专利名称：促进细胞凋亡和抑制转移的方法
促进细胞凋亡和抑制转移的方法相关串请本申请要求2009年8月12日提交而申请号为61/233，351的美国专利申请的优先权，该专利申请的内容通过参考引用在此全部并入本文。政府咨助本发明得到了美国国家健康研究院(NIH)资助项目CA107623和CA102310以及美国陆军医学研究(US Army Medical Research)资助项目0C080051所提供的政府支持。美国政府对于本发明拥有一定的权利。
背景技术：
细胞凋亡(Apoptosis)是一种细胞现象，其中细胞应答内部生化信号而经历程序性死亡。通常，细胞凋亡对于生物体来说是有利的，涉及发育和分化。人们认为，在某些情况下，细胞凋亡的失败会导致肿瘤增殖。肿瘤的增殖和转移对于带有肿瘤的生物体来说是负面的过程。肿瘤转移是导致癌症相关死亡的首要原因。肿瘤细胞能够以锚地非依赖性(anchorage-independent)方式生长。这部分地是经由绕过整合素细胞表面受体控制的正常生长限制的生存信号来介导。粘附斑激酶(Focal adhesion kinase, FAK)是一种细胞质的酪氨酸激酶,其被募集到整合素介导的基质附着位点，在此FAK的活性被认为涉及细胞存活、迁移和侵袭的控制。FAK与整合素结合并调节各种细胞的包括生长、存活和迁移。FAK作为信号激酶并且还作为在肿瘤细胞内细胞粘附相关的支架，调整各种不同的细胞支架相关蛋白例如pl30Cas和桩蛋白的位点募集和磷酸化作用。参见SchlaepferDD, Hauck CR，Sieg DJ.，Signaling through focal adhesion kinase，Prog Biophys MoIBiol 1999,71 :435-78 ；Zouq NK,Keeble JA,Lindsay J，Valentijn AJ,Zhang L，Mills D，et al. ， FAK engages multiple pathways to maintain survival of fibroblasts andepithelia !differential roles for paxillin and pl30Cas，J Cell Sci 2009，122 :357-67.在Y379位的增加FAK自磷酸化是FAK激活的一种标记。整合素介导的Y397FAK磷酸化作用能够促使Src家族酪氨酸激酶结合到FAK并且能够引起FAK介导的c-Src激活。参jALWu L，Bernard-TrifiIo JA,Lim Y，Lim ST,Mitra SK,Uryu S，et al. ,Distinct FAK-Srcactivation events promote alpha5betal and alpha4betal integrin-stimulatedneuroblastoma cell motility，Oncogene 2008，27 :1439-48.由于 FAK 和 c_Src 两者都能够使其共同下游目标比如pl30Cas磷酸化，从而不甚清楚是否FAK和/或c_Src的抑制作用会对下游目标的磷酸化过程会产生不同的效果。参见Defilippi P，Di Stefano P，Cabodi S. pl30Cas a versatile scaffold in signaling networks，Trends Cell Biol2006,16 :257-63.在鼠类4H乳腺癌细胞中，已经表明FAK促进侵袭和转移的细胞表型。参见 Mitra SK, Lim ST, Chi A，Schlaepfer DD, Intrinsic focal adhesion kinaseactivity controls orthotopic breast carcinoma metastasis via the regulationof urokinase plasminogen activator expression in a syngeneic tumor model，Oncogene 2006，25 :4429-40.在侵袭性的人类肿瘤中 FAK表达增高(Mitra SK, SchlaepferDD.，Integrin-regulated FAK-Src signaling in normal and cancer cells，Curr OpinCell Biol 2006,18 :516-23),而且，FAK 信号促进定向的细胞运动(Mitra SK, Hanson DA,Schlaepfer DD. ，Focal adhesion kinase in command and control of cell motility,Nat Rev MoI Cell Biol 2005，6 :56-68 ；Tomar A，Schlaepfer DD.，Focal adhesionkinase !switching between GAPs and GEFs in the regulation of cell motility,CurrOpin Cell Biol 2009，21 :676-83).