专利名称：N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种N-被护的α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的制备方法。
这种N-被护的α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯是制备α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的重要中间体。α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯具有优质的甜味，并且其甜度是蔗糖的约200倍，并且用作为食品甜味剂的需求越来越广泛。
α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯是一种由L-天冬氨酸和L-苯丙氨酸甲酯所构成的二肽化合物。迄今已披露了制备此化合物的多种方法，这些方法主要是化学方法。
一般采用N-被护的L-天冬氨酸酐作为起始物质。例如，已知有一种方法是将N-被护的L-天冬氨酸酐于一种有机溶剂中与L-苯丙氨酸甲酯进行缩合反应，然后用通常的方法将该保护基断掉，得到α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯(USP3786039)。另一种方法是将L-苯丙氨酸甲酯于一种惰性介质中与N-被护的L-天冬氨酸酐进行反应(GB708463)。
按照该方法，将N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐的乙酸乙酯溶液与L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐的乙酸乙酯溶液相混合。向该混合物中加入1N碳酸钠水溶液以便通过对L-苯丙氨酸甲酯的中和作用而促进上述反应。
关于不使用L-苯丙氨酸甲酯的方法，已知有一种方法是将N-甲酰-L-天冬氨酸酐于乙酸溶液中与L-苯丙氨酸进行缩合反应，然后于一种卤化氢水溶液存在下除掉该甲酰基团。然后用水、醇和该卤化氢水溶液处理该反应产物，进行酯化反应，并以其氢卤酸盐的形式离析出α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯(USP3933781)。
在惰性有机溶剂中，于一种碱存在下将N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐进行反应的方法也是已知的(USP3808190)。例如，将N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐溶解于乙酸乙酯中，然后向该溶液中加入碳酸钠或碳酸钾水溶液，进行该反应。
叔胺也可用作为促进该反应的碱。在这些情况下，也是使用L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐，并且于该有机溶剂中通过用碱的水溶液中和该盐酸盐来进行该反应。因此，不可避免地要出现这样一些缺点，就是L-苯丙氨酸甲酯中的酯基受该碱的水溶液作用而发生水解，还有在碱性条件下或由于叔胺的碱性条件下发生环化反应而生成副产物二酮哌嗪化合物，特别是由于水而引起N-被护的L-天冬氨酸酐的环破裂反应。
另方面，在一种溶剂中于乙酸或甲酸存在下使N-甲酰-L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯进行反应的方法也是已知的(EP227301)。
在USP4680403中，N-苄氧羰基-L-天冬氨酸于含乙酸酐的甲苯中转化为相应的酸酐，然后加入含有L-苯丙氨酸甲酯的甲苯溶液进行反应。
在这些方法中作为原料的L-苯丙氨酸甲酯通常是得自将L-苯丙氨酸与甲醇和一种无机酸例如盐酸进行反应，然后将所得的L-苯丙氨酸甲酯的无机酸盐加以中和。
然而，L-苯丙氨酸甲酯的游离胺受热不稳定，并且在大约中性条件，特别是当进行中和和萃取操作时，容易发生二聚反应而成为二酮哌嗪衍生物。另外的局限性是中和和萃取的收率不高，所以此方法的缺点是以昂贵的L-苯丙氨酸为基准，总收率不高。
本发明的目的是克服上述各常规方法中所提出的各项缺点，并提供一种制备N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的良好工业方法。
本发明的目的是提供一种制备N-被护α-L-苯丙氨酸甲酯的方法，该方法是使N-被护L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的一种无机酸盐进行反应。
本发明的目的还包括提供一种制备N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，该方法包括通过向N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的一种无机酸盐进行反应的产物中加入水，使N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯进行选择性结晶。
本发明的目的还包括提供一种制备N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，该方法是通过将N-被护的L-天冬氨酸转化为酸酐，然后将该酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的一种无机酸盐进行反应。
本发明的进一步目的是提供一种制备N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，该方法是利用由N-被护天冬氨酸与乙酸酐或光气反应所制得的N-被护L-天冬氨酸酐。
本发明者对于N-被护L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的反应进行了深入的研究，目的是提供一种适用于工业生产的方法。
在常规式N-被护L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的反应过程中，是通过将L-苯丙氨酸甲酯的无机酸盐进行中和、萃取和脱水处理而离析出L-苯丙氨酸甲酯。
本发明者发现了一种不需离析出L-苯丙氨酸甲酯来制备N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的新方法。也就是说，将L-苯丙氨酸甲酯的无机酸盐于下述物质存在下，与N-被护的L-天冬氨酸酐进行缩合反应;所述物质包括一种有机溶剂和一种有机羧酸的盐，或是一种有机羧酸和一种碱金属或一种碱土金属，或是这些金属的氢氧化物、氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐、或有机羧酸盐，或是碳酸铵或有机羧酸的铵盐。
本发明者还发现，当将苄氧羰基用于保护胺时，可以在上述反应完成后加入水，可使N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯进行选择结晶。
也就是说，本发明的一个方面是一种制备N-被护的α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，该方法包括将一种N-被护L-天冬氨酸酐于以下物质存在下与L-苯丙氨酸甲酯的一种无机酸盐进行反应，所述物质包一种有机溶剂和一种有机羧酸的一种盐;或是该有机羧酸和选自以下的一种或多种物质，包括一种碱金属;一种碱土金属;该碱金属或该碱土金属的一种氢氧化物、氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐或者该有机羧酸盐;碳酸铵以及该有机羧酸的铵盐。
