本发明属于药物化学合成领域，具体一种涉及利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法。
背景技术：
紫杉醇(Paclitaxel，商品名Taxol)是从红豆杉属(Taxus)植物中分离出的一种紫杉烷二萜类化合物。紫杉醇化学全合成获得成功，但合成路线复杂，成本过高，仅具有研究意义，尚无商业价值相对紫杉醇全合成，紫杉醇半合成是具有实用价值的一种制备方法。紫杉醇半合成一般都是以与紫杉醇大环结构类似的10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetylbaccatinⅢ，10-DABⅢ)为原料，通过与紫杉醇的侧链对接而制得紫杉醇，10-DABⅢ通常是从红豆杉中提取获得，由于10-DABⅢ在红豆杉中的含量也非常的低，因此对其10-DABⅢ进行充分利用具有相当大的价值。
通过10-DABⅢ半合成紫杉醇会经过四个反应步骤，每个反应步骤都会产生杂质，而这些杂质大多数具有10-DABⅢ结构，如《半合成紫杉醇工艺杂质研究》(王永毅等，中国现代应用药学2014年2月第31卷第2期)中所述的各种杂质，尤其是上述文献第155页图2所记载的各种杂质，若将这些杂质均作为废弃物丢掉，则对产量本较小的天然10-DABⅢ造成极大浪费，因此将含有10-DABⅢ结构的杂质转化为10-DABⅢ是获得10-DABⅢ的又一个新途径，目前未见将半合成紫杉醇的杂质转化为10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的报道，针对该新途径进行研究获得了新的技术方法。
技术实现要素：
为了解决上述问题，本发明提供了一种收率高、产品纯度高、易于产业化的一种半合成紫杉醇及其中间体的制备方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法包括步骤：
A.水解：将半合成紫杉醇杂质原料用有机溶剂溶解，加入水合肼水解；
B.酸化：在水解混合液中加入酸化剂进行酸化；
C.中和：将步骤B制得的酸化液用弱碱中和即得10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ。
通过对半合成紫杉醇杂质进行简单的水解、酸化及中和步骤便制得可有效利用的10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ，这对于工业应用来说显然具有十分实用的作用，同时能够大大增大半合成紫杉醇的原料利用率，提高了对本较为稀缺的紫杉醇资源的有效利用率。所述步骤A中半合成紫杉醇杂质原料为在半合成紫杉醇过程中含有紫杉醇母环的相关杂质。
进一步的，上述利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法中所述步骤A中水解反应的工艺参数为10～60℃下搅拌反应4～48小时。
进一步的，上述利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法中所述步骤B中酸化反应的工艺参数为10～40℃下反应6～24小时。
进一步的，上述利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法中所述步骤C中向混合物中加入弱碱调节pH至5～7。
进一步的，上述利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法中所述步骤C所得混合液经萃取剂萃取、浓缩干燥后得到10-去乙酰基巴卡亭粗品，将10-去乙酰基巴卡亭粗品经过硅胶柱层析分离后得10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ产品。
进一步的，上述利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法中所述有机溶剂为甲醇、乙醇、四氢呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯中的一种或多种混合。
进一步的，上述利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法中所述酸化剂为甲酸、乙酸、盐酸、硫酸、三氟乙酸中的一种或多种混合。
