一种蚕蛹活性多肽晒后修复凝露及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及护肤品【技术领域】，特别涉及一种蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，含有蚕蛹活性多肽、马齿笕提取物、石榴籽提取物、银耳多糖、玫瑰精油、乳酸链球菌素、凝胶基质、保湿剂、渗透剂、三乙醇胺、乙二胺四乙酸二钠、防腐剂、余量为纯净水或生理盐水。克服了蚕蛹蛋白及蚕蛹活性多肽本身所具有的缺陷，制备所得的晒后修复凝露无异味，容易为皮肤所吸收，能有效减少日晒所造成生物大分子的损伤，减少日晒所造成的黑色素沉积、晒斑、皮肤细纹等多种肌肤问题，降低紫外线损伤致癌的可能性，同时防止皮肤脱水，促进细胞生长、分化、增殖，保持皮肤的弹性和肤质，具有多重的晒后修复作用。
【专利说明】一种蚕蛹活性多肽晒后修复凝露及其制备方法
[0001]【技术领域】
本发明涉及护肤品【技术领域】，特别涉及一种蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，还涉及蚕蛹活性多肽晒后修复凝露的制备方法。
[0002]【背景技术】
太阳辐射到地面的紫外线包括波长为290nm-320nm的UV-B和320nm-400nm的UV-A。裸露的皮肤受紫外线照射，皮肤表层会吸收UVB产生自由基，自由基能破坏DNA、胶原蛋白等各种生物大分子，从而侵蚀和破坏皮肤表层细胞，导致皮肤衰老、黑色素沉积、晒斑等各种皮肤问题。而UVA比UVB具有更强的皮肤穿透力，能够显著増加UVA的急性损伤，増加了皮肤癌发生的可能性。
[0003]自由基是导致皮肤衰老，引起各类皮肤问题的重要原因。大量研究已经证明，蛋白水解所产生的小分子活性肽具有非常强的自由基清除功能，尤其是以蚕蛹蛋白为代表的昆虫蛋白。目前现有的晒后修复产品，主要是以补水保湿为主，无法从根本上解决日晒所导致的自由基累积和DNA损伤等深层次问题，从而无法从根源上抑制日晒所引起的皮肤衰老、色斑等，修复效果并不明显。将活性多肽应用于晒后修复产品中，可以有效清除紫外线照射所产生的自由基，修复DNA、胶原蛋白等生物大分子的损伤，參与和改善皮肤代谢，刺激胶原蛋白生成，从而有效减少紫外线照射所产生的皮肤损伤，减缓皮肤衰老，抑制黑色素生成，降低皮肤癌发生几率，維持肌肤健康。
[0004]蚕蛹(silkworm pupa)，为蚕蛾科昆虫家蚕蛾的蛹，是丝绸エ业的主要副产品。我国是丝绸エ业大国，每年仅缫丝厂下脚料就有几十万吨，蚕蛹资源极为丰富，但由于缺乏深加工技术，大部分蚕蛹都作为饲料或肥料使用，甚至被直接丢弃，资源利用率和附加值低，造成了极大的浪费。蚕蛹含多种活性物质，其中蚕蛹蛋白含量约为干蚕蛹的45%-50%，是ー种具有极大开发潜カ的天然蛋白资源。作为ー种昆虫蛋白，蚕蛹蛋白的氨基酸组成非常合理，且具有很高的生物活性。而将蚕蛹蛋白进ー步水解获得的活性多肽，具有比蛋白本身更强的生物活性，蚕蛹多作为饲料用，浪费了其中的活性成分，如果能将其应用于化妆品生产中，利用其具有的强自由基清除活性的特点，必能提高其附加值，带来巨大的经济效益。
[0005]将蚕蛹应用于化妆品生产行业，有以下需要克服和解决的问题:1.蚕蛹为缫丝后的副产物，一般具有较大异味，如果将其应用于化妆品或者是其它的食品制备中，很难去除其异味；2.蚕蛹蛋白多为球蛋白，球蛋白的溶解性差，如将其直接应用于化妆品制备中，不容易为皮肤所吸收；须将其转变为可溶性的易于为皮肤所吸收的物质；3.蚕蛹蛋白为高蛋白含量的物质，由于部分人群对高蛋白过敏，如果将其中所含的蛋白成分直接应用于化妆品行业，也会导致部分使用人群产生过敏现象。因此，将具有生理活性的蚕蛹蛋白应用于化妆品行业，亟待解决上述的问题。
[0006]
【发明内容】
