本发明涉及一种IDO抑制剂及其制备方法和用途。
背景技术：
：吲哚胺2，3-双加氧化酶(indoleamine2，3-dioxygenase，IDO)是肝脏以外唯一的催化色氨酸沿犬尿氨酸途径分解代谢的限速酶。IDO可通过降低微环境中色氨酸的浓度而达到抑制病原微生物增殖的作用；IDO与神经系统疾病也密切相关，它能降低5-羟色胺的水平而导致抑郁，也可造成脑中喹啉酸等具有神经毒性的代谢产物的累积；IDO在抑制T细胞免疫和抗肿瘤免疫、诱导母胎免疫耐受和移植物免疫耐受中均发挥重要的代谢性免疫调节作用。IDO已被证实与阿尔茨海默病、白内障、癌症等多种人类重大疾病密切相关，因此IDO抑制剂作为重要的药物受到日益广泛的关注。NLG919是一种新型的IDO抑制剂，目前已进入临床试验阶段。但是，其药效和药代动力学性质，仍有很大的改进空间。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种IDO抑制剂及其制备方法和用途。如下所示的化合物或其晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物：R1-R21分别选自H或D；且，R1-R21中至少一个为D。进一步地，R1和R2同时为H或同时为D。进一步地，R3-R6同时为H或同时为D。进一步地，R8和R9同时为H或同时为D。进一步地，R12-R21同时为H或同时为D。进一步地，R1和R2同时为H或同时为D；且，R3-R6同时为H或同时为D；且，R7为H或D；且，R8和R9同时为H或同时为D；且，R10为H或D；且，R11为H或D；且，R12-R21同时为H或同时为D；且，R1-R21中至少一个为D。进一步地，R1和R2同时为D；且，R3-R21中至少一个为D。进一步地，R1和R2同时为H；且，R3-R6同时为D；且，R7-R21中至少一个为D。进一步地，R1-R6同时为D；且，R7-R21中至少一个为D。进一步地，R1-R6同时为H；且，R7-R11中至少一个为D。进一步地，R1-R7同时为H；且，R8-R11中至少一个为D。进一步地，R7或/和R10为D。进一步地，所述化合物为如下化合物之一：本发明还提供了一种制备上述化合物或其晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物的方法，包括以下步骤：以式Ⅱ所示的化合物为原料，经羰基还原得到式Ⅰ所示化合物。进一步地，所述制备方法为，将式Ⅱ所示的化合物溶于溶剂中，加入羰基还原试剂进行还原反应，分离纯化得到式Ⅰ所示化合物。进一步地，所述溶剂选自甲醇。进一步地，所述羰基还原试剂选自NaBH4或NaBD4。进一步地，所述还原反应的温度为0℃。本发明还提供了所述化合物、或其晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物在制备用于治疗与IDO相关疾病药物中的用途。进一步地，所述化合物、或其晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物是IDO抑制剂。进一步地，所述IDO相关疾病包括癌症、病毒性感染、抑郁症、神经退行性疾病、创伤、与年龄相关的白内障、器官移植排斥反应、自身免疫性疾病。本发明还提供了一种药物组合物，它是以所述化合物、或其晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物为活性成分，加上药学上可接受辅料或/和辅助性成分制备而成的制剂。术语“药学上可接受的”是指某载体、运载物、稀释剂、辅料，和/或所形成的盐通常在化学上或物理上与构成某药物剂型的其它成分相兼容，并在生理上与受体相兼容。术语“盐”和“可药用的盐”是将化合物或其立体异构体，与无机和/或有机酸和碱形成的酸式和/或碱式盐，也包括两性离子盐(内盐)，还包括季铵盐，例如烷基铵盐。这些盐可以是在化合物的最后分离和纯化中直接得到。也可以是通过将化合物，或其立体异构体，与一定数量的酸或碱适当(例如等当量)进行混合而得到。这些盐可能在溶液中形成沉淀而以过滤方法收集，或在溶剂蒸发后回收而得到，或在水介质中反应后冷冻干燥制得。本发明中所述盐可以是化合物的盐酸盐、硫酸盐、枸橼酸盐、苯磺酸盐、氢溴酸盐、氢氟酸盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁二酸盐、草酸盐、苹果酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐或三氟乙酸盐。试验结果显示，本发明的化合物对IDO具有显著的抑制作用，效果与NLG919相当甚至更优。进一步的药代动力学试验还显示，与NLG919相比，本发明化合物在药效相当甚至更高的情况下，还具有更好的药代动力学性质，具有广阔的市场前景。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。具体实施方式下述实施例中所用试剂的来源如下：成都金山化学试剂有限公司：环己基甲酸，二氯亚砜，二氯甲烷，二甲羟胺盐酸盐，三乙胺，甲基溴化镁，氯化铵，咪唑，乙酸钠，乙酸，溴素，硫酸钠，三苯基氯甲烷，四氢呋喃，2-甲酰基苯硼酸，四三苯基磷钯，碳酸钠，N,N-二甲基甲酰胺，乙醇钠，甲醇，硼氢化钠。成都市科龙化工试剂厂：重水，钯炭，氘代甲醇，硼氘化钠，碳酸钾。成都睿智化学研究有限公司：2-氘代甲酰基苯硼酸，3，4，5，6-四氘代-2-甲酰基氘代苯硼酸，2-氘代甲酰基-氘代苯硼酸。实施例11-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物10)的合成(1)乙酰基环己烷(中间体3)的合成向100ml的单口瓶中加入环己甲酸(5g,39mmol)以及二氯甲烷(20ml)，室温下搅拌下缓慢地滴入二氯亚砜(5.67ml,78mmol)，反应5h，浓缩溶剂。