本发明涉及药物化学技术领域，具体涉及抗癌药贝利司他的合成方法。
背景技术：
贝利司他的化学名称为N-羟基-3-(3-苯基氨基磺酰基苯基)丙烯酰胺；英文化学名称为N-Hydroxy-3-(3-phenylsulfamoylphenyl)acrylamide；分子式为C15H14N2O4S；分子量为318.35；CAS登记号为414864-00-9；商品名为Beleodaq。贝利司他(Belinostat)是一种异羟戊酸结构的小分子，为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅳ型组蛋白脱乙酰化酶抑制剂(HDACI)，是由TopoTarget和Spectrum公司联合开发的，主要用于治疗复发或难治性外周淋巴瘤(PTCL)。组蛋白乙酰转移酶和组蛋白脱乙酰化酶是基因表达过程中调节器，组蛋白的乙酰化作用可以使基因表达，而脱乙酰化作用则会抑制基因表达，在肿瘤细胞中，组蛋白脱乙酰化作用可使肿瘤的抑制基因沉默，从而促进肿瘤增长。因此，组蛋白脱乙酰化酶抑制剂可以恢复肿瘤抑制基因从而抑制肿瘤生长。贝利司他在2014年7月3日获美国FDA初步批准，用于治疗成人复发难治性外周淋巴瘤，该药为静脉注射剂。贝利司他是自2009年以来用于PTCL治疗的第3种药物，此前，普拉曲沙(Folotyn，2009年)被批准用于复发或难治性PTCL患者，罗咪酯肽(Istodax，2011年)被批准用于之前至少接受过一种治疗的PTCL患者。在Ⅱ期临床阶段，贝利司他使129例PTCL患者中的25.8％病情得到改善。目前临床正在研究贝利司他的单药或联合用药对白血病及实体瘤的治疗作用。贝利司他最早的合成方法是由WO02030879公开的，该合成路线在第一步磺化反应中用到发烟硫酸，在储存、运输和使用过程中均存在安全隐患，并且造成环境污染。2010年，张弈华等(SyntheticCommunications，40(17):2520-2524)公开了贝利司他的另一种合成路线，该路线尽管避免了发烟硫酸及氯化亚砜的使用，但在第三步采用了重氮化反应，第五步磺化反应用到SO2气体，在大规模的生产中仍存在很大的安全隐患。为了更适合工业化生产，2012年万乐药业在专利CN102786448公开了一种新的合成方法，该方法以间羧基苯磺酸钠为原料，经酯化、氯代、缩合、还原、氧化、缩合反应得中间体，然后再经水解，酰氯化、缩合反应得到目标化合物贝利司他，该方法的不足：其一、在酰氯化过程中用到了管制剧毒品三氯氧磷，从采购、运输、管理上都大大增加了成本，且当三氯氧磷用量较大时可能发生危险事故；其二、在氧化过程中用PCC做氧化剂，有氧化产率低、重金属铬污染、后处理麻烦等缺点；其三、该方法操作步骤多，生产周期长，需要进一步改进。2014年该公司在专利CN104478769A改进了上述路线，反应路线如下：该路线第二步将酰氯化试剂改为氯化亚砜或草酰氯，氧化反应试剂改2-碘酰基苯甲酸(IBX)，将多步反应合为一步。该路线相比于上述几条路线来说虽然更适合工业化生产，但仍有改进之处。就工业化生产来说，该路线起始原料不易获得，生产成本会增加，从第一二步看，该路线先成酯，然后进行氯代后再与苯胺缩合，反应过程较为复杂；该方法在氧化过程中将氧化剂改为2-碘酰基苯甲酸，虽然避免了金属铬离子的污染、提高了收率，但该氧化剂价格较为昂贵，不利于工业化的大量生产。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种更适合工业化生产的贝利司他的合成路线，该方法以苯甲酸为起始原料，经氯磺化、缩合、还原、Swern氧化、Witting-Horner缩合及水解、酰氯化及与羟胺缩合六个步骤制备得到，该方法合成简单，易于操作，缩短了生产时间，提高了反应收率，且反应中所用物料廉价易得，更适合工业化生产。