5-芳基/杂环芳基取代的吡唑具有抗RNA和DNA病毒例如黏病毒、腺病毒、鼻病毒以及各种疱疹病毒的活性；专利号为US3984431的专利所涉及的吡唑-5-醋酸化合物，尤其是1-叔丁基-3，4-二苯基-1H吡唑-5-醋酸具有消炎药理活性。另外，吡唑衍生物还可以作为细胞及酶的抑制剂，在专利JP5345772、WO97/01551、US 5559137、EP115640中均有涉及。而在专利WO02076949中也涉及到对治疗精神病和神经错乱有很好药理活性的(4S)-4，5-二氢-1H-吡唑衍生物。在其他方面，专利WO92/19615、EP515041所涉及的吡唑化合物及嘧啶取代的新型吡唑衍生物在农业上具有杀真菌的药理活性，而专利JP4145081中吡唑羧酸衍生物可以作为除草剂来应用。
碳酰肼是一种重要的化工中间体，可用于医药、除草剂、植物生长调节剂、染料等行业，如专利US 4269717、US 4259717、EP0103400、US5078966中所涉及的碳酰肼化合物。而用碳酰肼作配体，可制备多种化合物，广泛应用于医药、石油、国防等工业中。在生物医药方面，碳酰肼衍生物的药理活性报道较少。以前的研究表明碳酰肼衍生物可抑制蛋白酶，用于治疗骨质疏松，牙龈疾病包括牙龈炎、牙周炎，关节炎恶性肿瘤和骨代谢疾病等，如专利号为US6284777，US2002077455的专利所涉及的碳酰肼衍生物；另外碳酰肼衍生物还具有抗肿瘤活性，如专利号为US4166810，DK14083的专利所涉及的碳酰肼衍生物。
在结构修饰方面通过药效基团的合理搭配往往可以得到更好的生物活性，文献检索表明，目前吡唑碳酰肼衍生物鲜有报道，尤其未见有关于1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物和应用或与其相关内容的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种吡唑碳酰肼衍生物1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物及其合成、分离、纯化方法与其在诱导人肺癌A549细胞凋亡中的应用。
本发明所述1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑5-碳酰肼衍生物用下述通式(I)表示 其中R1代表氢、C1～4烷基、烷氧基、卤素、硝基之一；R2代表氢、C1～4烷基、烷氧基、卤素、硝基之一；X代表碳、氮之一。
上述的化合物中R1优选氢或者C1～4烷基、烷氧基、卤素之一；R2优选氢或者C1～4烷基、烷氧基、卤素、硝基之一；X代表碳或者氮。
具体地说，上文所述的化合物中R1代表氢，2-甲基，2-乙基，2-丙基，2-异丙基，2-丁基，2-异丁基，2-叔丁基，2-仲丁基，4-甲基，4-乙基，4-丙基，4-异丙基，4-丁基，4-异丁基，4-叔丁基，4-仲丁基，2-甲氧基，2-乙氧基，4-甲氧基，4-乙氧基，2-氯，2-溴，4-氯，4-溴之一；R2代表氢，2-甲基，2-乙基，2-丙基，2-异丙基，2-丁基，2-异丁基，2-叔丁基，2-仲丁基，4-甲基，4-乙基，4-丙基，4-异丙基，4-丁基，4-异丁基，4-叔丁基，4-仲丁基，2-甲氧基，2-乙氧基，4-甲氧基，4-乙氧基，2-氯，2-溴，4-氯，4-溴，2-硝基，4-硝基之一；X代表碳或者氮。
其中R1优选氢、烷氧基、Cl、Br之一；R2优选氢、叔丁基、Cl、Br、NO2之一；X代表碳或者氮。
其中R1进一步优选H、OCH3、Cl之一；R2进一步优选H、C(CH3)3、Cl、NO2之一；
X代表碳或者氮。
其中R1最优选H、OCH3、Cl之一；R2最优选H、C(CH3)3、Cl之一；X代表碳或者氮。
本发明所述的通式(I)化合物1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物制备方法，包括下述步骤将芳甲基氯与3-芳基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯以摩尔数比为1～3∶1的比例加入到极性溶剂中，以等摩尔比为吡唑化合物的量加入缚酸剂，在回流温度下，反应2～10小时；减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯溶解产物，过滤，滤液浓缩；浓缩物用硅胶柱层析分离，所用展开剂为石油醚/乙酸乙酯，其体积比是2∶1，得到1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯的衍生物；将得到的1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯衍生物与80％的水合肼以其摩尔数比为1∶5～25的比例加入到极性溶剂中，回流反应1～5小时；静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用乙醇重结晶制得高纯度1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物。
在上述化合物的制备方法中所述的芳甲基氯与3-芳基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯摩尔数之比优选为1∶1；所述的1-芳甲基-3-芳基吡唑-5-羧酸乙酯衍生物与水合肼的摩尔数之比优选为1∶20。
在上述化合物的制备方法中所述的极性溶剂是甲醇，乙腈，乙醇之一。
在上述化合物的制备方法中所述的缚酸剂是碳酸锶，碳酸钠，碳酸钾之一。
其中所述的缚酸剂是碳酸钾。
上述通式(I)所示化合物的制备反应式如下 本发明所述的化合物1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物在制备促进人肺癌A549细胞凋亡药物中的应用。
经实验证实本发明所述1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物在诱导人肺癌A549细胞凋亡中具有重要作用，具备很大的应用开发前景。
