专利名称：一种富集纯化淫羊藿中淫羊藿苷的方法
技术领域：
本发明属于天然有机化学领域，涉及一种淫羊藿苷的纯化方法，特别是涉及一种 利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊藿苷的方法。
背景技术：
淫羊藿别名仙灵脾、三枝九叶草、肺经草、牛角花等，为小檗科植物心叶淫羊 藿，淫羊藿，柔毛淫羊藿的干燥地上部分。淫羊藿的叶和茎中含淫羊藿甙(Icariin)、淫 羊藿次甙(Icariside)、去氧甲基淫羊藿甙(des-0-Methylicariin)、β-去水淫羊藿素 (β-anhy-Droicaritin)、淫羊藿糖甙(Epimedoside)Α、B、C、D、E.具有雄性激素样作用，抗 衰老作用，病可对免疫系统和心血管系统起到一定的作用。淫羊藿苷为箭叶淫羊藿、柔毛淫羊藿、巫山淫羊藿等干燥茎叶提取物，经科学研究 及临床应用证明，淫羊藿苷具有增加心脑血管血流量、促进造血功能、免疫功能及骨代谢， 还具有补肾壮阳、抗衰老等功效。近年来，人们发现天然植物淫羊藿中含有大量的淫羊藿 苷，由于其原料淫羊藿来源较广，从中提取淫羊藿苷已取得了可喜进展，名称为“一种制备 高纯度淫羊藿甙的方法”的专利申请中便公开了将淫羊藿用高速逆流法分离纯化淫羊藿苷 工艺流程。上述专利文献中的淫羊藿苷提取工艺主要是经过提取、高速逆流法分离等步骤 提取而成，虽然最后的淫羊藿苷醇度很高，但其工艺本身耗费大，实际应用效果远远不如间 歇蒸馏_大孔吸附树脂耦合法处理后在进行硅胶柱层析分离的效果。
发明内容
本发明的目的在于克服常规技术提取率相对较低、提取纯度低等缺点，提供一种 利用间歇蒸馏_大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊藿苷的方法。为实现上述目的，本发明采用的技术方案是一种利用间歇蒸馏_大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊藿苷的方法，其 步骤如下(1)将干淫羊藿按料乙醇=1 6的比例加热至沸腾，回流提取2次，每次4h;(2)将提取液混合，抽滤，减压浓缩回收乙醇得初提物；(3)将所得初提物用纯化水萃取，调PH2. 0 2. 5，静置，抽滤，得淫羊藿苷粗提 物；(4)将所得淫羊藿苷粗提物用大孔吸附树脂进行吸附；(5)用不同浓度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集淫 羊藿苷各阶段洗脱液；(6)将淫羊藿苷各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得淫羊藿苷半成品，其含量为35% 以上；(7)将所得淫羊藿苷半成品上硅胶层析柱，并以石油醚，氯仿以不同体积比例进行 洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集淫羊藿苷各阶段洗脱液；
(8)将所收集的淫羊藿苷洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得淫羊藿苷， 其含量在95%以上。所述的步骤(1)中，淫羊藿粉碎后过40 80目筛在进行乙醇回流提取。所述的步骤(1)中，乙醇得浓度为75 85% ；
所述的步骤(1)中，提取的方法为浸泡法、回流提取法、渗漉法、煎煮法、连续提取 法中的一种或一种以上。所述的步骤(3)中，加入纯化水的体积为淫羊藿粉体积的6倍；调节PH值所用的 酸为盐酸。所述的步骤(4)中，所用的大孔吸附树脂为天津南开大学所产生的X-5、NKA-9、 S-8、D 3520、D4006、H103、D4020、AB-8H和NKA-II型树脂中的一种，吸附为静态吸附或动 态吸附。所述的步骤(5)中，所述的洗脱为用30 90%的乙醇进行洗脱。所述的步骤(5)和(7)中，所采取的检测方法均为薄层色谱法跟踪检测。所述的步骤(7)中所采取的石油醚与氯仿的的体积为1 7 1。本发明应用间歇蒸馏_大孔吸附树脂耦合法分离纯化淫羊藿苷，对淫羊藿苷的吸 附选择性良好，吸附快解析也快，吸附容量较大；提取方便快捷，原料来源丰富，生产成本低 廉，分离效果明显，提取纯度高，可以得到含量35%以上的淫羊藿苷半成品和含量95%以 上的淫羊藿苷终产品，克服了常规提取率相对较低、提取纯度低且消耗过大的缺点。本发明选用理化性质稳定、表面积较大、交换速度较快、机械强度高、抗污染能力 强、热稳定性好的大孔吸附树脂，不容于酸、碱及有机媒，对有机物选择性较好，不受无机 盐类及强离子低分子化合物存在的影响，可以通过物理吸附从溶液中有选择地吸附淫羊藿 苷，吸附快、解析也快，吸附容量较大。