将二甲羟胺盐酸盐(4.5g,47mmol)二氯甲烷(10ml)以及三乙胺(13ml,96mmol)的混合液缓慢地滴入其中，室温下搅拌3h，滤去固体，向液体中滴入1N盐酸除去过量的三乙胺，乙酸乙酯萃取，合并有机层，用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到粗品2(5.3g)。向三口瓶中加入粗品化合物2(5g，29mmol)，四氢呋喃(15ml)，温度控制在0℃，在氮气保护下加入，缓慢加入甲基溴化镁(10ml，29mmol)，在0℃下搅拌2h，加入氯化铵淬灭甲基溴化镁，加入二氯甲烷萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干二氯甲烷得到化合物3(4.2g，收率85％)。(2)2，4，5-三溴咪唑(中间体5)的合成向三口瓶中加入咪唑(29.24g，0.43mol)，乙酸钠(317.34g，3.87mol)以及乙酸(150ml)，溶于乙酸(100ml)的溴素(65ml，1.28mol)通过恒压分液漏斗在室温下缓慢滴入，控制温度不超过40℃，在室温下搅拌3h，反应液倒入1.5L的水中，析出固体，抽滤，用水洗涤固体，烘干得到化合物5(120g，收率92％)，质谱：305(M+H+)。(3)4-溴咪唑(中间体6)的合成向单口瓶中加入2，4，5-三溴咪唑(49g，161mmol)，亚硫酸钠(101.5g，806mmol)和水(500ml)，在110℃下搅拌6h，加入乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干乙酸乙酯得到化合物6(20.5g，收率89％)，质谱：148(M+H+)。(4)4-溴-1-三苯甲基-1H-咪唑(中间体7)的合成向单口瓶中加入4-溴咪唑(30g，205mmol)，二氯甲烷：四氢呋喃＝1：1，和三苯基氯甲烷(62g，226mmol)，在室温下搅拌下加入三乙胺(29ml)，继续搅拌1h，加入水以及1N盐酸，加入二氯甲烷萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干二氯甲烷得到化合物7(61g，收率72％)。(5)2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-)苯甲醛(中间体8)的合成向单口瓶中加入4-溴-1-三苯甲基-1H-咪唑(1.5g，3.9mmol)，碳酸钠(1.2g，11.7mmol)，2-甲酰基苯硼酸(864mg，5.8mmol)和DMF(10ml)，水(2ml)，使反应体系充满氮气，加入四(三苯基膦)钯(242mg，0.195mmol)，在氮气保护下，90℃搅拌16h，加入水，乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物8(930mg，收率58％)。(6)1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(中间体9)的合成向三口瓶中加入2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-)苯甲醛(400mg，0.97mmol)，乙酰基环己烷(122mg，0.97mmol)和无水四氢呋喃(5ml)，在氮气保护下，将乙醇钠(85mg，1.25mmol)的乙醇溶液在室温下加入，在室温下搅拌3h，旋干溶剂，加入饱和氯化铵(10ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，加入乙酸(1ml)和乙醇(5ml)，在90℃下搅拌3h，冷却至室温，加入饱和碳酸钠调节PH＝10，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物9(210mg，收率77％)，质谱：281(M+H+)。(7)环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物10)的合成向单口瓶中加入1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)和甲醇(3ml)，在0℃下加入硼氢化钠(57mg，1.5mmol)，搅拌1h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物10(105mg，收率73％，LCMS纯度99.0％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,5H),2.05(m,2H),2.15(m,1H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.16(s,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz),7.80(s,1H)；质谱：283(M+H+)。实施例21-环己基-2-(5H-7,8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物15(D1))的合成(1)4-溴-1,2,5-三氘代-1H-咪唑(中间体11)的合成室温下钯碳(2g，10％Pd)在氢气中搅拌一个小时，然后将溶于纯重水(50g，2.5mol)的4-溴咪唑(10g，69mmol)加入，除氢气后，在100℃下搅拌1h，反应液过滤除去催化剂，旋干溶剂得到化合物11(9.2g，收率91％)，质谱：151(M+H+)。(2)4-溴-1-三苯甲基-2,5,-二氘代-1H-咪唑(中间体12)的合成向单口瓶中加入4-溴-1,2,5-三氘代-1H-咪唑(30g，205mmol)，二氯甲烷：四氢呋喃＝1：1，和三苯基氯甲烷(62g，226mmol)，在室温下搅拌下加入三乙胺(29ml)，继续搅拌1h，加入水以及1N盐酸，加入二氯甲烷萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干二氯甲烷得到化合物12(61g，收率72％)。