具体实施方案实施例11-苄基-3-苯基-1H-吡唑-5-碳酰肼的制备1)在100毫升的圆底烧瓶中加入0.690克碳酸钾(0.005摩尔)，1.080克3-苯基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(0.005摩尔)，0.633克苄基氯(0.005摩尔)以及乙腈(25毫升)，装置回流冷凝器，上部接干燥管。加热回流8小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯(30毫升)溶解产物，过滤，滤液浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(V/V＝1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离剩余物(100～200目硅胶)，得到1-苄基-3-苯基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯，产率为79％。
2)在0.336克(0.001摩尔)1-苄基-3-苯基1H-吡唑-5-羧酸乙酯的甲醇(5毫升)溶液中加入1.2毫升80％的水合肼，搅拌回流反应4小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用8毫升乙醇重结晶制得高纯度1-苄基-3-苯基-1H-吡唑-5-碳酰肼，产率为93％。
结构式如下 分子式C17H16N4O分子量292.34性状白色固体熔点132-133℃核磁共振数据如下1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ4.03(s，2H，NH2)，5.80(s，2H，CH2)，6.80(s，1H，4-H)，7.24-7.43(m，9H，ArH，NH)，7.79(d，J＝7.2Hz，2H，ArH)。
红外光谱数据如下IR(KBr)v3302-3031(NH)，1681(C＝0)cm-1。
质谱数据如下MS(EI)m/z 293.5(M+H)+。
实施例21-(4-叔丁基苄基)-3-苯基-1H-吡唑-5-碳酰肼的制备1)在100毫升的圆底烧瓶中加入0.690克碳酸钾(0.005摩尔)，1.080克3-苯基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(0.005摩尔)，0.913克对叔丁基苄基氯(0.005摩尔)以及乙腈(25毫升)，装置回流冷凝器，上部接干燥管。加热回流6小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯(30毫升)溶解产物，过滤，滤液浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(V/V＝1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离剩余物(100～200目硅胶)，得到1-(4-叔丁基苄基)-3-苯基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯，产率为80％。
2)在0.362克(0.001摩尔)1-(4-叔丁基苄基)-3-苯基1H-吡唑-5-羧酸乙酯的甲醇(5毫升)溶液中加入1.2毫升80％的水合肼，搅拌回流反应4小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用8毫升乙醇重结晶制得高纯度1-(4-叔丁基苄基)-3-苯基-1H-吡唑-5-碳酰肼，产率为76％。
结构式如下 分子式C21H24N4O分子量348.44性状白色固体熔点148-149℃核磁共振数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.27(s，9H，3CH3)，4.0l(s，2H，NH2)，5.77(s，2H，CH2)，6.79(s，1H，4-H)，7.24-7.43(m，8H，ArH，NH)，7.79(d，J＝7.8Hz，2H，ArH)。
红外光谱数据如下IR(KBr)v3329-2865(NH)，1663(C＝0)cm-1。
质谱数据如下MS(EI)m/z 349.4(M+H)+。
实施例31-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-苯基-1H-吡唑-5-碳酰肼的制备1)在100毫升的圆底烧瓶中加入0.690克碳酸钾(0.005摩尔)，1.080克3-苯基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(0.005摩尔)，0.810克2-氯-5-氯甲基吡啶(0.005摩尔)以及乙腈(25毫升)，装置回流冷凝器，上部接干燥管。加热回流4小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯(30毫升)溶解产物，过滤，滤液浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(V/V＝1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离剩余物(100～200目硅胶)，得到1-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-苯基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯，产率为87％。2)在0.341克(0.001摩尔)1-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-苯基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯的甲醇(5毫升)溶液中加入1.2毫升80％的水合肼，搅拌回流反应1小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用8毫升乙醇重结晶制得高纯度1-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-苯基-1H-吡唑-5-碳酰肼，产率为86％。
结构式如下
分子式C16H14ClN5O分子量327.77性状白色固体熔点152-154℃核磁共振数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.03(s，2H，NH2)，5.79(s，2H，CH2)，6.82(s，1H，4-H)，7.26(d，J＝8.1Hz，1H，PyH)，7.33-7.44(m，4H，ArH，NH)，7.68(dd，J＝2.1，8.1Hz，1H，PyH)，7.77(d，J＝7.2Hz，2H，ArH)，8.45(d，J＝2.1Hz，1H，PyH)。
