专利名称：一种海藻倍半萜类化合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及海洋天然产物领域，具体地说是一种海藻倍半萜类化合物及其制备方 法。随着陆地生物天然产物资源的广泛开发，人们把寻找新药的目光越来越多的聚焦 在海洋天然产物资源上，海洋中生存着地球上80%以上的生物资源，丰富多样的物种能够 在高压、高盐、低氧、竞争激烈的海洋环境中生存下来，说明它们拥有天然自卫与对抗疾病 的能力，其中许多海洋生物体内含有化学结构新颖、生物活性显著的化学防御物质，为海洋 天然产物研究提供了巨大的资源宝库，而且有数个海洋天然产物已开发为临床药物或正在 进行临床研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种天然的海藻倍半萜类化合物及其制备方法。为实现上述目的，本发明采用的技术方案为海藻倍半萜类化合物结构式如(I)所示 (I)海藻倍半萜类化合物的制备方法1)将海洋褐藻叉开网翼藻(Dictyopteris divaricate)冲洗、阴干、粉碎，然后用 有机溶液提取2-5次，合并提取液进行浓缩，得到粗提物；2)取步骤1)中所得粗提物的10-15倍体积的水加入步骤1)的粗提物中，并用所 述加入水体积1-1. 5倍的乙酸乙酯萃取2-5次，萃取物浓缩得相应的提取物，备用；3)取步骤2)中的提取物进行硅胶柱层析，用有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱 液，洗脱液经薄层层析检测；所述有机溶剂可为100 0-0 100梯度的石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮；4)将步骤3)中以洗脱液体积比2-3 1梯度洗脱下的组分进行凝胶柱、反相硅胶 柱并用薄层层析分离纯化得目标化合物I。步骤1)中的有机溶液可为氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇或甲醇中一种或几种。步骤4)中的凝胶柱洗脱液可为体积比1-2 1的氯仿-甲醇或氯仿-乙醇；步骤 4)中的反相硅胶柱洗脱液可为体积比3-4 1的甲醇-水或乙醇-水。5.按权利要求2所述的海藻倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于步骤4)所
背景技术：
述薄层层析分离纯化时展开剂为体积比3 1石油醚-乙酸乙酯，Rf值为0.6-0. 7的化合 物即为目标化合物I。本发明具有以下优点本发明涉及的海洋褐藻叉开网翼藻(Dictyopteris divaricate)属于褐藻门、网 地藻科、网翼藻属海藻，广泛分布于中国的辽宁、山东和浙江等沿海地区。本发明通过海洋 褐藻叉开网翼藻经提取、分离获得的倍半萜类天然化合物，属于新的小分子天然有机化合 物，容易制备获得。
具体实施例方式下面结合实施实例对本发明做进一步阐述。实施例1采集新鲜的叉开网翼藻(Dictyopteris divaricate)经海水清洗，除去表面附着 的沙砾及杂藻，阴凉处凉干备用。取凉干后的样品2千克，粉碎到60-80目后用5升氯仿和 甲醇体积比1 1混合溶剂常温提取三次，每次48小时，合并提取液，在温度40°C左右减 压浓缩、回收氯仿和甲醇，获得粗提物。将粗提物加入蒸馏水中使其混悬于水中，再用乙酸 乙酯萃取3次，所得萃取物浓缩得提取物，备用；将浓缩后的乙酸乙酯提取物(90克)进行 硅胶柱(200-300目)层析，用石油醚-乙酸乙酯以100 0、50 1、20 1、5 1,2 1 到0 100的梯度进行洗脱，分别收集洗脱液，再用薄层层析(TLC)检测(薄层层析(TLC) 检测时用茴香醛_硫酸作为显色剂)，根据Rf值来判断、合并相同或类似部分，获得十个组 分(I-X)。将组分VII Rf = 0.5-0. 