(3)2-(1-三苯甲基-2，5-二氘代-1H-咪唑-4-)苯甲醛(中间体13)的合成向单口瓶中加入4-溴-1-三苯甲基-2,5,-二氘代-1H-咪唑(1.5g，3.9mmol)，碳酸钠(1.2g，11.7mmol)，2-甲酰基苯硼酸(864mg，5.8mmol)和DMF(10ml)，水(2ml)，使反应体系充满氮气，加入四(三苯基膦)钯(242mg，0.195mmol)，在氮气保护下，90℃搅拌16h，加入水，乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物13(930mg，收率58％)。(4)1-环己基-2-(5H-7，8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(中间体14)的合成向三口瓶中加入2-(1-三苯甲基-2，5-二氘代-1H-咪唑-4-)苯甲醛(400mg，0.97mmol)，乙酰基环己烷(122mg，0.97mmol)和无水四氢呋喃(5ml)，在氮气保护下，将乙醇钠(85mg，1.25mmol)的乙醇溶液在室温下加入，在室温下搅拌3h，旋干溶剂，加入饱和氯化铵(10ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，加入乙酸(1ml)和乙醇(5ml)，在90℃下搅拌3h，冷却至室温，加入饱和碳酸钠调节PH＝10，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物14(210mg，收率77％)，质谱：283(M+H+)。(5)1-环己基-2-(5H-7,8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物15)的合成向单口瓶中加入1-环己基-2-(5H-7，8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)和甲醇(3ml)，在0℃下加入硼氢化钠(57mg，1.5mmol)，搅拌1h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物15(105mg，收率78％，LCMS纯度99.4％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,5H),2.05(m,2H),2.15(m,1H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz)；质谱：285(M+H+)。实施例31-环己基-1-氘代-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物16(D5))的合成向单口瓶中加入1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)和氘代甲醇(5ml)，在0℃下加入硼氘化钠(57mg，1.5mmol)，室温下搅拌24h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物16(105mg，收率69％，LCMS纯度99.3％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,5H),2.05(m,2H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.16(s,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz),7.80(s,1H)；质谱：284(M+H+)。实施例41-环己基-1-氘代-2-(5H-7,8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物17(D15))向单口瓶中加入1-环己基-2-(5H-7，8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)和氘代甲醇(5ml)，在0℃下加入硼氘化钠(57mg，1.5mmol)，室温下搅拌24h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物17(105mg，收率78％，LCMS纯度99.7％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,5H),2.05(m,2H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz)；质谱：286(M+H+)。实施例51-环己基-1-氘代-2-(5H-咪唑并[5,1-a]-8，9，10，11-四氘代异吲哚-5-)乙醇(化合物20(D25))(1)2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-)-3，4，5，6-四氘代苯甲醛(中间体18)的合成向单口瓶中加入4-溴-1-三苯甲基-1H-咪唑(1.5g，3.9mmol)，碳酸钠(1.2g，11.7mmol)，3，4，5，6-四氘代邻甲酰基苯硼酸(864mg，5.8mmol)和DMF(10ml)，水(2ml)，使反应体系充满氮气，加入四(三苯基膦)钯(242mg，0.195mmol)，在氮气保护下，90℃搅拌16h，加入水，乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物18(930mg，收率58％)。(2)1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]8，9，10，11-四氘代异吲哚-5-)乙酮(中间体19)的合成向三口瓶中加入2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-)-3，4，5，6-四氘代苯甲醛(400mg，0.97mmol)，乙酰基环己烷(122mg，0.97mmol)和无水四氢呋喃(5ml)，在氮气保护下，将乙醇钠(85mg，1.25mmol)的乙醇溶液在室温下加入，在室温下搅拌3h，旋干溶剂，加入饱和氯化铵(10ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，加入乙酸(1ml)和乙醇(5ml)，在90℃下搅拌3h，冷却至室温，加入饱和碳酸钠调节PH＝10，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物19(210mg，收率77％)，质谱：285(M+H+)。