本发明属于药物化学合成领域，具体涉及一种半合成紫杉醇及其中间体的制备方法。
背景技术：
紫杉醇(Paclitaxel，商品名Taxol)是从红豆杉属(Taxus)植物中分离出的一种紫杉烷二萜类化合物。其结构新颖、抗癌机理独特、抗癌效果显著、抗癌谱广，被认为是迄今所发现最好的抗癌药物之一。紫杉醇化学全合成获得成功，但合成路线复杂，成本过高，仅具有研究意义，尚无商业价值相对紫杉醇全合成，紫杉醇半合成是具有实用价值的一种制备方法。紫杉醇半合成一般都是以与紫杉醇大环结构类似的10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetylbaccatinⅢ，10-DABⅢ)为原料，通过与紫杉醇的侧链基团化合物对接而制得紫杉醇。10-DABⅢ可从来源丰富的红豆杉属植物中提取而获得，且得率高，从而为紫杉醇半合成提供了充足的原料。现有技术中在半合成紫杉醇的方法中除了使用溶剂外还会使用各种催化剂以提高反应收率，如专利CN200580011712.2使用咪唑等催化剂，又如专利US193263中对C7羟基保护时需使用琼斯试剂，并且对C10羟基保护时需要在-23℃下反应，反应试剂要求较高、体系组分复杂有杂质产生，使得最终提纯产品中紫杉醇的含量不高。
总之，现有专利技术中普遍存在的问题是：以10-DABⅢ为原料，最终获得的紫杉醇收率低，其主要原因是：(1)对10-DABⅢ10位羟基进行乙酰化的过程中，在反应接近终点的时候容易产生副反应生成其它杂质；(2)在进行最后一步开环脱保护反应过程容易造成过反应生成其它杂质。
由于将原料大量的转化为了杂质，因此收率低；在进行紫杉醇纯化分离过程中，采用柱层析及重结晶的进行纯化，因此造成了部分紫杉醇产品损失且紫杉醇纯度提高不大。
技术实现要素：
为了解决上述问题，本发明提供了一种收率高、产品纯度高、易于产业化的一种半合成紫杉醇及其中间体的制备方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种半合成紫杉醇的制备方法包括步骤：
A.制备中间体I：10-DABⅢ溶于吡啶中，将10-DABⅢ上7位碳上羟基用三乙基甲硅烷基进行保护得中间体I；
B.制备中间体II：将中间体I的10位碳上羟基乙酰化得中间体II；
C.制备中间体III：将中间体II、侧链基团化合物、4-二甲氨基吡啶在有机溶剂中反应制得中间体III；
D.制备紫杉醇粗品：将中间体III在酸性条件下与三氟乙酸反应得紫杉醇粗品；
所述中间体Ⅰ分子式：C35H50O10Si，其结构式如下：
所述中间体Ⅱ分子式：C37H52O11Si，其结构式如下：
所述中间体Ⅲ分子式：C62H71NO15Si，其结构式如下：
通过对10-DABIII分子结构中的活性羟基进行保护，并且选择合适的侧链基团化合物化合物基团使得紫杉醇的收率和纯度大大提高，适于合成较高品质的紫杉醇，对抗肿瘤药物的开发提供支持。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤A至D具体如下：
A.制备中间体I：将10-DABⅢ加入吡啶中搅拌溶解，在氮气保护下滴加三乙基氯硅烷，当反应液中10-DABⅢ残留小于0.2％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，用浓盐酸中和吡啶，萃取二氯甲烷，浓缩干燥得到中间体I；
B.制备中间体Ⅱ：将中间体I加入吡啶中搅拌溶解，在氮气保护下滴加乙酰氯，然后在-15～5℃温度下反应至中间体I残留为5～10％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，用浓盐酸中和吡啶，萃取二氯甲烷，浓缩干燥得到中间体Ⅱ；
C.制备中间体Ⅲ：将中间体II、侧链基团化合物、4-二甲氨基吡啶加入甲苯中搅拌溶解，在10～30℃温度及氮气保护下滴加缩合剂，然后在10～30℃温度下反应至中间体Ⅱ原料残留小于0.2％停止反应，加入正己烷搅拌结晶，过滤干燥得到中间体Ⅲ；