为了解决为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种过敏率低、活性成分较大限度的保留且易于为人休所吸收的蚕蛹活性肽晒后修复凝露。
[0007]本发明还提供了所述蚕蛹活性肽晒后修复凝露的制备方法。[0008]本发明是通过以下措施实现的:
一种蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，原料的重量百分数如下:
蚕蛹活性多肽5%-15%，
马齿笕提取物1%_3%，
石榴籽提取物1%_3%，
银耳多糖4%-10%，
玫瑰精油1%_2%，
乳酸链球菌素0.05%-0.1%，
凝胶基质0.2%-1.5%，
保湿剂8%-15%，
渗透剂0.5%-1%，
三こ醇胺 0.5%-1.5%,
こ二胺四こ酸二钠0.01%-0.05%,
防腐剂 0.05%-0.1%，
余量为纯净水或生理盐水。
[0009]所述的蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，原料的重量百分数如下: 蚕蛹活性多肽8%-13%，
马齿笕提取物1%_2%， 石榴籽提取物1%_2%，
银耳多糖5%-8%，
玫瑰精油1%_2%，
乳酸链球菌素0.05%-0.08%,
凝胶基质0.5%-1%，
保湿剂8%-15%，
渗透剂0.5%-1%，
三こ醇胺 0.5%-1.5%,
こ二胺四こ酸二钠0.02%-0.04%,
防腐剂 0.05%-0.1%，
余量为纯净水或生理盐水。
[0010]所述的蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，原料的重量百分数如下: 蚕蛹活性多肽13%,
马齿笕提取物1%，
石榴籽提取物1%，
银耳多糖5%，
玫瑰精油1%，
乳酸链球菌素0.05%,
凝胶基质1%，
保湿剂8%，
渗透剂0.5%，三乙醇胺0.5%，
乙二胺四こ酸二钠0.02%，
防腐剂 0.05%,
余量为纯净水或生理盐水。[0011]上述使用的马齿笕提取物、石榴籽提取物均为醇提取物。
[0012]所述的蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，优选蚕蛹活性多肽是通过以下步骤得到的:
(1)配制蚕蛹蛋白水溶液，加入木瓜蛋白酶酶解，加酶量8000-60000IU/g蚕蛹蛋白，酶解结束后灭酶得到酶解液；
(2)调节酶解液pH至8.0~11.0，加入Esperase蛋白酶，加酶量0.075-0.225KNPU/g蚕蛹蛋白，酶解；
(3)步骤(2)的产物灭酶后过滤除去不溶物，滤液过超微滤膜，收集分子量为3000Da以下的滤液；
(4)滤液经脱色、脱盐、浓缩、干燥，得蚕蛹蛋白多肽。
[0013]优选步骤(1)中酶解温度45~60°C，pH值6.5~8.0，酶解时间2~4h。
[0014]优选步骤(2)中酶解温度45で~60°C，时间2~4h。
[0015]所述的蚕蛹活性多肽嫩肤面膜，
所述的凝胶基质为卡波姆940、羧甲基纤维素钠和壳聚糖基质中的ー种以上；
所述的保湿剂为甘油、透明质酸、辛酸甘油三酷、葡聚糖苷、聚氨基葡聚糖和卵磷脂中的ー种以上；
所述的渗透剂为氮酮和葡聚糖硫酸酷中的ー种以上；
所述的防腐剂为对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酷、异丙醇和丙二醇中的ー种以上。
[0016]所述的蚕蛹活性多肽晒后修复凝露的制备方法，包括如下步骤:
(1)将保湿剂、滲透剂、こ二胺四こ酸二钠、防腐剂加入容器内，加入纯净水或生理盐水，搅拌溶解，然后加入凝胶基质，继续搅拌至凝胶基质溶胀均匀，加热至70°C -80°C，保温30-40分钟，搅拌均匀得混合液I ;
(2)混合液冷却至55-60°C，加入三こ醇胺，搅拌均匀得混合液2；