本发明的技术方案如下：一种贝利司他的合成方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：步骤1)苯甲酸与氯磺酸反应，得化合物Ⅱ；步骤2)化合物Ⅱ在碱性试剂存在下与苯胺进行缩合反应，得化合物Ⅲ；步骤3)化合物Ⅲ在还原剂存在下进行还原反应，得化合物Ⅳ；步骤4)化合物Ⅳ在氧化剂和助氧化剂的存在下进行氧化反应，得化合物Ⅴ；其中所述氧化剂为DMSO，所述助氧化剂为三氧化硫吡啶络合物或五氧化二磷；步骤5)化合物Ⅴ中加入磷酰基乙酸三甲酯和碳酸盐水溶液或磷酰基乙酸三乙酯和碳酸盐水溶液进行缩合反应，反应完全后加入碱溶液水解，得化合物Ⅵ；步骤6)化合物Ⅵ在酰氯化试剂存在下进行酰氯化反应，酰氯产物与羟胺进行缩合反应，得到化合物Ⅰ。进一步地，在步骤1)中，所述的苯甲酸与氯磺酸的摩尔比为1：4～15，优选为1:5～10。进一步地，在步骤1)中，将氯磺酸加入苯甲酸中，50～120℃下搅拌反应，反应完毕后将反应液缓慢加入冰水中，析出固体，减压抽滤，干燥，得化合物Ⅱ，其中反应温度优选为90～100℃。进一步地，在步骤2)中，所述的碱性试剂与化合物Ⅱ的摩尔比为1～3：1，苯胺与化合物Ⅱ的摩尔比为1～3：1。进一步地，所述的碱性试剂为吡啶、N-甲基吡咯烷酮、N-甲基吗啉中的一种。进一步地，在步骤2)中，将化合物Ⅱ溶解在乙酸乙酯或四氢呋喃中，加入碱性试剂和苯胺，室温搅拌至反应完全，调pH为2～3使产物析出，得化合物Ⅲ。进一步地，在步骤3)中，将化合物Ⅲ溶于四氢呋喃或乙醚中，将其滴加至冰浴中的还原剂溶液中，搅拌5-15min后，在50～100℃下回流反应，得化合物Ⅳ，其中所述的还原剂为氢化锂铝、NaBH4/I2、NaBH4/H2SO4中的一种，所述的还原剂与化合物Ⅲ的摩尔比为1～4：1。所述还原剂溶液是指溶于四氢呋喃或乙醚的含还原剂的溶液。进一步地，在步骤4)中，所述氧化剂与化合物Ⅳ的摩尔比为2～10：1，优选为5～10：1，助氧化剂与化合物Ⅳ的摩尔比为1～8：1，优选为3～6：1。进一步地，在步骤4)中，化合物Ⅳ溶于有机溶剂中，加入氧化剂和缚酸剂，搅拌5-10min后，向该溶液中加入助氧化剂，室温搅拌，反应完毕后，加入pH为1-5的盐酸或硫酸溶液，用有机溶剂萃取，合并有机相并浓缩，浓缩液中加入亚硫酸氢钠的水溶液搅拌，用有机溶剂洗涤，水层中加入饱和碳酸钠溶液，用有机溶剂萃取，萃取液用无水硫酸钠干燥，得化合物Ⅴ；其中，化合物Ⅳ溶于二氯甲烷、四氢呋喃、氯仿或乙酸乙酯，反应完毕后产品的萃取以及洗涤所用有机溶剂为二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯。所述缚酸剂可以使用本领域常规缚酸剂，优选三乙胺、乙二胺等试剂。进一步地，在步骤5)中，将化合物Ⅴ溶于四氢呋喃中，加入磷酰基乙酸三甲酯和碳酸盐水溶液或磷酰基乙酸三乙酯和碳酸盐水溶液，室温搅拌反应，反应完全后加入碱溶液在室温下进行水解反应，得化合物Ⅵ，其中所述碳酸盐为碳酸钾或碳酸钠中的一种，所述碱溶液为氢氧化钠或氢氧化钾水溶液中的一种，所述磷酰基乙酸酯与化合物Ⅴ的加入量为按摩尔比1～3:1，所述碳酸盐与化合物Ⅴ的加入量为按摩尔比2～5:1，所述氢氧化钠或氢氧化钾与化合物Ⅴ的加入量为按摩尔比3～7:1。进一步地，在步骤6)中，将化合物Ⅵ溶于四氢呋喃中，加入酰氯化试剂在25-35℃下搅拌反应，反应完成后，在冰浴条件下将反应液滴加至含有碱、盐酸羟胺的混合溶液中，搅拌反应，得到化合物Ⅰ，其中所述酰氯化试剂为草酰氯、氯化亚砜、三氯氧磷中的一种，所述的碱为碳酸钾、碳酸钠或碳酸氢钠。本发明的上述贝利司他的合成反应中，步骤1)为氯磺化反应，步骤1)由苯甲酸作为起始原料，与氯磺酸反应，可一步实现磺酰化及氯代反应，减少了反应步骤，操作更加简便。本发明的有益效果：本发明提供了一种新的更适合工业化生产的贝利司他的合成方法，该方法与2014年CN104478769A公开的最新的合成路线相比，所用原料更加廉价易得，第一步将磺酰化与氯代反应一步实现，使合成步骤更加简单，缩短了生产周期，降低了生产成本。