专利名称：囊性纤维化跨膜传导调节因子的调节剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及囊性纤维化跨膜传导调节因子(“CFTR”)的调节剂、其组合物及其方法。本发明还涉及使用CFTR调节剂治疗疾病的方法。
背景技术：
ATP盒转运体是一族膜转运蛋白，其调节范围广泛的药物、可能的毒性药物和外源性化学物质和阴离子的转运。它们是同源膜蛋白，由于结合和使用细胞的三磷腺苷(ATP) 来实现它们的特异性活性。人们发现，这些转运体中的一些是多药抗药性蛋白质类(例如 MDRl-P糖蛋白，或多药抗药性蛋白MRP1)，保护恶性癌细胞免于化疗剂的影响。迄今为止， 已经鉴定出了 48种这样的转运体，基于它们的序列同一性和功能分为7族。通常与疾病有关的ATP盒转运体家族的一个成员是cAMP/ATP-介导的阴离子通道，CFTR。CFTR在多种细胞类型(包括吸收和分泌上皮细胞)中表达，其中它调节跨膜的阴离子流通，并调节其他离子通道和蛋白质的活性。在上皮细胞中，CFTR的正常功能对于维持包括呼吸和消化组织在内的整个身体的电解质转运是非常关键的。CFTR是由约1480 个氨基酸构成的，这些氨基酸编码由跨膜区的串联重复体构成的蛋白质，每个重复体包含6 个跨膜螺旋和1个核苷酸结合区。2个跨膜区通过一个具有多个磷酸化位点的大的、极性的、调节性(R)-区相连，所述磷酸化位点调节通道活性和细胞运输。已经鉴定出了编码CFTR的基因并测定了其序列(参见Gregory，R. J.等人(1990) Nature 347 :382-386 ；Rich, D. P.等人(1990)Nature347:358-362)，Riordan，J. R.等人(1989) Science 245:1066-1073)。这个基因的缺陷引起CFTR突变，导致囊性纤维化 (“CF”)，是人体最常致命的遗传性疾病。在美国，囊性纤维化影响约2，500分之一的婴儿。 在一般的美国人口中，高达1千万的人携带有单独1份这样的缺陷基因，但没有明显的不良效果。与此不同的是，具有2份与CF有关的基因的个体会发生CF的致虚弱和致命作用，包括慢性肺病。在患囊性纤维化的患者中，在呼吸上皮中内源性表达的CFTR突变导致顶膜的阴离子分泌减少，使离子和液体转运失衡。所导致的阴离子转运的减少使得CF患者的肺粘液蓄积增加并伴随最终导致死亡的微生物感染。除了呼吸性疾病，CF患者典型地具有胃肠方面的问题和胰功能不全，如果不治疗的话，会导致死亡。此外，大部分患有囊性纤维化的男性都不能生育，而患囊性纤维化的女性则生育力降低。与2份和CF有关的基因所带来的严重后果不同的是，携带有一份与CF有关的基因的个体显示出对霍乱和腹泻导致的脱水的抵抗力增强——可能解释了 CF基因在这个人群中的相对高频率出现。CF染色体的CFTR基因的序列分析显示了很多导致疾病的突变(Cutting，G.R.等人(1990)Nature 346 :366-369 ；Dean,Μ.等人(1990) Cell 61 :863 :870 ；和 Kerem，B_S.等人(1989)kience 245 :1073-1080 ；Kerem, B-S 等人(1990) Proc. Natl. Acad. ki. USA 87 8447-8451)。迄今为止，已经鉴定出了 1000种以上的引起疾病的CF基因突变(http //www. genet, sickkids. on. ca/cftr/)。最常见的突变是在CFTR氨基酸序列的508位上苯丙氨酸的缺失，一般称作AF508-CFTR。