(3)混合液2冷却至40-45°C，依次将蚕蛹活性多肽、马齿笕提取物、石榴籽提取物、银耳多糖、乳酸链球菌素加入，搅拌溶解后，保持温度，继续搅拌15-20分钟得混合液3 ；
(4)混合液3降温至35°C，加入玫瑰精油，搅拌均匀即得。
[0017]由于蚕蛹蛋白中含有大量的球蛋白，球蛋白的水溶性差，将其直接应用于化妆品的生产中，球蛋白与化妆品中其它的成分如保湿剂、滲透剂等很难相溶，而且即使与上述的物质较好的融合，也不易为皮肤所吸收，其活性成分不能有效的利用。
[0018]另外，由于部分人群对高蛋白的蚕蛹蛋白过敏，如直接将蚕蛹蛋白应用于晚霜的生产中，其过敏因素仍然未消除，以化妆品形式出现的产品中含有的易引起皮肤过敏的成分依然会继续使皮肤过敏；
因此，为了解决这ー问题，本发明将蚕蛹蛋白水解为小分子的多肽，并且只取用其中分子量小于3KDa的部分，以多肽形式生产出来的化妆品，其性能得到了较大的改变，水溶性大大增强，易干与其它的化妆品常用辅料生产出易于为人体皮肤所吸收的化妆品；另外由于水解后的小分子多肽，不同于原来的大分子量的高蛋白，以小分子多肽为原料制备得到的化妆品，消除了过敏因素，使用人群不再产生过敏现象；
与动物源性胶原多肽相比，蚕蛹活性多肽不仅氨基酸种类、生物活性等毫不逊色，且具有无病原隐患的优势，适合应用于护肤品；
本产品中添加的石榴籽提取物、马齿苋提取物也具有非常强的抗氧化活性，这两种天然提取物中所富含的活性成分，能有效降低胶原蛋白酶对皮肤胶原蛋白的降解作用，从而达到保持皮肤弹性，维持肌肤年轻态的目的。
[0019]凝露中添加的乳酸链球菌素是另ー种食品级多肽产品，是ー种天然防腐剤，可以有效减少因产品营养丰富所引起的微生物快速繁殖。
[0020]凝露中中添加的银耳多糖，是ー种植物来源保湿成分，可有效减少干燥、炎热对皮肤的伤害，防止皮肤脱水，同时也能促进皮肤细胞中SOD酶的活性，与蚕蛹活性多肽起到协同抗氧化的作用。
[0021]本发明的另ー个创新点在于，将蚕蛹蛋白多肽与玫瑰精油相结合，由于蚕蛹蛋白有较大的异味，如果不消除异味，很难突破蚕蛹蛋白制备化妆品的瓶颈；水解蚕蛹蛋白为多肽后，虽然能消除绝大部分的异味，但是蚕蛹活性多肽仍含有较淡的腥味，玫瑰精油中含有芳樟醇、橙花醇、丁香油酚、甲基丁香油酚、玫瑰醚这些物质可以很好的消除蚕蛹蛋白多肽中所残留的异味，产生令人愉悦的香气，克服由于蚕蛹蛋白多肽中所含异味的缺陷；
另外蚕蛹蛋白虽然水解为多肽，但是该多肽还是保留了原蛋白的某些特性，例如，易腐性，由于玫瑰精油中含有3 -苯こ醇和丁香油酚，这两物质具有较好的抗菌和抑郁及防腐性能，克服了蚕蛹活性多肽易生菌易腐的缺陷；
本发明充分利用天然蚕蛹蛋白酶 解产物的强抗氧化活性，将其应用于护肤产品中，和将其应用于饲料中相比，提高了其价值，也提高了其副加值。
[0022]本发明的有益效果:
将有异味、水溶性差、不易于为皮肤所吸收的蚕蛹蛋白水解为蚕蛹活性多肽，再将蚕蛹活性多肽与其它的组分相混合，制备得活性多肽晒后修复凝露，克服了蚕蛹蛋白及蚕蛹活性多肽本身所具有的缺陷，制备所得的晒后修复凝露无异味，容易为皮肤所吸收，凝露中所含的多种天然活性与蚕蛹蛋白多肽之间协同增效，对皮肤中的自由基清除具有显著的效果，能有效减少日晒所造成生物大分子的损伤，減少日晒所造成的黑色素沉积、晒斑、皮肤细纹等多种肌肤问题，降低紫外线损伤致癌的可能性，同时防止皮肤脱水，促进细胞生长、分化、増殖，保持皮肤的弹性和肤质，具有多重的晒后修复作用。
【具体实施方式】
[0023]下面结合具体实施例对本发明作更进ー步的说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制本发明。
[0024]实施例1
(一)蚕蛹活性多肽的制备:
