专利名称：：具有抗炎、抗真菌活性的6H-硫色烯并[4,3-d][1,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶类化合物的制作方法
技术领域：
：本发明专利涉及含氮硫的杂环化合物，特别是涉及一种6H-硫色烯并[4，3-d][l,2,4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶系列抗炎、抗真菌合成药物。
背景技术：
：真菌是一种与宿主细胞有相似结构和生理代谢过程的真核细胞生物，按照真菌引起的感染部位不同，分为浅部菌感染和深部菌感染。浅部真菌感染主要是由各种癣菌引起，如手足癣、头癣、体癣等，目前常以灰霉菌素、制霉菌素、酮康唑等作为治疗药物。深部真菌感染危害大，甚至危机生命，它主要由致病真菌引起，它包括白色念珠菌、新型隐球菌、曲霉菌、毛霉菌等，这些真菌属于正常机体内菌群成员，正常情况下不引起疾病，但是，长期大量使用广谱抗生素、激素和免疫抑制剂等可以导致发病。近年来，深部真菌感染的发病率有逐年上升的趋势。由于真菌的生物特性，一般抗真菌药物往往在破坏真菌细胞同时，又会损伤宿主细胞，再加上耐药菌株的不断出现，使得真菌感染疾病的治疗陷于两难之境。截至目前，可应用于临床的疗效好、毒副作用小、安全系数(safetyIndex,LD5/ED95)高的药物寥寥无几。两性霉素B和三唑类氟康唑类药物也因其毒副作用大而在应用方面受限。因此，开发和探求一种高效低毒、具有治疗预防双重功效的广谱和窄谱抗真菌活性的新化合物，成为当前一项具有重要意义的研究工作。
发明内容本发明的目的在于弥补上述现有技术中的不足之处，而提供合成方法简单、效果好的6H-硫色烯并[4,3-d][l,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶系列抗真菌合成药物。本发明目标物可以通过如下措施来达到抗炎、抗真菌6H-硫色烯并[4,3-d][l,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶类化合物，其特征在于用通式(I)、(II)表示化合物3III其中当R,、R2、R3中有一个或两个为H时，另外两个或一个分别为R,=X(卣素取代基)、-OH、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMe2、-NEt2、C3-C6烃基或取代烃基R2=X(卣素取代基)、-OH、Me、-Et、-OMe、-OEt、-CF3、-NMe2、-NEt2、CrC6烃基或取代烃基R3=X(齒素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、Et、-NMe2、-NEt2、C3-CV烃基或取代烃基R4=H、d-C6的链烃基或环烃基、苯基或取代苯基、杂芳环基或取代杂芳R5=H、-Me、-Et卤素取代基是指氟、氯、溴、碘。6H-硫色烯并[4,3-d][l,2，4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶类药物的合成方法是将苯硫酚溶于2MNaOH溶液中(可加入适量的乙醇)。另将P-氯丙酸(或其甲基酯、乙基酯)溶于计算量的Na2C03溶液中，然后与上述溶液混合超声，回流6~8小时，除尽醇后抽滤。滤液用4MH2S04酸化，然后抽滤。水洗得到的滤饼并将其干燥，得化合物i，化合物i再用浓硫酸(或聚磷酸)縮合，分离纯化得到化合物ii的粗品。室温下，在芳香醛(取代芳香醛)的乙醇和10。/bNaOH混合溶液中滴加上述得到的化合物ii，加完后继续反应l小时。将反应液冷却抽滤。水洗滤饼并将其干燥，得化合物m。在150154'C的DMF中，化合物iii与3-氨基-1,2，4-三氮唑分别反应2和IO小时。然后向反应2小时的反应体系中加入苯，析出固体过滤；将滤饼用苯和DMF重结晶，得到固体化合物I;向反应10小时的体系加入甲醇析出固体过滤，收集滤饼得到固体化合物II。6H-硫色烯并4，3-dl[l，2,41三氮唑并4，3-al嘧啶类化合物的合成方法如下IIIR卜R2、R3、R4、Rs定义同上。本发明相比现有技术具有如下优点6H-硫色烯并[4，3-d][l,2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶类系列化合物是含有氮硫原子的杂环化合物，具有广泛生物活性。它不但对常见浅表真菌感染具有较好的抑制活性，而且对深部真菌具有良好的杀菌活性。