本发明涉及药物化学领域，具体涉及17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(D4A)的盐形式，以及所述盐在制备与雄性激素功能有关的适应症的药物中的用途。
背景技术：
：前列腺癌是世界范围内最普遍的恶性致死性肿瘤，并且随年龄增长发病率升高。当前的人口老龄化趋势导致前列腺癌患者迅速增加，除肺癌外，前列腺癌为男性癌症患者中的最常见形式。已经证明，雄性激素在前列腺癌的发生，增长和扩散中起着重要作用。雄性激素中重要的有睾酮、雄酮、雄二酮和脱氢异雄酮。睾酮由睾丸的间质细胞分泌，是体内最重要的雄性激素。雄酮、雄二酮和脱氢异雄酮是睾酮的代谢产物。同时，肾上腺皮质也能分泌一种雄性激素，即肾上腺雄酮。这些激素都可刺激前列腺癌的生长。目前治疗前列腺癌的首选是通过药物或手术抑制睾丸的雄性激素产生，但是，这些方法不能阻断身体其他部位产生雄性激素。CYP17(17α-羟化酶/C17,20-裂解酶)(CYP17A1)是一种细胞色素P450酶，位于睾丸和肾上腺及其他如前列腺肿瘤组织中。它能催化两种独立调节类固醇17α-羟化酶和C17,20-裂解酶的酶活性，这两种酶是雄性激素生物合成途径中的关键酶，从而调节睾丸和身体其他部位的雄激素的合成。如果发生的肿瘤仅限于前列腺，病人可以通过手术或放疗进行切除。但在患前列腺肿瘤的男子中，大约15％的人癌症将会扩散。对于这些病人，目前并没有治愈的办法。CYP17酶抑制剂不仅能够抑制睾丸中雄性激素的生物合成，还能抑制肾上腺及其他如前列腺肿瘤组织中雄性激素的生物合成，相比目前临床上常用的去势疗法只能抑制睾丸中雄性激素的生物合成，具有更好的治疗作用。此外，去势抵抗性前列腺癌是前列腺癌治疗的难点和重点，而肿瘤细胞获得了将脱氢异维酮代谢成5α-二氢睾酮(DHT)的能力，是去势性前列腺癌发生的主要原因。DHT的合成需要酶的参与，包括3β-羟化类固醇脱氢酶(3βHSD)、类固醇-5α-还原酶(SRD5A)、17β-羟化类固醇脱氢酶(17βHSD)。前列腺癌治疗药物阿比特龙，是一种CYP17(17α-羟化酶/C17,20-裂解酶)抑制剂，可以降低体内雄性激素，如脱氢异维酮的含量，但对DHT合成中所用到酶的影响较小。研究发现，阿比特龙的代谢产物17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(Ⅰ)，简称D4A，不仅可以抑制CYP17A1酶的活性，对酶3βHSD、SRD5A也有抑制作用。与阿比特龙相比，D4A对酶3βHSD的抑制作用是阿比特龙的10倍，还可以同时抑制人体内3βHSD的2种同工酶，3βHSD1和3βHSD2。此外，D4A对CYP17A1的抑制作用与阿比特龙相似，在1nMD4A和1nM阿比特龙的作用下，孕烯醇酮转化为脱氢异维酮的比例分别是4.2％和2.6％。值得注意的是，10μM的D4A几乎完全抑制了酶SRD5A的活性，然而即使100μM阿比特龙对酶SRD5A也无抑制作用。除了对雄性激素的合成酶具有抑制作用外，D4A对雄激素受体也表现出较高的亲和力。D4A对变异型(IC50＝5.3nM)和野生型(IC50＝7.9nM)雄激素受体的抑制作用远高于阿比特龙(IC50＝418nM，和>500nM)，稍高于目前最有效的非甾体类雄激素受体拮抗剂恩杂鲁胺(IC50＝24nM，和23nM)。研究者在异种移植肿瘤VCaP和LNCaP细胞系中，测试了D4A的抗肿瘤活性，结果显示，D4A的抗肿瘤活性强于阿比特龙。综合上述抗癌性质，D4A可以更有效的用于治疗人前列腺癌，以及乳腺癌、卵巢癌等其它泌尿生殖系统癌症，或其它与雄激素相关的疾病。但是，除了化合物的效能外，口服生物利用度也是开发分子治疗剂时需要考虑的重要因素。经初步研究显示，D4A的游离碱具有较差的水溶性(2μg/ml)，同时在动物体内，具有较低的生物利用度。碱性药学活性化合物一般配制成药物制剂，如酸加成盐形式。虽然盐形式的制剂可以改善碱性药学活性化合物的物理活性药学性质是已知的，但是在真正制备和表征盐形式前预测哪种盐形式可能具有用于特定目的的优点是不可能的。本发明的其它背景见文献“conversionofabirateronetoD4Adrivesanti-tumouractivityinprostatecancer”，“pharmacologyofnovelsteroidalinhibitiorsofcytochromeP45017α(17α-Hydroxylase/C17-20Lyase)”等。本文提到的所有文献都通过参考完整地结合于此。技术实现要素：本发明的目的在于提供了17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的盐形式；本发明的另一目的在于提供了17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的盐的制备方法；本发明的又一目的在于提供 17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的盐在制备与雄性激素功能有关的适应症的药物中的用途。