专利名称：链阳性菌素衍生物、它们的制备方法以及含有它们的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有下述通式的链阳性菌素A组衍生物以及它们的盐
式中-R1是-NR′R″，其中R′是氢原子或甲基，而R″是氢原子、烷基、环烷基、烯丙基、丙炔基、苄基或-OR，R是氢原子、烷基、环烷基、烯丙基、丙炔基或苄基，或R″代表-NR3R4，R3和R4可以代表甲基或和与其连接的氮原子一起构成4或5元饱和或不饱和的杂环，该杂环还可以含有选自氮、氧或硫的另一杂原子，-R2是氢原子或甲基或乙基，和-键
代表单键或双键，它们具有特别有利的抗菌活性和良好的代谢稳定性。
在已知的链阳性菌素中，在1955年首次分离出原始霉素(RP7293)，它是从始旋链霉菌产生的天然来源的抗菌素。以商品名Pyostacine销售的原始霉素是主要由原始霉素IA结合原始霉素IIA构成的。
另一种链阳性菌素类的抗菌素是从弗吉尼亚链霉菌ATCC 13161制备的维吉霉素[抗菌素与化学治疗(Antibiotics and Chemotherapy)，5，632(1955)]。维吉霉素(Staphylomycine)基本上是由因子S结合因子M1构成的。
在专利EP 135410和EP 191662中描述了具有下述结构的链阳性霉素半合成衍生物
其中n是0-2。与B组链阳性霉素半合成组分结合，它们显示出协同作用，并可采用注射方法使用。
在通式(I)中，除非特别说明，烷基是直链或支链的，并含有1-6个碳原子；环烷基含有3-4碳原子；16位的链当R″不为-OR或-NR3R4时，表示差向异构体R或以差向异构体R是主要的差向异构体R和S的混合物，当R″是-OR或-NR3R4时，表示差向异构体R和S及其它们的混合物。
当R″是-NR3R4时，其中R3和R4和与其连接的氮原子一起构成4或5元饱和或不饱和的杂环，该杂环具体地可以是氮杂环丁烷、氮杂环戊烷或咪唑。
通式(I)链阳性菌素衍生物可按照下述方法制备得到下述通式的天然原始霉素组分
式中R2如前面所定义，用下述通式胺作用H2N-R″ (III)式中R″如前面所定义，接着用还原剂与所得到的中间烯胺(或肟)作用，然后，当希望得到式中R′是甲基的通式(I)链阳性菌素衍生物时，通过甲醛或就地产生甲醛的衍生物作用并还原中间产物烯胺，进行第二次还原胺化作用。
一般地，在如醇(例如甲醇、乙醇)、含氯溶剂(例如二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿)、腈(例如乙腈)、吡啶之类的有机溶剂中，在温度0-30℃，任选地在例如硫酸镁、硫酸钠或分子筛之类的脱水剂存在下进行胺的作用。优选在惰性气氛(例如氩气)下操作。让胺盐进行反应也是可能的。优选地，为了制备键
代表双键的衍生物，在如腈(例如乙腈)之类的有机溶剂中，在如有机酸(例如乙酸)之类的酸存在下操作；在这种情况下，不必要添加脱水剂。当制备R″是-OR的通式(I)链阳性菌素衍生物时，有可能分离出具有下述通式的中间产物肟
式中R2和R如前面所定义，然后将这种产物还原成R′是氢原子的通式(I)衍生物，任选地在后续的还原胺化操作中使用。
在有机酸(例如乙酸)存在下，在如前面胺化反应所列举的有机溶剂中，通过例如碱金属硼氢化物(例如氰基硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠)之类的还原剂进行还原。
如果必要的话，用来得到双取代胺的后续还原胺化操作可在类似的条件下进行。
根据本发明，通式(I)链阳性菌素衍生物还可以按照如下方法制备使具有所要求R″的酮与下述通式的胺衍生物作用
式中R2如前面所定义，接着当希望得到式中R′是甲基的通式(I)链阳性菌素衍生物时，通过甲醛或就地产生甲醛的衍生物的作用并还原中间产物烯胺，进行第二次还原胺化作用。
在与上述类似的条件下进行反应。
可由通式(II)链阳性菌素衍生物如前面所述制备得到通式(V)胺。
通式(II)原始霉素衍生物分别相应于原始霉素IIA(PIIA)、原始霉素IIB(PIIB)、原始霉素IIC(PIIC)、原始霉素IID(PIID)、原始霉素IIF(PIIF)和原始霉素IIG(PIIG)，它们是天然原始霉素的已知组分。在专利申请EP 614910中描述过组分IIF和IIG。
如J.C.Barrière及其同事在Expert.Opin.Invest.Drugs，3(2)，115-31(1994)中所描述的，可以得到原始霉素IIC(PIIC)与原始霉素IID(PIID)。
根据与Preud′homme及其同事在“法国化学学会通报”(Bull.Soc.Chim.Fr.)第2卷第585页(1968)中所描述的相同或类似的方法，经发酵和从发酵液中分离制备和分离出A组天然链阳性菌素[通式(II)链阳性菌素]组分。
或者，如专利申请FR 2 689 518所描述的，采用特定的发酵方法制备出A组天然组分。
如果必要的话，可采用如结晶或色谱之类的物理方法纯化通式(I)链阳性菌素衍生物。
特别可以得到呈16R差向异构体形式的通式(I)链阳性菌素衍生物。可以采用快速色谱、高效液相色谱(HPLC)或离心分配色谱(CPC)从16R和16S差向异构体混合物分离得到16R差向异构体和16S差向异构体形式。
可以采用已知的方法将通式(I)链阳性菌素衍生物转化成与酸的加合盐形式。应当理解这些盐也在本发明范围之内。
作为药学上可接受酸的加合盐实例，可以列举与无机酸生成的盐(盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐)或与有机酸生成的盐(琥珀酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、乙酸盐、丙酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、羟乙磺酸盐、萘磺酸盐或樟脑磺酸盐，或与这些化合物的取代衍生物生成的盐)。
本发明的链阳性菌素衍生物具有抗菌性质和与B组链阳性菌素衍生物抗菌活性的协同性质。由于它们单用或配合使用时的活性以及它们与现有已知A组衍生物相比良好的代谢稳定性，所以它们是特别有利的。
当它们与链阳性菌素B组的一种组分或一种衍生物配合时，根据人们希望获得口服还是肠胃道外用药形式，后者选自下述天然组分原始霉素IA、原始霉素IB、原始霉素IC、原始霉素ID、原始霉素IE、原始霉素IF、原始霉素IG、维吉霉素S1、S3或S4、春霉素B或C、宜他霉素，或选自半合成衍生物，如专利或专利申请US 4618599、US4798827、US 5326782、EP 772630或EP 770132中所描述的那些，特别是下述通式的链阳性菌素衍生物
式中1. Rb、Rc、Re和Rf是氢原子，Rd是氢原子或二甲氨基，而Ra是具有-CH2R′a结构的基团，式中R′a是可被烷基取代的3-吡咯烷基硫基、3-(或4-)哌啶基硫基，被1或2个羟基磺酰基、烷基氨基、二烷基氨基(它本身任选地被巯基或二烷基氨基取代)取代的烷硫基，或被1个或2个任选取代的哌嗪环、吗啉代基、硫代吗啉代基、哌啶子基、1-吡咯烷基、2-，3-或4-哌啶基或2-或3-吡咯烷基(它们可被烷基取代)取代的烷硫基，或者Ra是具有＝CHR′a结构的基团，其中R′a是可被烷基取代的3-吡咯烷基氨基、3-(或4-)哌啶基氨基、3-吡咯烷基氧基、3-(或4-)哌啶基氧基、3-吡咯烷基硫基、3-(或4-)哌啶基硫基，或R′a是被1个或2个羟基磺酰基、烷基氨基、二烷基氨基(它本身任选地被二烷基氨基取代)取代的、或被三烷基氨基、4-或5-咪唑基取代的、或被1或2个任选取代的哌嗪环、吗啉代基、硫代吗啉代基、哌啶子基、1-吡咯烷基、2-，3-或4-哌啶基或2-或3-吡咯烷基(可被烷基取代)取代的烷基氨基、烷氧基或烷硫基，或Ra是3-(或4-)奎宁环基硫基甲基，或2. Ra是氢原子，和a)Rb、Re和Rf是氢原子，Rd是-NHCH3或-N(CH3)2，而Rc是氯或溴原子，或代表含有3-5个碳原子的链烯基[如果Rd是-N(CH3)2]，或者b)Rb、Rd、Re和Rf代表氢原子，而Rc是卤素或单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、三氟甲氧基、烷硫基、C1-C3烷基或三卤代甲基，或者c)Rb、Rc、Re和Rf代表氢原子，而Rd是卤素、或乙基氨基、二乙基氨基或甲基乙基氨基、烷氧基或三氟甲氧基、烷硫基、C1-C6烷基、芳基或三卤代甲基，或者d)Rb、Re和Rf代表氢原子，而Rc是卤素或单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、三氟甲氧基、烷硫基、C1-C3烷基，而Rd是卤素或氨基、单烷基氨基或二烷基氨基、烷氧基或三氟甲氧基、烷硫基、C1-C6烷基或三卤代甲基，或者e)Rc、Re和Rf代表氢原子，而Rb和Rd代表甲基。
应当理解本发明的衍生物与B组链阳性菌素的组合也在本发明的范围内。
在体内，以口服和/或皮下方式，对金黄色葡萄球菌IP 8203在小鼠中的试验感染，在剂量为25-150毫克/千克下(CD50)，这些化合物与原始霉素IB、原始霉素IA或quinupristine(以30/70配合)产生了协同抗菌活性。
最后，本发明的产品因它们的低毒性而特别有利。皮下方式用药剂量为300毫克/千克或高于300毫克/千克时，没有任何一种产品表现出毒性。
特别感兴趣的是如下通式(I)产品以及它们的盐，式中R1是-NR′R″，其中R′是氢原子或甲基，而R″是氢原子、烷基、环烷基、烯丙基、丙炔基、苄基或-OR，R是含有1-6个碳原子的烷基、烯丙基或丙炔基，或R″代表-NR3R4，R3和R4可以代表甲基，或它们和与其结合的氮原子一起构成饱和或不饱和的4或5元杂环，这些杂环还可以含有选自氮、氧或硫的另一杂原子，R2是氢原子或甲基或乙基，而键
代表单键或双键，16位的链当R″不是-OR或-NR3R4时，表示差向异构体R或以差向异构体R为主的差向异构体R和S混合物，而当R″是-OR或-NR3R4时，表示差向异构体R和S及其它们的混合物；在这些产品中，尤其特别感兴趣的是如下通式(I)衍生物以及它们的盐，式中R1是-NR′R″，其中R′是氢原子或甲基，而R″是氢原子、含有1-4个碳原子的烷基、环烷基、烯丙基、丙炔基、苄基或-OR，R是含有1-3个碳原子的烷基、烯丙基或丙炔基，或R″代表-NR3R4，R3和R4可以同与其结合的氮原子一起构成5元饱和杂环，R2是甲基或乙基，而键
代表单键或双键，16位的链如上面所定义。
更特别地，在这些产品中，下述衍生物很有意义·(16R)-16-二甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIA；·(16R)-16-甲氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB；·(16R)-16-乙氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB；·(16R)-16-烯丙氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB；·(16R)-16-甲氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIA。
非限制性地给出以下实施例用于说明本发明。
在下述实施例中，术语16-脱氧原始霉素IIA(或IIB)表示用2个氢原子置换16位酮官能团。