(1)用去离子水配制浓度12%的蚕蛹蛋白溶液，加入木瓜蛋白酶，加酶量20000IU/g蚕蛹蛋白，，酶解温度55°C，pH值7.0，酶解时间3h，酶解完成后92°C灭酶13min ；
(2)第一步酶解完成后，调节酶解液pH至9.0,加入Esperase蛋白酶，加酶量0.15KNPU/g蚕蛹蛋白，酶解3h，酶解温度55 °C，酶解完成后92°C灭酶13min ；
(3)灭酶后的物料过滤除去不溶物，得淡黄色澄清透明溶液，此多肽溶液过超微滤膜，收集分子量为3000Da以下的滤液；
(4)所得多肽溶液加入4%活性炭吸附脱色，经大孔树脂DA201-C脱盐处理后，真空浓缩，冷冻干燥获得蚕蛹活性多肽，备用。
[0025](二)蚕蛹活性多肽晒后修复凝露的制备
(1)将甘油8份、葡聚糖硫酸酷0.5份、こ二胺四こ酸二钠0.02份、对羟基苯甲酸甲酯0.05份加入容器内，加入69.88份的纯净水或生理盐水，搅拌溶解，然后加入1份卡波姆940，继续搅拌至凝胶基质溶胀均匀，加热至75V，保温35分钟，搅拌均匀；
(2)将上述混合液冷却至57°C，缓慢加入0.5份三こ醇胺，搅拌均匀；
(3)冷却至42°C，依次将蚕蛹活性多肽13份、马齿笕提取物1份、石榴籽提取物1份、银耳多糖4份、乳酸链球菌素0.05份加入，搅拌溶解后，保持温度，继续搅拌17分钟；
(4)混合液降温至35°C，加入玫瑰精油1份，搅拌均匀，待冷却后装入玻璃或者不锈钢容器，即为成品。
纯净水或生理盐水的加入量为使整个配方凑齐100份为标准。以下实施例同。
[0026]对比实施例1
与实施例1相比，将蚕 蛹活性多肽替换为未经酶解的蚕蛹蛋白，其余同实施例1完全一致，制备修复凝露。
[0027]对比实施例2
与实施例1相比，将实施例1制备的蚕蛹活性多肽替换为其他方法制备的蚕蛹活性多肽，其余同实施例1完全一致，制备修复凝露。
[0028]其他方法制备的蚕蛹活性多肽，制备方法同《食品科学》2008，Vol 29，N0.11，《蚕蛹蛋白多肽液抗肿瘤作用的实验研究》第588-589页中所记载的方法。
[0029]人体使用实验研究
1、过敏实验
女性志愿者60名(选择无过敏反应者)，年龄23-40岁，随机分成三组，用蒸馏水或生理盐水浸湿ー块纱布，拧至半干，并折叠为4层约I平方厘米大小，将化妆品涂在纱布的一面，然后敷在前臂伸侧或背部正常皮肤上，再盖上1.5平方厘米不透气的玻璃纸或塑料薄膜，以胶布固定。经过24~48小时的观察，如果测试处骚痒或灼痛，表明该化妆品对皮肤有刺激性，则为阳性反应。
[0030]结果说明，按照本实施例一所制备的蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，对皮肤温和无刺激，其中所含的蚕蛹蛋白为经过双步酶解并超滤制备的小分子肽，过敏原结构已被破坏，不会引起过敏反应。
[0031]2、女性志愿者60名(选择无过敏反应者)，年龄23-40岁，随机分成三組，实施例1组20人，对比例1、2、3组各20人，试验期间，试验部位停用任何外用物和/或化妆品，受试者分别将受试样品和对比例1、2、3样品分别涂于面部，每天早中晚各一次，连续12周，在实验开始前后，肉眼观察受试人群晒斑数量，分别进行统计评分小组由2人组成，采用双盲法。
[0032]结果如下表所示:
【权利要求】
1.一种蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，其特征在于原料的重量百分数如下: 蚕蛹活性多肽5%-15%， 马齿笕提取物1%_3%， 石榴籽提取物1%_3%， 银耳多糖4%-10%， 玫瑰精油1%_2%， 乳酸链球菌素0.05%-0.1%， 凝胶基质0.2%-1.5%， 保湿剂8%-15%， 渗透剂0.5%-1%， 三こ醇胺 0.5%-1.5%, こ二胺四こ酸二钠0.01%-0.05%, 防腐剂 0.05%-0.1%， 余量为纯净水或生理盐水。