本发明的另一方面也是一种制备N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，该方法是应用苄氧羰基作为该N-保护基，包括在上述反应完成后加入水，使N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯进行选择结晶。
本发明的又一个方面是一种制备N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，该方法是将N-被护的L-天冬氨酸于该有机羧酸存在下与乙酸酐进行反应，然后将所得的N-被护的L-天冬氨酸酐不经离析即用作为该反应的原料。
在本发明的方法中，该L-苯丙氨酸甲酯无机酸盐实质上是以L-苯丙氨酸甲酯的形式参加反应，这是借助于将该有机羧酸的该种盐加入到该有机溶剂中，或是通过将该碱金属加入到该有机羧酸中，除该碱金属外，或者是碱土金属，或该碱金属或该碱土金属的氢氧化物、氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐，或者该有机羧酸盐，或是碳酸铵，或是该有机羧酸的铵盐。有该有机酸存在时有一项优点，就是在L-苯丙氨酸甲酯中的游离胺的自环化反应，以及N-被护的L-天冬氨酸酐受水作用的环破裂反应，都不会发生。所以可以以高效率制备N-被护的α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯。
应用于本发明方法的N-保护基例如包括酰基，如苄基、乙酰基、甲酰基、卤代的乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基;三苯基甲基;对甲苯磺酰基;烷氧基苄氧羰基，如对甲氧基苄氧羰基;卤代苄氧羰基，如对氯代苄氧羰基;取代或未取代的苄氧羰基，如对硝基苄氧羰基。优选的保护基是甲酰基、三氟乙酰基、苄氧羰基。当应用苄氧羰基时，特别是用于保护氨基时，该保护基很容易通过催化还原而除去。因此就不存在甲酯水解的问题，这对于以高选择性除掉保护基是很有利的。
这些N-被护的L-天冬氨酸酐可通过各种方法以及下述的已知方法来制备。
例如，N-甲酰-天冬氨酸酐可通过L-天冬氨酸于乙酸酐中与甲酸反应而很容易制成(GB708463)。
N-三氟乙酰-L-天冬氨酸酐可通过预先冷却L-天冬氨酸并慢速加入三氟乙酸酐进行反应而制成。N-乙酰-L-天冬氨酸酐和N-三氯乙酰-L-天冬氨酸酐亦可按上述方法合成〔J.Med.Chem.11，163(1973)〕。
N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐可通过如下方法制得，即将L-天冬氨酸与苄氧羰基氯反应，然后将所得的N-苄氧羰基-L-天冬氨酸与一种脱水剂例如乙酸酐反应。
但是需用过量的乙酸酐，以便提高N-被护的L-天冬氨酸酐的收率。在下一步中使用如此得到的N-被护的L-天冬氨酸酐的原来溶液形式，在工业上也是有利的。但是，在该反应混合物中的残余乙酸酐常引起副反应。例如，当如上所得的N-甲酰-L-天冬氨酸酐的溶液与L-苯丙氨酸甲酯反应以制备N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯时，残留于该溶液中的乙酸酐使L-苯丙氨酸甲酯发生乙酰化反应，从而带来不利效果。
虽然也使用经离析后的N-被护的L-天冬氨酸酐(USP3808190)，但除掉过量乙酸酐和所生成的乙酸是很困难的，并且于高温度进行离析操作时，倾向于发生天冬氨酸的外消旋作用。
为了消除这些缺点，本发明者对于不使用乙酸酐来制备N-被护L-天冬氨酸酐的方法进行了深入的研究。研究的结果，业已发现N-被护L-天冬氨酸酐可由N-被护的L-天冬氨酸于惰性有机溶剂中与光气反应而制成，并达到高效率。
本发明是一种制备N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，该方法包括使用由N-被护L-天冬氨酸于有机溶剂中在有或没有各种金属的氧化物、氢氧化物或盐类的存在下与光气反应而制得N-被护L-天冬氨酸酐。
有些一般使用的N-保护基可在酸性条件下除掉，所以可假定带有未被护氨基的副产物是由于受到由N-被护L-天冬氨酸酐与光气反应产生的氯化氢副产物的作用。但令人意外的是，业已发现在本发明的条件下，这种副反应极少发生。
在本发明方法中所用的有机溶剂在该反应中是惰性的，特别是与光气相遇时没有反应活性。有机溶剂的实例包括醚类，如乙醚、丁醚、四氢呋喃和二噁烷;卤代烃，如氯仿、二氯甲烷、四氯化碳、1，2-二氯乙烷、1，1，2-三氯乙烷、氯苯;烃类如正己烷、环己烷、苯、甲苯;酯类如乙酸乙酯、乙酸丁酯。
加入各种金属的氧化物、氢氧化物或盐(后文中称之为金属化合物)，可以收到使本发明的反应大幅度缩短时间的效果。适用的金属化合物例如包括碱金属如Li、Na、K;碱土金属如Mg、Ca;过渡金属如Fe、Cu、Zn;其他金属如Sn、Al的氧化物和氢氧化物，以及这些金属与各种酸的盐，如氯化物、硫酸盐、硝酸盐、碳酸盐、磷酸盐、乙酸盐和羧酸盐。
对于所用金属化合物的量并无特别限制。所用的该金属化合物用量范围是作到使残余的金属化合物对于下一步反应无不利效应。通常的金属化合物用量以N-被护天冬氨酸计，约0.001-5摩尔%。
该金属化合物一般是在反应过程开始时加入到该反应混合物中，无论在溶解状态或是悬浮状态，都能发挥良好的效应。
在进行该反应时，是将N-被护L-天冬氨酸溶解或悬浮于上述有机溶剂中，然后在有或没有上述金属化合物存在下加入光气(需要时，应加搅拌)。光气用量通常按摩尔比为过量，以便从反应体系中除掉所产生的氯化氢和二氧化碳。反应温度较好是在-10°至80℃，最好是10-60℃。当温度高于此范围时，容易发生外消旋作用和保护基断裂的副反应。另一方面，温度低于此范围使反应时间过长，因此无经济价值。
反应完毕后，除掉过量的光气，并将目的产物的晶体沉淀物原样过滤分出并干燥。当目的产物溶解后，只须将该反应混合物浓缩。因此很容易得到N-被护的L-天冬氨酸酐。该反应产物只需除掉光气，即可原样应用于下一步骤。因此，可以抑止生成副产物，反应步骤可以简化，这对于α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的工业生产是十分有利的。
用于本发明的具有特定适当保护基的N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐的制备，已知有数种方法。
例如，将N-苄氧羰基-L-天冬氨酸溶解于大量过量的乙酸酐中，将由过量乙酸酐在该反应中生成的乙酸于减压条件下蒸馏除去，并且将残余在蒸馏剩余物中的乙酸通过加入一种有机溶剂而除去，从而得到N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐〔J.Am.Chem.Soc.，81，167-173(1959)〕。
在另一个方法中，是将N-苄氧羰基-L-天冬氨酸在乙酸酐中制成浆状液，于50℃或低于此温度进行反应，冷却，随后加入乙醚和石油醚的混合物，得到该目的产物(GB708463)。另一种方式，是将N-苄氧羰基-L-天冬氨酸于芳族烃存在下与乙酸酐反应(JapanesePatentLaid-Open75542/1973)。
然而，在上述的方法中，使用大量过量的乙酸酐是不经济的。此外，过量的乙酸酐和它生成的乙酸必须蒸馏除掉，以便离析出所要的产物，从而使操作更复杂。加入闪点很低的有机溶剂对于工业生产也是不太理想的。
在N-被护L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的工业生产中，从操作方面来讲，一般要求在进行N-被护L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的反应时不需要离析出该酸酐。
但是，当该反应应用过量乙酸酐作为脱水剂时，由随后的与L-苯丙氨酸甲酯的缩合反应而生成副产物。结果，要求使用尽量少量的乙酸酐来提高所需酸酐的收率。
JapanesePatentLaid-Open167577/1983披露了一种方法，该方法是将N-苄氧羰基-L-天冬氨酸于各种金属的氧化物、氢氧化物或盐，或者一种有机碱存在下与乙酸酐进行反应。