实施例1(16R)-16-苄基氨基-16-脱氧原始霉素IIB在约20℃和氩气氛下，往1.06克原始霉素IIB在15毫升甲醇中的溶液添加3克硫酸镁和0.328毫升苄基胺。在搅拌24小时之后，加入0.151克氰基硼氢化钠和0.5毫升乙酸。将反应混合物搅拌1小时，然后用赛力特硅藻土(Celite)过滤。赛力特硅藻土用100毫升甲醇洗涤，滤液在减压(2.7千帕)下浓缩，得到残余物，将其稀释在200毫升二氯甲烷中。有机相每次用100毫升5％碳酸氢钠水溶液洗涤2次。倾析有机相，水相每次用50毫升二氯甲烷重复操作2次。有机相经合并后再用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩，得到1.3克残余物，残余物用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇-乙腈(以体积计84-8-8)]。这样得到0.424克呈黄色粉末状的16-苄基氨基-16-脱氧原始霉素IIB异构体混合物[(16R)/(16S)＝65/35]，和0.144克呈黄色粉末状的16-苄基氨基-16-脱氧原始霉素IIB异构体混合物[(16R)/(16S)＞95/5]。这些混合物中每一种都采用HPLC进行纯化[柱C18(15-20微米)，(λ＝254纳米)，洗脱剂乙腈-水(以体积计80/20)]，总共得到0.250克(16R)-16-苄基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈浅黄色粉末状，熔化温度130℃(分解)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.95和1.00(2d，J＝6.5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.08(d，J＝6,5Hz，3H32位CH3)；1.43(mt，1H15位CH2的1H)；1.68(s，3H33位CH3)；1.70-2.00(mt，5H15位CH2的1H-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；2.12(mt，1H26位CH2的1H)；2.65-2.80(mt，1H4位CH)；2.78和3.18(2dd，分别J＝16和8Hz和J＝16和4Hz，每个1H17位CH2)；3.25(rn t，1H16位CH)；3.47(mt，1H9位CH2的1H)；3.80(mt，1H24位CH2的1H)；3.81和4.02(2d，J＝14Hz，每个1HCH2N)；3.96(mt，1H24位CH2的1H)；4.38(mt，1H9位CH2的1H)；4.66(mt，1H14位CH)；4.70-4.80(mt，2H3位CH和27位CH)；5.36(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.64(mt，1H10位CH)；5,78(dd，J＝16和2Hz，1H6位CH)；6.00(mt，1HCONH)；6.14(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.50(dd，J＝16和5Hz，1H5位CH)；7.25-7.40(mt，5H苄基芳族H)；8.09(s，1H20位CH)。
实施例2(16R)-16-环丙基氨基-16-脱氧原始霉素IIB在约20℃和氩气氛下，往3克原始霉素IIB在30毫升甲醇中的溶液添加9克硫酸镁和0,6毫升环丙基胺。在搅拌17小时30分钟之后，加入0.43克氰基硼氢化钠，然后在30分钟之后加入0.5毫升乙酸。将反应混合物搅拌2小时，然后用赛力特硅藻土过滤。赛力特硅藻土用甲醇洗涤，然后滤液在减压(2.7千帕)下浓缩得到4.64克黄色“烤蛋白”，将其溶解在100毫升乙酸乙酯和5毫升甲醇中，再每次用25毫升蒸馏水洗涤3次。有机相合并后用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩，得到2.2克黄色“烤蛋白”，用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇-乙腈(以体积计84-8-8)]。分离得到0.61克黄色粉末，该粉末在15毫升乙醚中搅拌，过滤，再在30℃下减压(2.7千帕)干燥，得到0.508克(16R)-16-环丙基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈奶油色粉末状，熔化温度135℃(分解)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.35-0.60(mt，4H环丙基的CH2)0.97和1.00(2d，J＝6,5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.08(d，J＝6,5Hz，3H32位CH3)；1.33(mt，1H15位CH2的1H)；1.70-2.00(mt，5H15位CH2的1H-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.77(s，3H33位CH3)；2.13(mt，1H26位CH2的1H)；2.29(mt，1H环丙基的CH)；2.74(mt，1H4位CH)；2.82和3.25(2dd，分别J＝16和8Hz和J＝16和4Hz，每个1H17位CH2)；3.33(mt，1H16位CH)；3.51(mt，1H9位CH2的1H)；3.83和3.99(2mt，每个1H24位CH2)；4.35(mt，1H9位CH2的1H)；4.65(mt，1H14位CH)；4.70-4.80(mt，2H3位CH和27位CH)；5.39(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.65(mt，1H10位CH)；5.79(dd，J＝17和2Hz，1H6位CH)；5.97(mt，1HCONH)；6.17(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.53(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)；8.12(s，1H20位CH)。
实施例3(16R)-16-烯丙基氨基-16-脱氧原始霉素IIB以与实施例1所描述的类似方式操作，但使用5克原始霉素IIB在70毫升甲醇中的溶液、15克硫酸镁和1.45毫升烯丙基胺，在24小时添加0.714克氰基硼氢化钠和5毫升乙酸之后，继续搅拌1小时，处理之后得到一固体，对它用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇(以体积计95-5)]，得到0.975克浅黄色粉末状的(16R)-16-烯丙基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，熔化温度122-124℃。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.96和1.00(2d，J＝6.5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.08(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.38(mt，1H15位CH2的1H)；1.65-2.00(mt，5H15位CH2的1H-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.77(s，3H33位CH3)；2.12(mt，1H26位CH2的1H)；2.70-2.80(mt，1H4位CH)；2.74和3.13(2dd，分别J＝16和8Hz和J＝16和5Hz，每个1H17位CH2)；3.20-3.35(mt，2H16位CH和CH2N的1H)；3.45-3.55(mt，2H9位CH2的1H和CH2N的1H)；3.83和3.98(2mt，每个1H24位CH2)；4.38(mt，1H9位CH2的1H)；4.70(mt，1H14位CH)；4.65-4.80(mt，2H3位CH和27位CH)5.15和5.24(2dd，分别J＝10和1.5Hz和J＝18和1.5Hz，每个1H烯丙基的＝CH2)；5.40(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.66(mt，1H10位CH)；5.80(dd，J＝17和2.5Hz，1H6位CH)；5.85-6.00(mt，2H烯丙基的CH＝和CONH)；6.16(d，J＝16Hz，1H11位CH)6.52(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)；8.10(s，1H20位CH)。
实施例4(16R)-16-丙炔-2-基氨基-16-脱氧原始霉素IIB以与实施例1所描述的类似方式操作，但使用5克原始霉素IIB在70毫升甲醇中的溶液、10克硫酸镁和1.3毫升炔丙基胺，在22小时添加0.714克氰基硼氢化钠和5毫升乙酸之后，继续搅拌3小时30分钟，处理之后得到5.5克固体，对它用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇(以体积计96-4)]，得到0.266克赭色粉末状的(16R)-16-丙炔-2-基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，熔化温度124℃(déc)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.95和1.00(2d，J＝6.5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.07(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.53(mt，1H15位CH2的1H)；1.60-2.00(mt，5H15位CH2的1H-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.79(s，3H33位CH3)；2.13(mt，1H26位CH2的1H)；2.26(t.J＝2Hz，1H丙炔基的CH)；2.70-2.80(mt，1H4位CH)；2.76和3.16(2dd，分别J＝16和8Hz和J＝16和4Hz，每个1H17位CH2)；3.36(mt，1H16位CH)；3.48(mt，1H9位CH2的1H)；3.56(限制性AB，2H丙炔基NCH2)；3.84和3.99(2mt，每个1H24位CH2)；4.40(mt，1H9位CH2的1H)；4.65-4.80(mt，3H3位CH-14位CH和27位CH)；5.36(d，.J＝9Hz，1H13位CH)；5.69(mt，1H10位CH)；5.80(dd，J＝16和2Hz，1H6位CH)；6.11(mt.1HCONH)；6.17(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.52(dd，J＝16和5Hz，1H5位CH)；8.08(s，1H20位CH)。
实施例5
(16R)-16-[(R)-仲丁基氨基]-16-脱氧原始霉素IIB以与实施例1所描述的类似方式操作，但使用5克原始霉素IIB在70毫升甲醇中的溶液、10克硫酸镁和1.92毫升(R)-仲丁基胺，在搅拌20小时时添加0.714克氰基硼氢化钠和5毫升乙酸之后，继续搅拌2小时30分钟，处理之后得到5.6克固体，对它用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇(以体积计96-4)]，得到0.680克黄色粉末状的(16R)-16-[(R)-仲丁基氨基]-16-脱氧原始霉素IIB，熔化温度156℃(dec)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.15(mt，15H30位CH3-31位CH3-32位CH3和N-2-丁基的2个CH3)；1.28(mt，2HN-1-甲丙基的CH2)；1.50-2.20(mt，7H15位CH2-25位CH2-26位CH2和29位CH)；1.79(s，3H33位CH3)；2.74(mt，1H4位CH)；3.00-3.10(mt，2HN-1-甲基丙基的CH和17位CH2的1H)；3.25(dd，J＝16和4Hz，1H17位CH2的1H)；3.50-3.60(mt，2H9位CH2的1H和16位CH)；3.80和3.95(2mt，每个1H24位CH2)；4.28(mt，1H9位CH2的1H)；4.70-4.85(mt，3H3位CH-14位CH和27位CH)；5.41(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.68(mt，1H10位CH)；5.80(d，J＝16Hz，1H6位CH)；6.10-6.25(宽mf.1HCONH)；6.18(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.55(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)；8.11(s，1H20位CH)。