D.制备紫杉醇粗品：将中间体Ⅲ加入乙酸中，再加入水搅拌溶解，再将三氟乙酸加入体系，在10～30℃温度下反应至中间体Ⅲ原料残留为5～10％时停止反应，加入碱中和，用二氯甲烷萃取后经水洗、浓缩、干燥得到紫杉醇粗品。
合成紫杉醇的方法中体系组分相对简单，不需使用其他催化剂，且制备工艺均较常规易于工业化，分离简单。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤A中滴加三乙基氯硅烷的滴加时间为30～60min，滴加温度为10～20℃，滴加完成后反应温度为10～30℃；所述步骤C中加入正己烷搅拌结晶的时间为1～2小时。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤B中滴加乙酰氯的滴加时间为30～60min，滴加温度为-15～5℃，滴加完成后反应温度为-15～5℃。
进一步优选的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤D中加入碱中和具体为加入弱碱调节pH至6～8。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤D后还包括步骤E，所述步骤E为：
E.制备紫杉醇：将紫杉醇粗品用有机溶剂溶解、过滤，然后经液相色谱分离分别收集含有紫杉醇、中间体Ⅲ的洗脱液，含有紫杉醇洗脱液浓缩干燥得紫杉醇产品。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤E中收集的含有中间体III的洗脱液经浓缩干燥后加入步骤D中重复利用。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤B中浓缩干燥后的中间体II粗品经过液相色谱分离分别收集含有中间体I的洗脱液和含有中间体II的洗脱液，含有中间体I的洗脱液经过浓缩干燥后加入步骤B中重复利用，含有中间体II的洗脱液经过浓缩干燥后用作步骤C的原料。
对于洗脱液的重复利用，不仅仅能够提高原料的使用率，同时洗脱液的加入还能对反应有促进作用，使得最终产品收率更高、转化率更高。
进一步优选的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤A中10-DABⅢ原料与吡啶的用量重量比为1：(3～6)，所述10-DABⅢ与三乙基氯硅烷的用量重量比为＝1：(0.8～2)；所述步骤B中所述中间体I和吡啶的用量重量比为1：(3～6)，中间体Ⅰ和乙酰氯的用量重量比为1：(0.5～2)；所述步骤C中中间体II和有机溶剂的用量重量比为1：(2～5)。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤C中有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈中的一种。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述提纯中间体II粗品的液相色谱分离的制备柱所用填料为5～60um的十八烷基硅烷键合硅胶，所述液相色谱的流动相为50～70vol％的甲醇、50～70vol％的乙醇、50～70vol％的乙腈中的一种；所述步骤E中紫杉醇粗品和有机溶剂的用量重量比为1：(2～5)，所用液相色谱分离的制备柱所用填料为5～60um的十八烷基硅烷键合硅胶，所述流动相为40～60vol％的甲醇或40～60vol％的乙醇或40～60vol％的乙腈。
采用简单的液相色谱分离方法对产品进行分离能够大大提高方法的实用性，通过选择合适的填料和溶剂能够最大程度地保证产品的收率。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤C中侧链基团化合物为(4S,5R)-3-苯甲酰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-恶唑啉羧酸。所述侧链基团化合物的分子式为：C24H21NO5，其结构式如下：