该方法还应用该有机溶剂来降低乙酸酐的用量，并且对于缩短反应时间是有效的。但是，此方法在工业上应用时，在有机溶剂回收中的乙酸分离存在有问题。
本发明者进行了深入的研究工作，旨在制备N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐中免除上述常规方法中的缺点，并以高收率和短的反应时间得到目的产物，即N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐。结果，业已发现，通过加入各种酰基卤或卤化磷而使天冬氨酸的脱水反应速率大大加速，并且可以短的反应时间得到高收率的目的产物，即N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐。
因此，本发明是一种制备N-苄氧羰基-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，该方法包括使用将N-苄氧羰基-L-天冬氨酸于一种有机羧酸中并于一种酰基卤或一种卤化磷存在下与乙酸酐进行反应所得的N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐。
本发明方法中所用的优选酰基卤例如包括酰基氯，如乙酰氯、新戊酰氯、月桂酰氯、苯甲酰氯、氯代乙酰氯;酰基溴，如乙酰溴、溴代乙酰溴;酰基碘，如乙酰碘;硫酰氯，如亚硫酰氯、磺酰氯;磺酰卤，如苯磺酰氯、对甲苯磺酰氯;亚磺酰卤;磷酰卤，如磷酰三氯。优选的卤化磷包括三卤化磷，如三氯化磷、三溴化磷、三碘化磷;五卤化磷，如五氯化磷和五溴化磷。
在反应中所用卤化物的量视所加入的卤化物类型而稍有不同。但是，存在有痕量的卤化物已足够，并应限制其用量使之不致对后续步骤产生不利效果。也就是说，存在有痕量即能发挥有效的催化作用。在工业生产中该化合物的适宜存在量是按N-苄氧羰基-L-天冬氨酸计算在1×10-5至5×10-3%(重量)。
任何类型的溶剂只要它们对本反应的反应物和生成物无反应活性，均可应用于本发明的方法中。所用溶剂的代表性实例包括酮类如丙酮、甲乙酮;醚类如乙醚、四氢呋喃、二噁烷;腈类如乙腈;酯类如乙酸乙酯和丙酸甲酯;羧酸类如甲酸、乙酸、丙酸;卤代烃类如氯仿、二氯甲烷以及1，2-二氯乙烷;烃类如甲苯、二甲苯、己烷和环己烷;酰胺类如二甲基甲酰胺;其他溶剂如二甲基亚砜、γ-丁内酯、硝基甲烷。这些溶剂可以单独使用，或组合成混合物使用。
从溶剂回收方面来讲，乙酸是优选的溶剂，因为不需把它与反应中生成的乙酸进行分离。
在本方法中应用的乙酸酐量较好是每摩尔N-苄氧羰基-L-天冬氨酸使用0.5-2摩尔，更好是0.9-1.05摩尔。反应温度范围一般为-10°至100℃，更好是0-80℃，以便抑制产物的外消旋作用。
由于本方法是在小量乙酸酐中进行，所以不必须回收乙酸酐。当用乙酸作为溶剂时，所得的N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐直接用于与L-苯丙氨酸甲酯进行反应，不需要先从反应混合物中离析出来。在此情况下，未发现对反应有不利影响，可抑制副产物的生成，并可以简化生产步骤。因此，本方法对于N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的工业生产是十分有效的。
用于由N-被护L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐进行反应的该有机溶剂，对于N-被护L-天冬氨酸酐是没有反应活性的。脂族卤代烃溶剂、脂肪酸酯溶剂或烃类溶剂是特别优选的。
适用的溶剂例如包括脂族卤代烃溶剂，如二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、三氯乙烯、四氯乙烯;脂肪酸酯溶剂如乙酸乙酯、乙酸丁酯、甲酸乙酯、甲酸丙酯、丙酸甲酯、丙酯乙酯;磷酸酯溶剂，如磷酸三乙酯、磷酸三正丁酯;烃类溶剂如甲苯、二甲苯和己烷;其他溶剂如四氢呋喃、二噁烷。
适用于将N-被护L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐进行反应的有机羧酸例如包括羧酸，如甲酸、乙酸、丙酸。优选的酸是乙酸和丙酸。
该有机溶剂和有机羧酸的用量并无限定。其用量从操作的方面来讲通常为该N-被护L-天冬氨酸酐原料的2-50倍(重量比)。
任何类型的有机羧酸盐，只要该盐是由该有机酸和金属，例如碱金属、碱土金属以及氨所组成，就可以应用在N-被护L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐进行反应。适用的该有机羧酸盐例如包括乙酸锂、乙酸钠、乙酸钾、乙酸铵、乙酸钙、乙酸镁和乙酸钡。优选的盐是乙酸钠和乙酸钾。
适用于由N-被护L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐进行反应的碱金属和碱土金属例如包括Na和Mg。
适用的碱金属和碱土金属氢氧化物例如包括NaOH、KOH、LiOH、Mg(OH)2。适用的碱金属和碱土金属氧化物例如包括CaO和MgO。适用的碱金属和碱土金属碳酸盐例如包括Li2CO3、Na2CO3、K2CO3、CaCO3、MgCO3。适用的碱金属和碱土金属碳酸氢盐例如包括LiHCO3、NaHCO3、KHCO3、Ca(HCO3)2。适用的碱金属和碱土金属有机羧酸盐例如包括乙酸锂、乙酸钠、乙酸钾、乙酸钙、乙酸镁。优选的盐是乙酸钠和乙酸钾。也可以使用碳酸铵和该有机羧酸的铵盐。
对于L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐，使用等摩尔量的该有机羧酸盐，碱金属，碱土金属，碱金属及碱土金属的氢氧化物、氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐、该有机羧酸盐，碳酸铵或该有机羧酸的铵盐，已经足够。这些物质的通常用量为每摩尔L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐为1.0-3.0摩尔范围。
在实施本发明的一个优选方法中，将N-被护L-天冬氨酸酐悬浮或溶解于该有机溶剂中，加入该有机羧酸的盐，然后向反应混合物中加入L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐。另外的方法，是在加入L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐之后，加入该有机羧酸的盐。
在本发明的方法中，对该反应的温度并无限定。反应温度通常在-15℃至50℃范围，最好在5-25℃范围。
通常反应时间由0.5至10小时已足够。
关于实施本发明的另一方法，是将N-被护的L-天冬氨酸酐悬浮或溶解于该有机羧酸中，然后向所得反应混合物中加入碱金属，碱土金属，碱金属和碱土金属的氢氧化物、氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐或有机羧酸盐，碳酸铵或该有机羧酸的铵盐，然后加入L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐。另外的方式，在向所得混合物加入碱金属，碱土金属，碱金属和碱土金属的氢氧化物、氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐或有机羧酸的盐，碳酸铵或该有机羧酸的铵盐之前，先加入L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐。
对于本发明方法的反应温度并无限定。通常的反应温度范围在-15°至80℃，更好是在-5°至25℃。
通常反应时间由0.5至10小时已足够。