具体实施例方式实施例1 一种利用间歇蒸馏_大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊藿苷 的方法，其步骤如下(1)将干淫羊藿粉碎后过60目筛，将干淫羊藿按料75%乙醇=1 6的比例回 流提取2次，每次4h;(2)将提取液混合，抽滤，减压浓缩回收乙醇得初提物；(3)将所得初提物用纯化水萃取，调PH2. 0，静置，抽滤，得淫羊藿苷粗提物；(4)将所得淫羊藿苷提物用大孔吸附树脂层析柱上进行吸附，所用的大孔树脂为 天津南开大学所生产的NKA-II型树脂；(5)用30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇在大孔吸附树脂层柱中依
次进行梯度洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集淫羊藿苷各阶段洗脱液；(6)将淫羊藿苷各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得到含量为35.8%淫羊藿苷半成
P
m ；(7)将所得淫羊藿苷半成品上硅胶层析柱，并用石油醚、氯仿依次以1 1、2 1、 3 1、4 1、5 1、6 1、7 1的体积比进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集淫羊 藿苷各阶段洗脱液；
(8)将所收集的淫羊藿苷洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得到含量
95.4%淫羊藿苷。实施案例2 —种利用间歇蒸馏_大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊藿苷的方法，其步骤如下(1)将干淫羊藿粉碎后过80目筛，将干淫羊藿按料85%乙醇=1 6的回流提 取2次，每次4h;(2)将提取液混合，抽滤，减压浓缩回收乙醇得初提物；(3)将所得初提物用纯化水萃取，调PH2. 3，静置，抽滤，得淫羊藿苷粗提物；(4)将所得淫羊藿苷粗提物用大孔吸附树脂进行吸附，所用的大孔树脂为天津南 开大学所生产的D4006型树脂；(5)用30%、50%、70%、90%的乙醇在大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟 踪检测，收集淫羊藿苷各阶段洗脱液；(6)将淫羊藿苷各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得到含量36. 淫羊藿苷半成品；(7)将所得淫羊藿苷半成品上硅胶层析柱，并用石油醚、氯仿依次以1 1、2 1、 3 1、4 1、5 1、6 1、7 1的体积比进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集淫羊 藿苷各阶段洗脱液；(8)将所收集的淫羊藿苷洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得到含量
96.3%淫羊藿苷。实施案例3 —种利用间歇蒸馏_大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊藿 苷的方法，其步骤如下(1)将干淫羊藿粉碎后过40目筛，将干淫羊藿按料80%乙醇=1 6的比例回 流提取2次，每次4h;(2)将提取液混合，抽滤，减压浓缩回收乙醇得初提物；(3)将所得初提物用纯化水萃取，调PH2. 5，静置，抽滤，得淫羊藿苷粗提物；(4)将所得淫羊藿苷粗提物用大孔吸附树脂层析柱子、上进行吸附，所用的大孔树 脂为天津南开大学所生产的NKA-9型树脂；(5)用40%、60%、80%的乙醇在大孔吸附树脂层析柱子中依次进行梯度洗脱，用 薄层色谱法跟踪检测，收集淫羊藿苷各阶段洗脱液；(6)将淫羊藿苷各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得到含量36. 5%淫羊藿苷半成品；(7)将所得淫羊藿苷半成品上硅胶层析柱，并用石油醚、氯仿依次以1 1、2 1、 3 1、4 1、5 1、6 1、7 1的体积比进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集淫羊 藿苷各阶段洗脱液；(8)将所收集的淫羊藿苷洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得到含量 96. 8%淫羊藿苷。