侧链基团化合物基团的选择对于紫杉醇的合成至关重要，选择所述侧链基团化合物能够减少杂质和副反应产物的产生。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤C中中间体Ⅲ和侧链基团化合物的用量重量比为1：(0.63～1)。
进一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤C中中间体Ⅲ和4-二甲氨基吡啶的用量重量比为1：(0.05～0.2)；所述步骤C中中间体Ⅲ和甲苯的用量重量比为1：(4～10)；所述步骤C中缩合剂为二环已基碳二亚胺或二异丙基碳二亚胺中；所述步骤C中中间体Ⅲ和缩合剂的用量重量比为1：(0.2～0.6)；所述步骤C中中间体Ⅲ和正己烷的用量重量比为1：(8～20)；所述步骤D中中间体Ⅲ和乙酸的用量重量比为1：(2～4)；所述步骤D中中间体Ⅲ和水的用量重量比为1：(0.1～0.5)；所述步骤D中中间体Ⅲ和三氟乙酸的用量重量比为1：(0.5～2)。
进一步优选的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步骤D中弱碱为碳酸氢钠、碳酸氢钾、氨水中的一种，当然还可以是其它溶于水后不完全电离的弱碱。
本发明还提供一种半合成紫杉醇中间体的制备方法，包括步骤：在10-DABⅢ原料中加入吡啶搅拌溶解，在氮气保护下滴加三乙基氯硅烷，当反应液中10-DABⅢ残留小于0.2％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，用浓盐酸中和吡啶，萃取二氯甲烷，浓缩干燥得到中间体I。
本发明提供的半合成紫杉醇及其中间体的制备方法具有如下有益效果：
1.本发明方法以10-DABⅢ为原料，先用三乙基氯硅烷进行7位羟基保护得到中间体Ⅰ，再用中间体Ⅰ与乙酰氯反应合成中间体Ⅱ，中间体Ⅱ通过制备液相色谱纯化得到精制后的中间体Ⅱ，精制后的中间体Ⅱ再与侧链基团化合物反应制得中间体Ⅲ，中间体Ⅲ开环脱保护后制得粗品紫杉醇，粗品紫杉醇经过制备液相色谱纯化后获得紫杉醇产品。制备方法简单易于工业化，且对10-DABIII原料活性羟基保护有效，使得最终的副产物少，制得的紫杉醇产品摩尔收率高达70％～81％，紫杉醇纯度高达99.5％～99.9％。
2.本发明方法控制合成中间体Ⅱ和合成紫杉醇步骤中原料残留为5～10％时停止反应，即本发明制备方法提高了原料的选择性，减少了副反应的产生，使原料转化为所需的产物，合成中间体Ⅱ反应步骤的选择性高达92％～97％，合成紫杉醇反应步骤的选择性高达93％～97％。
3.本发明方法利用制备液相色谱分离纯化中间体Ⅱ和紫杉醇，将分离得到未反应完的中间体Ⅰ和中间体Ⅲ作为下一步反应的原料，充分利用了原料。
4.紫杉醇粗品的分离纯化过程采用制备液相色谱一步纯化获得紫杉醇产品，操作简单易控制，且利用本发明提供的液相色谱原料及溶液分离获得的紫杉醇产品纯度高，收率高。
5.本发明方法可广泛应用于10-DABⅢ半合成紫杉醇的实验室及工业化制备中，采用本发明方法生产的紫杉醇作为治疗卵巢癌和乳腺癌等医药领域的原料。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。需要说明的是，本发明所记载的实施例仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。下述实施例中所述用量比除特殊说明外均为质量比。
实施例一
(1)称取10-DABⅢ原料，加入一定重量的干燥吡啶搅拌溶解，然后在氮气保护下滴加一定重量的三乙基氯硅烷，滴加时间保持在30min，滴加温度控制在10℃，滴加完成后，控制反应温度为10℃，当反应液中10-DABⅢ残留小于0.2％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，然后经过浓盐酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，浓缩干燥，得到中间体I。