在前述的任一个方法中，通常在反应完毕后在该反应体系中沉淀出N-被护α-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯。当将该有机羧酸用作为溶剂时，所生成的副产物N-被护β-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯在该有机羧酸中的溶解度较大。因此，通过过滤和洗涤沉淀的晶体，即可很容易地离析出目的产物N-被护α-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯。
当产物是N-苄氧羰基-α-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯时，可通过加入水的方法使N-苄氧羰基-α-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯选择性地结晶出来。所加入的水量是专门优选的，使得所得到的有机羧酸浓度为5-90%(重量)。最适宜浓度是45-70%(重量)。
当此浓度低于45%(重量)时，发生来自N-苄氧羰基-β-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的污染。另方面，当浓度大于70%(重量)，使离析所得的N-苄氧羰基-α-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的收率下降。
在离析所得的N-被护α-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯中含有少量N-被护β-天冬氨酰-L-苯丙氨酸时，可按常规方法用水或有机溶剂很容易将之除掉。
在本发明的另一个实施方法中，通过将N-被护L-天冬氨酸于有机羧酸溶剂中与乙酸酐反应，从而转化为它的酸酐。所生成的N-被护L-天冬氨酸酐是在该反应混合物中的悬浮或溶解状态。将该碱金属，或碱土金属，或该碱金属或碱土金属的氢氧化物、氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐或该有机羧酸的盐，碳酸铵或该有机羧酸的铵盐，加入到该反应混合物中，然后在进行该反应之前加入L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐。另外的方式，将L-苯丙氨酸甲酯的该无机酸盐加入到该反应混合物中，然后在进行该反应之前，加入该碱金属，碱土金属，碱金属或碱土金属的氢氧化物、氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐、或该有机羧酸的盐，碳酸铵或该有机羧酸的铵盐。
将N-被护L-天冬氨酸转化为该酸酐的反应可以在40-65℃温度进行，更好是在50-60℃进行。
N-被护L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯进行反应的温度并无限定。通常的反应温度范围由-15°至80℃，更好是由-5°至25℃。
通常，反应时间0.5-10小时已足够。
在本反应的后处理步骤方面，可以采取上述的相同步骤。
按本发明的方法，可以用短的时间和温和的条件，高效地制备出N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯，这是制备α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的一种重要中间体。
本发明方法的各该步骤可通过与酸酐制备步骤综合起来而得到简化。因此，本发明的方法从工业生产方面来讲是很有价值的。
下面以实例详细阐明本发明的方法。
实例1在100.1克乙酸乙酯中，悬浮14.3克(0.1摩尔)N-甲酰-L-天冬氨酸酐，并于-50℃至0℃于搅拌中加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠，并于同温度再加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。于同一温度将混合物搅拌5小时进行反应。然后加入14.3克乙酸，并于相同温度搅拌1小时。过滤沉淀的晶体，洗涤并干燥。N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体收得量为20.9克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计，收率65.0%)。用高效液相色谱法分析所得晶体，结果是α-异构体∶β-异构体＝99.0∶1.0。
实例2向100.4克乙酸乙酯中，加入25.1克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐使之悬浮，并于-5°至0℃于搅拌中加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠，并于相同温度加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。
于相同温度于减压条件和搅拌中使混合物反应3小时。然后加入100.4克乙酸和75.3克水，并于15-20℃搅拌1小时。过滤出沉淀的晶体，洗涤并干燥。N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯收得量为29.1克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计，收率为68.0%)。用高效液相色谱法分析所得的晶体，结果α-异构体∶β-异构体＝99.3∶0.7。
实例3在84.4克乙酸乙酯中，将21.2克(0.1摩尔)N-三氟乙酰-L-天冬氨酸酐悬浮，并于-5°至0℃于搅拌中加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠，并于相同温度加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。于相同温度将该混合物搅拌反应3小时，然后减压浓缩。然后于15-20℃加入63.3克乙酸并搅拌1小时。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。N-三氟乙酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体的收得量为30.6克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为78.5%)。用高效液相色谱法分析所得晶体，所得α-异构体∶β-异构体比率为99.0∶1.0。
实例4在179.4克二氯甲烷中，将14.3克(0.1摩尔)N-甲酰-L-天冬氨酸酐悬浮，并于20-25℃于搅拌中加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠，并于相同温度用30分钟加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。于相同温度将混合物搅拌反应5小时。过滤出沉淀的晶体，洗涤并干燥。N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯和N-甲酰-β-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的混合晶体的收得量为30.0克。用高效液相色谱法分析所得晶体，结果α-异构体∶β-异构体的比率为75.0∶25.0。用常规方法纯化这些晶体，得到纯的N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体。收得量16.1克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为50%)。
元素分析结果，与N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯相吻合。
元素分析(%)C15H18N2O6CHN测定值55.855.698.66理论值55.905.638.69实例5实施实例4所述的相同步骤，不同之处是使用表1所示的有机溶剂。结果示于表1。