红外光谱数据如下IR(KBr)v3423-2944(NH)，1676(C＝0)cm-1。
质谱数据如下MS(EI)m/z 328.5(M+H)+。
实施例41-苄基-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼的制备1)在100毫升的圆底烧瓶中加入0.690克碳酸钾(0.005摩尔)，1.253克3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(0.005摩尔)，0.633克苄基氯(0.005摩尔)以及乙腈(25毫升)，装置回流冷凝器，上部接干燥管。加热回流8小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯(30毫升)溶解产物，过滤，滤液浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(V/V＝1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离剩余物(100～200目硅胶)，得到1-苯甲基-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯，产率为83％。
2)在0.340克(0.001摩尔)1-苄基-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯的甲醇(5毫升)溶液中加入1.2毫升80％的水合肼，搅拌回流反应4小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用8毫升乙醇重结晶制得高纯度1-苄基-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼，产率为89％。
结构式如下 分子式C17H15ClN4O
分子量326.78性状白色固体熔点180-182℃核磁共振数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.98(s，2H，NH2)，5.79(s，2H，CH2)，6.77(s，1H，4-H)，7.28-7.29(m，6H，ArH，NH)，7.37(d，J＝8.7Hz，2H，ArH)，7.72(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)。
红外光谱数据如下IR(KBr)v3266-2958(NH)，1630(C＝0)cm-1。
质谱数据如下MS(EI)m/z 327.3(M+H)+。
实施例51-(4-叔丁基苄基)-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼的制备1)在100mL的圆底烧瓶中加入0.690克碳酸钾(0.005摩尔)，1.253克3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(0.005摩尔)，0.913克对叔丁基苄基氯(0.005摩尔)以及乙醇(25毫升)，装置回流冷凝器，上部接干燥管。加热回流5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯(30毫升)溶解产物，过滤，滤液浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(V/V＝1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离剩余物(100～200目硅胶)，得到1-(4-叔丁基苄基)-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯，产率为80％。
2)在0.396克(0.001摩尔)1-(4-叔丁基苄基)-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯的甲醇(5毫升)溶液中加入1.2毫升80％的水合肼，搅拌回流反应5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用8毫升乙醇重结晶制得高纯度1-(4-叔丁基苄基)-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼，产率为79％。
结构式如下 分子式C21H23ClN4O分子量382.89性状白色固体熔点122-124℃核磁共振数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.28(s，9H，3CH3)，4.02(s，2H，NH2)，5.75(s，2H，CH2)，6.76(s，1H，4-H)，7.24-7.31(m，3H，ArH，NH)，7.32(d，J＝8.4，2H，ArH)，7.37(d，J＝8.4，2H，ArH)，7.73(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)。
红外光谱数据如下IR(KBr)v3319-2860(NH)，1654(C＝0)cm-1。
质谱数据如下MS(EI)m/z 383.5(M+H)+(M+H)+。
实施例61-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼的制备1)在100毫升的圆底烧瓶中加入0.690克碳酸钾(0.005摩尔)，1.253克3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(0.005摩尔)，0.810克2-氯-5-氯甲基吡啶(0.005摩尔)以及乙腈(25毫升)，装置回流冷凝器，上部接干燥管。加热回流2小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯(30毫升)溶解产物，过滤，滤液浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(V/V＝1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离剩余物(100～200目硅胶)，得到1-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯，产率为90％。
