用于控制叶甲属的组合物和方法与流程

文档序号:13109616阅读:来源:国知局
技术特征:
1.一种用于控制植物受叶甲属种类侵扰的方法,其包括:(a)使所述叶甲属种类与多核苷酸接触,所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列,所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(b)在所述叶甲属种类的食物中提供多核苷酸,所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列,所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(c)通过在所述叶甲属种类的幼虫的食物中提供包含至少一个沉默元件的至少一种多核苷酸而在所述幼虫中引起死亡或生长受阻,所述沉默元件包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的21个连续核苷酸,所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(d)向所述植物局部施用包含至少一种多核苷酸的组合物,所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列,所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(e)以使得有效量的至少一种多核苷酸被以所述植物为食的叶甲属种类摄取的方式向所述植物局部施用包含所述多核苷酸的组合物,所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的至少21个连续核苷酸,所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(f)在所述植物中表达至少一种多核苷酸,所述多核苷酸包含与具有选自以下的序列的DNA的至少21个连续核苷酸相同或互补的至少一个片段:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(g)向所述植物提供至少一种多核苷酸,所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸相同或互补的至少一个片段,其中所述靶基因选自:在靶基因序列组中标识的基因或由所述靶基因转录的RNA;或(h)使所述叶甲属种类与有效量的双链RNA接触,其中一条链与编码核糖体蛋白的基因的至少21个连续核苷酸互补,其中RNA干扰被诱导并且发生死亡;或(i)使所述叶甲属种类与多核苷酸接触,所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸相同或互补的至少一个片段,所述靶基因选自:在靶基因序列组中标识的基因。2.根据权利要求1所述的方法,其中所述多核苷酸为双链RNA。3.根据权利要求2所述的方法,其中所述双链RNA经化学合成或通过在微生物中表达或在植物细胞中表达而生成。4.根据权利要求2所述的方法,其中所述双链RNA包含含有选自以下的序列的链:SEQIDNO:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1118、1119和1124。5.根据权利要求1所述的方法,其中所述方法包括向所述植物局部施用包含至少一种多核苷酸的组合物,所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列,其中所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;并且其中所述组合物还包含选自载体剂、表面活性剂、阳离子脂质、有机硅、有机硅表面活性剂、多核苷酸除草分子、非多核苷酸除草分子、非多核苷酸杀虫剂、安全剂和昆虫生长调节剂的一种或多种组分。6.根据权利要求1所述的方法,其中所述方法包括使所述叶甲属种类与有效量的包含双链RNA的溶液接触,其中所述双链RNA的至少一条链与编码核糖体蛋白的基因或由所述基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补,其中所述叶甲属种类为马铃薯叶甲,并且其中RNA干扰被诱导并且发生马铃薯叶甲死亡,并且其中所述核糖体蛋白为核糖体L7蛋白或由SEQIDNO:730编码的蛋白或其中所述双链RNA包含选自SEQIDNO:989、988、1104或1105的序列。7.根据权利要求6所述的方法,其中所述溶液还包含选自有机硅表面活性剂或阳离子脂质的一种或多种组分。8.根据权利要求1所述的方法,其中所述方法包括以使得有效量的至少一种多核苷酸被以所述植物为食的叶甲属种类摄取的方式向所述植物局部施用包含所述多核苷酸的组合物,所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列,所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;其中所述叶甲属种类为马铃薯叶甲;并且其中所述靶基因具有SEQIDNO:730的序列或其中所述多核苷酸为双链RNA,其具有有选自SEQIDNO:989、988、1104或1105的序列的链。9.根据权利要求1所述的方法,其中所述叶甲属种类选自:Leptinotarsabehrensi、Leptinotarsacollinsi、马铃薯叶甲(科罗拉多马铃薯甲虫)、Leptinotarsadefecta、Leptinotarsahaldemani(Haldeman绿色马铃薯甲虫)、Leptinotarsaheydeni、Leptinotarsajuncta(伪马铃薯甲虫)、膜苞菊叶甲(菊科灌木甲虫)、蒺藜叶甲、柔毛茄叶甲、胡颓子叶茄叶甲、蒺藜四条叶甲、Leptinotarsatumamoca和Leptinotarsatypographica。10.一种植物,其对叶甲属种类侵扰具有提高的抗性,通过根据权利要求1所述的方法提供,或所述植物的果实、种子或可繁殖部分。11.根据权利要求10所述的植物,其中所述植物选自马铃薯、番茄和茄子。12.