表1
实例6在100克乙酸乙酯中，将14.3克(0.1摩尔)N-甲酰-L-天冬氨酸酐和21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐悬浮，然后于20-25℃于搅拌中向该悬浮液加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠。于相同温度将混合物搅拌反应5小时。然后加入14.3克乙酸并于相同温度搅拌1小时。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体收得量为21.1克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为65.5%)。用高效液相色谱法分析所得晶体，结果α-异构体∶β-异构体的比率为98.0∶2.0。
实例7实施实例3所述的相同步骤，不同之处是使用27.7克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐和17.2克(0.205摩尔)乙酸钠。收得量为30.4克(按L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐计的收率为77.9%)。
实例8实施实例2所述的相同步骤，不同之处是使用10.8克(0.11摩尔)乙酸钾代替乙酸钠。收得量为29.0克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为67.8%)。用高效液相色谱法分析所得的晶体，结果α-异构体∶β-异构体的比率为99.1∶0.9。
实例9实施实例1所述的相同步骤，不同之处是使用8.5克(0.06摩尔)乙酸镁代替乙酸钠。收得量为21.3克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为66.1%)。
用高效液相色谱法分析所得晶体，结果α-异构体∶β-异构体的比率为98.8∶1.2。
实例10实施实例2所述的相同步骤，不同之处是使用表2所示的有机溶剂。所得结果示于表2。
表2
实例11在63.3克乙酸中，将21.1克(0.1摩尔)N-三氟乙酰-L-天冬氨酸酐悬浮，并于10-15℃于搅拌中加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠。然后于相同温度加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。于相同温度搅拌2小时进行反应。
过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。得到N-三氟乙酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯。收得量为31.2克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为80.0%)。用高效液相色谱法分析所得的晶体，只发现了α异构体。
熔点150-151℃无素分析(%)C16H17N2O6F3CHNF测定值49.104.457.1714.56理论值49.244.397.1814.60实例12实施实例11所述的相同步骤，不同之处是使用表3所示的有机羧酸和有机羧酸盐。所得结果示于表3。
表3
实例13在100.4克乙酸中，将25.1克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐悬浮，并于10-15℃于搅拌中加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠。然后于相同温度加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。于相同温度搅拌反应4小时。然后于相同温度加入75.3克水并冷却至0-5℃。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。得到N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体。收得量为31.2克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为72.9%)。
熔点123.8-124.8℃元素分析(%)C22H23N2O7CHN测定值61.585.706.53理论值61.685.656.54实例14在28.6克乙酸中，将14.3克(0.1摩尔)N-甲酰-L-天冬氨酸酐悬浮，并于5-10℃于搅拌中加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠。然后于相同温度加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐，并于同一温度搅拌5小时进行反应。然后将反应混合物浓缩并加入57.2克水。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。得到30.6克N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体。
用高效液相色谱法分析该晶体，结果α-异构体∶β-异构体的比率为81.0∶19.0。用常规方法纯化该晶体，得到高纯度的N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体。收得量为22.3克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为69.3%)。
熔点123.5-124℃
元素分析(%)C15H18N2O6CHN测定值55.855.698.66理论值55.905.638.69实例15在75.3克乙酸中，将25.1克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐悬浮，并于20-25℃于搅拌中加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠。冷却至15-20℃后，于同一温度加入64.8克含有21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐的乙酸溶液。于相同温度于搅拌中使该反应进行2小时。然后于相同温度加入110.1克水，并冷却至0-5℃。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。得到N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体。收得量为29.5克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计算的收率为68.9%)。
熔点123.8-124.9℃实例16实施实施11所述的相同步骤，不同之处是用22.7克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐来代替L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐，并将乙酸钠用量增至17.6克(0.21摩尔)。
N-三氟乙酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体的收得量为31.1克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为79.7%)。
熔点150-151℃。