进一步的，上述利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法中所述弱碱为碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸氢钾、碳酸钾、氨水中的一种或多种混合。
进一步的，上述利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法中所述萃取剂为二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯中的一种或多种混合。
进一步的，上述利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法中所述有机溶剂与半合成紫杉醇杂质的质量比为1：(4～10)；所述水合肼与半合成紫杉醇杂质的质量比为1：(1～3)；半合成紫杉醇杂质与酸化剂的质量比为1：(3～8)；所述萃取剂与半合成紫杉醇杂质的质量比为1：(20～50)。
本发明提供的利用半合成紫杉醇杂质制备10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法具有如下有益效果：
1.本发明方法以半合成紫杉醇杂质为原料，先用水合肼进行水解后，再用酸化剂进行处理得到10-DABⅢ粗品，对10-DABⅢ粗品用硅胶层析柱纯化后得到10-DABⅢ产品，10-DABⅢ收率高达25.6％～36.8％，10-DABⅢ含量高达98.2％～99.1％。
2.本发明方法以半合成紫杉醇杂质为原料，开辟了一条获得10-DABⅢ产品的新途径，不但解决了半合成紫杉醇过程中杂质的累积问题，还为半合成紫杉醇提供了原料。
3.本发明方法所用生产设备为常规设备，所用溶剂为常规溶剂，生产条件易实施，操作方便适合工业化生产。
4.利用本发明方法生产的10-DABⅢ可用于紫杉醇、多西他赛的合成原料，应用于医药领用中。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。需要说明的是，本发明所记载的实施例仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例一至三中的使用的半合成紫杉醇杂质原料是按如下方法合成紫杉醇中的各种含有紫杉醇类的废液集合：
(1)称取10-DABⅢ原料，加入干燥吡啶搅拌溶解，然后在氮气保护下滴加三乙基氯硅烷，滴加时间保持在30min，滴加温度控制在10℃，滴加完成后，控制反应温度为10℃，当反应液中10-DABⅢ残留小于0.2％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，然后经过浓盐酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，浓缩干燥，得到中间体I。其中，各反应组分的质量比为，10-DABⅢ原料：干燥吡啶＝1：3，10-DABⅢ原料：三乙基氯硅烷＝1：0.8。
(2)称取中间体I，加入干燥吡啶搅拌溶解，然后在氮气保护下滴加乙酰氯，滴加时间保持在30min，滴加温度控制在-15℃，滴加完成后，控制反应温度为-15℃，当反应液中中间体I残留为5％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，然后经过浓盐酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，浓缩干燥，得到中间体Ⅱ。其中，各反应组分的质量比为，中间体I：干燥吡啶＝1：3，中间体I：乙酰氯＝1：0.5。
(3)称取中间体Ⅱ，用有机溶剂溶解、过滤，然后经制备液相色谱分离分别收集含有中间体I、中间体Ⅱ的洗脱液，含有中间体I、中间体Ⅱ的洗脱液分别经浓缩干燥得到中间体I、中间体Ⅱ，中间体I作为合成中间体Ⅱ的原料，中间体Ⅱ作为合成中间体Ⅲ的反应原料。其中，有机溶剂为甲醇，各反应组分的质量比为，中间体Ⅱ：有机溶剂＝1：2，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为5um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为50vol％的甲醇。