这种突变在约70%的囊性纤维化病例中都会发生，与严重的疾病有关。AF508-CFTR中残基508的缺失妨碍了初生蛋白正确折叠。这导致该突变蛋白不能退出ER，和通过质膜。结果，膜中存在的通道数量远小于表达野生型CFTR的细胞中所观察到的数量。除了运输受损，该突变导致通道门控缺陷。这样加起来，膜中通道数量减少和门控缺陷导致通过上皮的阴离子转运减少，导致离子和液体转运出现缺陷(Quinton， P.M. (1990), FASEB J. 4 :2709-2727)。但是，研究已经显示出，尽管比野生型CFTR少，膜中 Δ F508-CFTR 的数量减少是有用的。(Dolmans 等人(1991)，Nature Lond. 354 :526-528 ； Denning 等人，出处同前；Pasyk 和 Foskett (1995)，J. Cell. Biochem. 270 12347-50)。除了 AF508-CFTR、R117H-CFTR和G551D-CFTR以外，导致运输、合成和/或通道门控缺陷的其他的引起疾病的CFTR突变可以被向上或向下调节，以改变阴离子分泌并改变疾病进程和/或严重性。尽管除了阴离子外CFTR还转运多种分子，但是显然，这种作用(转运阴离子)代表了跨上皮细胞转运离子和水的重要机制中的一个要素。其他要素包括上皮Na+通道、 ENaC,Na+/2Cl7K+共转运体、Na+-K+-ATP酶泵和基底外侧膜K+通道，它们负责将氯离子吸收到细胞中。这些要素一起运作，以通过它们在细胞中的选择性表达和定位实现跨上皮细胞的定向转运。通过存在于顶膜上的ENaC和CFTR与在细胞的基底外侧表面上表达的Na+-K+-ATP 酶泵和Cl通道之间的协调性活性，发生了氯离子的吸收。氯离子从腔侧的继发性主动转运导致细胞内的氯离子蓄积，接着被动地通过Cl—通道离开细胞，导致矢量转运。基底外侧表面上的Na72Cl7K+共转运体、Na+-K+-ATP酶泵和基底外侧膜K+通道和腔侧上的CFTR的排列，通过腔侧上的CFTR来协调氯离子的分泌。由于水可能从不自己主动转运，因此它依靠钠和氯离子的总体流量产生的微小的跨上皮渗透梯度流过上皮。推定因CFTR中的突变导致的碳酸氢盐转运缺陷导致一些分泌功能缺陷。例如， 0M “Cystic fibrosis-impaired bicarbonatesecretion and mucoviscidosis", Paul M. Quinton, Lancet 2008 ；372 :415_417。与中度CFTR功能障碍相关的CFTR中的突变还在与CF共有一些疾病表现、但不满足CF诊断标准的疾病的患者中明显。它们包括先天性双侧输精管缺失、特发性慢性胰腺炎、慢性支气管炎和慢性鼻窦炎。认为突变体CFTR与修饰基因或环境因素一起是危险因素的其他疾病包括原发性硬化性胆管炎、变应性支气管肺曲菌病和哮喘。还显示吸香烟、缺氧和诱导含氧量低信号的环境因素损害CFTR功能并且可以贡献一些呼吸道疾病的形式，例如慢性支气管炎。可能因缺陷性CFTR功能、但不满足CF诊断标准的疾病的特征为CFTR-相关疾病。除了囊性纤维化，调节CFTR活性还有益于并非是CFTR突变直接导致的其他疾病， 例如CFTR介导的分泌性疾病和其他蛋白质折叠性疾病。CFTR调节氯离子和碳酸氢盐流过许多细胞上皮，以控制流体运动、蛋白质增溶、粘液粘度和酶活性。CFTR中的缺陷可以导致气道或许多器官包括肝和胰腺中的导管阻塞。增强剂是增强于细胞膜中存在的CFTR的门控活性的化合物。牵连粘液浓稠、流体调节受损、粘液清除受损或导致炎症和组织破坏的阻塞导管的任何疾病可以是增强剂的候选者。