实例17在100.4克乙酸中，将25.1克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐悬浮，并于10-15℃加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。然后于相同温度用30分钟加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠。于相同温度搅拌3小时进行反应。然后加入75.3克水并冷却至0-5℃。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。得到N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的晶体，收得量为30.0克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为70.1%)。
熔点123-124℃。
实例18在100.4克乙酸中，将25.1克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐悬浮，并于10-15℃加入27.7克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐。然后于相同温度加入11.1克(0.105摩尔)Na2CO3。于相同温度搅拌4小时进行反应。然后加入75.3克水并冷却至0-5℃。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。得到N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体，收得量为29.9克(按L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐计，收率为69.9%)。
熔点123-124℃。
实例19实施实例18所述的相同步骤，不同之处是用4.8克(0.12摩尔)MgO代替11.1克(0.105摩尔)Na2CO3。
收得量为26.0克(按L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐计的收率为60.7%)。
熔点123.5-124.5℃。
实例20在63.3克乙酸中，将22.9克(0.1摩尔)N-三氟乙酰-L-天冬氨酸悬浮，并加入10.2克(0.1摩尔)乙酸酐。将混合物加热至55-60℃并于同一温度搅拌6小时。反应完毕后，将所得混合物冷却至15-20℃，然后于相同温度相继加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠和20.5克(0.095摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。于相同温度搅拌2小时进行反应。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。得到N-三氟乙酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯，收得量为29.3克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为79.0%)。用高效液相色谱法分析所得的晶体，发现只有α-异构体。
熔点150-151℃
元素分析(%)C16H17N2O6F3CHNF测定值49.104.457.1714.56理论值49.244.397.1814.60实例21实施实例20的相同步骤，不同之处是使用表4所示的有机羧酸和有机羧酸盐。所得结果示于表4。
表4
实例22实施实例20的相同步骤，不同之处是将乙酸酐用量更改为9.7克(0.095摩尔)。
收得量为29.0克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为78.2%)。
实例23在95.5克乙酸中，将26.7克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸悬浮，并加入10.2克(0.1摩尔)乙酸酐。将混合物加热至55-60℃并于相同温度搅拌5小时。在反应完毕后，将所得混合物降温至15-20℃，然后于相同温度相继加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠和20.5克(0.095摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。于相同温度搅拌4小时，进行反应。然后加入75.3克水并将混合物降温至0-5℃。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。
所得的晶体为28.9克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计收率为71.0%)。
熔点123.9-124.8℃。
元素分析结果与N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯相吻合。
元素分析(%)C22H24N2O7CHN测定值61.785.686.53理论值61.685.656.54实例24实施实例23所述的相同步骤，不同之处是使用26.3克(0.095摩尔)L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐和16.8克(0.21摩尔)乙酸钠。
收得量为27.8克(按L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐计算，收率为68.3%)。
实例25实施实例23所述的相同步骤，不同之处是使用9.7克(0.095摩尔)乙酸酐。
收得量为27.7克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计，收率为68.1%)。
实例26在28.6乙酸中，将16.1克(0.1摩尔)N-甲酰-L-天冬氨酸悬浮，并加入10.2克(0.1摩尔)乙酸酐。将此混合物加热至50-55℃并于相同温度搅拌5小时。在反应完毕后，将所得混合物降温至15-20℃，然后于相同温度相继加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠和20.5克(0.095摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。于相同温度于搅拌中进行反应4小时。然后浓缩反应混合物并加入57.2克水，冷却至10-15℃。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并过滤。得到28.2克N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯。用高效液相色谱法分析该晶体，结果α-异构体∶β-异构体的比率为81.0∶19.0。用常规方法纯化该晶体，得到高纯度N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯。收得量为20.8克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计，收率为68.0%)。
元素分析结果与N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯相吻合。
元素分析(%)C15H18N2O6CHN测定值55.855.698.66理论值55.905.638.69实例27实施实例20所述的相同步骤，不同之处是用26.3克(0.095摩尔)L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐替代L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐，乙酸钠的用量为17.6克(0.21摩尔)。
得到N-三氟乙酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的晶体。