实施例6(16R)-16-[(S)-仲丁基氨基]-16-脱氧原始霉素IIB以与实施例1所描述的类似方式操作，但使用5克原始霉素IIB在70毫升甲醇中的溶液、10克硫酸镁和1.92毫升(S)-仲丁基胺，在搅拌20小时后添加0.714克氰基硼氢化钠和5毫升乙酸。再反应混合物搅拌2小时30分钟，处理之后得到一固体，对它用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇(以体积计96-4)]，得到的固体在热乙腈中重结晶，得到0.590克黄色粉末状的(16R)-16-[(S)-仲丁基氨基]-16-脱氧原始霉素IIB，熔化温度150℃(déc)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.15(mt，15H30位CH3-31位CH3-32位CH3和N-1-甲基丙基的2个CH3)；1.44(五重峰，J＝7Hz，2HN-1-甲基丙基的CH2)；1.60-2.00(mt，5H15位CH2的1H-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.76(s，3H33位CH3)；2.04(宽d，J＝14Hz，1H15位CH2的1H)；2.11(mt，1H26位CH2的1H)；2.65-2.85(mt，1H4位CH)；2.70和3.12(2dd，分别J＝16和11Hz和J＝16和4Hz，每个1H17位CH2)；2.80(mt，1HN-1-甲基丙基的CH)；3.35(mt，1H16位CH)；3.50(mt，1H9位CH2的1H)；3.81和3.98(2mt，每个1H24位CH2)；4.33(mt，1H9位CH2的1H)；4.65-4.80(mt，3H3位CH-14位CH和27位CH)；5.43(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.62(mt，1H10位CH)；5.78(dd，J＝16和2Hz，1H6位CH)；5.86(mt，1HCONH)；6.17(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.53(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)；8.12(s，1H20位CH)。
实施例716-氨基-16-脱氧原始霉素IIB[(16R)/(16S)＝75/25异构体混合物]在约20℃和氩气氛下，往100克原始霉素IIB在1400毫升甲醇中的溶液添加200克硫酸镁、74克乙酸铵和28克氰基硼氢化钠。在搅拌20小时之后，反应混合物用赛力特硅藻土过滤，然后赛力特硅藻土用甲醇洗涤。滤液在减压(2.7千帕)下浓缩得到栗色油，将其分成两个相等的份，将每份稀释在1000毫升二氯甲烷中，然后用5％碳酸氢钠水溶液处理。倾析有机相，水相用1000毫升二氯甲烷提取。有机相合并后，用饱和氯化钠水溶液洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到97.5克深黄色粉末。该粉末用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇(以体积计70-30)]。得到21.7克16-氨基-16-脱氧原始霉素IIB((16R)/(16S)＝75/25异构体混合物)，呈米黄色粉末状。
1HN.M.R.谱[75％顺式(16R)异构体与25％反式(16S)异构体](400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.94和0.98(2d，J＝6.5Hz顺式异构体的30位CH3和31位CH3)；0.90-1.15(mt反式异构体的30位CH3-31位CH3和32位CH3)；1.07(d，J＝6.5Hz顺式异构体32位CH3)；1.46(mt顺式异构体15位CH2的1H)；1.65-2.00(mt顺式异构体15位CH2的1H-反式异构体15位CH2的1H-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.73和1.78(2s分别为反式异构体33位CH3和顺式异构体33位CH3)；2.00-2.30(mt反式异构体15位CH2的1H和26位CH2的1H)；2.65-2.80(mt4位CH和顺式异构体17位CH2的1H)；2.80-2.90(mt反式异构体17位CH2)；2.95(dd，J＝16和5Hz顺式异构体17位CH2的1H)；3.30-3.45(mt反式异构体9位CH2的1H和顺式异构体16位CH)；3.48(mt顺式异构体9位CH2的1H)；3.63(mt反式异构体16位CH)；3.80和3.91(2mt分别为反式异构体24位CH2和顺式异构体24位CH2)；4.37(mt顺式异构体9位CH2的1H)；4.45(mt反式异构体9位CH2的1H)；4.65-4.80(mt顺式异构体3位CH-27位CH和14位CH)；4.85(mt反式异构体14位CH)；5.40(d，J＝9Hz顺式异构体13位CH)；5.65(mt10位CH)；5.70-5.85(mt反式异构体6位CH和13位CH)；6.00-6.15(mtCONH)；6.18和6.22(2d，J＝16Hz，分别为顺式异构体11位CH和反式异构体11位CH)；6.45和6.52(2dd，J＝16和5Hz分别为反式异构体5位CH和顺式异构体5位CH)；8.09和8.10(s分别为顺式异构体20位CH和反式异构体20位CH)。
采用高效液相色谱由16-氨基-16-脱氧原始霉素IIB((16R)/(16S)＝75/25异构体混合物)，得到(16R)-16-氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈白色粉末状，在约130℃熔化(分解)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.95和0.99(2d，.J＝6.5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.08(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.45(mt，1H15位CH2的1H)；1.65-2.00(mt，5H15位CH2的1H-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.79(s，3H33位CH3)；2.12(mt，1H26位CH2的1H)；2.70-2.80(mt，1H4位CH)；2.76和2.98(2dd，分别J＝16和8 Hz和J＝16和5Hz.每个1H17位CH2)；3.42(mt，1H16位CH2)；3.48(mt，1H9位CH2的1H)；3.93(mt，2H24位CH2)；4.40(mt，1H9位CH2的1H)；4.70-4.80(mt，3H3位CH-14位CH和27位CH)；5.42(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.67(mt，1H10位CH)；5.79(dd，J＝17和2.5Hz，1H6位CH)；5.93(mt，1HCONH)；6.18(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.52(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)8.12(s，1H20位CH)。
实施例816-甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIB[(16R)/(16S)＝70/30异构体混合物]在约20℃和氩气氛下，往20克原始霉素IIB在280毫升甲醇中的溶液添加56克硫酸镁和9.46毫升甲基胺在乙醇中的溶液(约8M)。将反应混合物在约20℃下搅拌24小时。这时反应混合物用赛力特硅藻土过滤，然后赛力特硅藻土用甲醇洗涤多次。往滤液添加2.86克氰基硼氢化钠和9.46毫升乙酸。在将反应混合物搅拌5小时之后，所得到的溶液在30℃下减压(2.7千帕)浓缩至干。残余物溶解于200毫升二氯甲烷中，然后用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。倾析含水相，然后用3×100毫升二氯甲烷提取。有机相合并后，用硫酸镁干燥，过滤，然后在减压(2.7千帕)下浓缩，得到17.8克橙色粉末，该粉末用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇(以体积计60/40)]。这样分离得到10.5克16-甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIB((16R)/(16S)＝70/30异构体混合物)，呈黄色粉末状。
1HN.M.R.谱[70％(16R)顺式异构体与30％(16S)反式异构体](400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.10(mt，9H30位CH3-31位CH3和32位CH3)；1.20-1.40(mt顺式异构体15位CH2的1H)；1.65-2.00(mt顺式异构体15位CH2的1H-反式异构体15位CH2的1H-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.73和1.77(2s分别为反式异构体33位CH3和顺式异构体33位CH3)；2.05-2.15(mt26位CH2的1H)；2.18(dt，J＝15和3Hz，反式异构体15位CH2的1H)；2.20-2.60(宽的mfNH)；2.51和2.52(2s分别为反式异构体NCH3和顺式异构体NCH3)；2.60(dd，J＝16和11Hz反式异构体17位CH2的1H)；2.70-2.80(mt4位CH)；2.75(dd，J＝16和8Hz顺式异构体17位CH2的1H)；3.05-3.20(mt顺式异构体17位CH2的1H和16位CH)；3.30-3.40(mt反式异构体9位CH2的1H和反式异构体16位CH)；3.48(mt顺式异构体9位CH2的1H)；3.83和3.98(2mt，总共2H24位CH2)；4.37(mt顺式异构体9位CH2的1H)；4.50(mt反式异构体9位CH2的1H)；4.65-4.80(mt3位CH-27位CH和顺式异构体14位CH)；4.83(mt反式异构体14位CH)；5.39(d，J＝9Hz顺式异构体13位CH)；5.65(mt，1H10位CH)；5.70-5.85(mt反式异构体6位CH和13位CH)；5.96(mt，1HCONH)；6.16和6.23(2d，J＝16Hz，总共1H分别为顺式异构体11位CH和反式异构体11位CH)；6.45和6.52(2dd，J＝16和5Hz，总共1H分别为反式异构体5位CH和顺式异构体5位CH)；8.10和8.12(s分别为顺式异构体20位CH和反式异构体20位CH)。
采用高效液相色谱由16-甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIB((16R)/(16S)＝70/30异构体混合物)，得到(16R)-16-甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈黄色固体状，在约128℃熔化(分解)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.96和1.00(2d，J＝6.5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.08(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.33(mt，1H15位CH2的1H)；1.60-2.05(mt，5H15位CH2的1H-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.75(s，3H33位CH3)；2.11(mt，1H26位CH2的1H)；2.53(s，3HNCH3)；2.70-2.80(mt，1H4位CH)；2.75和3.12(2 dd，分别J＝16和8Hz和J＝16和4Hz，每个1H17位CH2)；3.10-3.20(mt，1H16位CH)；3.48(mt，1H9位CH2的1H)；3.82和3.98(2mt，每个1H24位CH2)；4.37(mt，1H9位CH2的1H)；4.65-4.80(mt，3H3位CH-14位CH和27位CH)；5.40(d，J＝9Hz.1H13位CH)；5.64(mt，1H10位CH)；5.78(dd，J＝17和2.5Hz.1H6位CH)；5.96(mt，1HCONH)；6.16(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.52(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)；8.10(s，1H20位CH)。