2.根据权利要求1所·述的蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，其特征在于原料的重量百分数如下: 蚕蛹活性多肽8%-13%， 马齿笕提取物1%_2%， 石榴籽提取物1%_2%， 银耳多糖5%-8%， 玫瑰精油1%_2%， 乳酸链球菌素0.05%-0.08%, 凝胶基质0.5%-1%， 保湿剂8%-15%， 渗透剂0.5%-1%， 三こ醇胺 0.5%-1.5%, こ二胺四こ酸二钠0.02%-0.04%, 防腐剂 0.05%-0.1%， 余量为纯净水或生理盐水。
3.根据权利要求1所述的蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，其特征在于原料的重量百分数如下: 蚕蛹活性多肽13%, 马齿笕提取物1%， 石榴籽提取物1%， 银耳多糖5%， 玫瑰精油1%， 乳酸链球菌素0.05%, 凝胶基质1%， 保湿剂8%，渗透剂0.5%， 三こ醇胺0.5%， こ二胺四こ酸二钠0.02%，
防腐剂 0.05%, 余量为纯净水或生理盐水。
4.根据权利要求1所述的蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，其特征在于马齿笕提取物和石榴籽提取物为醇提取物。
5.根据权利要求1所述的蚕蛹活性多肽晒后修复凝露，其特征在于所述蚕蛹活性多肽是通过以下步骤得到的: (I)配制蚕蛹蛋白水溶液，加入木瓜蛋白酶酶解，加酶量8000-60000IU/g蚕蛹蛋白，酶解结束后灭酶得到酶解液； (2)调节酶解液pH至8.0~11.0，加入Esperase蛋白酶，加酶量0.075-0.225KNPU/g蚕蛹蛋白，酶解； (3)步骤(2)的产物灭酶后过滤除去不溶物，滤液过超微滤膜，收集分子量为3000Da以下的滤液； (4)滤液经脱色、脱盐、浓缩、干燥，得蚕蛹蛋白多肽。
6.根据权利要求5所述的蚕蛹活性多肽嫩肤面膜，其特征在于步骤(1)中酶解温度45~60°C，pH值6.5~8.0，酶 解时间2~4h。
7.根据权利要求5或6所述的蚕蛹活性多肽嫩肤面膜，其特征在于步骤(2)中酶解温度45°C~60°C，时间2~4h。
8.根据权利要求1或5所述的蚕蛹活性多肽嫩肤面膜，其特征在于 所述的凝胶基质为卡波姆940、羧甲基纤维素钠和壳聚糖基质中的ー种以上； 所述的保湿剂为甘油、透明质酸、辛酸甘油三酷、葡聚糖苷、聚氨基葡聚糖和卵磷脂中的ー种以上； 所述的渗透剂为氮酮和葡聚糖硫酸酷中的ー种以上； 所述的防腐剂为对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酷、异丙醇和丙二醇中的ー种以上。
9.一种权利要求1-8所述的蚕蛹活性多肽晒后修复凝露的制备方法，其特征是包括如下步骤: (1)将保湿剂、滲透剂、こ二胺四こ酸二钠、防腐剂加入容器内，加入纯净水或生理盐水，搅拌溶解，然后加入凝胶基质，继续搅拌至凝胶基质溶胀均匀，加热至70°C -80°C，保温30-40分钟，搅拌均匀得混合液I ; (2)混合液冷却至55-60°C，加入三こ醇胺，搅拌均匀得混合液2； (3)混合液2冷却至40-45°C，依次将蚕蛹活性多肽、马齿笕提取物、石榴籽提取物、银耳多糖、乳酸链球菌素加入，搅拌溶解后，保持温度，继续搅拌15-20分钟得混合液3 ； (4)混合液3降温至35°C，加入玫瑰精油，搅拌均匀即得。
【文档编号】C07K1/34GK103520058SQ201310491350
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年10月18日 优先权日:2013年10月18日
【发明者】刘玮, 杜芳岭, 陈相艳, 刘曼丽, 刘丽娜, 徐同成, 陶海腾 申请人:山东省农业科学院农产品研究所