本发明原料易得、合成方法简单、收率较高，有很好的研究价值和应用前景。具体实施例方式下面列举实施例，结合表A对本发明加以进一步说明。实施例l(表A中化合物3的制备)表A中化合物1(6-氟-硫色满酮)的制备将50mmol氟代苯硫酚溶于2mol/LNaOH溶液中(可加入适量的乙醇)。另将8.2gJ3-氯丙酸(或10g其甲基酯)溶于50mmolNa2CO3溶液中，然后与上述溶液混合，超声，回流6-8小时。然后减压蒸馏除去大部分溶剂，抽滤。滤液用4mol/LH2S04酸化，搅拌1~2小时后抽滤。水洗滤饼并干燥，得卩-(6-氟-苯硫基)-丙酸，产率6575%。在室温下，将13mmol卩-(6-氟-苯硫基)-丙酸溶解于20ml浓硫酸，放置18h。然后将反应液冰解，过滤，滤饼用5~10°/。NaHC03溶液洗涤，洗至中性，抽滤。滤饼干燥，得浅黄色固体6-氟-硫色满酮，产率80~85%。表A中化合物2(3-次苄基-6-氟-硫色满酮)的制备控制温度在2230°C条件下，在38mmol10%KOH溶液和7.4ml无水乙醇中，搅拌下加入30mmol6-氟-硫色满酮，然后加入30mmol苯甲醛，反应3.5h。然后将反应液在0'C冰箱中放置10h后，抽滤，水洗滤饼至中性。滤饼用乙醇/水重结晶干燥得浅黄色3-次苄基-6-氟-硫色满酮，产率8592%。表A中化合物3(2-氟-7-(4-甲氧基苯基)-7，12-二氢-6H-硫色烯[4,3-d][1,2，4〗三氮唑f4，3-a〕嘧啶)的制备在150154'C的5mlDMF中，6mmol3-次苄基-6-氟-硫色满酮和7mmol3-氨基1,2,4-三氮唑反应2h。然后向反应液中加入适量苯，至有大量固体析出，抽滤。滤饼干燥，用DMF和苯重结晶，得到固体化合物3。I类其他化合物的制备工艺同化合物3的制备工艺。实施例2(表A中化合物13的制备)表A中化合物13(2-氟-7-(4-甲氧基苯基)-6H-硫色烯[4,3-d][l，2，4]三氮唑[4,3-a]嘧啶)的制备方法l:6mmol3—次苄基一6—氟-硫色满酮和7mmol3-氨基1,2,4-三氮唑在5mlDMF中加热回流15h。然后向反应液中加入适量甲醇，抽滤，得到的滤饼干燥，即化合物13。表A中化合物13(2-氟-7-(4-甲氧基苯基)-6H-硫色烯[4,3-d][l,2，4]三氮唑[4,3-a]嘧啶)的制备方法2:控制温度在456(TC条件下，将2.5咖ol溴代丁二6酰亚胺加到2mmol化合物3的甲醇悬浮液中，加热回流2h。反应液冷却至室温，减压蒸馏，除去大部分反应液，至有大量固体析出，加入少量DMF重结晶，过滤，得到的滤饼干燥，即化合物13。II类其他化合物的制备工艺同化合物13的制备工艺1或工艺2。表A部分合成化合物的理化常数编号分子式结构式'H-画R(CDC13)ESI(m/z+1)1C9H7FOS2.96-2.99(q,2H)，3.22-3.25(q,2H),7.11-7.16(m,lH),7.25-7.28(m,lH)，7,78-7.81(q，lH)—2.C16HnFOS4.11(s,2H),7.12-7.18(m,lH),7.28-7.31(q,lH),7.37-7.47(m,5H),7.81(s,lH),7,86-7.卯(q,1H)—3C19H15FN4OSn一n、义》3.12-3.16(d,1H),3.19-3.23(d,lH)，3.80(s,3H),6.05(s,lH),6.90-6.93(d,2H),7.00-7.03(m,lH),7.32-7.41(s,4H),7.63(s,lH),10.85(s,1H;)3674Ci9H15FN4Sn-n乂》2.27(s,3H),2,95-2.98(d,lH)，3,38陽3.42(d,lH),3.94-3.99(q，lH),6.15(s,lH),7.13-7.23(m,5H),7.37-7.4l(m,lH),7.56-7.63(m，1H),7.95(s,1H),9.99(s,1H)3517<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>抑菌试验本发明6H-硫色烯并[4,3-d][1,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶系列药物通过对10属、18种18株真菌，采用二倍浓度稀释法进行体外抑菌实验，结果参见表B。