一种胆管癌microRNA检测试剂盒的制作方法

文档序号:11145218阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种探针组合物,其特征在于,所述探针组合物包括:与靶标microRNA结合捕获探针以及信号放大组合物,所述靶标microRNA选自has-miR-CCA、hsa-miR-204-5p、hsa-miR-320a、hsa-miR-200b-3p、hsa-miR-200a-3p、hsa-miR-200c-3p、hsa-miR-141-3p、hsa-miR-429、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-31-5p、hsa-miR-142-3p以及hsa-miR-27a-3p中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的探针组合物,其特征在于,所述捕获探针的碱基序列从5’端到3’端依次为:与所述靶标microRNA结合的特异性序列P1、第一间隔臂序列、P2序列,所述P1序列为SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.12中的任意一条,所述P2序列为SEQ ID NO.13~SEQ ID NO.24中的任意一条,所述第一间隔臂序列为5~10个T。

3.根据权利要求2所述的探针组合物,其特征在于,所述信号放大组合物选自:第一信号放大组合物、第二信号放大组合物和第三信号放大组合物的任意一种;所述第一信号放大组合物为一级信号放大探针,所述第一信号放大组合物的3’端还修饰有第一荧光基团,所述第一荧光基团选自FAM、TET、JOE、HEX、Cy3、TAMRA、ROX、Texas Red、LC RED640、Cy5、LC RED705和Alexa Fluor 488中的任意一种;所述第二信号放大组合物为一级信号放大探针和二级信号放大探针,所述第二信号放大组合物的3’端还修饰有第二荧光基团,所述第二荧光基团选自FAM、TET、JOE、HEX、Cy3、TAMRA、ROX、Texas Red、LC RED640、Cy5、LC RED705和Alexa Fluor 488中的任意一种;所述第三信号放大组合物为一级信号放大探针、二级信号放大探针和三级信号放大探针,所述第三信号放大组合物的3’端还修饰有第三荧光基团,所述第三荧光基团选自FAM、TET、JOE、HEX、Cy3、TAMRA、ROX、Texas Red、LC RED640、Cy5、LC RED705和Alexa Fluor 488中的任意一种。

4.根据权利要求3所述的探针组合物,其特征在于,所述一级信号放大探针的碱基序列从5’端到3’端依次为:P4序列、第二间隔臂序列、与所述P2序列反向互补结合的P3序列;所述P4序列为SEQ ID NO.25~SEQ ID NO.36中的任意一条,所述第二间隔臂序列为5~10个T。

5.根据权利要求4所述的探针组合物,其特征在于,所述二级信号放大探针的碱基序列从5’端到3’端依次为:P5序列、第三间隔臂序列、P6序列, 所述P5序列含有一个或以上与所述P4序列反向互补的碱基序列;所述P5序列为SEQ ID NO.37~SEQ ID NO.48中的任意一条,所述P6序列为SEQ ID NO.49~SEQ ID NO.60中的任意一条,所述第三间隔臂序列为5~10个T。

6.根据权利要求5所述的探针组合物,其特征在于,所述三级信号大探针的碱基序列从5’端到3’端依次为:P8序列、第四间隔臂序列、P7序列,所述P7序列含有一个或以上与所述P5序列反向互补的碱基序列;所述P7序列为SEQ ID NO.61~SEQ ID NO.72中的任意一条,所述P8序列为5个碱基的polyT序列,所述第四间隔臂序列为5~10个T。

7.根据权利要求6所述的探针组合物,其特征在于,所述P1序列、P2序列、P3序列、P4序列、P5序列、P6序列、P7序列和P8序列内部不存在发夹结构。

8.根据权利要求7所述的探针组合物,其特征在于,所述第一间隔臂序列、所述第二间隔臂序列、所述第三间隔臂序列和所述第四间隔臂序列中T的数量相同或者不同。

9.根据权利要求8所述的探针组合物,其特征在于,所述第一荧光基团、所述第二荧光基团和所述第三荧光基团相同或者不同。

10.一种胆管癌microRNA检测试剂盒,其特征在于,所述胆管癌microRNA检测试剂盒包括权利要求1至9任意一项所述的探针组分。

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