一种肝脏保护作用的柠檬苦素类化合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从两面针的干燥根中分离得到的一种柠檬苦 素化合物，含其的药物组合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 两面针[Zanthoxylum nitidum(Roxb. )DC.]又名蔓椒、两背针、入地金牛，属芸香 科花椒属植物，传统入药部位为根，是临床常用中药，广泛分布于我国广西、广东、云南、台 湾等南方省份。两面针最早以蔓椒之名记载于《神农本草经》;《全国中草药汇编》记载："两 面针活血，麻醉止痛，主治神经痛、胃、十二指肠溃疡、胃肠绞痛、胆道蛔虫病引起的疼痛、咽 喉肿痛，并用于皮肤粘膜麻醉"。它在中医临床上的应用十分广泛，可治疗风湿麻痹、牙痛、 腰腿痛、跌打损伤肿痛以及咽炎、淋巴结炎等感染性疾病。
[0003] 两面针化学成分方面的研究较为系统，目前从两面针中已分离多种化合物，分属 于生物碱类、木脂素类、香豆素类、脂肪酸类等。生物碱类化合物是两面针中最主要的化学 成分，其药理活性最为显著，具有较强的抗肿瘤活性。
[0004] 氯化两面针碱是两面针中活性生物碱类的主成分，在抗炎、镇痛、心血管系统疾病 以及抗氧化活性等方面具有广泛的药理活性。两面针的提取物具有广泛的药理活性，如镇 痛、消炎、止血作用及对化学性肝损伤的保护作用等；其作为驰名的牙膏品牌而开发的系列 口腔护理产品，则是基于两面针提取液显著的抗菌消炎和止血作用。而两面针在民间用药 的组合方剂中应用也十分广泛，对等常见病症均有显著的疗效，也有报道以两面针为主成 分的组合中药对跌打损伤、关节肿痛、腰椎间盘突出症、痛经、血栓外痔、冻疮、口腔溃疡及 慢性溃疡性结肠炎等病症均有较好的疗效。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从两面针的干燥根中分离得到的一种柠檬苦素化合物， 含其的药物组合物及其制备方法和应用。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物（I ):
[0008]
G
[0009] 所述的化合物（I )的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将两面针的干燥根粉 碎，用80~90 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和 水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤 (a)中正丁醇取物用大孔树脂除杂，先用5%乙醇洗脱6个柱体积，再用75%乙醇洗脱8个 柱体积，收集75 %洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤（b)中75 %乙醇洗脱 浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为65:1、30:1、15:1和8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到4个组分；（d)步骤（c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为15:1、8:1 和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2用十八烷基硅烷 键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体 积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I )。
[0010] 进一步地，步骤（a)中，用85%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0012] 药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I )和药学上可接受的载体。
[0013] 所述的化合物（I )在制备肝脏保护的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备肝脏保护的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I )，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物（I )结构式；
[0019] 图2为化合物（I )计算E⑶和实验E⑶图。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021] 主要材料、试剂来源及仪器类型：
[0022] 乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限 公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023] 实施例1 :化合物（I )分离制备及结构确证
[0024] (a)将两面针的干燥根（8kg)粉碎，用85%乙醇热回流提取（30LX 3次），合并提 取液，浓缩至无醇味（6L)，依次用石油醚（6LX 3次）、乙酸乙酯（6LX 3次）和水饱和的正 丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（375g)和正丁醇萃取物； (b) 步骤（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔树脂除杂，先用5%乙醇洗脱6个柱体积，再 用75%乙醇洗脱8个柱体积，收集75%洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱浓缩物（129g); (c) 步骤（b)中75%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为65:1 (8个柱体积）、 30:1 (8个柱体积）、15:1 (8个柱体积）和8:1 (10个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得 到4个组分；（d)步骤（c)中组分4(27g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为12:1(8 个柱体积）、8:1 (10个柱体积）和5:1 (8个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个 组分；（e)步骤（d)中组分2 (15g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度 为75%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化 合物（I ) (40mg)。
[0025] 结构确证：HR-ES頂S显示[M+Na]+为m/z 621. 2308,结合核磁特征可得分子式 为 C32H38O11，不饱和度为 14。核磁共振氢谱数据 SH(ppm，DMS0-d6,400MHz) :Η-3(4·82， s)，Η-5(2·83, s)，Η-6(4· 18, s)，Η-11(5·91，dd，J = 4·7,2·5)，Η-12(2·09, dd，J = 19. 2,4· 7)，Η-12(2· 54, dd，J = 19. 2,2· 5)，Η-14(1· 67, dd，J = 11. 8,7· 5)，Η-15(2· 58， dd，J = 18. 8,7· 5)，Η-15(2· 70, dd，J = 18. 8,11. 8)，Η-17(5· 02, s)，Η-18(0· 97, s)， Η-19 (1· 38, s)，Η-21 (7· 25, br，s)，Η-22 (6· 16, br，s)，Η-23 (7· 33, t，J = L 7)，Η-28 (1· 00， s)，Η-29 (0· 75, s)，Η-30 (3· 27, s)，Η-3'（6· 89, q，J = 7· I)，Η-4'（1· 82, d，J = 7· 1)， Η-5'（1.84, s)，6-OH(3.06, br，s)，8-OH(4.05, br，s)，7-0CH3(3.78, s);核磁共振碳谱 数据 δ c (ppm，DMS0-d6,100MHz) :209. I (C，1-C)，78. 5 (C，2-C)，85. 3 (CH，3-C)，39. 6 (C， 4-C)，49. 8 (CH，5-C)，68. 4 (CH，6-C)，175. 2 (C，7-C)，60. 0 (C，8-C)，136. 3 (C，9-C)，51. 6 (C， 10-C)，125. 9 (CH，11-C)，30. 8 (CH2,12-C)，34. 0 (C，13-C)，37. 7 (CH，14-C)，28. I (CH2,15-C)， 168. 4 (C，16-C)，81. 6 (CH，17-C)，22. 2 (CH3, 18-C)，14. 7 (CH3, 19-C)，121. 3 (C，20-C)， 140. 0 (CH，2卜C)，108. 6 (CH，22-C)，143. 2 (CH，23-C)，21. 3 (CH3, 28-C)，21. 8 (CH3, 29-C)， 63. 5(CH，30-C)，165. 8(C，Γ -C)，127. 5(C，2' -C)，138. 2(CH，3' -C)，14. 2(CH3,4' -C)， 12. 1(CH3,5' -C)，52. 7(CH3,7-0CH3);碳原子标记参见图1。红外光谱显示该化合物含有 羟基和羰基基团