实施例9(16R)-16-异丙基氨基-16-脱氧原始霉素IIB在约20℃和氩气氛下，往12克原始霉素IIB在120毫升甲醇中的溶液添加72克硫酸镁、8.8克乙酸铵和3.3克氰基硼氢化钠。在搅拌20小时之后，加入33.5毫升丙酮，反应混合物在约20℃下搅拌7小时之后用赛力特硅藻土过滤。赛力特硅藻土用二氯甲烷洗涤多次，合并的滤液在30℃减压(2.7千帕)下浓缩至干。将残余物溶解在400毫升二氯甲烷中，这样得到的溶液用3×200毫升饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。最后的有机相在30℃下减压(2.7千帕)浓缩至干，得到11.3克橙色粉末，对它用快速色谱纯化[以梯度方式洗脱正丁醇-乙酸乙酯-乙醇-水(以体积计10-60-15-15，然后20-50-15-15，再30-40-15-15)]，得到2.92克16-异丙基氨基-16-脱氧原始霉素IIB((16R)/(16S)＝75/25异构体混合物)，呈黄色粉末状。两种差相异构体采用离心分配色谱继续分离[洗脱剂乙酸乙酯-己烷-甲醇-水(以体积计2-1-1-1.8)]，得到0.77克(16R)-16-异丙基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈白色粉末状。将该粉末溶解于10.8毫升0.1N盐酸和27.7毫升水的混合物中。将如此得到的溶液进行过滤，滤液冻干得到0.72克(16R)-16-异丙基氨基-16-脱氧原始霉素IIB盐酸盐，白色粉末状，在约135℃熔化(分解)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.05(mt，6H30位CH3和31位CH3)；1.07(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.44和1.54(2d，J＝6.5Hz，每个3H异丙基的2个CH3)；1.70-2.25(mt，7H15位CH2-25位CH2-26位CH2和29位CH)；1.85(s，3H33位CH3)；2.74(mt，1H4位CH)；3.34(mt，2H17位CH2)；3.45(mt，1H异丙基的CH)；3.56(mt，1H9位CH2的1H)；3.67(mt，1H16位CH)；3.82和3.95(2mt，每个1H24位CH2)；4.31(mt，1H9位CH2的1H)；4.70-4.80(mt，2H3位CH和27位CH)；4.85(mt，1H14位CH)；5.41(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.75(mt，1H10位CH)；5.83(dd，J＝16和2Hz，1H6位CH)；6.22(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.46(mt，1HCONH)；6.54(dd，J＝16和5Hz，1H5位CH)；8.10(s20位CH)。
实施例10(16R)-16-二甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIB在约20℃和氩气氛下，往20克原始霉素IIB在300毫升甲醇中的溶液添加50克硫酸镁和9.5毫升甲胺。在搅拌22小时之后，将反应混合物冷却到-5℃，再添加16.1克三乙酰氧基硼氢化钠。将反应混合物在-5℃至0℃之间搅拌5小时，然后在12小时内将温度升到约20℃。然后加入11.35克多聚甲醛，然后在搅拌6小时之后，加入16.1克三乙酰氧基硼氢化钠。搅拌1小时后加入2.27克多聚甲醛。搅拌16小时后，反应混合物用赛力特硅藻土过滤。赛力特硅藻土用300毫升甲醇洗涤，滤液在减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到残余物，将该残余物稀释在500毫升二氯甲烷中。有机相用600毫升5％碳酸氢钠水溶液洗涤。倾析出有机相，水相每次用500毫升二氯甲烷重复操作两次。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，再在30℃下减压(2.7千帕)浓缩至干，得到23克栗色粉末，对它用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇-乙腈(以体积计90-5-5)]。这样得到3.4克(16R)-16-二甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈米色-栗色粉末状，在约122℃熔化(分解)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.95和0.98(2d，J＝6.5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.07(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.60-2.00(mt，6H15位CH2-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.78(s，3H33位CH3)；2.11(mt，1H26位CH2的1H)；2.36(s，6HN(CH3)2)；2.61(dd，J＝16和10Hz，1H17位CH2的1H)；2.72(mt，1H4位CH)；2.98(dd，J＝16和4Hz，1H17位CH2的1H)；3.21(mt，1H16位CH)；3.52(mt，1H9位CH2的1H)；3.83和3.92(2mt，每个1H24位CH2)；4.32(mt，1H9位CH2的1H)；4.67(mt，1H14位CH)；4.74(dd，J＝9和3Hz.1H27位CH)；4.79(dd，J＝10和2Hz.1H3位CH)；5.35(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.65(mt，1H10位CH)；5.78(dd，J＝16和2Hz，1H6位CH)；6.07(mt，1HCONH)；6.17(d，J＝16Hz，1H11位CH)6.53(dd，J＝16和5Hz，1H5位CH)；8.06(s20位CH)。
实施例11(16R)-16-(烯丙基)(甲基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB在约20℃和氮气氛下，往7克原始霉素IIB在100毫升甲醇中的溶液添加20克硫酸镁和2.3毫升烯丙基胺。在搅拌21小时45分钟之后，再添加0.5毫升烯丙基胺，然后在4小时45分钟后加1.67克氰基硼氢化钠，再加入7毫升乙酸。将反应混合物搅拌4小时30分钟后另加入100毫克氰基硼氢化钠。再搅拌25小时之后，加入2.39克多聚甲醛，继续搅拌。以半小时间隔分3次加同样量的多聚甲醛，在加完最后一次后1小时添加450毫克氰基硼氢化钠、3.5毫升乙酸，然后再加2.39克多聚甲醛。在搅拌19小时30分钟之后，反应混合物用赛力特硅藻土过滤，用甲醇冲洗。滤液在30℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，然后将得到的残余物用300毫升二氯甲烷溶解，用600毫升5％碳酸氢钠水溶液洗涤。水相经倾析后用200毫升二氯甲烷提取。合并有机相，用300毫升蒸馏水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，再在减压(2.7千帕)浓缩至干，所得固体在20℃减压(90帕)下干燥，然后用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇(以体积计95-5)]。得到1.25克(16R)-16-(烯丙基)(甲基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈碎的白色固体状，在约124℃熔化(分解)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.95和0.99(2d，J＝6.5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.08(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.65-2.00(mt，6H15位CH2-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.78(s，3H33位CH3)；2.12(mt，1H26位CH2的1H)；2.32(s，3HNCH3)；2.64和2.98(2dd，分别J＝16和10Hz和J＝16和4Hz，每个1H17位CH2)；2.73(mt，1H4位CH)；3.05和3.28(2dd，分别J＝14和7Hz和J＝14和6Hz，每个1HN(烯丙基)的CH2；3.35(mt，1H16位CH)；3.52(mt，1H9位CH2的1H)；3.84和3.93(2mt，每个1H24位CH2)；4.34(mt，1H9位CH2的1H)；4.67(mt，1H14位CH)；4.75(dd，J＝9和2.5Hz，1H27位CH)；4.80(dd，J＝8和1.5Hz，1H3位CH)；5.19和5.23(分别d，J＝10Hz和dd，J＝18和1.5Hz，每个1H烯丙基的＝CH2)；5.36(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.67(mt，1H10位CH)；5.80(dd，J＝17和2.5Hz，1H6位CH)5.80-5.95(mt，1H烯丙基的CH＝)；6.02(mt，1HCONH)；6.18(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.53(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)；8.07(s，1H20位CH)。
实施例1216-丙炔-2-基氨基-16-脱氧原始霉素IIA[(16R)/(16S)＝65/35异构体混合物]在约20℃和氩气氛下，往0.5克原始霉素IIA在70毫升无水乙腈中的溶液添加0.130毫升炔丙基胺，再添加0.053毫升乙酸。反应混合物在约20℃下搅拌18小时，然后再加入0.13毫升炔丙基胺。将混合物在约20℃搅拌4小时，再在约30℃减压(2.7千帕)下浓缩直到出现不溶物。然后在约20℃和氩气氛下添加0.072克氰基硼氢化钠，然后添加1.2毫升浓乙酸。将混合物在约20℃下搅拌1小时30分钟。将反应混合物在减压(2.7千帕)下浓缩至干。得到的残余物再用二氯甲烷溶解，有机相用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次。水相经合并后用二氯甲烷提取。有机相合并后用硫酸镁干燥，用烧结玻璃过滤器过滤，再在减压(2.7千帕)浓缩至干。得到的残余物用制备板色谱纯化(Merck 60F254硅胶；厚度＝2毫米，20×20厘米)，用二氯甲烷-甲醇-乙腈混合物(以体积计9-5-5)洗脱，得到0.205克16-丙炔-2-基氨基-16-脱氧原始霉素IIA((16R)/(16S)＝65/35异构体混合物)，呈米色粉末状。
1HN.M.R.谱[65％顺式(16R)异构体与35％反式(16S)异构体](400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.05(mt，6H30位CH3和31位CH3；1.05-1.20(mt，3H32位CH3)；1.50-2.10(mt15位CH2和29位CH)；1.64和1.74(2s分别为反式异构体33位CH3和顺式异构体33位CH3)；2.27和2.32(2t.J＝2.5Hz分别为顺式异构体的2-丙炔基CH和反式异构体的2-丙炔基CH)；2.55-2.95(mt25位CH2-17位CH2的1H-顺式异构体16位CH和4位CH)；3.00(dd，J＝14和2.5Hz顺式异构体17位CH2的1H)；3.22(dd，J＝14和2.5Hz反式异构体17位CH2的1H)；3.36(mt反式异构体9位CH2的1H)；3.45-3.60(mt2-炔丙基的NCH2和反式异构体16位CH)；3.82(宽d，J＝18Hz顺式异构体9位CH2的1H)；4.10-4.60(mt24位CH2-9位CH2的1H和顺式异构体14位CH)；4.75-4.85(mt反式异构体14位CH和顺式异构体13位CH)；4.90-5.00(mt，1H3位CH)；5.45-5.60(mt反式异构体10位CH)；5.50(d，J＝8Hz反式异构体13位CH)；5.64(mt顺式异构体10位CH)；5.80-6.10(mt6位CH-11位CH和反式异构体26位CH)；6.13(t.J＝3Hz顺式异构体26位CH)；6.53(dd，J＝16和6Hz反式异构体5位CH)；6.55-6.70(mt反式异构体CONH)；6.61(dd，.J＝16和7Hz顺式异构体5位CH)；7.48(mt顺式异构体CONH)；7.87和8.08(2s分别为顺式异构体20位CH和反式异构体20位CH)。
