专利名称：木果楝柠檬苦素a作为椰心叶甲毒杀剂的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及下述通式(I)表示的柠檬苦素化合物-木果楝柠檬苦素A的新应用， 具体涉及木果楝柠檬苦素A作为椰心叶甲毒杀剂的应用，尤其是作为椰心叶甲5龄幼虫的 毒杀剂。
背景技术：
下述通式(I)表示的柠檬苦素化合物-木果楝柠檬苦素A(Xyl0lim0n0id Α)于 2007年首次报道从浆果楝分离出来(见文献L. S. Gan，X.N.Wang，Y. Wu et al. J. Nat. Prod. ,70(8) : 1344-1347(2007))。其通式如下 通式(I)通式(I)表示的化合物-木果楝柠檬苦素Α，该化合物外观呈白色粉末，分子式为 C32H42O8，其化学名为6-去氧，3-0-2S-甲基丁酰基-桃花心木内酯[英文名6-Deoxy，3-0-2 S-methylbutyryl-swietenolide]，中文名为木果楝柠檬苦素A。到目前为止，未发现上述通式(I)表示的化合物-木果楝柠檬苦素A对椰心叶甲 Brontispa longissima(Gestro)具有毒杀作用的 艮道。椰心叶甲Brontispa Iongissima(Gestro)是一种重大危险性的外来毁灭性害虫。 在国家林业局最新公布的19种林业检疫性有害生物名单中名列第三位，是我国1992年新 增的禁止入境的二类检疫性有害生物。目前椰心叶甲在我国海南省、广东省、台湾省和香港 地区危害严重，并且有蔓延的趋势。该害虫严重为害椰子、槟榔、大王棕等棕榈科植物，对我 国亚热带甚至温带地区种植的棕榈科园林植物的生长和繁殖构成了严重威胁。目前国内的 化学防治方法主要是采用高效氯氰菊酯、呲虫啉、辛硫磷等人工合成的化学农药。这类农药 虽毒力强、见效快，但长期、大量使用易导致农药残留、农药抗性、环境污染和慢性毒性等诸 多问题。因此，研发高效低毒、无公害、选择性强的生物农药已成为当今农药发展的新趋势 和必然需求。上述通式(I)表示的化合物是由植物新陈代谢产生，属于生物农药，开发作为椰心叶甲的毒杀剂可以很好的克服上述人工合成的化学农药作为椰心叶甲的毒杀剂而存在 的种种问题。
发明内容
本发明的目的是提供木果楝柠檬苦素A作为椰心叶甲毒杀剂的新应用。
本发明通过幼虫活体模型实验证实木果楝柠檬苦素A对椰心叶甲的5龄幼虫具有
很强的毒杀作用，因此可以作为椰心叶甲的毒杀剂，从而实现了本发明的目的。本发明的中的木果楝柠檬苦素A可以通过现有技术中的方法分离得到，如根据参 考文献 L.S.Gan，X. N. Wang, Y. Wu et al. J. Nat. Prod. ,70(8) 1344-1347 (2007)公开的分 离方法分离获得。本发明人利用现代色谱技术从印度的木果楝属红树植物Xylocarpus moluccensis中分离出柠檬苦素化合物木果楝柠檬苦素A(Xylolimonoid A)，其分离方法 是以木果楝属红树植物Xylocarpus moluccensis的种子为原料，粉碎后用乙醇提取，减压 浓缩后得乙醇提取物，乙醇提取物加水混悬后，用乙酸乙酯萃取，减压浓缩得到的乙酸乙酯 萃取物。该萃取物经正相硅胶柱层析，以氯仿-甲醇为洗脱剂从体积比100 1-5 1梯 度洗脱，收集氯仿_甲醇体积比为100 1洗脱的馏分，然后经反向硅胶柱层析洗脱，以乙 腈-水为洗脱剂从体积比50 50-100 0梯度洗脱，收集乙腈-水体积比为65 35洗 脱的馏分，最后通过高效液相色谱制备，用体积比为53 47的乙腈-水为洗脱剂洗脱，分 离纯化而得到化合物木果楝柠檬苦素A(XylolimonoidA。本发明采用浸叶法测定木果楝柠檬苦素A对椰心叶甲5龄幼虫的毒杀活性，结果 表明该化合物对椰心叶甲5龄幼虫具有很强的毒杀作用。在供试浓度为50mg/L时，椰心 叶甲5龄幼虫的致死率为100%，在该浓度下，同等实验条件下，其杀虫效果稍优于对照药 剂_鱼藤酮，远远优于对照药剂_川楝素，毒杀结果见表1。表1化合物木果楝柠檬苦素A(Xyl0lim0n0id Α)对椰心叶甲5龄幼虫的毒力 上述实验结果表明木果楝柠檬苦素A可以用作椰心叶甲的毒杀剂，其对椰心叶甲 5龄幼虫具有很好的毒杀效果。
具体实施例方式以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。木果楝柠檬苦素A(Xyl0lim0n0id Α)的制备以7. Okg印度木果楝属植物Xylocarpus moluccensis的种子为原料，粉碎后用15kg 95% (体积分数)的乙醇室温提取5次，减压浓缩后得乙醇提取物1087g。乙醇提 取物加水混悬后，用乙酸乙酯萃取8次，减压浓缩得到的乙酸乙酯萃取物320g。该萃取物 经正相硅胶(100-200目)柱层析，以氯仿-甲醇洗脱系统从体积比100 1-5 1梯度 洗脱，收集氯仿-甲醇体积比为100 1洗脱的馏分，该馏分浓缩后，然后经反向硅胶(0 75 μ m)柱层析洗脱，用乙腈_水洗脱系统从体积比50 50-100 0梯度洗脱，收集乙 腈-水体积比为65 35洗脱的馏分，该馏分最后通过高效液相色谱制备(Waters 600，色 谱柱 YMC 250X 10mm, i.d.