(2)称取中间体I，加入一定重量的干燥吡啶搅拌溶解，然后在氮气保护下滴加一定重量的乙酰氯，滴加时间保持在30min，滴加温度控制在-15℃，滴加完成后，控制反应温度为-15℃，当反应液中中间体I残留为5％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，然后经过浓盐酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，浓缩干燥，得到中间体Ⅱ。
(3)称取中间体Ⅱ，用一定重量的有机溶剂溶解、过滤，然后经制备液相色谱分离分别收集含有中间体I、中间体Ⅱ的洗脱液，含有中间体I、中间体Ⅱ的洗脱液分别经浓缩干燥得到中间体I、中间体Ⅱ，中间体I作为合成中间体Ⅱ的原料，中间体Ⅱ作为合成中间体Ⅲ的反应原料。
(4)称取中间体Ⅱ，加入一定重量的侧链基团化合物、4-二甲氨基吡啶，再加入一定重量的干燥甲苯溶解，在温度为10℃下氮气保护下滴加一定重量的缩合剂，滴加完成后在反应温度为10℃下反应至中间体Ⅱ原料残留小于0.2％以下停止反应得到反应液，向反应液中加入一定重量的正己烷搅拌结晶1小时，过滤干燥得到中间体Ⅲ。
(5)称取中间体Ⅲ，加入一定重量的乙酸、水搅拌溶解，再加入一定重量的三氟乙酸，在温度为10℃下反应至中间体Ⅲ原料残留为5％时停止反应，加入弱碱调节pH至6，用二氯甲烷萃取后，经水洗、浓缩、干燥得到紫杉醇粗品。
(6)称取紫杉醇粗品，用一定重量的有机溶剂溶解、过滤，然后经制备液相色谱分离分别收集含有紫杉醇、中间体Ⅲ的洗脱液，含有紫杉醇、中间体Ⅲ的洗脱液分别经浓缩干燥得到紫杉醇产品、中间体Ⅲ，中间体Ⅲ作为合成紫杉醇的反应原料。
(7)所述第(1)步中一定重量的干燥吡啶为10-DABⅢ原料：干燥吡啶＝1：3，一定量的三乙基氯硅烷为10-DABⅢ原料：三乙基氯硅烷＝1：0.8。
(8)所述第(2)步中一定重量的干燥吡啶为中间体I：干燥吡啶＝1：3，一定重量的乙酰氯为中间体I：乙酰氯＝1：0.5。
(9)所述第(3)步中的有机溶剂为甲醇，一定重量的有机溶剂为中间体Ⅱ：有机溶剂＝1：2，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为5um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为50vol％的甲醇。
(10)所述第(4)步中的侧链基团化合物为(4S,5R)-3-苯甲酰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-恶唑啉羧酸，一定重量的侧链基团化合物为中间体Ⅲ：侧链基团化合物＝1：0.63，一定重量的4-二甲氨基吡啶为中间体Ⅲ：4-二甲氨基吡啶＝1：0.05，一定重量的干燥甲苯为中间体Ⅲ：甲苯＝1：4，缩合剂为二环已基碳二亚胺，一定重量缩合剂为中间体Ⅲ：缩合剂＝1：0.2，一定重量正己烷为中间体Ⅲ：正己烷＝1：8。
(11)所述第(5)步中一定重量的乙酸为中间体Ⅲ：乙酸＝1：2，一定重量的水为中间体Ⅲ：水＝1：0.1，一定重量的三氟乙酸为中间体Ⅲ：三氟乙酸＝1：0.5，弱碱为碳酸氢钠。
(12)所述第(6)步中的有机溶剂为甲醇，一定重量的有机溶剂为紫杉醇粗品：有机溶剂＝1：2，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为5um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为40vol％的甲醇。
所得产品紫杉醇摩尔收率高达70％，紫杉醇纯度高达99.5％。
实施例二