8 (石油醚-乙酸乙酯3 1展开)，即以石油醚-乙 酸乙酯2 1梯度洗脱下的组分再进行凝胶柱、反相硅胶柱并用薄层层析分离。凝胶柱层 析时用1 1的氯仿_甲醇进行洗脱，TLC检测，收集Rf = 0. 5-0. 7的组分；反相硅胶柱 层析时用3 1的甲醇_水进行洗脱，TLC检测，收集Rf = O. 6-0.7的组分；而后用薄层 层析用体积比3 1的石油醚-乙酸乙酯为展开剂，Rf = 0.6-0. 7，即得化合物I (9.1毫 克)，经TLC检测，呈单个、均勻蓝色斑点，确定为纯化合物。经波谱分析，其结构鉴定为1， 4-epoxymuurolan_5 β-ol,结构式如(I)所示。 (I)该化合物具有以下理化和波谱特性无色油状物；[a]25D-29. 2° (c = 0. 33, CHCl3) ； IR (KBr) cm-1 =3452,2962,2954, 2870，1458，1377，1065 ；核磁共振S谱(1H 匪R，CDCl3, 500ΜΗζ) δ 0. 80 (3Η, d, J = 6. 9Hz， H-12) ,0. 94 (3H, d, J = 6. 9Hz, H-13)，1. 01 (3H，d, J = 6. 5Hz, H-14)，1. 41 (3H，s, H-15)， 3. 46 (1H, br s, H_5)；核磁共振碳谱(13C NMR, CDCl3,125MHz) δ 15. 3 (C—14)，16. 0 (C—12)， 19. 6(C-15) ,21. 8(C-13)，23· 7(C_8)，27· 3 (C_l 1)，29. 4 (C_3)，31. 7 (C_9)，34. 6 (C_2)， 34. 9 (C-IO)，47. 3 (C_7)，56. 0 (C_6)，85. 5 (C_5)，85. 7 (C_4)，87. 1 (C-I) ppm ；电喷雾离子化高分辨质谱 HRESIMS m/z 261. 1829 [M+Na]+，计算为 C15H26O2Na, 261. 1830。本发明海藻倍半萜类化合物应用广泛，可用于有机合成、农药等领域，是这些领域 中重要的化工产品的结构单元，在许多具有生理活性的分子中也包含了这些结构单元，所 以利用本发明方法合成制备的海藻倍半萜类化合物可作为进一步拒食杀虫活性药物开发 的前体。实施例2采集新鲜的叉开网翼藻(Dictyopteris divaricate)经海水清洗，除去表面附着 的沙砾及杂藻，阴凉处凉干备用。取凉干后的样品，粉碎到60-80目后用乙酸乙酯和乙醇 体积比1 1混合溶剂常温提取五次，每次48小时，合并提取液，在温度40°C左右减压浓 缩、回收乙酸乙酯和乙醇，获得粗提物。将粗提物加入蒸馏水中使其混悬于水中，再用乙酸 乙酯萃取3次，所得萃取物浓缩得提取物，备用；将浓缩后的乙酸乙酯提取物进行硅胶柱 (200-300 目)层析，用石油醚-丙酮以 100 0、50 1、20 UlO 1,3 1 到 0 100 的梯度进行洗脱，分别收集洗脱液，再用薄层层析(TLC)检测(薄层层析(TLC)检测时用茴 香醛-硫酸作为显色剂)，根据Rf值来判断、合并相同或类似部分，获得十个组分(I-X)。将 组分VII Rf = 0.5-0. 8 (石油醚-乙酸乙酯3 1展开)，即以石油醚-丙酮3 1梯度 洗脱下的组分再进行凝胶柱、反相硅胶柱并用薄层层析分离。凝胶柱层析时用2 1的氯 仿-甲醇进行洗脱，TLC检测，收集Rf = 0.5-0. 7的组分；反相硅胶柱层析时用3 1的甲 醇-水进行洗脱，TLC检测，收集Rf = 0.6-0.7的组分；而后用薄层层析用体积比3 1的 石油醚_乙酸乙酯为展开剂，Rf = 0. 6-0. 7，即得化合物I。实施例3采集新鲜的叉开网翼藻(Dictyopteris divaricate)经海水清洗，除去表面附着 的沙砾及杂藻，阴凉处凉干备用。取凉干后的样品，粉碎到60-80目后用丙酮常温提取二 次，每次48小时，合并提取液，在温度40°C左右减压浓缩、回收丙酮，获得粗提物。