2)在0.376克(0.001摩尔)1-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-苯基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯的乙醇(5毫升)溶液中加入1.2毫升80％的水合肼，搅拌回流反应1小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用8毫升乙醇重结晶制得高纯度1-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼，产率为84％。
结构式如下 分子式C16H13Cl2N5O分子量361.05性状白色固体熔点192-193℃核磁共振数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.11(s，2H，NH2)，5.78(s，2H，CH2)，6.78(s，1H，4-H)，7.26-7.30(m，2H，ArH，NH)，7.39(d，J＝8.7Hz，2H，ArH)，7.70-7.72(m，3H，ArH，PyH)，8.45(s，1H，PyH)。
红外光谱数据如下IR(KBr) v3299-2936(NH)，1675(C＝0)cm-1。
质谱数据如下
MS(EI)m/z 362.3(M+H)+。
实施例71-苄基-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼的制备1)在100毫升的圆底烧瓶中加入0.53克无水碳酸钠(0.005摩尔)，1.230克3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(0.005摩尔)，0.633克苄基氯(0.005摩尔)以及乙腈(25毫升)，装置回流冷凝器，上部接干燥管。加热回流10小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯(30毫升)溶解产物，过滤，滤液浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(V/V＝1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离剩余物(100～200目硅胶)，得到1-苯甲基-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯，产率为87％。2)在0.336克(0.001摩尔)1-苄基-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯的甲醇(5毫升)溶液中加入1.2毫升80％的水合肼，搅拌回流反应4小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用8毫升乙醇重结晶制得高纯度1-苄基-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼，产率为75％。
结构式如下 分子式C18H18N4O2分子量322.36性状白色固体熔点142-144℃核磁共振数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.84(s，3H，OCH3)，4.01(s，2H，NH2)，5.78(s，2H，CH2)，6.72(s，1H，4-H)，6.94(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，7.23-7.28(m，6H，ArH，NH)，7.72(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)。
红外光谱数据如下IR(KBr)v3306-2835(NH)，1673(C＝0)cm-1。
质谱数据如下MS(EI)m/z 323.4(M+H)+。
实施例81-(4-叔丁基苄基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼的制备1)在100毫升的圆底烧瓶中加入0.738克碳酸锶(0.005摩尔)，1.230克3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(0.005摩尔)，0.913克对叔丁基苄基氯(0.005摩尔)以及乙腈(25毫升)，装置回流冷凝器，上部接干燥管。加热回流5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯(30毫升)溶解产物，过滤，滤液浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(V/V＝1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离剩余物(100～200目硅胶)，得到1-(4-叔丁基苄基)-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯，产率为80％。
2)在0.392克(0.001摩尔)1-(4-叔丁基苄基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5羧酸乙酯的甲醇(5毫升)溶液中加入1.2毫升80％的水合肼，搅拌回流反应5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用8毫升乙醇重结晶制得高纯度1-(4-叔丁基苄基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼，产率为72％。
结构式如下 分子式C22H26N4O2分子量378.47性状白色固体熔点142-144℃核磁共振数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.27(s，9H，3CH3)，3.84(s，3H，OCH3)，4.01(s，2H，NH2)，5.75(s，2H，CH2)，6.71(s，1H，4-H)，6.93(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，7.26-7.32(m，5H，ArH，NH)，7.72(d，J＝8.1Hz，2H，ArH)。
红外光谱数据如下IR(KBr)v3325-2867(NH)，1656(C＝0)cm-1。
质谱数据如下MS(EI)m/z 379.6(M+H)+(M+H)+。