(1)称取10-DABⅢ原料，加入一定重量的干燥吡啶搅拌溶解，然后在氮气保护下滴加一定重量的三乙基氯硅烷，滴加时间保持在60min，滴加温度控制在20℃，滴加完成后，控制反应温度为30℃，当反应液中10-DABⅢ残留小于0.2％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，然后经过浓盐酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，浓缩干燥，得到中间体I。
(2)称取中间体I，加入一定重量的干燥吡啶搅拌溶解，然后在氮气保护下滴加一定重量的乙酰氯，滴加时间保持在60min，滴加温度控制在5℃，滴加完成后，控制反应温度为5℃，当反应液中中间体I残留为10％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，然后经过浓盐酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，浓缩干燥，得到中间体Ⅱ。
(3)称取中间体Ⅱ，用一定重量的有机溶剂溶解、过滤，然后经制备液相色谱分离分别收集含有中间体I、中间体Ⅱ的洗脱液，含有中间体I、中间体Ⅱ的洗脱液分别经浓缩干燥得到中间体I、中间体Ⅱ，中间体I作为合成中间体Ⅱ的原料，中间体Ⅱ作为合成中间体Ⅲ的反应原料。
(4)称取中间体Ⅱ，加入一定重量的侧链基团化合物、4-二甲氨基吡啶，再加入一定重量的干燥甲苯溶解，在温度为30℃下氮气保护下滴加一定重量的缩合剂，滴加完成后在反应温度为30℃下反应至中间体Ⅱ原料残留小于0.2％以下停止反应得到反应液，向反应液中加入一定重量的正己烷搅拌结晶2小时，过滤干燥得到中间体Ⅲ。
(5)称取中间体Ⅲ，加入一定重量的乙酸、水搅拌溶解，再加入一定重量的三氟乙酸，在温度为30℃下反应至中间体Ⅲ原料残留为10％时停止反应，加入弱碱调节pH至8，用二氯甲烷萃取后，经水洗、浓缩、干燥得到紫杉醇粗品。
(6)称取紫杉醇粗品，用一定重量的有机溶剂溶解、过滤，然后经制备液相色谱分离分别收集含有紫杉醇、中间体Ⅲ的洗脱液，含有紫杉醇、中间体Ⅲ的洗脱液分别经浓缩干燥得到紫杉醇产品、中间体Ⅲ，中间体Ⅲ作为合成紫杉醇的反应原料。
(7)所述第(1)步中一定重量的干燥吡啶为10-DABⅢ原料：干燥吡啶＝1：6，一定量的三乙基氯硅烷为10-DABⅢ原料：三乙基氯硅烷＝1：2。
(8)所述第(2)步中一定重量的干燥吡啶为中间体I：干燥吡啶＝1：6，一定重量的乙酰氯为中间体I：乙酰氯＝1：2。
(9)所述第(3)步中的有机溶剂为乙腈，一定重量的有机溶剂为中间体Ⅱ：有机溶剂＝1：5，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为60um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为50vol％的乙腈。
(10)所述第(4)步中的侧链基团化合物为(4S,5R)-3-苯甲酰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-恶唑啉羧酸，一定重量的侧链基团化合物为中间体Ⅲ：侧链基团化合物＝1：1，一定重量的4-二甲氨基吡啶为中间体Ⅲ：4-二甲氨基吡啶＝1：0.2，一定重量的干燥甲苯为中间体Ⅲ：甲苯＝1：10，缩合剂为二异丙基碳二亚胺，一定重量缩合剂为中间体Ⅲ：缩合剂＝1：0.6，一定重量正己烷为中间体Ⅲ：正己烷＝1：20。
(11)所述第(5)步中一定重量的乙酸为中间体Ⅲ：乙酸＝1：4，一定重量的水为中间体Ⅲ：水＝1：0.5，一定重量的三氟乙酸为中间体Ⅲ：三氟乙酸＝1：2，弱碱为氨水。
(12)所述第(6)步中的有机溶剂为乙腈，一定重量的有机溶剂为紫杉醇粗品：有机溶剂＝1：5，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为60um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为40vol％的乙腈。
所得产品紫杉醇摩尔收率高达81％，紫杉醇纯度高达99.9％。
实施例三