将粗提 物加入蒸馏水中使其混悬于水中，再用乙酸乙酯萃取2次，所得萃取物浓缩得提取物，备 用；将浓缩后的乙酸乙酯提取物进行硅胶柱(200-300目)层析，用石油醚-乙酸乙酯以 100 0,50 1,20 1、5 1,2 1到0 100的梯度进行洗脱，分别收集洗脱液，再用 薄层层析(TLC)检测(薄层层析(TLC)检测时用茴香醛-硫酸作为显色剂)，根据Rf值来 判断、合并相同或类似部分，获得十个组分(I-X)。将组分VII Rf = 0.5-0.8(石油醚-乙 酸乙酯3 1展开)，即以石油醚-乙酸乙酯2 1梯度洗脱下的组分再进行凝胶柱、反相 硅胶柱并用薄层层析分离。凝胶柱层析时用2 1的氯仿-甲醇进行洗脱，TLC检测，收集 Rf = 0.5-0. 7的组分；反相硅胶柱层析时用4 1的甲醇-水进行洗脱，TLC检测，收集Rf =0.6-0. 7的组分；而后用薄层层析用体积比3 1的石油醚-乙酸乙酯为展开剂，Rf = 0. 6-0. 7，即得化合物I。
权利要求
一种海藻倍半萜类化合物，其特征在于结构式如(I)所示F200910016226XC0000011.tif
2.一种按权利要求1所述的海藻倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于1)将海洋褐藻叉开网翼藻(Dictyopterisdivaricata)冲洗、阴干、粉碎，然后用有机 溶液提取2-5次，合并提取液进行浓缩，得到粗提物；2)取步骤1)中所得粗提物的10-15倍体积的水加入步骤1)的粗提物中，并用所述加 入水体积1-1. 5倍的乙酸乙酯萃取2-5次，萃取物浓缩得相应的提取物，备用；3)取步骤2)中的提取物进行硅胶柱层析，用有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液，洗 脱液经薄层层析检测；所述有机溶剂可为100 0-0 100梯度的石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮；4)将步骤3)中以洗脱液体积比2-3 1梯度洗脱下的组分进行凝胶柱、反相硅胶柱并 用薄层层析分离纯化得目标化合物I。
3.按权利要求2所述的海藻倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于步骤1)中的有 机溶液可为氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇或甲醇中一种或几种。
4.按权利要求2所述的海藻倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于步骤4)中的凝 胶柱洗脱液可为氯仿_甲醇或氯仿_乙醇；步骤4)中的反相硅胶柱洗脱液可为甲醇-水或 乙醇-水。
5.按权利要求2所述的海藻倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于步骤4)所述薄 层层析分离纯化时展开剂为体积比3 1石油醚-乙酸乙酯，Rf值为0.6-0. 7的化合物即 为目标化合物I。
全文摘要
本发明涉及海洋天然产物领域，具体地说是一种海藻倍半萜类化合物及其制备方法。具体结构式如(I)所示，其制备方法为将海洋褐藻叉开网翼藻经海水冲洗干净、除去表面附着的沙砾及杂藻，阴干、粉碎后浸取、溶剂分配和反复的层析分离，得到单体化合物。本发明通过海洋褐藻叉开网翼藻经提取、分离获得的倍半萜类天然化合物，属于新的小分子天然有机化合物，容易制备获得。(I)
文档编号C07D493/08GK101921281SQ20091001622
公开日2010年12月22日 申请日期2009年6月13日 优先权日2009年6月13日
发明者季乃云, 李晓栋, 温炜 申请人:烟台海岸带可持续发展研究所