(3)环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物20)的合成向单口瓶中加入1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]8，9，10，11-四氘代异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)和氘代甲醇(5ml)，在0℃下加入硼氘化钠(57mg，1.5mmol)，室温下搅拌24h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物20(105mg，收率72％，LCMS纯度99.5％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,5H),2.05(m,2H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.16(s,1H),7.80(s,1H)；质谱：288(M+H+)。实施例61-(1-氘代环己基)-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物24(D6))的合成(1)乙酰基1-氘代环己烷(中间体22)的合成向100ml的单口瓶中加入环己甲酸(5g,39mmol)以及二氯甲烷(20ml)，室温下搅拌下缓慢地滴入二氯亚砜(5.67ml,78mmol)，反应5h，浓缩溶剂。将二甲羟胺盐酸盐(4.5g,47mmol)二氯甲烷(10ml)以及三乙胺(13ml,96mmol)的混合液缓慢地滴入其中，室温下搅拌3h，滤去固体，向液体中滴入1N盐酸除去过量的三乙胺，乙酸乙酯萃取，合并有机层，用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到粗品2(5.3g)。向三口瓶中加入粗品2(4g，23mmol)，碳酸钾(9.5g，69mmol)和重水(5ml)80℃下搅拌48h，乙酸乙酯萃取，合并有机层无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到粗品23(5g)，三口瓶中加入粗品化合物23(5g，29mmol)，四氢呋喃(15ml)，温度控制在0℃，在氮气保护下加入，缓慢加入甲基溴化镁(10ml，29mmol)，在0℃下搅拌2h，加入氯化铵淬灭甲基溴化镁，加入二氯甲烷萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干二氯甲烷得到化合物22(4.2g，收率85％)(2)1-(1-氘代环己基)-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(中间体23)的合成向三口瓶中加入2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-)苯甲醛(400mg，0.97mmol)，乙酰基1-氘代环己烷(122mg，0.97mmol)和无水四氢呋喃(5ml)，在氮气保护下，将乙醇钠(85mg，1.25mmol)的乙醇溶液在室温下加入，在室温下搅拌3h，旋干溶剂，加入饱和氯化铵(10ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，加入乙酸(1ml)和乙醇(5ml)，在90℃下搅拌3h，冷却至室温，加入饱和碳酸钠调节PH＝10，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物23(210mg，收率77％)，质谱：282(M+H+)。(3)1-(1-氘代环己基)-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物24)的合成向单口瓶中加入1-(1-氘代环己基)-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)和甲醇(3ml)，在0℃下加入硼氢化钠(57mg，1.5mmol)，搅拌1h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物24(105mg，收率72％，LCMS纯度99.6％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,4H),2.05(m,2H),2.15(m,1H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.16(s,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz),7.80(s,1H)；质谱：284(M+H+)。实施例71-(1-氘代环己基)-1-氘代-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物25(D56))向单口瓶中加入1-(1-氘代环己基)-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)和氘代甲醇(5ml)，在0℃下加入硼氘化钠(57mg，1.5mmol)，室温下搅拌24h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物25(105mg，收率78％，LCMS纯度99.1％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,4H),2.05(m,2H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.16(s,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz),7.80(s,1H)；质谱：285(M+H+)。