(1)称取10-DABⅢ原料，加入一定重量的干燥吡啶搅拌溶解，然后在氮气保护下滴加一定重量的三乙基氯硅烷，滴加时间保持在45min，滴加温度控制在15℃，滴加完成后，控制反应温度为20℃，当反应液中10-DABⅢ残留小于0.2％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，然后经过浓盐酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，浓缩干燥，得到中间体I。
(2)称取中间体I，加入一定重量的干燥吡啶搅拌溶解，然后在氮气保护下滴加一定重量的乙酰氯，滴加时间保持在45min，滴加温度控制在-5℃，滴加完成后，控制反应温度为-5℃，当反应液中中间体I残留为7％时停止反应，滴加水进行淬灭反应，然后经过浓盐酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，浓缩干燥，得到中间体Ⅱ。
(3)称取中间体Ⅱ，用一定重量的有机溶剂溶解、过滤，然后经制备液相色谱分离分别收集含有中间体I、中间体Ⅱ的洗脱液，含有中间体I、中间体Ⅱ的洗脱液分别经浓缩干燥得到中间体I、中间体Ⅱ，中间体I作为合成中间体Ⅱ的原料，中间体Ⅱ作为合成中间体Ⅲ的反应原料。
(4)称取中间体Ⅱ，加入一定重量的侧链基团化合物、4-二甲氨基吡啶，再加入一定重量的干燥甲苯溶解，在温度为20℃下氮气保护下滴加一定重量的缩合剂，滴加完成后在反应温度为20℃下反应至中间体Ⅱ原料残留小于0.2％以下停止反应得到反应液，向反应液中加入一定重量的正己烷搅拌结晶1.5小时，过滤干燥得到中间体Ⅲ。
(5)称取中间体Ⅲ，加入一定重量的乙酸、水搅拌溶解，再加入一定重量的三氟乙酸，在温度为20℃下反应至中间体Ⅲ原料残留为7％时停止反应，加入弱碱调节pH至7，用二氯甲烷萃取后，经水洗、浓缩、干燥得到紫杉醇粗品。
(6)称取紫杉醇粗品，用一定重量的有机溶剂溶解、过滤，然后经制备液相色谱分离分别收集含有紫杉醇、中间体Ⅲ的洗脱液，含有紫杉醇、中间体Ⅲ的洗脱液分别经浓缩干燥得到紫杉醇产品、中间体Ⅲ，中间体Ⅲ作为合成紫杉醇的反应原料。
(7)所述第(1)步中一定重量的干燥吡啶为10-DABⅢ原料：干燥吡啶＝1：5，一定量的三乙基氯硅烷为10-DABⅢ原料：三乙基氯硅烷＝1：1.5。
(8)所述第(2)步中一定重量的干燥吡啶为中间体I：干燥吡啶＝1：5，一定重量的乙酰氯为中间体I：乙酰氯＝1：1.5。
(9)所述第(3)步中的有机溶剂为乙醇，一定重量的有机溶剂为中间体Ⅱ：有机溶剂＝1：4，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为10um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为50vol％的乙醇。
(10)所述第(4)步中的侧链基团化合物为(4S,5R)-3-苯甲酰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-恶唑啉羧酸，一定重量的侧链基团化合物为中间体Ⅲ：侧链基团化合物＝1：0.8，一定重量的4-二甲氨基吡啶为中间体Ⅲ：4-二甲氨基吡啶＝1：0.1，一定重量的干燥甲苯为中间体Ⅲ：甲苯＝1：7，缩合剂为二异丙基碳二亚胺，一定重量缩合剂为中间体Ⅲ：缩合剂＝1：0.4，一定重量正己烷为中间体Ⅲ：正己烷＝1：12。
(11)所述第(5)步中一定重量的乙酸为中间体Ⅲ：乙酸＝1：3，一定重量的水为中间体Ⅲ：水＝1：0.3，一定重量的三氟乙酸为中间体Ⅲ：三氟乙酸＝1：1，弱碱为碳酸氢钾。
(12)所述第(6)步中的有机溶剂为乙醇，一定重量的有机溶剂为紫杉醇粗品：有机溶剂＝1：4，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为10um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为40vol％的乙醇。
所得产品紫杉醇摩尔收率高达75％，紫杉醇纯度高达99.8％。