(4)称取中间体Ⅱ，加入侧链基团化合物、4-二甲氨基吡啶，再加入干燥甲苯溶解，在温度为10℃下氮气保护下滴加缩合剂，滴加完成后在反应温度为10℃下反应至中间体Ⅱ原料残留小于0.2％以下停止反应得到反应液，向反应液中加入正己烷搅拌结晶1小时，过滤干燥得到中间体Ⅲ。其中，侧链基团化合物为(4S,5R)-3-苯甲酰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-恶唑啉羧酸，缩合剂为二环已基碳二亚胺，各反应组分的质量比为，中间体Ⅲ：侧链基团化合物＝1：0.63，中间体Ⅲ：4-二甲氨基吡啶＝1：0.05，中间体Ⅲ：甲苯＝1：4，中间体Ⅲ：缩合剂＝1：0.2，中间体Ⅲ：正己烷＝1：8。
(5)称取中间体Ⅲ，加入乙酸、水搅拌溶解，再加入三氟乙酸，在温度为10℃下反应至中间体Ⅲ原料残留为5％时停止反应，加入弱碱调节pH至6，用二氯甲烷萃取后，经水洗、浓缩、干燥得到紫杉醇粗品。其中，弱碱为碳酸氢钠，各反应组分的质量比为，中间体Ⅲ：乙酸＝1：2，间体Ⅲ：水＝1：0.1，中间体Ⅲ：三氟乙酸＝1：0.5。
(6)称取紫杉醇粗品，用有机溶剂溶解、过滤，然后经制备液相色谱分离分别收集含有紫杉醇、中间体Ⅲ的洗脱液，含有紫杉醇、中间体Ⅲ的洗脱液分别经浓缩干燥得到紫杉醇产品、中间体Ⅲ，中间体Ⅲ作为合成紫杉醇的反应原料。其中，有机溶剂为甲醇，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为5um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为40vol％的甲醇，各反应组分的质量比为，紫杉醇粗品：有机溶剂＝1：2。
实施例一
称取半合成紫杉醇杂质原料，加入一定重量的有机溶剂搅拌溶解，再加入一定重量的水合肼，在10℃下搅拌反应4小时，得到水解后的溶液，向水解后的溶液中加入一定重量的酸化剂，在10℃下反应6小时得到混合物，向混合物中加入弱碱调节pH至5，用一定重量的萃取剂进行萃取后，浓缩、干燥得到10-DABⅢ粗品，10-DABⅢ粗品经过常规硅胶柱层析分离后即可得到10-DABⅢ产品。有机溶剂为甲醇；所述一定重量的有机溶剂为半合成紫杉醇杂质：有机溶剂＝1:4；所述一定重量的水合肼为半合成紫杉醇杂质：水合肼＝1:1；所述酸化剂为甲酸；所述一定重量的酸化剂为半合成紫杉醇杂质：酸化剂＝1:3；所述弱碱为碳酸氢钠；所述萃取剂为二氯甲烷；所述一定重量的萃取剂为半合成紫杉醇杂质：萃取剂＝1:20；所得产品10-DABⅢ收率高达25.6％，10-DABⅢ含量高达98.2％％。
实施例二
称取半合成紫杉醇杂质原料，加入一定重量的有机溶剂搅拌溶解，再加入一定重量的水合肼，在60℃下搅拌反应48小时，得到水解后的溶液，向水解后的溶液中加入一定重量的酸化剂，在40℃下反应24小时得到混合物，向混合物中加入弱碱调节pH至7，用一定重量的萃取剂进行萃取后，浓缩、干燥得到10-DABⅢ粗品，10-DABⅢ粗品经过常规硅胶柱层析分离后即可得到10-DABⅢ产品。所述有机溶剂为乙酸乙酯；所述一定重量的有机溶剂为半合成紫杉醇杂质：有机溶剂＝1:10；所述一定重量的水合肼为半合成紫杉醇杂质：水合肼＝1:3；所述酸化剂为三氟乙酸；所述一定重量的酸化剂为半合成紫杉醇杂质：酸化剂＝1:8；所述弱碱为氨水；所述萃取剂为乙酸乙酯；所述一定重量的萃取剂为半合成紫杉醇杂质：萃取剂＝1:50；所得产品10-DABⅢ收率高达36.8％，10-DABⅢ含量高达99.1％。
实施例三
称取半合成紫杉醇杂质原料，加入一定重量的有机溶剂搅拌溶解，再加入一定重量的水合肼，在30℃下搅拌反应24小时，得到水解后的溶液，向水解后的溶液中加入一定重量的酸化剂，在25℃下反应12小时得到混合物，向混合物中加入弱碱调节pH至6，用一定重量的萃取剂进行萃取后，浓缩、干燥得到10-DABⅢ粗品，10-DABⅢ粗品经过常规硅胶柱层析分离后即可得到10-DABⅢ产品。所述有机溶剂为四氢呋喃；所述一定重量的有机溶剂为半合成紫杉醇杂质：有机溶剂＝1:7；所述一定重量的水合肼为半合成紫杉醇杂质：水合肼＝1:2；所述酸化剂为乙酸；所述一定重量的酸化剂为半合成紫杉醇杂质：酸化剂＝1:5；所述弱碱为碳酸氢钾；所述萃取剂为三氯甲烷；所述一定重量的萃取剂为半合成紫杉醇杂质：萃取剂＝1:35；所得产品10-DABⅢ收率高达30.7％，10-DABⅢ含量高达98.5％。