在氧化反应过程中，本发明采用廉价的三氧化硫吡啶络合物或五氧化二磷作助氧剂，二甲基亚砜为氧化剂，既降低了生产成本，在反应过程中又没有引入金属离子，该合成方法既节俭又环保，因此本发明更适合贝利司他的工业化生产。具体实施方式下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。下述实施例中，如无特殊说明，所使用的实验方法均为常规方法，所用材料、试剂等均可从化学公司购买。实施例1化合物Ⅱ的制备实施例1-1：称取1.22g(10mmol)苯甲酸于50mL梨形瓶中，然后缓慢加入5ml氯磺酸，80℃下搅拌5h。反应完毕后，将反应液滴加至冰水中，然后减压抽滤，洗涤，真空干燥，得白色固体，收率69.1％。实施例1-2：称取1.22g(10mmol)苯甲酸于50mL梨形瓶中，然后缓慢加入5ml氯磺酸，120℃下搅拌30min。反应完毕后，将反应液滴加至冰水中，然后减压抽滤，洗涤，真空干燥，得白色固体，收率67.7％。实施例1-3：称取1.22g(10mmol)苯甲酸于50mL梨形瓶中，然后缓慢加入5ml氯磺酸，100℃下搅拌45min。反应完毕后，将反应液滴加至冰盐水中，然后减压抽滤，洗涤，真空干燥，得白色固体，收率86.4％。实施例1-4：称取1.22g(10mmol)苯甲酸于50mL梨形瓶中，然后缓慢加入10mL氯磺酸，100℃下搅拌45min。反应完毕后，将反应液滴加至冰盐水，然后减压抽滤，洗涤，真空干燥，得白色固体，收率88.7％。上述实施例中得到的产品的1H-NMR检测结果如下：1H-NMR(Acetone-d6，400MHz)δ：8.64(t，J＝1.6Hz，1H)，8.52(d，J＝7.6Hz，1H)，8.41(dt，J＝8.0，1.2Hz，1H)，8.00(t，J＝8.0Hz，1H)。实施例2化合物Ⅲ的制备称取1.1g(5mmol)化合物Ⅱ于100mL梨形瓶中，加入20mL乙酸乙酯溶解，然后加入805μL(10mmol)吡啶及684μL(7.5mmol)苯胺，室温搅拌30min，反应完毕后，将反应液转移至分液漏斗中，用1mol/L氢氧化钠溶液30mL洗涤，然后氢氧化钠层再用乙酸乙酯洗涤，洗涤完毕后，氢氧化钠层用2mol/L的盐酸溶液将pH调至2～3，有固体析出，减压抽滤，干燥后得白色固体化合物，收率85.2％。1H-NMR(Acetone-d6，400MHz)δ：11.70(br，s，1H)，9.11(s，1H)，8.44(t，J＝1.6Hz，1H),8.22(dt，J＝8.0，1.2Hz，1H)，8.00(dt，J＝8.0，1.2Hz，1H)，7.68(t，J＝8.0Hz，1H)，7.05-7.30(m，5H)。实施例3化合物Ⅳ的制备将2.77g(10mmol)化合物Ⅲ溶于40mL四氢呋喃，称取950mg(25mmol)LiAlH4于250mL梨形瓶，然后加入30mL四氢呋喃，冰浴条件下将化合物Ⅲ的四氢呋喃溶液滴入梨形瓶中，搅拌15min后，将其转移至75℃油浴锅中回流2h。反应完毕后，向反应液中加10mL水将反应淬灭，然后加入盐酸调pH为2～3，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得淡黄色固体，收率100％。1H-NMR(Acetone-d6，400MHz)δ：9.02(s，1H)，7.85(s，1H)，7.66(d，J＝8.0Hz，1H)，7.55(d，J＝8.0Hz，1H)，7.45(t，J＝8.0Hz，1H)，7.00-7.30(m，5H)，4.67(s，1H)，4.49(s，1H)。实施例4化合物Ⅴ的制备实施例4-1：将526mg(2mmol)化合物Ⅳ溶于10ml二氯甲烷，然后加入1135μl(16mmol)DMSO及1385μl(10mmol)三乙胺，搅拌5min，然后加入1.59g(10mmol)吡啶三氧化硫络合物，室温搅拌2h。