收得量为29.0克(按L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐计的收率为78.2%)。
实例28实施实例23所述的相同步骤，不同之处是在制备了N-苄氧羰基-L-苯丙氨酸的酸酐之后，相继加入L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐和乙酸钠。
收得量为30.3克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计，收率为74.4%)。
实例29在95.5克乙酸中，将26.7克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸悬浮，并加入10.2克(0.1摩尔)乙酸酐。将混合物加热至55-60℃并于相同温度搅拌5小时。在反应完毕后，所得混合物冷却至10-15℃，然后于相同温度相继加入20.5克(0.095摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐和9.2克(0.11摩尔)乙酸钠。于相同温度搅拌4小时进行反应。然后加入75.3克水并将混合物冷却至0-5℃。过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。
所得晶体为30.4克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计，收率为74.7%)。
实例30在100.4克乙酸中，将25.1克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐悬浮，于10-15℃于搅拌中加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠。于相同温度，再加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。于相同温度搅拌4小时，进行反应。然后向反应混合物中加入87.1克水，用以将有机羧酸的浓度调节至53.5%(重量)。将混合物冷却至0-5℃以后，过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。
该晶体的收得量为31.0克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为72.4%)。
用高效液相色谱法分析该晶体，发现只有α-异构体。
熔点123.8-124.9℃元素分析(%)C22H24N2O7CHN测定值61.565.706.53理论值61.685.656.54实例31
实施实例30所述的相同方法，不同之处是使用表5所示的有机羧酸和有机羧酸盐。结果示于表5。
实例32在100.4克乙酸中，将25.1克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐悬浮，并于10-15℃于搅拌中加入9.2克(0.11摩尔)乙酸钠。然后于相同温度加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。于相同温度搅拌4小时进行反应。然后向反应混合物中加入70.9克水，以便将有机羧酸浓度调节至58.6%(重量)。将混合物冷却至0-5℃以后，过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。
晶体的收得量为27.0克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为63.1%)。
用高效液相色谱法分析该晶体，发现只有α-异构体。
实例33在100.4克乙酸中，将25.1克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐悬浮，并于10-15℃于搅拌中加入17.6克(0.21摩尔)乙酸钠。然后于相同温度加入22.7克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐。于相同温度搅拌4小时进行反应。然后向反应混合物中加入87.1克水，以便将有机羧酸浓度调节到53.3%(重量)。在冷却至0-5℃以后，过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。
该晶体收得量为29.5克(按L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐计的收率为68.9%)。
实例34在100.4克乙酸中，将25.1克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐悬浮，并于5-10℃于搅拌中加入21.6克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐。然后于相同温度加入9.2克(0.1摩尔)乙酸钠。于相同温度搅拌4小时进行反应。
然后向反应混合物中加入87.1克水，以便将有机羧酸浓度调节至53.5%(重量)。冷却至0-5℃之后，过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥，得到N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的晶体，收得量为31.2克(按L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐计的收率为72.9%)。
用高效液相色谱法分析所得晶体，结果只发现α-异构体。
实例35在100.4克乙酸中，将25.1克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐悬浮，并于5-10℃于搅拌中加入22.7克(0.1摩尔)L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐。然后于相同温度加入17.6克(0.21摩尔)乙酸钠。于相同温度搅拌4小时进行反应。然后向反应混合物中加入87.1克水，以便将有机羧酸浓度调节到53.5%(重量)。冷却至0-5℃以后，过滤分出沉淀的晶体，洗涤并干燥。得到N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯晶体，收得量为31.2克(按L-苯丙氨酸甲酯硫酸盐计，收率为73.1%)。
用高效液相色谱法分析所得的晶体，发现只有α-异构体。
实例36在表6所示的溶剂中，将67.0克(0.25摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸悬浮，并按表6所示的量加入乙酸酐(纯度93%)。按表6所示，于55℃于一种酰基卤存在下反应3小时。
从所得的均匀反应混合物中取出适量样品，并将之溶解于含有5%(重量)三乙胺的甲醇溶液中。用高效液相色谱法测定由N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐与甲醇反应所得N-苄氧羰基-羰基苯甲酰氧基-L-天冬氨酸甲酯的α-和β-异构体及残余N-苄氧羰基-L-天冬氨酸。由测定值计算N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐的含量和收率，结果示于表6。
对比实例1实施例36所述的相同步骤，不同之处是未用该酰基卤。所得结果亦示表6。
实例37在表7所示的溶剂中，将67.0克(0.25摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸悬浮，并加入表7所示量的乙酸酐(纯度93%)。按表7所示，于一种囟化磷存在下于55℃反应3小时。