这些疾病包括但不限于慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、吸烟诱发的C0PD、慢性支气管炎、鼻窦炎、便秘、干眼病、斯耶格伦综合征、胃食管返流病、胆石、直肠脱垂和炎性肠病。COPD的特征在于渐进性和非完全可逆性的气流受限。气流受限是由于粘液分泌过多、 肺气肿和细支气管炎。突变体或野生型CFTR的活化剂为COPD中常见的粘液分泌过多和粘膜纤毛清除受损提供了潜在的治疗。具体地，增加跨CFTR的阴离子的分泌会促进流体转运到气道表面液体中，以水化粘液且优化纤周流体粘度。这会导致增强粘膜纤毛清除并减轻与COPD有关的症状。此外，通过预防因气道清除改善导致的进行性感染和炎症，CFTR调节剂可以预防或减缓特征在于肺气肿的气道实质毁坏和减少或逆转粘液细胞数量和大小增加，其以气道疾病中的粘液分泌过多为基础。干眼病的特征在于泪水产生减少以及泪液膜液体、蛋白质和粘蛋白性质异常。干眼有很多种原因，其中一些包括年龄、Lasik眼科手术、 关节炎、药物、化学/热灼伤、变态反应和疾病，例如囊性纤维化和斯耶格伦综合征。通过 CFTR的阴离子分泌增加可以增加由眼周围的角膜内皮细胞和分泌腺中的流体转运，以增强角膜水合。这有助于减轻与干眼病有关的症状。斯耶格伦综合征是一种自身免疫性疾病， 其中免疫系统攻击全身的产生液体的腺体，包括眼、口、皮肤、呼吸组织、肝、阴道和消化道。 症状包括眼、口和阴道干燥，以及肺病。该病也与类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、系统性硬化病和多肌炎/皮肌炎有关。蛋白质运输缺陷据认为会导致该疾病，由此限制了治疗选择。CFTR活性的调节剂可以使受该疾病影响的各种器官水合并有助于缓解相关的症状。具有囊性纤维化的个体存在肠梗阻反复发作和直肠脱垂、胆石、胃食管返流病、GI恶性肿瘤和炎性肠病的高发病率，显示CFTR功能可能在预防这类疾病中起重要作用。如上所述，据认为，AF508-CFTR中残基508的缺失会妨碍初生蛋白正确折叠， 导致该突变蛋白不能退出ER，并通过质膜。结果，质膜中存在的成熟蛋白量不足，上皮组织内的氯离子转运显著减少。事实上，经由ER机制加工CFTR的ER缺陷的这种细胞现象已经显示出，其不仅是CF疾病的潜在基础，也是范围广泛的其他独立和遗传疾病的潜在基础。导致ER机制障碍的两种途径是，通过丧失与蛋白质的ER出口偶合而导致降解，或者是通过这些缺陷/错误折叠蛋白质的ER蓄积[Aridor M.等人，Nature Med.，5 (7)， pp 745-751(1999) ；Shastry, B. S.等人，Neurochem. International，43，pp 1-7(2003); Rutishauser, J.等人，Swiss Med ffkly, 132, pp 211-222(2002) ；Morello，JP 等人，TIPS, 21，pp. 466-469(2000) ；Bross P.等人，Human Mut.，14，pp. 186-198(1999)]。