针对FAK的ATP竞争性小分子抑制剂已由Novartis (TAE-226)和Pfizer (PF-573，228，PF-562,271)开发出来。此外，有些化合物(如Y15)被确认会阻挡主要FAK Tyr-397 自磷酸化以及Six家族激酶结合到FAK的通路。参见，例如Shi Q，Hjelmeland AB, KeirST, Song L， Wickman S， Jackson D， et al. ， A novel low-molecular weight inhibitorof focal adhesion kinase， TAE226， inhibits glioma growth, MoI Carcinog 2007,46 488-96 ；Slack-Davis JK,Martin KH,Tilghman RW,Iwanicki M，Ung EJ,Autry C，et al.，Cellular characterization of a novel focal adhesion kinase inhibitor， J BiolChem 2007,282 :14845-52 ；Roberts WG, Ung E，Whalen P，Cooper B，Hulford C，AutryC， et al. ， Antitumor activity and pharmacology of a selective focal adhesionkinase inhibitor，PF-562，271，Cancer Res 2008，68 :1935-44 ;and Golubovskaya VM,Nyberg C，Zheng M，Kweh F，Magis A，Ostrov D，et al.，A small molecule inhibitor，1，2，4，5—benzenetetraamine tetrahydrochloride， targeting the y397 site of focaladhesion kinase decreases tumor growth,J Med Chem 2008,51 :7405-16.FAK的各种抑制剂，包括PND-1186，已披露于PCT专利申请PCT/US2008/003205，其提交于2008年3月10日并且公布为W02008/115369，该申请的内容通过参考引用全部并入本文。PND-1186的制备已描述于这份公布的专利申请。
发明内容
本发明旨在提供一种通过活体，比如在患者体内，促进细胞凋亡或抑制患者细胞转移，或者两者兼而有之，包括对有需要的患者施用有效剂量的粘附斑激酶的小分子抑制齐U。例如，所述抑制剂可以是下式所示的化合物
权利要求
1.一种促进患者肿瘤中细胞凋亡或抑制患者体内肿瘤转移或两者兼有的方法，其包括将有效量的粘附斑激酶(Focal Adhesion Kinase)抑制剂施用于有需要的患者，其中所述抑制剂是下式所述的化合物
2.根据权利要求I所述的方法，其中所述促进细胞凋亡对于肿瘤患者导致抑制肿瘤生长，抑制肿瘤转移或促进肿瘤细胞凋亡，或其任何组合。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述肿瘤是恶性肿瘤。
4.根据权利要求2所述的方法，其中所述肿瘤包括乳腺癌或卵巢癌。
5.根据权利要求I所述的方法，其中所述抑制剂是以包含药学上可接受的赋形剂的制剂施用于所述患者。
6.根据权利要求I所述的方法，其中所述抑制剂是通过口服给药施用于所述患者。
7.根据权利要求I所述的方法，其中所述抑制剂是通过肠外给药施用于所述患者。
8.根据权利要求I所述的方法，其包括在一定的时间里以能够提供有益效果的持续时间和频率对所述患者多次地施用所述抑制剂。
9.根据权利要求I所述的方法，其进一步包括将有效量的第二药物施用于患者。
10.一种粘附斑激酶(Focal Adhesion Kinase)抑制剂用于制备药物的用途,其中所述药物用来促进肿瘤细胞中的细胞凋亡，或抑制患者体内的肿瘤转移，或两者兼而有之，其中所述抑制剂包括如下式所述的化合物
11.根据权利要求10所述的用途，其中所述促进细胞凋亡导致抑制肿瘤生长，或抑制肿瘤转移，或促进肿瘤细胞凋亡，或其任何组合。
全文摘要
本发明提供一种在肿瘤细胞中促进细胞凋亡的方法，通过施用有效量的粘附斑激酶(FAK)抑制剂具有抑制肿瘤生长，或抑制肿瘤转移，或促进肿瘤细胞凋亡，或其任何组合的效果。所述抑制剂是一种小分子有机化合物。因此，所述粘附斑激酶抑制剂能够用于治疗肿瘤例如恶性肿瘤。例如，在有关乳腺癌和卵巢癌的鼠类实验模型中施用FAK抑制剂PND-1186具有抑制肿瘤细胞之效果。
文档编号C07D413/04GK102648197SQ201080045280
公开日2012年8月22日 申请日期2010年8月12日 优先权日2009年8月12日
发明者大卫·施莱佛 申请人:铂雅制药公司