实施例1316-烯丙基氨基-16-脱氧原始霉素IIA[(16R)/(16S)＝65/35异构体混合物]往保持在约20℃下的0.5克原始霉素IIA在15毫升乙腈和0.143毫升烯丙基胺中的悬浮液添加0.054毫升乙酸。反应混合物在约20℃下1小时后，相继地加入0.072克氰基硼氢化钠，再加1毫升乙酸。在约20℃下1小时后，往反应混合物添加7毫升水和15毫升二氯甲烷。有机相倾析后每次用10毫升饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次。水相用10毫升二氯甲烷提取。有机相合并后用硫酸镁干燥，过滤，再在温度40℃减压(2.7千帕)浓缩。这样得到鲜黄色“烤蛋白”，该产物用薄层制备性色谱纯化6块Merck.Kieselgel 60F254制备板，20×20厘米，厚度2毫米，以二氯甲烷溶液点样，采用二氯甲烷-甲醇-乙腈混合物(以体积计80-10-10)展开，得到0.179克16-烯丙基氨基-16-脱氧原始霉素IIA((16R)/(16S)＝65/35异构体混合物)，呈奶油色“烤蛋白”状。
1HN.M.R.谱[(16R)异构体(16S)异构体＝65/35的混合物](400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.95-1.05(mt，6H30位CH3和31位CH3)；1.10-1.20(mt，3H32位CH3)；1.64和1.71(2s，总共3H分别为反式异构体33位CH3和顺式异构体33位CH3)；1.70-2.10(mt，3H15位CH2和29位CH)；2.60-2.90(mt25位CH2-17位CH2的1H-顺式异构体16位CH和4位CH)；3.06(宽d，J＝14Hz顺式异构体17位CH2的1H)；3.22(宽d，J＝15Hz反式异构体17位CH2的1H)；3.30-3.55(mt反式异构体9位CH2的1H-烯丙基的NCH2和反式异构体16位CH)；3.85(宽d，J＝18Hz顺式异构体9位CH2的1H)；4.10-4.60(mt24位CH2-9位CH2的1H和顺式异构体14位CH)；4.80(mt反式异构体14位CH)；4.87(宽d，J＝8 Hz顺式异构体13位CH)；4.90-5.00(mt，1H3位CH)；5.15-5.30(mt烯丙基的＝CH2)；5.45-5.60(mt反式异构体10位CH)；5.55(d，J＝9Hz反式异构体13位CH)；5.63(mt顺式异构体10位CH)；5.85-6.10(mt6位CH-11位CH-反式异构体26位CH和烯丙基＝CH)；6.14(宽s顺式异构体26位CH)；6.45-6.60(mt反式异构体5位CH和反式异构体CONH)；6.62(dd，J＝16和7Hz顺式异构体5位CH)；7.39(mt顺式异构体CONH)；7.8R和8.07(2s分别为顺式异构体20位CH和反式异构体20位CH)。
实施例14(16R)-16-二甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIA往28.5克原始霉素IIA在780毫升无水乙腈中的溶液，在约20℃和氩气氛下添加6.9毫升甲胺(8M，在乙醇中)，然后加1.43毫升乙酸。反应混合物在约20℃下搅拌48小时，再在氩气氛下加入3.8克氰基硼氢化钠和12毫升乙酸。反应混合物在约20℃下搅拌3小时后，再加入11毫升乙酸。将反应混合物在约20℃下再搅拌7.5小时。然后加入6克多聚甲醛，将反应混合物在约20℃下继续搅拌17小时。将得到的白色悬浮液过滤，滤液在温度约30℃减压(2.7千帕)下浓缩。残余的稠厚油再用800毫升乙酸乙酯和用300毫升水溶解。在搅拌约15分钟之后，所得溶液的pH首先用浓氢氧化钠调节到9，然后用150毫升1N氢氧化钠调节到11。得到的混合物搅拌1小时后，再加50毫升1N氢氧化钠，并再搅拌约1小时。生成的混合物倾析后，有机相每次用100毫升水洗涤2次，然后用1N HCl提取3次(相继用量为1000毫升、100毫升和50毫升)。合并的酸性水溶液用200毫升乙醚提取，然后加入23毫升浓氢氧化钠碱化到pH 10-11。得到的水相每次用300毫升二氯甲烷提取2次，合并有机相，用100毫升水洗涤，用硫酸镁干燥，用烧结玻璃过滤器过滤，然后在温度约30℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到白色固体。这种固体在200毫升乙醚中搅拌，然后过滤，再干燥至恒重(90帕，在约20℃下)，得到20克白色粉末。这种粉末用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇-乙腈(以体积计92-4-4，然后84-8-8)]，得到5.2克(16R)-16-二甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIA，呈白色固体状。4.5克这种固体在乙腈-水混合物(18毫升-9毫升)中重结晶，在沥干和减压(90帕，在约20℃下)下干燥之后得到3.46克粉末，其在约212℃熔化。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.05(mt，6H30位CH3和31位CH3)；1.13(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.63(mt，1H15位CH2的1H)；1.73(s，3H33位CH3)；1.95-2.10(mt，2H15位CH2的1H和29位CH)；2.36(s，6HN(CH3)2)；2.50-2.65(mt，2H17位CH2的1H和16位CH)；2.65-2.75(mt，2H4位CH和25位CH2的1H)；2.80-2.95(mt，1H25位CH2的1H)；2.97(d，J＝11Hz，1H17位CH2的1H)；3.79(宽d，J＝18Hz，1H9位CH2的1H)；4.21(mt，1H24位CH2的1H)；4.30-4.50(mt，3H9位CH2的1H-24位CH2的1H和14位CH)；4.79(d，J＝9Hz，1H13位CH)；4.97(dd，J＝10和1.5Hz，1H3位CH)；5.64(mt，1H10位CH)；5.90(宽d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.04(d，J＝16Hz，1H6位CH)；6.13(t.J＝3Hz，1H26位CH)；6.62(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)；7.51(mt，1HCONH)；7.87(s20位CH).
实施例15(16R)-16-甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIA如实施例12和13中所描述的那样操作，但使用原始霉素IIA，得到(16R)-16-甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIA，呈奶油色“烤蛋白”状，在约130℃熔化(分解)。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ.以ppm计)0.90-1.05(mt，6H30位CH3和31位CH3)；1.12(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.72(s，3H33位CH3)；1.80-2.10(mt，3H15位CH2和29位CH)；2.58(s，3HNCH3)；2.60-2.90(mt，4H4位CH-17位CH2的1H和25位CH2)；3.12(dd，J＝14和1.5Hz，1H17位CH2的1H)；3.35-3.45(mt，1H16位CH)；3.86(宽d，.J＝18Hz，1H9位CH2的1H)；4.18-4.40(mt，3H9位CH2的1H和24位CH2)；4.55(mt，1H14位CH)；4.89(d，J＝9Hz，1H13位CH)；4.93(dd，J＝10和1.5Hz，1H3位CH)；5.62(mt，1H10位CH)；5.90(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.01(d，J＝16Hz，1H6位CH)；6.14(t.J＝3Hz，1H26位CH)；6.61(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)；7.38(mt，1HCONH)；7.90(s，1H20位CH)。
实施例1616-苄基氨基-16-脱氧原始霉素IIA[(16R)/(16S)＝50/50异构体混合物]如实施例12和13中所描述的那样操作，但使用原始霉素IIA，得到16-苄基氨基-16-脱氧原始霉素IIA[(16R)/(16S)＝50/50异构体混合物]，呈白色粉末。
1HN.M.R.谱[50％顺式异构体(16R)和50％反式异构体(16S)](400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.95-1.05(mt，6H30位CH3和31位CH3)；1.05-1.20(mt，3H32位CH3)；1.45和1.63(2s分别为反式异构体33位CH3和顺式异构体33位CH3)；1.50-2.15(mt，多个3H15位CH2和29位CH)；2.60-2.95(mt25位CH2-反式异构体17位CH2的1H-顺式异构体17位CH2和4位CH)；3.12(mt顺式异构体16位CH)；3.29(宽d，J＝15Hz反式异构体17位CH2的1H)；3.35(mt反式异构体9位CH2的1H)；3.47(mt反式异构体16位CH)；3.80-4.10(mt顺式异构体9位CH2的1H和苄基NCH2)；4.10-4.45(mt24位CH2-顺式异构体9位CH2的1H和顺式异构体14位CH)；4.54(mt反式异构体9位CH2的1H)；4.75-4.85(mt反式异构体14位CH和顺式异构体13位CH)；4.90-5.00(mt，1H3位CH)；5.40(d，J＝8Hz反式异构体13位CH)；5.45-5.65(mt，1H10位CH)；5.80-6.05(mt，2H6位CH和11位CH)；6.08和6.14(2t.J＝3Hz.总共1H分别为反式异构体26位CH和顺式异构体26位CH)；6.45-6.55(mt反式异构体CONH)；6.54(dd，J＝16和6Hz反式异构体5位CH)；6.61(dd，J＝16和7Hz顺式异构体5位CH)；7.25-7.45(mt苯基的5H和顺式异构体CONH)；7.86和8.09(2s分别为顺式异构体20位CH和反式异构体20位CH)。
实施例17(16R)-16-甲氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB在保持在氮气氛下的瓶中放入10克原始霉素IIB的O-甲基肟(Z和E异构体混合物，70/30)在300毫升甲醇和100毫升乙酸中的溶液。将混合物冷却到-70℃后加入10.3克氰基硼氢化钠。温度缓慢地升到约20℃，搅拌下继续反应48小时。让氩气流通过放在抽风的通风橱里的溶液1小时，然后在约20℃减压(2.7千帕)下蒸去溶剂，残余物用200毫升二氯甲烷和100毫升蒸馏水溶解。通过加30毫升浓NaOH将水相碱化到pH8，将混合物搅拌30分钟后转移到倾析烧瓶中，倾析有机相，然后每次用100毫升蒸馏水洗涤2次。倾析有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后在约20℃减压(2.7千帕)下浓缩，得到无色的油，该油在乙醚中搅拌，过滤所得到的沉淀。这样得到9.1克白色粉末，该粉末用快速色谱纯化[洗脱剂；二氯甲烷-甲醇(以体积计97-3)]。分离得到1.88克(16R)-16-甲氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈白色粉末状，熔化温度195℃。