与第一类 ER障碍有关的疾病是囊性纤维化(由如上所述的错误折叠的AF508-CFTR导致)、遗传性肺气肿(由α -抗胰蛋白酶；非Piz变体导致)、遗传性血色病、凝血-纤溶缺陷，例如蛋白质C缺乏症、1型遗传性血管性水肿、脂质加工缺陷，例如家族性高胆固醇血症、1型乳糜微粒血症、无β脂蛋白血症、溶酶体贮积症，例如I-细胞病/假性-赫尔勒综合症 (pseudo-Hurler)、粘多糖症(由溶酶体加工酶导致)、桑霍夫病/泰-萨病(由β-氨基己糖苷酶导致)、克-纳综合征(Crigler-Najjar) II型(由UDP-葡糖醛酸-唾液酸-转移酶导致)、多内分泌腺病/高胰岛素血症、糖尿病(由胰岛素受体导致)、拉伦侏儒症(由生长激素受体导致)、髓过氧化物酶缺乏症、原发性甲状旁腺功能减退(由前甲状旁腺激素原导致)，黑素瘤(由酪氨酸酶导致)。与后一类ER障碍有关的疾病是聚糖病(GlycanosisKDG 1型、遗传性肺气肿(由α -抗胰蛋白酶(PiZ变体)导致)、先天性甲状腺功能亢进症、 成骨不全(由I、II、IV型前胶原导致)、遗传性低纤维蛋白原血症(由纤维蛋白原导致)、 ACT缺乏症(由α 1-抗胰凝乳蛋白酶导致)、尿崩症(DI)、神经生长性DI (由加压素激素/ V2-受体导致)、肾性DI (由水通道蛋白-II导致)、夏-马-图综合征(由周围髓磷脂蛋白 22导致)、佩-梅病、神经变性疾病，例如阿尔茨海默病(由β APP和衰老蛋白导致)、帕金森病、肌萎缩性侧索硬化、进行性核上性麻痹、皮克病、若干聚谷氨酰胺神经性障碍，例如亨廷顿病、I型脊髓小脑性共济失调、脊髓与延髓肌肉萎缩症、齿状核红核苍白球丘脑下部核萎缩，和肌强直性营养不良，以及海绵状脑病，例如遗传性克雅病(由朊病毒蛋白加工缺陷导致)、法布里病(由溶酶体α-半乳糖苷酶A导致)、格-斯-施综合征(由Prp加工缺陷导致)、不育症胰腺炎、胰腺功能不全、骨质疏松症、骨质减少、戈勒姆(Gorham)综合征、氯化物通道病变、先天性肌强直(汤姆森(Thomson)和贝克尔(Becker)型)、巴特综合征III 型、登特(Dent)病、过度惊跳症、癫痫症、过度惊跳症、溶酶体贮存病、安格曼(Angelman)综合征、原发性纤毛运动障碍(P⑶)、具有左右转位的P⑶(也称作卡特金纳综合征)、没有左右转位和纤毛发育不良的PCD和肝病。CFTR中突变牵连的其他疾病包括因输精管先天性双侧缺失(CBAVD)导致的男性不育症、轻度肺病、特发性胰腺炎和变应性支气管肺曲菌病(ΑΒΡΑ)。参见“CFTR-opathies disease phenotypesassociated with cystic fibrosis transmembrane regulator genemutations，，，Peader G. Noone 禾口 Michael R. Knowles, Respir. Res. 2001, 2 328-332(引入本文参考)。除了向上调节CFTR活性以外，CFTR调节剂导致的阴离子分泌减少对于治疗分泌性腹泻可能是有益的，其中由于促分泌性活化的氯离子转运，上皮细胞的水转运显著增加。 该机制包括提高cAMP和刺激CFTR。尽管腹泻有很多原因，但由氯离子转运过量引起的腹泻性疾病的主要后果是共同的，包括脱水、酸中毒、发育受损和死亡。急性和慢性腹泻代表了世界上很多地区的主要医学问题。腹泻是营养不良的重要因素，并且是导致5岁以下儿童死亡的主要原因(每年死亡 5，000, 000 人)。分泌性腹泻也是获得性免疫缺陷综合征(AIDS)和慢性炎性肠病(IBD)患者的一种危险的症状。每年都有1600万从发达国家到发展中国家的旅行者会发生腹泻，腹泻病例的严重性和数量随着所旅行的国家和地区而变化。因此，对人CFTR野生型和突变型的有效和选择性CFTR增强剂存在需求，这些突变型 CFTR 包括、但不限于 AF508del、G551D、R117H、2789+5G- > A。对CFTR活性调节剂及其组合物也存在需求，它们可以用于调节哺乳动物细胞膜中的CFTR活性。对使用这种CFTR活性调节剂治疗因CFTR中突变导致的疾病的方法存在需求。对调节哺乳动物离体细胞膜中CFTR活性的方法存在需求。发明_既述现在已经发现，本发明的化合物及其药学上可接受的组合物用作CFTR活性的调节剂。这些化合物具有式(I)