一种用于控制叶甲属种类的杀虫组合物,其包含:(a)杀虫有效量的多核苷酸,所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的至少21个连续核苷酸,所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(b)杀虫有效量的至少一种多核苷酸,所述多核苷酸包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的至少一个沉默元件,其中所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(c)杀虫有效量的至少一种RNA,所述RNA包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸相同或互补的至少一个片段,所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(d)当被叶甲属种类摄取或接触时在所述叶甲属种类中引起死亡或生长受阻的RNA分子,其中所述RNA分子包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的至少21个连续核苷酸,所述靶基因具有选自以下的核苷酸序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(e)当被叶甲属种类摄取或接触时在所述叶甲属种类中引起死亡或生长受阻的杀虫双链RNA分子,其中所述杀虫双链RNA分子的至少一条链包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的21个连续核苷酸,其中所述靶基因具有选自以下的序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(f)杀虫有效量的包含选自以下的序列的至少一种双链RNA:SEQIDNO:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1118、1119和1124。13.根据权利要求12所述的杀虫组合物,其中所述杀虫组合物呈选自以下的至少一种的形式:固体、液体、粉剂、混悬液、乳液、喷雾剂、封装剂、微珠、载体微粒、薄膜、基质、种子处理剂、土壤浇灌剂、可植入制剂和沟灌制剂。14.根据权利要求12所述的杀虫组合物,其还包含选自载体剂、表面活性剂、阳离子脂质、有机硅、有机硅表面活性剂、多核苷酸除草分子、非多核苷酸除草分子、非多核苷酸杀虫剂、安全剂和昆虫生长调节剂的至少一种组分。15.根据权利要求12所述的杀虫组合物,其中所述杀虫组合物包含当被叶甲属种类摄取或接触时在所述叶甲属种类中引起死亡或生长受阻的杀虫双链RNA分子,其中所述杀虫双链RNA分子包含与一个DNA或由所述DNA转录的RNA的21个连续核苷酸互补的至少一个片段,所述DNA具有选自以下的序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094,并且其中所述双链RNA分子长度为至少50个碱基对或长度介于约100至约500个碱基对之间。16.一种重组DNA构建体,其包含与以下可操作地连接的异源启动子:(a)包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的核苷酸序列的DNA,所述靶基因具有选自以下的序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(b)包含与一个DNA的等长片段具有100%同一性的21个或更多个连续核苷酸的DNA,所述DNA具有选自以下的序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094或其DNA互补物;或(c)编码与靶基因或由所述靶基因转录的RNA的至少21个连续核苷酸互补的至少一个沉默元件的DNA,其中所述靶基因具有选自以下的序列:SEQIDNO:730、SEQIDNO:807、SEQIDNO:1-725、SEQIDNO:726-729、SEQIDNO:731-806、SEQIDNO:808-830和SEQIDNO:1087-1094;或(d)编码包含与靶基因或由所述靶基因转录的RNA互补的至少21个连续核苷酸的至少一个沉默元件的DNA,所述靶基因选自在靶基因序列组中标识的基因;或(e)编码包含与一个核苷酸序列,或来自于叶甲属种类或拟谷盗属种类的直系同源核苷酸序列互补的至少21个连续核苷酸的RNA的DNA,所述核苷酸序列选自:SEQIDNO:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1118、1119和1124或其互补物,其中所述直系同源核苷酸序列与选自以下的核苷酸序列具有至少95%序列同一性:SEQIDNO:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1118、1119和1124,其中在相同长度上计算序列同一性百分比;或(f)编码包含至少一个双链RNA区的RNA的DNA,所述双链RNA区的至少一条链包含与一个核苷酸序列,或来自于叶甲属种类或拟谷盗属种类的直系同源核苷酸序列互补的至少21个连续核苷酸,所述核苷酸序列选自:SEQIDNO:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1118、1119和1124或其互补物,其中所述直系同源核苷酸序列与选自以下的核苷酸序列具有至少95%序列同一性:SEQIDNO:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1118、1119和1124,其中在相同长度上计算序列同一性百分比;或(g)编码包含选自以下的核苷酸序列的RNA的DNA:SEQIDNO:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1118、1119和1124或其互补物。17.一种植物染色体或质体或重组植物病毒载体或重组杆状病毒载体,其包含根据权利要求16所述的重组DNA构建体。18.一种转基因茄科植物细胞,其在其基因组中具有根据权利要求16所述的重组DNA构建体。19.根据权利要求18所述的转基因茄科植物细胞,其中所述转基因茄科植物细胞在其基因组中还具有编码选自以下的至少一种杀虫剂的DNA:马铃薯糖蛋白、植物凝集素、植物脱皮甾醇、苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白、致病杆菌杀虫蛋白、发光杆菌杀虫蛋白、侧孢芽孢杆菌杀虫蛋白和球形芽孢杆菌杀虫蛋白。20.一种转基因茄科植物,其包含根据权利要求18所述的转基因茄科植物细胞,或所述转基因茄科植物的果实、种子或可繁殖部分。
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