1HN.M.R.谱(600MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.95和1.00(2d，J＝6.5Hz.每个3H30位CH3和31位CH3)；1.07(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.60-2.00(mt，6H15位CH2-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.80(s，3H33位CH3)；2.15(mt，1H26位CH2的1H)；2.70-2.80(mt，1H4位CH)；2.76和3.24(2dd，分别J＝16和8Hz和J＝16和4Hz，每个1H17位CH2)；3.45-3.55(mt，2H16位CH和9位CH2的1H)；3.60(s，3H；OCH3)；3.92(mt，2H24位CH2)；4.43(mt，1H9位CH2的1H)；4.70-4.80(mt，3H3位CH-14位CH和27位CH)；5.34(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.70(mt，1H10位CH)5.80(dd，J＝16和2Hz，1H6位CH)；6.14(mt，1HCONH)；6.18(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.51(dd，J＝16和5Hz，1H5位CH)；8.09(s，1H20位CH)。
可以按下述方式制备原始霉素IIB的O-甲基肟(Z和E异构体混合物，70/30)往三颈瓶中加入20克原始霉素IIB在800毫升无水吡啶中的溶液，然后加入4.2克盐酸甲氧基胺。在搅拌21小时之后，在40℃减压(2.7千帕)下蒸去吡啶，然后用500毫升二氯甲烷和1升水溶解所得到的残余物。倾析有机相，每次用1升蒸馏水洗涤2次，用硫酸钠干燥，过滤，然后在温度约40℃减压(2.7千帕)下浓缩，得到残余物，残余物在300毫升乙醚中搅拌。过滤所得到的沉淀，在减压(90帕)下干燥，然后用快速色谱纯化[洗脱剂；二氯甲烷-甲醇(以体积计95-5)]。这样得到16.9克原始霉素IIB的O-甲基肟(Z和E异构体混合物，70/30)，呈白色固体状，约198-199℃熔化(分解)，它可原样用于随后的操作。
1HN.M.R.谱(300MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.10(mt，9H30位CH3-31位CH3和32位CH3)；1.73和1.74(2s.总共3H分别为E异构体33位CH3和Z异构体33位CH3)1.75-2.35(mt25位CH2-26位CH2-29位CH和E异构体15位CH2的1H)；2.51和2.65(2dd，分别J＝17和6Hz和J＝17和5HzZ异构体15位CH2)；2.65-2.80(mt，1H4位CH)；3.00(dd，J＝13和6HzE异构体15位CH2的1H)；3.22(d，J＝6HzZ异构体的OH)；3.30-3.45(mt，1H9位CH2的1H)；3.58和3.68(2d，J＝15HzE异构体17位CH2)；3.65-3.80(mt，1H24位CH2的1H)；3.62和4.04(2d，J＝16.5HzZ异构体17位CH2)；3.92和3.94(2s.总共3H分别为Z异构体OCH3和E异构体OCH3)；3.95-4.20(mt，1H24位CH2的1H)；4.35-4.55(mt，1H9位CH2的1H)；4.60-4.80(mt，2H3位CH和27位CH)；4.80-4.90(mtE异构体13位CH和Z异构体14位CH)；5.06(mtE异构体14位CH)；5.57(d，J＝9HzZ异构体13位CH)；5.60-5.90(mt.2H10位CH和6位CH)；6.05和6.14(2d.J＝16Hz，总共1H分别为E异构体11位CH和Z异构体11位CH)；6.28(mtZ异构体CONH)；6.47(d，J＝16和5Hz，1H5位CH)；7.47(mtE异构体CONH)；7.77(sE异构体20位CH)；8.08(sZ异构体20位CH)。
实施例18(16R)-16-乙氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB如实施例17那样操作，但使用1.53克原始霉素IIB的O-乙基肟(Z和E异构体混合物，50/50)在45毫升甲醇和15毫升乙酸中的溶液和1.67克氰基硼氢化钠，在反应67小时之后，得到1.4克白色固体，该固体用快速色谱纯化[洗脱剂；二氯甲烷-甲醇(以体积计97-3)]，得到360毫克(16R)-16-乙氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈白色固体状，熔化温度205℃。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.96和1.00(2d，J＝6.5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.08(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.19(t.J＝7Hz，3H乙基的CH)；1.60-2.00(mt，6H15位CH2-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.80(s，3H33位CH3)；2.14(mt，1H26位CH2的1H)；2.70-2.80(mt，1H4位CH)；2.76和3.26(2dd，分别J＝16和8Hz和J＝16和4Hz，每个1H17位CH2)；3.45-3.55(mt，2H16位CH和9位CH2的1H)；3.79(q.J＝7Hz，2H乙基的CH2)；3.93(mt，2H24位CH2)4.43(mt，1H9位CH2的1H)；4.70-4.80(mt，3H3位CH-14位CH和27位CH)；5.34(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.70(mt，1H10位CH)；5.80(dd，J＝16和2Hz，1H6位CH)；6.13(mt.1HCONH)；6.17(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.51(dd，J＝16和5Hz，1H5位CH)；8.08(s，1H20位CH)。
如实施例17那样操作可以制备原始霉素IIB的O-乙基肟(Z和E异构体混合物，70/30)，但使用12克原始霉素IIB、2.44克盐酸O-乙基羟基胺在400毫升吡啶中的溶液。提取并在乙醚中搅拌之后得到11.28克原始霉素IIB的O-乙基肟(Z和E异构体混合物，70/30)，呈亮黄色固体状，熔点约114℃(分解)，它可原样用于随后的操作。
Z/E两种异构体混合物(70/30)的1HN.M.R.谱(400 MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.10(mt，9H30位CH3-31位CH3和32位CH3)；1.25-1.35(mt，3H乙基的CH3)；1.70和1.75(2s，总共3H分别为E异构体33位CH3和Z异构体CH3)；1.75-2.35(mt25位CH2-26位CH2-29位CH和E异构体15位CH2的1H)；2.52和2.68(2dd，分别J＝16.5和6Hz和J＝16.5和5HzZ异构体15位CH2)；2.70-2.80(mt，1H4位CH)；3.02(dd，J＝13和5HzE异构体15位CH2的1H)；3.25(d，J＝6HzZ异构体的OH)；3.30-3.45(mt，1H9位CH2的1H)；3.61和3.72(2d，J＝15HzE异构体17位CH2)；3.70-3.80(mt，1H24位CH2的1H)；3.63和4.07(2d，J＝16HzZ异构体17位CH2)；4.00-4.25(mt，3H24位CH2的1H和OCH2)；4.40-4.55(mt，1H9位CH2的1H)；4.65-4.90(mt27位CH-3位CH和Z异构体14位CH)；4.91(d，J＝9HzE异构体13位CH)；5.08(mtE异构体14位CH)；5.59(d，I＝9HzZ异构体13位CH)；5.65-5.80(mt，1H10位CH)；5.79和5.85(2dd，分别J＝17和2Hz和J＝17和1.5Hz，总共1HZ异构体6位CH和E异构体6位CH)；6.06和6.15(2d，J＝16Hz，总共1H分别为E异构体11位CH和Z异构体11位CH)；6.24(mtZ异构体CONH)；6.40-6.55(mt，1H5位CH)；7.43(mtE异构体的CONH)；7.79(sE异构体20位CH)；8.09(sZ异构体20位CH)。
实施例19(16R)-16-烯丙氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB与实施例17同样操作，但使用1.46原始霉素IIB的O-烯丙基肟(Z和E异构体混合物，65/35)在42毫升甲醇中的溶液、14毫升乙酸和1.57克氰基硼氢化钠，在反应96小时之后，分离得到1.3克白色固体，该固体用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇(以体积计97-3)]，得到0.31克(16R)-16-烯丙氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈白色固体状，熔点130℃。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.95和1.00(2d，J＝6.5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.07(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.60-2.05(mt，6H15位CH2-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.80(s，3H33位CH3)；2.14(mt，1H26位CH2的1H)；2.24(宽s，1HOH)；2.70-2.85(mt，1H4位CH)；2.77和3.27(2dd，分别J＝16和8Hz和J＝16和4Hz，每个1H17位CH2)；3.45-3.55(mt，2H16位CH和9位CH2的1H)；3.92(mt，2H24位CH2)；4.25(mt，2HCH2O)；4.43(mt，1H9位CH2的1H)；4.70-4.80(mt，3H3位CH-14位CH和27位CH)；5.23和5.30(2dd.分别J＝10和1.5Hz和J＝18和1.5Hz，每个1H烯丙基的＝CH2)；5.34(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.60(mf.1HNH)；5.70(mt，1H10位CH)；5.80(dd，J＝16和2Hz，1H6位CH)；5.95(mt，1H烯丙基的CH)；6.12(mt，1HCONH)；6.18(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.51(dd，J＝16和5Hz，1H5位CH)；8.09(s，1H20位CH)。
如实施例17那样操作可以制备原始霉素IIB的O-烯丙基肟(Z和E异构体混合物，65/35)，但使用5克原始霉素IIB、1.14克盐酸O-烯丙基羟基胺在200毫升吡啶中的溶液。在提取并在乙醚中搅拌之后得到4.2克原始霉素IIB的O-烯丙基肟(Z和E异构体混合物，65/35)，呈赭色固体状，熔点102-104℃(分解)，它可原样用于随后的操作。
1HNMR.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.10(mt，9H30位CH3-31位CH3和32位CH3)1.73和1.74(2s，总共3H分别为E异构体33位CH3和Z异构体33位CH3)；1.75-2.35(mt25位CH2-26位CH2-29位CH和E异构体15位CH2的1H)；2.51和2.65(2dd，分别J＝17和6Hz和J＝17和5HzZ异构体15位CH2)；2.65-2.80(mt，1H4位CH)；3.00(dd，J＝13和6HzE异构体15位CH2的1H)；3.22(d，J＝6HzZ异构体的OH)；3.30-3.45(mt，1H9位CH2的1H)；3.58和3.68(2d，J＝15HzZ异构体17位CH2)；3.65-3.80(mt，1H24位CH2的1H)；3.62和4.04(2d，J＝16.5Hz，Z异构体17位CH2)；3.92和3.94(2s，总共3H分别Z异构体的OCH3和E异构体的OCH3)；3.95-4.20(mt，1H24位CH2的1H)；4.35-4.55(mt，1H9位CH2的1H)；4.60-4.80(mt，2H3位CH和27位CH)；4.80-4.90(mtE异构体13位CH和Z异构体14位CH)；5.06(mtE异构体14位CH)；5.57(d，J＝9HzZ异构体13位CH)；5.60-5.90(mt，2H10位CH和6位CH)；6.05和6.14(2d，J＝16Hz，总共1H分别为E异构体11位CH和Z异构体11位CH)；6.28(mtZ异构体CONH)；6.47(d，J＝16和5Hz，1H5位CH)；7.47(mtE异构体CONH)；7.77(sE异构体20位CH)；8.08(sZ异构体20位CH)。