本发明的目的是由以下技术方案达到的，本发明涉及17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的酸加成盐，其选自盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐或马来酸盐；优选自盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐或马来酸盐。本发明还提供了制备17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的酸加成盐的方法，所述方法包括：在有机溶剂中，在加热或不加热时将D4A或D4A溶液与有机酸或无机酸溶液组合。通过搅拌析出、蒸发溶剂或加入反溶剂的方式分离得到盐型。其中有机溶剂选自低级醇或丙酮。本发明还提供了17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的酸加成盐在制备与雄性激素功能有关的适应症的药物中的用途。所述适应症可选自前列腺癌。本发明还提供了17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的酸加成盐在调节选择性细胞色素氧化酶CYP17A1、3βHSD、SRD5A、雄激素受体活性方面的用途。本发明还提供了含有可药用载体和17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的酸加成盐的药物组合物。所述的酸加成盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐或马来酸盐；特别是盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐或马来酸盐。可药用载体包括崩解剂、粘合剂、稀释剂、表面活性剂、润滑剂、防腐剂、抗氧化剂、芳香剂、着色剂等。本发明还提供了药物组合物在制备与雄性激素功能有关的适应症的药物中的用途。所述适应症可选自前列腺癌。本发明还提供了药物组合物在调节选择性细胞色素氧化酶CYP17A1、3βHSD、SRD5A、雄激素受体活性方面的用途。具体实施方式本发明公开了一种化合物及其制备方法、该化合物的中间体及其制备方法，及该化合物的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。下面结合实施例，进一步阐述本发明：实施例117-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的盐酸盐17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(150mg，0.43mmol)分散于丙酮中，随后加入0.036ml盐酸(11.94mol/l，0.432mmol)，室温搅拌过夜，过滤和干燥后得白色固体154.1mg(收率：93％)。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.85(s,1H),8.74(d,J＝5.3Hz,1H),8.47(d,J＝8.2Hz,1H),7.92(dd,J＝8.1,5.6Hz,1H),6.47(s,1H),5.66(s,1H),2.49-2.35(m,2H),2.35-2.25(m,2H),2.14(ddd,J＝19.5,12.0,3.2Hz,3H),1.98(ddd,J＝13.1,4.6,3.0Hz,1H),1.84(dt,J＝11.1,6.6Hz,2H),1.71-1.48(m,4H),1.42(td,J＝12.1,4.6Hz,1H),1.21(s,3H),1.15-0.95(m,5H).实施例217-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的氢溴酸盐17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(150mg，0.43mmol)分散于丙酮中，随后加入0.05ml氢溴酸(8.6mol/l，0.43mmol)，室温搅拌过夜，过滤和干燥后得棕色固体170.1mg(收率：92％)。