权利要求
1.式⑴的化合物
2.权利要求1的化合物，其中环A是
3.权利要求1的化合物，其中环A是
4.权利要求1的化合物，其中环A是
5.权利要求1的化合物，其中环A是
6.权利要求2-5任一项的化合物，其中R1是-CF3。
7.权利要求2-5任一项的化合物，其中R1是-CN。
8.权利要求2-5任一项的化合物，其中R1是-Cε CCH2N(CH3)2c
9.权利要求6-8任一项的化合物，其中R2是氢。
10.权利要求6-8任一项的化合物，其中R2是_CH3。
11.权利要求6-8任一项的化合物，其中R2是-CF3。
12.权利要求6-8任一项的化合物，R2是-0H。
13.权利要求6-8任一项的化合物，其中R2是-CH2OTL
14.权利要求10-13任一项的化合物，其中R3是氢。
15.权利要求9-13任一项的化合物，其中R3是_CH3。
16.权利要求9-13任一项的化合物，其中R3是-0CH3。
17.权利要求9-13任一项的化合物，其中R3是-CN。
18.化合物，所述化合物选自
19.药物组合物，所述组合物包含权利要求1-18任一项的化合物和药学上可接受的载体或佐剂。
20.权利要求19的药物组合物，所述组合物还包含另外的活性剂，所述另外的活性剂选自溶粘蛋白剂、支气管扩张剂、抗生素、抗感染剂、抗炎剂、式(I)化合物以外的CFTR调节剂或营养剂。
21.权利要求20的药物组合物，其中所述另外的活性剂是式⑴化合物以外的CFTR调节剂。
22.治疗患者疾病或减轻所述疾病严重性的方法，其中所述疾病选自囊性纤维化、哮喘、吸烟诱发的C0PD、慢性支气管炎、鼻窦炎、便秘、胰腺炎、胰腺功能不全、先天性双侧输精管缺失(CBAVD)导致的男性不育症、轻度肺病、特发性胰腺炎、变应性支气管肺曲菌病 (ABPA)、肝病、遗传性肺气肿、遗传性血色病、凝血-纤溶缺陷，例如蛋白质C缺乏症、1型遗传性血管性水肿、脂质加工缺陷，例如家族性高胆固醇血症、1型乳糜微粒血症、无β脂蛋白血症、溶酶体贮积症，例如I-细胞病/假性赫尔勒综合征、粘多糖症、桑德霍夫/泰-萨克斯病、克-纳综合征II型、多内分泌腺病/高胰岛素血症、糖尿病、拉伦侏儒症、髓过氧化物酶缺乏症、原发性甲状旁腺功能减退、黑素瘤、聚糖病CDGl型、先天性甲状腺功能亢进症、成骨不全、遗传性低纤维蛋白原血症、ACT缺乏症、尿崩症(DI)、神经生长性DI、肾性DI、 夏-马-图综合征、佩-梅病、神经变性疾病，例如阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩性侧索硬化、进行性核上性麻痹、皮克病、若干聚谷氨酰胺神经性障碍，例如亨廷顿病、I型脊髓小脑性共济失调、脊髓与延髓肌肉萎缩症、齿状核红核苍白球丘脑下部核萎缩，和肌强直性营养不良，以及海绵状脑病，例如遗传性克雅病(由朊病毒蛋白加工缺陷导致)、法布里病、 格-斯-施综合征、C0PD、干眼病、胰腺功能不全、骨质疏松症、骨质减少、戈勒姆综合征、氯化物通道病变、先天性肌强直(汤姆森和贝克尔型)、巴特综合征III型、登特病、过度惊跳症、癫痫症、过度惊跳症、溶酶体贮存病、安格曼综合征、原发性纤毛运动障碍(P⑶)、具有左右转位的PCD(也称作卡特金纳综合征)、没有左右转位和纤毛发育不良的PCD或斯耶格仑病，该方法包括对所述患者给予有效量的权利要求1-18任一项的化合物的步骤。