实施例20(16R)-16-丙氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB与实施例17同样操作，但使用1.5原始霉素IIB的O-丙基肟(Z和E异构体混合物，50/50)在45毫升甲醇中的溶液、15毫升乙酸和1.61克氰基硼氢化钠，在反应50小时之后，分离得到1.4克白色固体，该固体用快速色谱纯化[洗脱剂；二氯甲烷-甲醇(以体积计97-3)]，得到0.31克(16R)-16-丙氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈白色固体状，熔点135℃。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.05(mt，9H30位CH3-31位CH3和丙基的CH3)；1.08(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.55-1.70(mt，3H15位CH2的1H和丙基中心的CH2)；1.70-2.00(mt，5H15位CH2的1H-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.80(s，3H33位CH3)；2.14(mt，1H26位CH2的1H)；2.20-2.35(宽的mf.1HOH)；2.70-2.80(mt，1H4位CH)；2.75(dd，J＝16和8Hz，1H17位CH2的1H)；3.27(dd，J＝16和4Hz，1H17位CH2的1H)；3.40-3.55(mt，2H16位CH和9位CH2的1H)；3.69(t.J＝6.5Hz，2HOCH2)；3.85-4.00(mt，2H24位CH2)；4.43(mt，1H9位CH2的1H)；4.65-4.80(mt，3H3位CH-14位CH和27位CH)5.36(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.40-5.60(宽的mf.1HNH)；5.70(mt，1H10位CH)；5.80(dd，J＝16和1.5Hz，1H6位CH)；6.14(mt，1HCONH)；6.17(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.51(dd，J＝16和5Hz，1H5位CH)8.08(s，1H20位CH)。
如实施例17同样操作可以制备原始霉素IIB的O-丙基肟(Z和E异构体混合物，85/15)，但使用4克原始霉素IIB、2.6克盐酸O-丙基羟基胺在60毫升吡啶中的溶液。在提取并在20℃减压(2.7千帕)下干燥之后得到固体，该固体在乙腈中搅拌，在过滤沉淀之后得到2.75克原始霉素IIB的O-丙基肟(Z和E异构体混合物，85/15)，呈白色固体状，熔点130-132℃，它可原样用于随后的操作。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.10(mt，12H30位CH3-31位CH3-32位CH3和丙基的CH3)；1.60-1.75(mt，2H丙基中心的CH2)；1.75(s，3H33位CH3)；1.75-2.00(mt，4H25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；2.15(mt，1H26位CH2的1H)；2.51和2.65(2dd，分别J＝17和6Hz和J＝17.5和5Hz，每个1H15位CH2)；2.74(mt，1H4位CH)；3.20(d，J＝6Hz，1HOH)；3.38(mt，1H9位CH2的1H)3.65(d，J＝15Hz，1H17位CH2的1H)；3.74(mt，1H24位CH2的1H)；3.95-4.10(mt，4H24位CH2的1H-17位CH2的1H和OCH2)；4.43(mt，1H9位CH2的1H)；4.67(dd，J＝10和3Hz，1H27位CH)；4.72(宽d，J＝10Hz，1H3位CH)；4.83(mt，1H14位CH)；5.55(d，J＝9Hz，1H13位CH)5.69(mt，1H10位CH)；5.78(dd，J＝17和1.5Hz，1H6位CH)6.13(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.26(mt，1HCONH)；6.46(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)8.07(s，1H20位CH)。
实施例21(16R)-16-甲氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB与实施例17同样操作可以制备该化合物，但使用3克原始霉素IIA的O-甲基肟(Z和E异构体混合物，65/35)在90毫升甲醇中的溶液、30毫升乙酸和3.4克氰基硼氢化钠，在约20℃下反应一周和在30-33℃下反应一周之后，得到3克白色固体，该固体用快速色谱纯化[洗脱剂；二氯甲烷-甲醇(以体积计97-3)]，得到0.36克(16R)-16-甲氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIA，呈白色固体状，熔点150℃。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.05(mt，6H30位CH3和31位CH3)；1.13(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.59(宽s，1HOH)；1.65-1.85(mt，2H15位CH2)；1.73(s，3H33位CH3)；2.03(mt，1H29位CH)；2.60-2.85(mt，2H4位CH和25位CH2的1H)；2.64(dd，J＝14和11Hz，1H17位CH2的1H)2.85(mt，.1H25位CH2的1H)；2.95(mt，1H16位CH)；3.20(dd，J＝14和2.5Hz，1H17位CH2的1H)；3.60(s，3HOCH3)；3.81(宽d，J＝18Hz，1H9位CH2的1H)；4.22(mt，1H24位CH2的1H)；4.30-4.55(mt，3H9位CH2的1H-24位CH2的1H和14位CH)；4.83(d，J＝9Hz，1H13位CH)；4.96(宽d，J＝10Hz，1H3位CH)；5.47(宽s，1HNH)；5.65(mt，1H10位CH)；5.90(宽d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.03(宽d，J＝17Hz，1H6位CH)；6.14(t.J＝3Hz，1H26位CH)；6.62(dd，J＝17和7Hz，1H5位CH)；7.48(mt，1HCONH)；7.87(s，1H20位CH)。
如实施例17那样操作可以得到原始霉素IIA的O-甲基肟(Z和E异构体混合物，65/35)，但使用8克原始霉素IIA和1.43克盐酸甲氧基胺在80毫升吡啶中的溶液。在45℃减压(2.7千帕)下蒸去吡啶之后，提取，在300毫升乙醚中搅拌该产物，过滤，再用乙醚洗涤，在40℃减压(90帕)下干燥后得到7.51克原始霉素IIA的O-甲基肟(Z和E异构体混合物，65/35)，呈白色固体状，熔点204℃，它可原样用于随后的操作。
实施例22(16R)-16-(1-吡咯烷基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB与实施例17同样操作，但使用3克原始霉素IIB在30毫升甲醇中的溶液，9克硫酸镁，1.6毫升三乙胺和1.4克1-氨基吡咯烷盐酸盐，在搅拌18小时之后加入0.43克氰基硼氢化钠和1.5毫升乙酸，将反应混合物搅拌4小时，处理之后得到3.5克黄色粉末，该粉末用快速色谱纯化[洗脱剂；二氯甲烷-甲醇-乙腈(以体积计90-5-5)]，这样得到一种固体，该固体在乙醚中搅拌，过滤分离得到0.56克(16R)-16-(1-吡咯烷基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB，呈米色粉末状，熔点约130℃。
1HN.M.R.谱(400 MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.95和1.00(2d，J＝6.5Hz，每个3H30位CH3和31位CH3)；1.06(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.53(mt，1H15位CH2的1H)1.70-2.20(mt，10H15位CH2的1H-25位CH2-29位CH2-29位CH和吡咯烷基的2CH2)；1.83(s，3H33位CH3)；2.70-2.90(mt，6H4位CH-17位CH2的1H和吡咯烷基的2个CH2N)；3.06(dd，J＝16和4Hz，1H17位CH2的1H)；3.40-3.50(mt，2H9位CH2的1H和16位CH)；3.82和3.97(2mt.每个1H24位CH2)；4.37(mt，1H9位CH2的1H)；4.57(mt，1H14位CH)；4.73(dd，J＝9和3Hz，1H27位CH)；4.77(dd，J＝10和2Hz，1H3位CH)；5.41(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.68(mt，1H10位CH)；5.78(dd，J＝17和2Hz，1H6位CH)；6.01(mt，1HCONH)；6.18(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.50(dd，J＝17和5Hz，1H5位CH)；8.10(s，1H20位CH)。
实施例23(16R)-16-二甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIF在约20℃和氩气氛下，往0.27克原始霉素IIF在7毫升无水乙腈中的溶液添加0.069毫升甲基胺(在乙醇中，8M)，然后添加0.015毫升乙酸。在约20℃下搅拌17小时，然后在氩气氛下加入0.038克氰硼基氢化钠和0.13毫升乙酸。反应混合物在约20℃下搅拌3小时，然后再加入0.1毫升乙酸。反应混合物在约20℃下再搅拌7小时。然后加入0.9克多聚甲醛，让反应介质在约20℃下继续搅拌17小时。将得到的白色悬浮液过滤，滤液在约30℃减压(2.7千帕)下浓缩至干。残余的稠厚油再用15毫升乙酸乙酯和3毫升水溶解。在搅拌15分钟之后，所得到溶液首先用浓氢氧化钠将其pH调节到9，然后用1.5毫升1N氢氧化钠调节到11。将得到的混合物搅拌约1小时，倾析，有机相再每次用1毫升水洗涤2次，然后每次用1N盐酸提取3次(相继为10毫升、1毫升与0.5毫升)。合并的水相用3毫升醚洗涤，然后用浓氢氧化钠将其碱化到pH 10-11。得到的水相每次用4毫升二氯甲烷提取2次，合并有机相，用2毫升水洗涤，用硫酸镁干燥，用烧结玻璃过滤器过滤，然后在温度约30℃减压(2.7千帕)下浓缩至干，得到一种白色固体。这种固体在5毫升乙醚中搅拌，然后过滤，再干燥至恒重(在20℃，90帕)，得到0.17克白色粉末。这种粉末用快速色谱纯化[洗脱剂二氯甲烷-甲醇-乙腈(以体积计92-4-4)]，得到0.067克(16R)-16-二甲基氨基-脱氧原始霉素IIF，呈白色固体，熔点132℃。