实施例81-(1-氘代环己基)-2-(5H-7,8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物27(D16))(1)1-(1-氘代环己基)-2-(5H-7，8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(中间体26)的合成向三口瓶中加入2-(1-三苯甲基-2，5-二氘代-1H-咪唑-4-)苯甲醛(400mg，0.97mmol)，乙酰基1-氘代环己烷(122mg，0.97mmol)和无水四氢呋喃(5ml)，在氮气保护下，将乙醇钠(85mg，1.25mmol)的乙醇溶液在室温下加入，在室温下搅拌3h，旋干溶剂，加入饱和氯化铵(10ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，加入乙酸(1ml)和乙醇(5ml)，在90℃下搅拌3h，冷却至室温，加入饱和碳酸钠调节PH＝10，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物26(210mg，收率77％)，质谱：284(M+H+)。(2)1-(1-氘代环己基)-2-(5H-7,8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙醇(化合物27)的合成向单口瓶中加入1-(1-氘代环己基)-2-(5H-7，8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)和甲醇(3ml)，在0℃下加入硼氢化钠(57mg，1.5mmol)，搅拌1h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物27(105mg，收率68％，LCMS纯度99.9％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,4H),2.05(m,2H),2.15(m,1H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz)；质谱：286(M+H+)。实施例91-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2,2-二氘代乙醇(化合物29(D4))(1)1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2，2-二氘代乙酮(中间体28)的合成向三口瓶中加入1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)，碳酸钾(207mg，1.5mmol)和重水(5ml)，80℃下搅拌48h，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到化合物28(130mg，收率92％)，质谱：283(M+H+)。(2)1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2，2-二氘代乙醇(化合物29)的合成向单口瓶中加入1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2,2-二氘代乙酮(140mg，0.5mmol)和甲醇(3ml)，在0℃下加入硼氢化钠(57mg，1.5mmol)，搅拌1h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物29(105mg，收率71％，LCMS纯度99.7％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,5H),2.15(m,1H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.16(s,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz),7.80(s,1H)；质谱：285(M+H+)。实施例101-环己基-1-氘代-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2,2-二氘代乙醇(化合物30(D45))向单口瓶中加入1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2，2-二氘代乙酮(140mg，0.5mmol)和氘代甲醇(5ml)，在0℃下加入硼氘化钠(57mg，1.5mmol)，室温下搅拌24h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物30(105mg，收率80％，LCMS纯度99.2％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,5H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.16(s,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz),7.80(s,1H)；质谱：285(M+H+)。