一种从毛叶香茶菜中制备冬凌草甲素的方法与流程

技术特征：
1.一种从毛叶香茶菜中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）上样液的制备：毛叶香茶菜干燥药材1kg粉碎，过40目药典筛，每次加质量浓度为95%的乙醇10L，提取3次，每次1.5h，合并3次提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水分散，减压回收溶剂至无醇味，水分散，在3600r/min下离心30min，倾取上清液，不溶物加100ml体积浓度为15%的乙醇溶解，在3600r/min下离心30min，合并两次上清液制得上样液；2）树脂预处理：方法是，SephadexLH-20树脂用甲醇浸泡24h后，倾去甲醇液，用体积浓度为15%的甲醇浸泡12h，每2h置换一次溶剂，湿法装柱，用体积浓度为15%的甲醇洗脱2个柱体积，得预处理好的SephadexLH-20树脂；3）装柱与上样：将步骤2）预处理好的树脂湿法装柱，于内径为5cm的层析柱，使树脂床径高比达1︰15，再将步骤1）中的上样液1000ml自然流速通过树脂柱吸附完全；4）分离纯化：树脂柱先用体积浓度为15%的甲醇洗脱1500ml，再用30%的甲醇洗脱4000ml，收集体积浓度为30%甲醇的洗脱液，减压回收溶剂，得相对密度为1.243的稠浸膏；5）重结晶：将上述稠浸膏用20ml甲醇溶解，在-20℃-35℃下静置24-72h，去除上清液，析出白色粉末状结晶，过滤，得白色结晶状粉末，上清液继续放置24-72h，析出白色粉末状结晶，过滤，得白色结晶状粉末，合并两次白色结晶状粉末，即得冬凌草甲素0.523g，采用HPLC法面积归一化法计算其纯度大于96.81%。2.一种从毛叶香茶菜中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）上样液的制备：毛叶香茶菜干燥药材1kg，粉碎，过60目药典筛，每次加质量浓度为95%的乙醇12L，提取3次，每次2h，合并3次提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水分散，减压回收溶剂至无醇味，加水分散，在3600r/min下离心30min，倾取上清液，不溶物加200ml体积浓度为20%的乙醇溶解，在3600r/min下离心30min，合并两次上清液制得上样液；2）树脂预处理：方法是，SephadexG树脂用甲醇浸泡24h，倾去甲醇液，用20%的甲醇浸泡12h，每2h置换一次溶剂，湿法装柱，用体积浓度为20%的甲醇洗脱2个柱体积，得预处理好的SephadexG树脂；3）装柱与上样：将步骤2）预处理好的树脂湿法装柱，于内径为5cm的层析柱，使树脂床径高比达1︰15，再将步骤1）中的上样液500mL自然流速通过树脂柱，吸附完全；4）分离纯化：树脂柱先用体积浓度为20%的甲醇洗脱1000ml，再用30%的甲醇洗脱3000ml，收集体积浓度为30%甲醇的洗脱液，减压回收溶剂，得相对密度为1.321的稠浸膏；5）重结晶：将上述稠浸膏用乙醇溶解20ml，在-20℃-35℃下静置24-72h，去除上清液，析出白色粉末状结晶，过滤，得白色结晶状粉末，上清液继续放置24-72h，析出白色粉末状结晶，过滤，得到白色结晶状粉末，合并上述白色结晶状粉末，制得冬凌草甲素0.5021g，采用HPLC法面积归一化法计算其纯度大于95.12%。3.一种从毛叶香茶菜中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）上样液的制备：毛叶香茶菜干燥药材1kg，粉碎，过80目药典筛，每次加质量浓度为75%的乙醇12L，提取3次，每次2h，合并3次提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水分散，减压回收溶剂至无醇味，加水分散，在3600r/min下离心30min，倾取上清液，不溶物加800ml体积浓度为20%的乙醇溶解，在3600r/min下离心30min，合并两次上清液制得上样液；2）树脂预处理：方法是，MCI树脂用甲醇浸泡24h后，倾去甲醇液，用20%的甲醇浸泡12h，每2h置换一次溶剂，湿法装柱，用体积浓度为20%的甲醇洗脱2个柱体积，得预处理好的MCI树脂；3）装柱与上样：将步骤2）预处理好的树脂湿法装柱，于内径为5cm的层析柱，使树脂床径高比达1︰15，再将步骤1）中的上样液800ml自然流速通过树脂柱，吸附完全；4）分离纯化：树脂柱先用体积浓度为20%的甲醇洗脱2000ml，再用30%的甲醇洗脱3000ml，收集体积浓度为30%甲醇的洗脱液，减压回收溶剂，得相对密度1.246稠浸膏；5）重结晶：将上述稠浸膏用20ml丙醇溶解，在-20℃-35℃下静置24-72h，去除上清液，析出白色粉末状结晶，过滤，得白色结晶状粉末，上清液继续放置24-72h，析出白色粉末状结晶，过滤，得白色结晶状粉末，合并两次白色结晶状粉末，即制得冬凌草甲素0.489g，采用HPLC法面积归一化法计算其纯度大于96.87%。4.一种从毛叶香茶菜中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）上样液的制备：毛叶香茶菜干燥药材1kg，粉碎，过80目药典筛，每次加质量浓度为50%的乙醇12L，提取3次，每次1.5h，合并3次提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水分散，减压回收溶剂至无醇味，加水分散，在3600r/min下离心30min，倾取上清液，不溶物加500ml体积浓度为20%的乙醇溶解，在3600r/min下离心30min，合并两次上清液制得上样液；2）树脂预处理：方法是，SephadexLH-20树脂用甲醇浸泡24h后，倾去甲醇液，用20%的甲醇浸泡12h，每2h置换一次溶剂，湿法装柱，用体积浓度为20%的甲醇洗脱2个柱体积，得预处理好的SephadexLH-20树脂；3）装柱与上样：将步骤2）预处理好的树脂湿法装柱，于内径为5cm的层析柱，使树脂床径高比达1︰10，再将步骤1）中的上样液1L自然流速通过树脂柱，吸附完全；4）分离纯化：树脂柱先用体积浓度为20%的甲醇洗脱1.9L，再用30%的甲醇洗脱4000ml，收集体积浓度为30%甲醇的洗脱液，减压回收溶剂，得相对密度为1.321的稠浸膏；5）重结晶：将上述稠浸膏用异丙醇溶解20ml，在-20℃-35℃下静置24-72h，析出白色粉末状结晶，过滤，得到白色结晶状粉末，上清液继续静置24-72h，析出白色粉末状结晶，过滤，得到白色结晶状粉末，合并上述白色结晶状粉末，即得冬凌草甲素0.549g，采用HPLC法面积归一化法计算其纯度大于95.02%。