23.权利要求22的方法，其中所述疾病是囊性纤维化。
24.治疗患者疾病或减轻所述疾病严重性的方法，其中所述疾病与因编码CFTR的基因中的突变或环境因素导致的CFTR功能下降相关，该方法包括对所述患者给予有效量的权利要求1-18任一项的化合物的步骤。
25.权利要求对的方法，其中所述疾病是囊性纤维化、慢性支气管炎、复发性支气管炎、急性支气管炎、先天性双侧输精管缺失(CBAVD)导致的男性不育症、子宫和阴道先天性缺失(CAUV)导致的女性不育症、特发性慢性胰腺炎(ICP)、特发性复发性胰腺炎、特发性急性胰腺炎、慢性鼻窦炎、原发性硬化性胆管炎、变应性支气管肺曲菌病、糖尿病、干眼、便秘、 变应性支气管肺曲菌病(ΑΒΡΑ)、骨疾病和哮喘。
26.治疗患者疾病或减轻所述疾病严重性的方法，其中所述疾病与CFTR正常功能相关，该方法包括对所述患者给予有效量的权利要求1-18任一项的化合物的步骤。
27.权利要求沈的方法，其中所述疾病是慢性阻塞性肺病(COPD)、慢性支气管炎、复发性支气管炎、急性支气管炎、鼻窦炎、便秘、慢性胰腺炎、复发性胰腺炎和急性胰腺炎、胰腺功能不全、先天性双侧输精管缺失(CBAVD)导致的男性不育症、轻度肺病、特发性胰腺炎、 肝病、遗传性肺气肿、胆石、胃食管返流病、胃肠道恶性肿瘤、炎性肠病、便秘、糖尿病、关节炎、骨质疏松症或骨质减少。
28.权利要求沈的方法，其中所述疾病是遗传性血色病、凝血-纤溶缺陷，例如蛋白质C缺乏症、1型遗传性血管性水肿、脂质加工缺陷，例如家族性高胆固醇血症、1型乳糜微粒血症、无β脂蛋白血症、溶酶体贮积症，例如I-细胞病/假性赫尔勒综合征、粘多糖症、 桑德霍夫/泰-萨克斯病、克-纳综合征II型、多内分泌腺病/高胰岛素血症、糖尿病、拉
29.用于体外或体内测定生物样品中CFTR或其片段活性的试剂盒，所述试剂盒包括(i)包含权利要求1的式(I)化合物的组合物；( )关于下列内容的说明书a)使该组合物与该生物样品接触；b)测定所述CFTR或其片段的活性。
30.权利要求四的试剂盒，所述试剂盒还包括关于如下的说明书a)使另外的组合物与该生物样品接触；b)测定在所述另外的化合物的存在下所述CFTR或其片段的活性；和c)比较在另外的化合物的存在下CFTR活性与在式⑴组合物的存在下CFTR的密度。
31.调节生物样品中CFTR活性的方法，所述方法包括使所述CFTR接触权利要求1_18 任一项的化合物的步骤。
32.式(I)化合物或其药学上可接受的盐的制备方法
33.权利要求32的方法，其中式Id的酸与式2c的胺的反应在溶剂中、在0-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N, N'，N'-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU)和三乙胺的存在下或在溶剂中、在丙基膦酸环酐(T 3P )和吡啶的存在下进行。
34.权利要求33的方法，其中所述溶剂包括N，N-二甲基甲酰胺、乙酸乙酯或2-甲基四氢呋喃。
35.权利要求32的方法，其中Ra是氢或TBDMS。
36.权利要求32的方法，其中Ra是TBDMS。
37.权利要求32的方法，所述方法还包括脱保护步骤，以除去甲硅烷基保护基，此时环
38.权利要求32的方法，其中式2c的胺由式加的化合物制备，所述方法包括下列步骤(a)使式加的化合物与式3的胺反应，得到式2b的化合物
39.权利要求38的方法，其中步骤(a)中的式3的胺在原位由胺盐酸盐生成。