从所得的均匀反应混合物中取出适量样品，并将之溶解于含有5%(重量)三乙胺的甲醇溶液中。用高效液相色谱法测定由N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐与甲醇反应所得N-苄氧羰基-羰基苯甲酰氧基-L-天冬氨酸甲酯的α-和β-异构体及残余N-苄氧羰基-L-天冬氨酸。由测定值计算N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐的含量和收率，结果示于表7。
对比实例2实施实例37的相同步骤，不同之处是不使用该等卤化磷，所得结果示于表7。
实例38将26.7克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸溶解于240克四氢呋喃中。以5克/小时的流量向该溶液中鼓入光气气泡，于55℃反应5小时。反应完毕后，向反应混合物中通入干的氮气，以除掉残余的光气。减压条件下除去四氢呋喃。于减压条件下于室温干燥后，得到26.0克晶体。
该晶体的红外光谱图与N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐相吻合。
以高效液相色谱法测定此晶体纯度为93.0%，收率为97.0%。
实例39在240克甲苯中，将16.1克(0.1摩尔)N-甲酰-L-天冬氨酸悬浮。以5克/小时的流量向该溶液中鼓入光气气泡，于50℃反应10小时。反应完毕后，向反应混合物中通入干的氮气，以除掉残余的光气。过滤分出沉淀的晶体并干燥。所得晶体为13.1克。
该晶体的红外光谱图与N-甲酰-L-天冬氨酸酐相吻合。
用高效液相色谱法测定该晶体纯度为96.0%，收率为87.9%。
实例40将23.3克(0.1摩尔)N-叔丁氧基羰基-L-天冬氨酸溶解于240克四氢呋喃。以5克/小时的流量向该溶液中鼓入光气气泡，于10℃反应10小时。反应完毕后，向反应混合物中通入干的氮气以除掉残余光气。反应完毕后，实施实例38所述的相同步骤。所得晶体为23.0克。
该晶体的红外光谱图与N-叔丁氧基羰基-L-天冬氨酸酐相吻合。
用高效液相色谱法测定该晶体纯度为91.5%，收率为97.9%。
实例41将37.5克(0.1摩尔)N-三苯甲基-L-天冬氨酸溶解于240克四氢呋喃。以5克/小时的流量向该溶液中鼓泡通入光气，于10℃反应5小时。反应完毕后，向反应混合物中通入干的氮气，以除掉残余的光气。然后于减压条件下除掉四氢呋喃。于室温和减压条件干燥后，得到36.7克晶体。
用高效液相色谱法测定此晶体纯度为96.3%，收率为99.0%。
实例42-44在表8所示每种溶剂240克中，将26.7克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸溶解或悬浮于其中。实施实例38的相同反应和离析步骤，结果示于表8。
表8
实例45将26.7克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸溶解于240克四氢呋喃中，并加入0.2克无水MgCl2。以5克/小时的流量向该溶液中鼓泡通入光气，于50℃反应2小时。反应完毕后，向反应混合物中通入干的氮气，除掉残余光气。然后于减压条件下除掉四氢呋喃。以减压条件于室温干燥后，得到25.8克晶体。
该晶体的红外光谱图与N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐相吻合。
用高效液相色谱测定该晶体纯度为96.7%，收率为100%。
实例46-57实施实例45所述的相同反应及离析步骤，不同之处是使用表9所示的各种N-保护基、金属化合物添加剂以及溶剂。所得结果汇总于表9。
对比实例3-5将26.7克(0.1摩尔)N-苄氧羰基-L-天冬氨酸溶解于240克四氢呋喃或甲苯中。按表10所示温度进行反应。反应时并不加入金属化合物，以5克/小时的流量鼓泡通入光气。实施实例45所述的相同步骤，离析出该产物。
所得结果示于表10。其中每一对比实例的收率均在50-60%范围。
表10
权利要求
1.一种制备N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，包括于下述的物质存在下将N-被护L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的一种无机酸盐进行反应；所述于反应时需存在的物质可以是一种有机溶剂和一种有机羧酸的一种盐，或是该有机羧酸和一种或多种选自下述的物质一种碱金属；一种碱土金属；该碱金属或碱土金属的一种氢氧化物、氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐或该有机羧酸的盐；碳酸铵以及该有机羧酸的铵盐。
2.权利要求1的方法，其中该N-被护L-天冬氨酸酐是N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐。
3.权利要求2的方法，其中的N-苄氧羰基-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯是于反应完毕后通过加入水来进行选择性结晶过程。
4.权利要求2的方法，其中的N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐的制备是于一种酰基卤或卤化磷存在下由N-苄氧羰基-L-天冬氨酸于该有机羧酸中与乙酸酐反应。
5.权利要求1的方法，其中该N-被护L-天冬氨酸酐是在一种N-被护L-天冬氨酸于该有机羧酸中与乙酸酐反应后不需离析出该化合物即直接使用。
6.权利要求1的方法，其中该N-被护L-天冬氨酸酐的制备是在有或者无该金属的氧化物、氢氧化物或盐的存在下，将该N-被护L-天冬氨酸于该有机溶剂中与光气反应而成。
7.一种制备N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，包括在加入下述一种物质的条件下，将一种N-被护L-天冬氨酸酐于一种有机羧酸中与L-苯丙氨酸甲酯的一种无机酸盐反应，所述需加入的物质可以是一种碱金属;一种碱土金属;该碱金属或碱土金属的一种氢氧化物、氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐或一种有机羧酸的盐;碳酸铵或该有机羧酸的铵盐。
8.一种制备N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法，包括在一种有机羧酸盐存在下，将N-被护L-天冬氨酸酐于一种有机溶剂中与L-苯丙氨酸的一种无机酸盐反应而成。
9.一种制备N-被护天冬氨酸酐的方法，包括将一种N-被护天冬氨酸于一种惰性有机溶剂中与光气反应而成。
10.一种制备N-被护天冬氨酸酐的方法，包括于一种金属的氧化物、氢氧化物或盐的存在下，将N-被护天冬氨酸于一种惰性有机溶剂中与光气反应而成。
11.一种制备N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐的方法，包括于一种酰基卤存在下，将N-苄氧羰基-L-天冬氨酸与乙酸酐反应而成。
12.一种制备N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐的方法，包括于一种卤化磷存在下将N-苄氧羰基-L-天冬氨酸与乙酸酐反应。
全文摘要
由N-被护天冬氨酸与光气反应制备N-被护天冬氨酸酐的方法；由N-被护天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸甲酯的无机酸盐反应制备N-被护α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯的方法；以及由N-苄氧羰基-L-天冬氨酸与乙酸酐反应制备N-苄氧羰基-L-天冬氨酸酐的方法。
文档编号C07C229/34GK1036581SQ89101760
公开日1989年10月25日 申请日期1989年3月21日 优先权日1988年3月22日
发明者加藤敏雄, 樋口长二郎, 大浦刚, 味冈正伸, 山口彰宏 申请人:三井东圧化学株式会社