反应完毕后加水淬灭，乙酸乙酯萃取，酸水洗涤，浓缩有机相，浓缩后加入四氢呋喃及亚硫酸氢钠1.04g(10mmol)水溶液搅拌，反应完毕后用乙酸乙酯洗涤，水层加饱和碳酸钠溶液使醛游离，再用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得白色固体，收率75.3％。实施例4-2：称取526mg(2mmol)化合物Ⅳ于100mL梨形瓶中，加入10mL二氯甲烷溶解，然后加入568μL(8mmol)DMSO及554μL(4mmol)三乙胺，搅拌5min后加入568mg(4mmol)五氧化二磷，室温搅拌至反应完全。加水淬灭，酸水洗涤，乙酸乙酯萃取，浓缩有机相，浓缩后加入四氢呋喃及亚硫酸氢钠1.04g(10mmol)水溶液搅拌，反应完毕后用乙酸乙酯洗涤，水层加饱和碳酸钠溶液使醛游离，再用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得白色固体，收率51.7％。上述实施例中得到的产品的1H-NMR检测结果如下：1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ：10.00(s，1H)，8.27(t，J＝1.6Hz，1H)，8.05(dt，J＝1.6，8.0Hz，1H)，8.00(dt，J＝1.6，8.0Hz，1H)，8.62(t，J＝8.0Hz，1H)，7.05-7.30(m，5H)，6.87(s，1H)。实施例5：化合物Ⅵ的制备称取449mg(1.72mmol)化合物Ⅴ于100mL梨形瓶中，然后加入8mL四氢呋喃溶解，将712mg(5.16mmol)碳酸钾溶于5mL水，备用；向化合物Ⅴ的四氢呋喃(THF)溶液中加入418μL(2.58mmol)磷酰基乙酸三甲酯及备用碳酸钾的水溶液，室温搅拌1h。然后向反应液中加入5mL2M的氢氧化钠溶液，30℃搅拌1h。反应完毕后向反应液中加入少量水，乙酸乙酯洗涤2次，水层用2M的盐酸溶液调pH为2-3，固体析出，过滤后干燥，得白色固体，收率92.1％。1H-NMR(Acetone-d6，400MHz)δ：10.95(br，s，1H)，9.07(s，1H)，8.05(s，1H)，7.91(d，J＝8.0Hz，1H)，7.81(d，J＝8.0Hz，1H)，7.68(d，J＝16.0Hz，1H)，7.59(t，J＝8.0Hz，1H)，7.05-7.30(m，5H)，6.57(s，J＝16.0Hz，1H)。实施例6化合物Ⅰ的制备将164mg(0.54mmol)化合物Ⅵ溶于3mLTHF，然后加入183μL(2.16mmol)草酰氯，30℃搅拌30min备用。称取373mg(2.7mmol)碳酸钾于50mL梨形瓶中，加3mL水溶解，然后加入3mLTHF，冰浴条件下加入188mg(2.7mmol)盐酸羟胺，搅拌5min后，滴加上述备用液，搅拌10min。反应完毕后向反应液中加盐酸调pH为1-2，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，乙酸乙酯重结晶得白色固体，收率82.7％。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：10.84(s，1H)，10.33(s，1H)，9.15(br，s，1H)，7.92(s，1H)，7.78(d，J＝8.0Hz，1H)，7.70(d，J＝8.0Hz，1H)，7.58(t，J＝8.0Hz，1H)，7.46(d，J＝16.0Hz，1H)，7.24(t，J＝7.8Hz，2H)，7.09(d，J＝7.8Hz，2H)，7.03(t，J＝7.8Hz，1H)，6.51(d，J＝16.0Hz，1H)。