权利要求
1.一种利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂偶合法富集纯化淫羊藿中淫羊藿苷的方法，其特 征在于，其步骤如下(1)将干淫羊藿按料乙醇=1 6的比例用回流提取2次，每次4h ；(2)将提取液混合，抽滤，减压浓缩回收乙醇得初提物；(3)将所得初提物用纯化水萃取，调PH2.0 2. 5，静置，抽滤，得淫羊藿苷粗提物；(4)将所得淫羊藿苷粗提物用大孔吸附树脂进行吸附；(5)用不同浓度乙醇水溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，收集淫羊藿苷各阶段洗脱液；(6)将淫羊藿苷洗脱液浓缩回收洗脱剂，得淫羊藿苷半成品；(7)将所得淫羊藿苷半成品上硅胶层析柱，并以石油醚、氯防以不同体积比进行洗脱， 收集淫羊藿苷各阶段洗脱液；(8)将所收集到得淫羊藿苷洗脱液进行精制的淫羊藿苷。
2.根据权利要求1或2所述的利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中 淫羊藿苷的方法其特质是所述的步骤(1)中，淫羊藿粉后过40 80目师再进行乙醇回流 提取。
3.根据权利要求1或2所述的利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯淫羊藿中淫 羊藿苷的方法，其特征是在所属的步骤(1)中，所用乙醇得醇度为75 85%。
4.根据权利要求3所述的利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊 藿苷的方法，其特征是所述的步骤(1)中，提取的方法为浸渍法、回流提取法 渗漉法、煎 煮法、连续提取法中的一种或一种以上。
5.根据权利要求3所述的利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊 藿苷的方法，其特征是；所属的步骤(3)中，加入纯化水的体积为淫羊藿粉体积的6倍。
6.根据权利要求5所述的利用用歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊 藿苷的方法，其特征是在所述的步骤(3)中，调节PH值所用的酸为盐酸。
7.根据权利要求6所述的利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊 藿苷的方法，其特征是步骤中所述吸附为静态吸附或动态吸附步骤(5)中所述的洗 脱为用30 90%的乙醇水溶液进行洗脱。
8.根据权利要求7所述的利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊 藿苷的方法，其特征是在步骤( 和(7)中，洗脱过程中采用薄层色谱法跟踪检测。
9.根据权利要求8所述的利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊 藿苷的方法，其特征是步骤(7)中所采用石油醚与氯仿得体积比为1 7 1。
10.根据权利要求7所述的利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫 羊藿苷的方法，其特征是在步骤(8)中，采用活性炭脱色、重结晶方法进行精制。
全文摘要
本发明属于天然有机化学领域，涉及一种利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法富集纯化淫羊藿中淫羊藿苷的方法。其特点是利用间歇蒸馏-大孔吸附树脂耦合法分离纯化淫羊藿苷，对淫羊藿苷的吸附选择性良好，吸附快解析也快，吸附容量较大；提取方便快捷，原料来源丰富，生产成本低廉，分离效果明显，提取纯度高，可以得到含量35％以上的淫羊藿苷半成品和含量95％以上的淫羊藿苷终产品，克服了常规提取率相对较低、提取纯度低的缺点。本发明选用理化性质稳定、表面积较大、交换速度较快、机械强度高、抗污染能力强、热稳定性好的大孔吸附树脂，可以通过物理吸附从溶液中有选择地吸附淫羊藿苷，吸附快、解析也快，吸附容量较大。
文档编号C07H1/08GK102070688SQ20101062312
公开日2011年5月25日 申请日期2010年12月20日 优先权日2010年12月20日
发明者姚德利, 姚德坤, 姚航, 郑君, 闫峰, 黄运生 申请人:大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司