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.87(s,1H),8.75(d,J＝5.3Hz,1H),8.48(d,J＝7.4Hz,1H),8.07-7.86(m,1H),6.47(s,1H),5.67(s,1H),2.44(ddd,J＝20.2,12.5,4.3Hz,2H),2.36-2.24(m,2H),2.23-2.06(m,3H),2.03-1.94(m,1H),1.84(dt,J＝11.1,6.6Hz,2H),1.69-1.49(m,4H),1.42(td,J＝12.1,4.6Hz,1H),1.21(s,3H),1.16-0.89(m,5H).实施例317-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的氢碘酸盐17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(150mg，0.43mmol)分散于丙酮溶液中，随后加入0.08ml氢碘酸(5.4mol/l，0.432mmol)，室温搅拌过夜，过滤和干燥后得棕色固体192.9mg(收率：94％)。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.85(s,1H),8.72(s,1H),8.46(s,1H),7.91(s,1H),6.45(s,1H),5.67(s,1H),2.49-2.37(m,2H),2.36-2.24(m,2H),2.14(ddd,J＝16.6,9.7,4.3Hz,3H),2.04-1.93(m,1H),1.84(dt,J＝11.1,6.6Hz,2H),1.72-1.49(m,4H),1.42(td,J＝12.0,4.5Hz,1H),1.21(s,3H),1.17-0.90(m,5H).实施例417-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的硝酸盐17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(150mg，0.43mmol)分散于乙醇中，随后加入0.03ml 硝酸(14.36mol/l，0.432mmol)，室温搅拌过夜，过滤和干燥后得白色固体161.2mg(收率：91％)。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.87(d,J＝1.8Hz,1H),8.74(d,J＝4.7Hz,1H),8.54-8.40(m,1H),7.93(dd,J＝8.2,5.6Hz,1H),6.46(dd,J＝3.0,1.7Hz,1H),5.66(s,1H),2.49-2.37(m,2H),2.36-2.24(m,2H),2.22-2.04(m,3H),1.98(ddd,J＝13.1,4.7,3.0Hz,1H),1.93-1.78(m,2H),1.71-1.48(m,4H),1.42(td,J＝12.1,4.6Hz,1H),1.21(s,3H),1.15-0.95(m,5H).实施例517-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的马来酸盐17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(50mg，0.14mmol)分散于丙酮中，随后加入马来酸(16.7mg，0.14mmol)，室温搅拌过夜，过滤和干燥后得白色固体59.36mg(收率：89％)。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.63(s,1H),8.48(d,J＝3.6Hz,1H),7.85(dd,J＝6.2,1.9Hz,1H),7.42(dd,J＝8.0,4.9Hz,1H),6.63(s,0H),6.25(s,2H),6.20-6.12(m,1H),5.66(s,1H),2.49-2.36(m,2H),2.36-2.11(m,3H),2.11-2.02(m,2H),2.02-1.92(m,1H),1.92-1.77(m,2H),1.70-1.47(m,4H),1.42(dd,J＝12.3,4.6Hz,1H),1.21(s,3H),1.19-0.92(m,5H).实施例6水溶解度将至少10mg的粉末与2ml的水混合，制备浓度大于5mg/ml的混合物。样品室温搅拌超过12小时，离心，直至上清液澄清，取上清液作为供试样品溶液。以在80％乙腈中制备的标准溶液作参比，通过HPLC测定供试样品溶液。测定结果，17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的盐在室温下水中的溶解度在以下表1中列出。游离碱在室温下水中的溶解度是2μg/ml。表1实施例的盐室温下水中的溶解度(μg/ml)119302133032543605890以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页1 2 3