供试菌株白色念珠菌(C.albicas)、热带念珠菌(C.tropicalis)、啤酒酵母菌(C.cecerisiae)、新生隐球菌(C.neoformans)、絮状表皮癣菌(E.floccosum)、石膏样毛癣菌(T,gypsoum)、红色毛癣菌(T.vubrum)、断发毛癣菌(T.tonsurans)、石膏样小孢子菌(M.gypseum)、木霉菌(trichoderum)、黑曲霉菌(A.niger)、灰绿曲菌(A.glaucus)、普通青霉菌(P.commune)、裴氏瓶霉菌(P.pedrosoi)、卡氏枝孢霉菌(C.carionii)、紧密瓶霉菌(P.comaitum)、疣状瓶霉菌(P.verrcosa)和申克包子丝菌(S.schenekn)。菌液配制将充分发育的供试菌种移至5ml无菌生理盐水内，捣碎后超声充分震荡，去除块状不溶物质，混匀，作为原菌液，测试时调整其浓度为106个细胞/ml后使用。供试化合物为附表B中的化合物3~13。实验方法供试化合物用适量二甲亚砜溶解，再用无菌蒸馏水稀释，加入灭过菌的1%(热)的葡萄糖蛋白陈琼脂培养基中，样品浓度为200，100,50,25,12.5，6.25,3.12，1.60mg/mL。接种供试菌以后，置恒温烘箱培养5-7日以无真菌生长的最高稀释浓度为最小抑菌浓度MIC。从实验结果可以看出，6H-硫色烯并[4，3-d][l,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶对真菌都有不同程度的抑制活性，其中一些化合物的抗真菌活性与对照品克霉唑相当，有些甚至优于克霉唑的抗真菌活性。总之，本发明涉及到的药物，都是以苯硫酚作为原料合成出来的，合成反应过程中用到的各种化学试剂都是常见和简单易得的，反应的收率也比较理想。通过药理毒理学实验，表明系列化合物对真菌都有不同程度的抑制活性。本发明化合物广泛应用于抗真菌领域，有广阔的研究价值和应用前景。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>权利要求1.具有抗炎、抗真菌活性的6H-硫色烯并[4，3-d][1，2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶类化合物。2.根据权利要求l，6H-硫色烯并[4,3-d][l，2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶类化合物,其特征在于用通式(I)、(II)表示化合物其中当R卜R2、R3中有一个或两个为H时，另外两个或一个分别为R尸X(^素取代基)、-OH、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMe2、-NEt2、C3-C6烃基或取代烃基R2=X(卣素取代基)、-OH、Me、-Et、-OMe、-OEt、-CF3、-NMe2、-NEt2、C3-C6烃基或取代烃基R3=X(囱素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、Et、-NMe2、-NEt2、。3-(:6烃基或取代烃基R4二H、d-Q的链烃基或环烃基、苯基或取代苯基、杂芳环基或取代杂芳环基R5=H、-Me、-Et卤素取代基是指氟、氯、溴、碘。3.根据权利要求l，6H-硫色烯并[4,3-d][l，2,4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶类化合物的特征在于具有抗炎、抗真菌活性。4.根据权利要求l,6H-硫色烯并[4,3-d][l，2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶类化合物可用于抗炎、抗真菌药物。全文摘要本发明公开了新的具有抗炎、抗真菌活性的含氮硫的并四环杂环化合物6H-硫色烯并[4，3-d][1，2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶类化合物。针对现有技术中抗真菌药物少，毒性大的研发现状，本发明进行了新的6H-硫色烯并[4，3-d][1，2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶类化合物的设计合成，并进行了抗真菌实验，实验结果表明这一类化合物具有好的抗真菌活性。本发明化合物合成方法简单，原料易得，合成方法详见说明书。本发明产品可用于抗炎、抗真菌药物。文档编号C07D495/00GK101469001SQ200710301578公开日2009年7月1日申请日期2007年12月25日优先权日2007年12月25日发明者杨更亮,祝士国,贾苗辉,郭兰弟,马正月,魏春亮申请人:杨更亮;马正月