40.权利要求38的方法，其中Ra是氢或TBDMS。
41.权利要求38的方法，其中Ra是TBDMS。
42.权利要求38的方法，其中步骤(a)在极性非质子溶剂中、在叔胺碱的存在下进行。
43.权利要求42的方法，其中步骤(a)在乙腈中、在三乙胺的存在下进行。
44.权利要求38的方法，其中步骤(a)的反应温度是约75°C-约85°C。
45.权利要求38的方法，其中反应时间是约2-约30小时。
46.权利要求38的方法，其中步骤(b)在极性质子溶剂中、在钯催化剂的存在下进行。
47.权利要求46的方法，其中步骤(b)中的溶剂包括甲醇或乙醇。
48.权利要求38的方法，其中步骤(b)在极性质子溶剂中、在!^e和!^eSO4或Si和AcOH 的存在下进行。
49.权利要求48的方法，其中极性质子溶剂是水。
50.式(Ic)化合物或其药学上可接受的盐的制备方
51.权利要求50的方法，其中步骤(a)中的式3的胺在原位由胺盐酸盐生成。
52.权利要求51的方法，其中Ra是氢或TBDMS。
53.权利要求52的方法，其中Ra是TBDMS。
54.权利要求50的方法，其中步骤(a)在极性非质子溶剂中、在叔胺碱的存在下进行。
55.权利要求M的方法，其中步骤(a)在乙腈中、在三乙胺的存在下进行。
56.权利要求50的方法，其中步骤(a)的反应温度是约75°C-约85°C。
57.权利要求50的方法，其中反应时间是约2-约30小时。
58.权利要求50的方法，其中步骤(b)在极性质子溶剂中、在钯催化剂的存在下进行。
59.权利要求58的方法，其中步骤(b)中的溶剂包括甲醇或乙醇。
60.权利要求50的方法，其中步骤(b)在极性质子溶剂中、在!^e和!^eSO4或Si和AcOH 的存在下进行。O2NH2N(c)使式2c的胺与式Id的酸反应，得到式(Ic)的化合物
61.权利要求50的方法，其中所述极性溶剂是水。
62.权利要求50的方法，其中步骤(c)在溶剂中、在0-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N， N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU)和三乙胺的存在下或在溶剂中在丙基膦酸环酐 (T3P )和吡啶的存在下进行。
63.权利要求62的方法，其中步骤(c)中的溶剂包括N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯或2-甲基四氢呋喃。
64.权利要求62的方法，其中Ra是氢或TBDMS。
65.权利要求64的方法，其中Ra是TBDMS。
66.权利要求50的方法，所述方法还包括脱保护反应，此时环A是
67.化合物，所述化合物为
68.化合物，所述化合物为
69.式(IA)的化合物
70.式⑴的化合物
71.选自如下的化合物
全文摘要
本发明涉及囊性纤维化跨膜传导调节因子(“CFTR”)的调节剂、其组合物及其方法。本发明还涉及使用CFTR的调节剂(I)或其药学上可接受的盐治疗疾病的方法其中，环A选自
文档编号C07D451/02GK102227424SQ200980147862
公开日2011年10月26日 申请日期2009年10月23日 优先权日2008年10月23日
发明者A·斯利纳, D·赫利, F·范古尔, H·宾奇, L·T·D·范宁, M·M·D·努马, M·波特费尔德, P·D·J·格鲁特纽易斯, U·谢斯, X·杨 申请人:沃泰克斯药物股份有限公司