1HN.M.R.谱(400MHz，CDCl3，δ，以ppm计)0.90-1.00(mt，6H30位CH3和29位乙基的CH3)；1.07(d，J＝6.5Hz，3H32位CH3)；1.18和1.50(2mt，每个1H29位乙基的CH2)；1.60-2.00(mt，6H15位CH2-25位CH2-26位CH2的1H和29位CH)；1.78(s，3H33位CH3)；2.12(mt，1H26位CH2的1H)；2.37(s，6HN(CH3)2)；2.62和2.99(2dd，分别J＝16和10Hz和J＝16和4Hz，每个1H17位CH2)；2.76(mt，1H4位CH)；3.22(mt，1H16位CH)；3.51(mt，1H9位CH2的1H)；3.83和3.94(2mt，每个1H24位CH2)；4.35(mt，1H9位CH2的1H)；4.67(mt，1H14位CH)；4.75(dd，J＝9和2.5Hz，1H27位CH)；4.91(dd，J＝9.5和1.5Hz，1H3位CH)；5.35(d，J＝9Hz，1H13位CH)；5.66(mt，1H10位CH)；5.80(dd，J＝16和1.5Hz，1H6位CH)；6.02(mt，1HCONH)；6.18(d，J＝16Hz，1H11位CH)；6.54(dd，J＝16和5Hz，1H5位CH)；8.07(s，1H20位CH)。
实施例24类似于上述实施例的操作，还制备了下述产品-(16R)-16-(甲氧基)(甲基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB-(16R)-16-(甲氧基)(甲基)氨基-16-脱氧原始霉素IIA-(16R)-16-(乙氧基)(甲基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB-(16R)-16-(乙氧基)(甲基)氨基-16-脱氧原始霉素IIA-(16R)-16-(甲基)(丙氧基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB-(16R)-16-(甲基)(丙氧基)氨基-16-脱氧原始霉素IIA-(16R)-16-(烯丙氧基)(甲基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB-(16R)-16-(烯丙氧基)(甲基)氨基-16-脱氧原始霉素IIA-(16R)-16-(环丙基)(甲基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB-(16R)-16-(环丙基)(甲基)氨基-16-脱氧原始霉素IIA-(16R)-16-(甲基)(丙炔-2-基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB-(16R)-16-(甲基)(丙炔-2-基)氨基-16-脱氧原始霉素IIA-(16R)-16-(甲基)(1-吡咯烷基)氨基-16-脱氧原始霉素IIB
本发明还涉及含有与B组链阳性菌素衍生物结合的至少一种本发明纯的链阳性菌素衍生物的药物组合物，如果必要，本发明衍生物呈盐形式和/或与一种或多种相容的和药学上可接受的稀释剂或添加剂结合的形式。
本发明的组合物可以采用口服、肠胃道外、局部、直肠或气雾剂方式用药。
作为口服固体组合物，可以使用片剂、丸剂、胶囊、粉剂或颗粒剂。在这些组合物中，一般呈结合形式的本发明的活性产品与一种或多种惰性稀释剂或添加剂混合，如多糖、乳糖或淀粉。这些组合物可以含有除稀释剂之外的物质，例如润滑剂，如硬脂酸镁，或用于控制释放的包衣。
作为口服液体组合物，可以使用药物上可接受的溶液、含有如水或石蜡油之类的惰性稀释剂的混悬液、乳液、糖浆和酏剂。这些组合物还可以含有除稀释剂之外的物质，例如润湿剂、甜味剂或芳香剂。
肠胃道外用药物组合物可以是无菌溶液或乳液。作为溶剂或赋形剂，可以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油(特别是橄榄油)，可注射的有机酯(例如油酸乙酯)。这些组合物还可以含有添加剂，特别是润温剂、等渗剂、乳化剂、分散剂与稳定剂。
灭菌可以有多种方式，例如采用细菌过滤器，采用辐照或加热。这些组合物还可以制成在使用时可溶于无菌水中或任何其他可注射的无菌介质中的无菌固体组合物。
局部用的组合物例如可以是软膏、油膏、洗剂或气溶胶。
直肠用组合物是栓剂或直肠用胶囊，除活性组分外它们还含有赋形剂，如可可脂、半合成甘油酯或聚乙二醇。
这些组合物还可以是气溶胶。为了以液体气溶胶形式使用，这些组合物可以是稳定的无菌溶液，或在使用时溶于无热原的无菌水中、血清中或任何其他药学上可接受的载体中的固体组合物。为了以直接吸入的干气溶胶形式使用，将活性组分磨细，再与粒度30-80微米的水溶性固体稀释剂或载体混合，例如葡聚糖、甘露醇或乳糖。
在人的治疗中，本发明的新链阳性菌素衍生物对治疗细菌性感染是特别有效的。使用的剂量取决于所要达到的效果和治疗时间。医生将根据治疗情况、根据年龄、体重、感染程度和治疗对象所固有的其他因素确定最合适的剂量。一般地，这些剂量对成年人为每天2或3次口服1-3克活性产品。
下述实施例说明本发明的组合物。
实施例按照常规技术制备剂量为250毫克活性产品的片剂，该片剂具有下述组成-(16R)-16-二甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIA175毫克-原始霉素IB75毫克-赋形剂淀粉，水合二氧化硅，糊精，明胶，硬脂酸镁适量至 500毫克
权利要求
1.一种链阳性菌素A组衍生物及其盐，其特征在于它满足下述通式
式中-R1是-NR′R″，其中R′是氢原子或甲基，而R″是氢原子、烷基、环烷基、烯丙基、丙炔基、苄基或-OR，R是氢原子、烷基、环烷基、烯丙基、丙炔基或苄基，或R″代表-NR3R4，R3和R4可以代表甲基或和与其连接的氮原子一起构成4或5元饱和或不饱和杂环，该杂环还可以含有选自氮、氧或硫的另一杂原子，-R2是氢原子或甲基或乙基，和-键
代表单键或双键，其中除非特别说明，烷基是直链或支链的并含有1-6个碳原子；环烷基含有3-4碳原子；16位的链当R″不是-OR或-NR3R4时，表示差向异构体R或以差向异构体R为主的差向异构体R和S的混合物，当R″是-OR或-NR3R4时，表示差向异构体R和S及它们的混合物。
2.根据权利要求1所述的链阳性菌素A组衍生物及其盐，其特征在于R1是-NR′R″，其中R′是氢原子或甲基，而R″是氢原子、烷基、环烷基、烯丙基、丙炔基、苄基或-OR，R是含有1-6个碳原子的烷基、烯丙基或丙炔基，或R″代表-NR3R4，R3基和R4可以代表甲基或和与其连接的氮原子一起构成4或5元饱和或不饱和的杂环，该杂环还可以含有选自氮、氧或硫的另一杂原子，R2是氢原子或甲基或乙基，和键
代表单键或双键，16位的链当R″不是-OR或-NR3R4时，表示差向异构体R或以差向异构体R为主的差向异构体R和S的混合物，当R″是-OR或-NR3R4时，表示差向异构体R和S及它们的混合物。
3.根据权利要求1或2所述的链阳性菌素A组衍生物及其盐，其特征在于R1是-NR′R″，R′是氢原子或甲基，而R″是氢原子、含有1-4个碳原子的烷基、环烷基、烯丙基、丙炔基、苄基或-OR，R是含有1-3个碳原子的烷基、烯丙基或丙炔基。或R″代表-NR3R4，R3和R4可以和与其连接的氮原子一起构成5元饱和杂环，R2是甲基或乙基，键
代表单键或双键，16位的链当R″不是-OR或-NR3R4时，表示差向异构体R或以差向异构体R为主的差向异构体R和S的混合物，当R″是-OR或-NR3R4时，表示差向异构体R和S及其混合物。
4.根据权利要求1所述的链阳性菌素A组衍生物，其特征在于它是(16R)-16-二甲基氨基-16-脱氧原始霉素IIA及其盐。
5.根据权利要求1所述的链阳性菌素A组衍生物，其特征在于它是(16R)-16-甲氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB及其盐。
6.根据权利要求1所述的链阳性菌素A组衍生物，其特征在于它是(16R)-16-乙氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB及其盐。
7.根据权利要求1所述的链阳性菌素A组衍生物，其特征在于它是(16R)-16-烯丙氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIB及其盐。
8.根据权利要求1所述的链阳性菌素A组衍生物，其特征在于它是(16R)-16-甲氧基氨基-16-脱氧原始霉素IIA及其盐。
9.制备权利要求1所述链阳性菌素衍生物的方法，其特征在于使下述通式(III)胺与下述通式(II)天然原始霉素化合物作用H2N-R″ (III)式中R″如前面所限定。
式中R2如权利要求1中所限定，接着用还原剂与所得到的中间烯胺(或肟)作用，然后，当希望得到式中R′是甲基的权利要求1所述的链阳性菌素衍生物时，通过甲醛或就地产生甲醛的衍生物作用接着还原中间产物烯胺，进行第二次还原胺化作用，任选地将所得到的产物转化成盐，和/或分离其R差向异构体。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于为了制备其中R″是-OR的权利要求1所述的链阳性菌素衍生物，分离出下述通式的中间产物肟
式中R2和R如权利要求1中所限定，然后还原成R′是氢原子的权利要求1所述的链阳性菌素衍生物，任选地进行后续的还原胺化操作。
11.制备权利要求1所述的链阳性菌素衍生物的方法，其特征在于是具有所要求R″的酮与下述通式的胺衍生物作用
式中R2如前面所定义，接着当希望得到式中R′是甲基的权利要求1所述的链阳性菌素衍生物时，通过甲醛或就地产生甲醛的衍生物作用并还原中间产物烯胺，进行第二次还原胺化作用，任选地将所得到的产物转化成盐，和/或分离其R差相异构体。
12.一种组合，其特征在于其含有权利要求1所述的A组链阳性菌素衍生物，和B组链阳性菌素衍生物。
13.根据权利要求12所述的组合，其特征在于B组链阳性菌素衍生物选自天然组分或半合成组分。
14.根据权利要求12所述的组合，其特征在于B组链阳性菌素衍生物选自原始霉素IA、原始霉素IB、原始霉素IC、原始霉素ID、原始霉素IE、原始霉素IF、原始霉素IG、维吉霉素S1、S2或S4、春霉素B或C、或宜他霉素。
15.根据权利要求12所述的组合，其特征在于B组链阳性菌素衍生物选自下述通式的链阳性菌素衍生物
式中1. Rb、Rc、Re和Rf是氢原子，Rd是氢原子或二甲氨基，而Ra是具有-CH2R′a结构的基团，式中R′a是可被烷基取代的3-吡咯烷基硫基、3-(或4-)哌啶基硫基，被1或2个羟基磺酰基、烷基氨基、二烷基氨基(它本身任选地被巯基或二烷基氨基取代)取代的烷硫基，或被1个或2个任选取代的哌嗪环、吗啉代基、硫代吗啉代基、哌啶子基、1-吡咯烷基、2-，3-或4-哌啶基或2-或3-吡咯烷基(它们可被烷基取代)取代的烷硫基，或者Ra是具有＝CHR′a结构的基团，其中R′a是可被烷基取代的3-吡咯烷基氨基、3-(或4-)哌啶基氨基、3-吡咯烷基氧基、3-(或4-)哌啶基氧基、3-吡咯烷基硫基、3-(或4-)哌啶基硫基，或R′a是被1个或2个羟基磺酰基、烷基氨基、二烷基氨基(它本身任选地被二烷基氨基取代)取代的、或被三烷基氨基、4-或5-咪唑基取代的、或被1或2个任选取代的哌嗪环、吗啉代基、硫代吗啉代基、哌啶子基、1-吡咯烷基、2-，3-或4-哌啶基或2-或3-吡咯烷基(可被烷基取代)取代的烷基氨基、烷氧基或烷硫基，或Ra是3-(或4-)奎宁环基硫基甲基，或2. Ra是氢原子，和a)Rb、Re和Rf是氢原子，Rd是-NHCH3或-N(CH3)2，而Rc是氯或溴原子，或代表含有3-5个碳原子的链烯基[如果Rd是-N(CH3)2]，或者b)Rb、Rd、Re和Rf代表氢原子，而Rc是卤素或单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、三氟甲氧基、烷硫基、C1-C3烷基或三卤代甲基，或者c)Rb、Rc、Re和Rf代表氢原子，而Rd是卤素、或乙基氨基、二乙基氨基或甲基乙基氨基、烷氧基或三氟甲氧基、烷硫基、C1-C6烷基、芳基或三卤代甲基，或者d)Rb、Re和Rf代表氢原子，而Rc是卤素或单烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基、三氟甲氧基、烷硫基、C1-C3烷基，而Rd是卤素或氨基、单烷基氨基或二烷基氨基、烷氧基或三氟甲氧基、烷硫基、C1-C6烷基或三卤代甲基，或者e)Rc、Re和Rf代表氢原子，而Rb和Rd代表甲基。
16.药物组合物，其特征在于它含有至少一种权利要求1-8中任一项所述的链阳性菌素衍生物，任选地与链阳性菌素B组衍生物结合，和/或任选地与任何药学上可接受的相容稀释剂或添加剂结合。
全文摘要
通式(Ⅰ)链阳性菌素A组衍生物及其盐,式中R
文档编号C07K5/00GK1265115SQ98807630
公开日2000年8月30日 申请日期1998年7月24日 优先权日1997年7月28日
发明者A·康莫肯, H·褒查德, Y·利贝尔, E·巴奎, B·罗南, J－C·巴利勒, G·普豪尔特, C·泰利尔 申请人:罗纳-布朗克罗莱尔股份有限公司