实施例111-环己基-2-(5H-7,8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2,2-二氘代乙醇(化合物32(D14))(1)1-环己基-2-(5H-7，8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2，2二氘代乙酮(中间体31)的合成向三口瓶中加入1-环己基-2-(5H-7，8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)，碳酸钾(207mg，1.5mmol)和重水(5ml)，80℃下搅拌48h，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到化合物31(130mg，收率92％)，质谱：285(M+H+)。(2)1-环己基-2-(5H-7，8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2，2二氘代乙醇(化合物32)的合成向单口瓶中加入1-环己基-2-(5H-7,8-二氘代咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2,2-二氘代乙酮(140mg，0.5mmol)和甲醇(3ml)，在0℃下加入硼氢化钠(57mg，1.5mmol)，搅拌1h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物32(105mg，收率75％，LCMS纯度99.4％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,5H),2.15(m,1H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz)；质谱：287(M+H+)。实施例121-(1-氘代环己基)-1-氘代-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2,2-二氘代乙醇(化合物34(D456))(1)1-(1-氘代环己基)-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2，2-二氘代乙酮(中间体33)的合成向三口瓶中加入1-(1-氘代环己基)-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)，碳酸钾(207mg，1.5mmol)和重水(5ml)，80℃下搅拌48h，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到化合物33(130mg，收率92％)，质谱：284(M+H+)。(2)1-(1-氘代环己基)-1-氘代-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2,2-二氘代乙醇(化合物34)向单口瓶中加入1-(1-氘代环己基)-2-(5H-咪唑并[5,1-a]异吲哚-5-)-2，2-二氘代乙酮(140mg，0.5mmol)和氘代甲醇(5ml)，在0℃下加入硼氘化钠(57mg，1.5mmol)，室温下搅拌24h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物34(105mg，收率70％，LCMS纯度99.8％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,4H),3.72(m,1H),5.36-5.46(m,1H),7.16(s,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz),7.80(s,1H)；质谱：287(M+H+)。实施例131-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]-6-氘代异吲哚-5-)乙醇(化合物37(D3))(1)2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-)氘代苯甲醛(中间体35)的合成向单口瓶中加入4-溴-1-三苯甲基-1H-咪唑(1.5g，3.9mmol)，碳酸钠(1.2g，11.7mmol)，2-氘代甲酰基氘代苯硼酸(864mg，5.8mmol)和DMF(10ml)，水(2ml)，使反应体系充满氮气，加入四(三苯基膦)钯(242mg，0.195mmol)，在氮气保护下，90℃搅拌16h，加入水，乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物35(930mg，收率58％)，质谱：415(M+H+)。(2)1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]-6-氘代异吲哚-5-)乙酮(中间体36)的合成向三口瓶中加入2-(1-三苯甲基-1H-咪唑-4-)氘代苯甲醛(400mg，0.97mmol)，1-乙酰基环己烷(122mg，0.97mmol)和无水四氢呋喃(5ml)，在氮气保护下，将乙醇钠(85mg，1.25mmol)的乙醇溶液在室温下加入，在室温下搅拌3h，旋干溶剂，加入饱和氯化铵(10ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，加入乙酸(1ml)和乙醇(5ml)，在90℃下搅拌3h，冷却至室温，加入饱和碳酸钠调节PH＝10，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物36(210mg，收率77％)，质谱：283(M+H+)。(3)1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]-6-氘代异吲哚-5-)乙醇(化合物37)的合成向三口瓶中加入1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]-6-氘代异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)，甲醇(5ml)，在0℃下加入硼氢化钠(57mg，1.5mmol)，室温下搅拌24h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物37(105mg，收率82％，LCMS纯度99.3％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,5H),2.05(m,2H),2.15(m,1H),3.72(m,1H),7.16(s,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz),7.80(s,1H)；质谱：284(M+H+)。