，5ym，RP-C18，流速 3ml/min，保留时间 RT = 18. 5min)，用体积 比为53 47的乙腈-水为洗脱剂洗脱，分离纯化而得到白色化合物，该化合物经结构鉴定 为木果楝柠檬苦素A(Xyl0IimonoidA)。结构鉴定由高分辨质谱(HRTOF-MS)可知此化合物的[Μ+Na] +为577. 2795，确定其分子式为C32H4208。该化合物最大紫外吸收波长位于210. Onm。其核磁共振波谱(1H NMRj13C NMR)数 据与文献[L. S. Gan, X. N. Wang, Y. Wu et al. J. Nat. Prod.，70 (8) 1344-1347 (2007)]报道 的数据对照一致，故此化合物确定为6-去氧，3-0-2S-甲基丁酰基-桃花心木内酯，英文名 6-Deoxy，3-0-2S-methylbutyryl-swietenolide，中文名为木果楝柠檬苦素 A。其1H NMR 与 13C NMR数据见表2。表2. 1H, 13C 匪R data of Xylolimonoid A. (500MHz for 1H and 125MHz for 13C NMR, Chloroform-d) 对比例1 :供试椰心叶甲幼虫模型供试幼虫系从海南儋州椰子树上采回，在室内饲养繁殖多代。试验时挑取个体大 小、颜色一致的5龄幼虫供试。毒杀活性试验试验采用浸叶法，将椰子树Cocos nuciferaLinnaeus的树叶放入50mg/L的鱼 藤酮_丙酮溶液中浸渍3秒后取出，放吸水纸上晾干，再将晾干的浸药叶片放入培养皿中， 然后将大小一致的椰心叶甲5龄幼虫放入装有浸药叶片的培养皿中，培养皿底铺有滤纸保 湿。将处理好的培养皿置于培养箱(T :25士 1°C，RH = 70 80% )中。以丙酮作空白对照，试验重复3次，每次10头幼虫。定时检查试虫死亡情况，以毛笔轻触虫体，以完全不动者视 为死亡。分别于给药后12小时、24小时、48小时和72小时时统计死虫数，计算死亡率。其 结果见于表1。对比例2:供试椰心叶甲幼虫模型供试幼虫系从海南儋州椰子树上采回，在室内饲养繁殖多代。试验时挑取个体大 小、颜色一致的5龄幼虫供试。毒杀活性试验 试验采用浸叶法，将椰子树Cocos nucifera Linnaeus的树叶放入50mg/L的川 楝素_丙酮溶液中浸渍3秒后取出，放吸水纸上晾干，再将晾干的浸药叶片放入培养皿中， 然后将大小一致的椰心叶甲5龄幼虫放入装有浸药叶片的培养皿中，培养皿底铺有滤纸保 湿。将处理好的培养皿置于培养箱(T :25士 1°C，RH = 70 80% )中。以丙酮作空白对照， 试验重复3次，每次10头幼虫。定时检查试虫死亡情况，以毛笔轻触虫体，以完全不动者视 为死亡。分别于给药后12小时、24小时、48小时和72小时时统计死虫数，计算死亡率。其 结果见于表1。实施例1 供试椰心叶甲幼虫模型供试幼虫系从海南儋州椰子树上采回，在室内饲养繁殖多代。试验时挑取个体大 小、颜色一致的5龄幼虫供试。毒杀活性试验试验采用浸叶法，将椰子树Cocos nucifera Linnaeus的树叶放入50mg/L的木果 楝柠檬苦素A-丙酮溶液中浸渍3秒后取出，放吸水纸上晾干，再将晾干的浸药叶片放入培 养皿中，然后将大小一致的椰心叶甲5龄幼虫放入装有浸药叶片的培养皿中，培养皿底铺 有滤纸保湿。将处理好的培养皿置于培养箱(T :25士 1°C，RH = 70 80% )中。以丙酮作 空白对照，试验重复3次，每次10头幼虫。定时检查试虫死亡情况，以毛笔轻触虫体，以完 全不动者视为死亡。分别于给药后12小时、24小时、48小时和72小时时统计死虫数，计算 死亡率。其结果见于表1。
权利要求
下述通式(I)表示的化合物作为椰心叶甲毒杀剂的应用通式(I)。FSA00000151270400011.tif
2.根据权利要求1所述的通式(I)表示的化合物作为椰心叶甲毒杀剂的应用，其特征 在于所述的椰心叶甲为椰心叶甲的5龄幼虫。
全文摘要
本发明公开了一种木果楝柠檬苦素A作为椰心叶甲毒杀剂的应用，其结构如通式(I)所示。本发明采用浸叶法测定木果楝柠檬苦素A对椰心叶甲5龄幼虫的毒杀活性，结果表明该化合物对椰心叶甲5龄幼虫具有很强的毒杀作用。在供试浓度为50mg/L时，椰心叶甲5龄幼虫的致死率为100％，在该浓度下，同等实验条件下，其杀虫效果稍优于对照药剂-鱼藤酮，远远优于对照药剂-川楝素。由此可以表明木果楝柠檬苦素A可以用作椰心叶甲的毒杀剂，其对椰心叶甲5龄幼虫具有很好的毒杀效果。通式(I)
文档编号A01N43/16GK101849542SQ20101019405
公开日2010年10月6日 申请日期2010年6月3日 优先权日2010年6月3日
发明者吴军, 李敏一 申请人:中国科学院南海海洋研究所