实施例91-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-碳酰肼的制备1)在100毫升的圆底烧瓶中加入0.690克碳酸钾(0.005摩尔)，1.230克3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(0.005摩尔)，0.810克2-氯-5-氯甲基吡啶(0.005摩尔)以及乙腈(25毫升)，装置回流冷凝器，上部接干燥管。加热回流4小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯(30毫升)溶解产物，过滤，滤液浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(V/V＝1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离剩余物(100～200目硅胶)，得到1-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯，产率为92％。
2)在0.371克(0.001摩尔)1-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯的甲醇(5毫升)溶液中加入1.2毫升80％的水合肼，搅拌回流反应1小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用8毫升乙醇重结晶制得高纯度1-(3-(6-氯吡啶)甲基)-3-甲氧基苯基-1H-吡唑-5-碳酰肼，产率为86％。
结构式如下 分子式C17H16ClN5O2分子量357.79性状黄色固体熔点157-159℃核磁共振数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.84(s，3H，OCH3)，4.01(s，2H，NH2)，5.76(s，2H，CH2)，6.74(s，1H，4-H)，6.94(d，J＝8.4Hz，2H，ArH)，7.25(d，J＝7.8Hz，1H，PyH)，7.42(s，1H，NH)，7.66-7.70(m，3H，ArH，PyH)，8.44(s，1H，PyH)。
红外光谱数据如下IR(KBr)v3410-2834(NH)，1669(C＝0)cm-1。
质谱数据如下MS(EI)m/z 358.5(M+H)+。
实施例101-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物在制备促进人肺癌A549细胞凋亡药物中的应用。
以常规方法培养人肺癌A549细胞，选取生长状态良好且处于指数生长期的人肺癌A549细胞，备用。
应用吡唑碳酰肼衍生物1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物对人肺癌A549细胞进行药理实验来说明其在人肺癌A549细胞凋亡中的应用。
实验证实本发明所述1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物对人肺癌A549细胞凋亡有明显促进作用。
权利要求
1.下述通式(I)的化合物， 其中R1代表氢、C1～4烷基、烷氧基、卤素、硝基之一；R2代表氢、C1～4烷基、烷氧基、卤素、硝基之一；X代表碳、氮之一。
2.按照权利要求1所述的化合物，其特征是R1代表氢，2-甲基，2-乙基，2-丙基，2-异丙基，2-丁基，2-异丁基，2-叔丁基，2-仲丁基，4-甲基，4-乙基，4-丙基，4-异丙基，4-丁基，4-异丁基，4-叔丁基，4-仲丁基，2-甲氧基，2-乙氧基，4-甲氧基，4-乙氧基，2-氯，2-溴，4-氯，4-溴之一；R2代表氢，2-甲基，2-乙基，2-丙基，2-异丙基，2-丁基，2-异丁基，2-叔丁基，2-仲丁基，4-甲基，4-乙基，4-丙基，4-异丙基，4-丁基，4-异丁基，4-叔丁基，4-仲丁基，2-甲氧基，2-乙氧基，4-甲氧基，4-乙氧基，2-氯，2-溴，4-氯，4-溴，2-硝基，4-硝基之一；X代表碳或者氮。
3.按照权利要求2所述的化合物，其特征是R1代表H、OCH3、Cl之一；R2代表H、C(CH3)3、Cl之一；X代表碳或者氮。
4.权利要求1～3之一所述的化合物的制备方法，包括下述步骤将芳甲基氯与3-芳基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯以摩尔数比为1～3∶1的比例加入到极性溶剂中，以等摩尔比为吡唑化合物的量加入缚酸剂，在回流温度下，反应2～10小时；减压浓缩，去除溶剂，加入乙酸乙酯溶解产物，过滤，滤液浓缩；浓缩物用硅胶柱层析分离，所用展开剂为石油醚/乙酸乙酯，其体积比是2∶1，得到1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯的衍生物；将得到的1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯衍生物与80％的水合肼以其摩尔数比为1∶5～25的比例加入到极性溶剂中，回流反应1～5小时；静置过夜，析出固体，过滤，减压抽滤得粗产物；用乙醇重结晶制得高纯度1-芳甲基-3-芳基-1H-吡唑-5-碳酰肼衍生物。
5.如权利要求4所述的化合物的制备方法，其特征是所述的芳甲基氯与3-芳基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯摩尔数之比优选为1∶1；所述的1-芳甲基-3-芳基吡唑-5-羧酸乙酯衍生物与水合肼的摩尔数之比优选为1∶20。
6.如权利要求4所述的化合物的制备方法，其特征是所述的极性溶剂是甲醇，乙腈，乙醇之一。
7.如权利要求4所述的化合物的制备方法，其特征是所述的缚酸剂是碳酸锶，碳酸钠，碳酸钾之一。
8.如权利要求7所述的化合物的制备方法，其特征是所述的缚酸剂是碳酸钾。
9.权利要求1～3中任意一项所述的化合物在制备促进人肺癌A549细胞凋亡药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及通式(I)的1－芳甲基－3－芳基－1H－吡唑－5－碳酰肼衍生物。其中R
文档编号C07D401/00GK101085758SQ20071001666
公开日2007年12月12日 申请日期2007年7月3日 优先权日2007年7月3日
发明者赵宝祥, 苗俊英, 张尚立, 夏永, 董志武 申请人:山东大学