产生人抗体的细胞的制作方法

文档序号:11141447阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种禽B细胞,其特征在于,在抗体轻链基因座中,插入来源于人抗体轻链可变区和人抗体轻链恒定区的DNA序列的全部或一部分,或用来源于人抗体轻链可变区和人抗体轻链恒定区的DNA序列的全部或一部分取代,以及,在抗体重链基因座中,插入来源于人抗体重链可变区和人抗体重链恒定区的DNA序列的全部或一部分,或用来源于人抗体重链可变区和人抗体重链恒定区的DNA序列的全部或一部分取代,以及,在抗体轻链假基因座中,插入2个以上来源于人抗体轻链可变区的DNA序列,或用2个以上来源于人抗体轻链可变区的DNA序列取代,和/或,在抗体重链假基因座中,插入2个以上来源于人抗体重链可变区的DNA序列,或用2个以上来源于人抗体重链可变区的DNA序列取代。

2.根据权利要求1所述的禽B细胞,其特征在于,在抗体轻链假基因座中插入的或取代该抗体轻链假基因座的序列的、来源于人抗体轻链可变区的DNA序列的数量是5个以上。

3.根据权利要求1所述的禽B细胞,其特征在于,在抗体重链假基因座中插入的或取代该抗体重链假基因座的序列的、来源于人抗体重链可变区的DNA序列的数量是5个以上。

4.根据权利要求1所述的禽B细胞,其特征在于,在抗体轻链假基因座中插入的或取代该抗体轻链假基因座的序列的、来源于人抗体轻链可变区的DNA序列的数量是15个以上。

5.根据权利要求1所述的禽B细胞,其特征在于,在抗体重链假基因座中插入的或者取代该抗体重链假基因座的序列的、来源于人抗体重链可变区的DNA序列的数量是15个以上。

6.根据权利要求1~5中任一项所述的禽B细胞,其特征在于,在抗体轻链基因座中插入的来源于人抗体轻链可变区的DNA序列的位置位于来源于人抗体轻链恒定区的DNA序列所存在的位置的上游,以及在抗体重链基因座中插入的来源于人抗体重链可变区的DNA序列的位置位于来源于人抗体重链恒定区的DNA序列所存在的位置的上游。

7.根据权利要求6所述的禽B细胞,其特征在于,在抗体轻链基因座中插入的来源于人抗体轻链可变区的DNA序列和来源于恒定区的DNA序列的位置与禽抗体轻链可变区和恒定区的位置相比位于上游,以及在抗体重链基因座中插入的人抗体重链可变区和恒定区的位置与禽抗体重链可变区和恒定区的位置相比位于上游。

8.根据权利要求1~7中任一项所述的禽B细胞,其特征在于,所述人抗体重链是γ链。

9.根据权利要求1~8中任一项所述的禽B细胞,其特征在于,所述人抗体轻链是λ链或κ链。

10.根据权利要求1~9中任一项所述的禽B细胞,其特征在于,所述禽B细胞具有在细胞表面表达人抗体且还在培养液中分泌人抗体的能力。

11.根据权利要求1~10中任一项所述的禽B细胞,其特征在于,禽B细胞是DT40细胞。

12.根据权利要求1~11中任一项所述的禽B细胞,其中,进行使染色质松弛的处理。

13.根据权利要求12所述的禽B细胞,其中,所述使染色质松弛的处理是使该禽B细胞中的组蛋白去乙酰化酶的功能降低或丧失。

14.根据权利要求13所述的禽B细胞,其中,所述使组蛋白去乙酰化酶的功能降低或丧失的方法是使该禽B细胞中的组蛋白去乙酰化酶基因的表达降低或丧失。

15.根据权利要求14所述的禽B细胞,其特征在于,所述组蛋白去乙酰化酶是HDAC2。

16.根据权利要求13所述的禽B细胞,其特征在于,所述使组蛋白去乙酰化酶的功能降低或丧失的方法是利用HDAC抑制剂处理。

17.一种由权利要求12~16中任一项所述的禽B细胞构成的产生抗体的细胞文库。

18.一种由权利要求1~16中任一项所述的禽B细胞制造抗体的方法。

19.一种通过权利要求18所述的方法取得的抗体。

20.一种用于制造权利要求1~16中任一项所述的禽B细胞的试剂盒。

21.一种用于通过权利要求18所述的方法产生抗体的试剂盒。

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