实施例141-环己基-1-氘代-2-(5H-咪唑并[5,1-a]-6-氘代异吲哚-5-)乙醇(化合物3(D35)8)向三口瓶中加入1-环己基-2-(5H-咪唑并[5,1-a]-6-氘代异吲哚-5-)乙酮(140mg，0.5mmol)，甲醇(5ml)，在0℃下加入硼氢化钠(57mg，1.5mmol)，室温下搅拌24h，旋干溶剂，加入2N盐酸(3ml)，用乙酸乙酯萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，浓缩溶剂，用硅胶过柱纯化得到化合物37(105mg，收率79％，LCMS纯度99.2％)，1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ(ppm)1.10-1.37(m,6H),1.66-1.80(m,5H),2.05(m,2H),3.72(m,1H),7.16(s,1H),7.25(m,1H),7.34(m,1H),7.43(d,1H,J＝7.6Hz),7.54(d,1H,J＝7.6Hz),7.80(s,1H)；质谱：284(M+H+)。实施例15本发明化合物的药效试验通过IDO酶试验进行IDO抑制化合物的测试：每个化合物的IC50是通过在PH＝6.5的50mM磷酸钾缓冲液中对IDO的活性进行测试。70nM纯化的人类IDO蛋白，200μML-色氨酸，20mM抗坏血酸盐，20μM亚甲蓝，0.1％DMSO。抑制剂先在100mM的DMSO中稀释，再在50mM的磷酸钾中稀释，最后溶度在1mM到5nM之间加入到反应液中，在25℃下与酶预培养5分钟。反应加入L-色氨酸达到200μM然后在60℃下培养30min将N-甲酰基犬尿氨酸水解为犬尿氨酸。反应在3400g下离心5分钟除去沉淀蛋白，上层清液在乙酸中与2％(w/v)对二甲胺苯甲醛反应。反应在25℃下培养10min，在分光光度计中读取480nm。对照样品与没有IDO抑制剂，或者没有IDO酶，或者与参考抑制剂1-甲基色氨酸(200μM)以及甲萘醌(1.2μM)被作为控制组用于对需要确定每个化合物的IC50的非线性回归设置参数。非线性回归以及IC50是通过GraphPadPrism4软件来确定。结果如下表1所示。表1实施例16本发明化合物的药代试验(1)化合物10、16、37、38的药代动力学参数检测SD大鼠血浆中分别灌胃给予25mg/kg化合物10、16、37、38后化合物10、16、37、38的浓度并绘制药时曲线计算出该药的药代动力学参数。实验使用健康雄性SD大鼠，体重180-220g，由上海药物所试验动物中心提供，使用许可证号SYXK(川)2011-178。饲养环境室温控制在16-26℃。相对湿度40-70％，人工照明，12小时明暗交替，饲以北京华扈康实验动物中心专门配制的饲料，自由饮水。受试动物在实验日前一周在实验场所进行适应性饲养。实验动物在样品采集结束后按照SOP进行安乐死处理。实验动物分组及给药方案：据实验目的和实验设计的要求，分别灌胃给予25mg/kg化合物10、16、37、38，给药体积为25ml/kg，给药浓度为1mg/kg。SD大鼠16只，雄性，随机分成4组，每组4只，分别灌胃给予被试化合物。试验前禁食12h，自由饮水，给药后2h统一进食。给药2h后统一进食。称取所需量的供试品于10ml进口离心管(BD)中，边搅拌边加入经高温灭菌后的0.5％HPMC(羟甲基纤维素)水溶液至所需浓度，配制为混悬剂，给药前混匀。于给药后0.25，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0和24小时采集样品。经大鼠眼球后静脉丛取血0.3ml。血样用肝素钠抗凝处理，在4℃离心机中3500rpm离心10分钟后分离血浆(避光)约200μL。冷冻保存于-80℃冰箱待检测。药代动力学参数用DAS2.1软件进行分析，选择非房室模型计算药动学参数。采用各时间点血药浓度平均值进行计算。达峰浓度Cmax和达峰时间Tmax为实测值；药时曲线下面积AUC0-t值：采用梯形法计算；AUC0-∞＝AUC0-t+Ct/ke，Ct为最后一个可测得时间点的血药浓度，ke为消除速率常数；消除半衰期t1/2＝0.693/ke。结果如下表2所示。表2大鼠灌胃25mg/kg时的PK数据化合物Cmax(ng/ml)AUC0-t(ng*h/ml)AUC0-∞(ng*h/ml)T1/2(h)106512795480631.216635313657145431.93764069651100751.838630914142158952.6(2)化合物10、16、37、38在大鼠血浆中的代谢分别将上述药代动力学实验中的大鼠血浆样品按时间点等体积合并，获得各时间点(0h、9h和48h)合并血浆样品。取合并血浆100μL，加入300μL乙腈，涡流1min，离心(14000rpm)5min，取全部上清液40℃氮气流吹干，加100μL乙腈/水(1:1，v/v)溶解，离心5min(14000rpm)，取7.0μL进行UPLC-UV/Q-TOFMS分析。测得各代谢物的含量。结果如下表3所示.表3大鼠血浆代谢物化合物原药异构化代谢物氧化代谢物脱氢代谢物105215.82.527.51671.19.82.616.5376310.22.124.73881.42.72.813.1试验结果显示，本发明的化合物对IDO具有显著的抑制作用，效果与NLG919相当甚至更优。进一步的药代动力学试验还显示，与NLG919相比，本发明化合物在药效相当甚至更高的情况下，还具有更好的药代动力学性质，具有广阔的市场前景。当前第1页1 2 3