紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法
【专利摘要】本发明涉及定量分析领域，特别涉及紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，包括下列步骤：采用超高效合相色谱仪检测待测样品，得到待测样品中紫杉醇的质量浓度C；超高效合相色谱仪的检测条件为：色谱柱的直径为3.0mm、柱长为100mm、填料粒径为1.7μm，填料为亚乙基桥杂化颗粒；流动相为超临界二氧化碳和甲醇的混合液，且采用梯度洗脱的方式进行洗脱；检测波长为227nm。在检测紫杉醇时，不仅可以将紫杉醇与三尖杉宁碱有效地分离，而且可以将紫杉醇与7-表-10-去乙酰基紫杉醇有效地分离。并且经试验证明，本发明对紫杉醇与以上两个伴生物的分离度均可达到4.7以上，远远高于中国药典上分离度应大于1.0的要求。
【专利说明】紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及定量分析领域，具体而言，涉及紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法。
【背景技术】
[0002]紫杉醇是从紫衫或红豆杉中提取的一种天然抗癌药，是三环二萜类化合物，是红 豆杉属植物中一种复杂的次生代谢产物。临床中常用的紫杉醇制剂是紫杉醇注射液。紫杉 醇注射液是紫杉醇添加适量助溶剂和稳定剂制成的灭菌溶液。为了研究紫杉醇注射液中紫 杉醇的含量，以及研究紫杉醇在体内的分布、代谢规律，已建立了许多定性定量测定方法。 其中，应用最广泛的是高效液相色谱法(HPLC )。
[0003]由于紫杉醇与其伴生的紫杉烷类化合物(三尖杉宁碱、7-表-10-去乙酰基紫杉醇 等)在化学结构和极性方面极为相似，这些伴生物会对紫杉醇的测定产生严重干扰，因此， 为了使测定结果具有良好的准确度，通常要求测定方法对紫杉醇与其伴生的紫杉烷类化合 物具有一定的分离度。例如，在《中国药典》中要求，利用HPLC测定紫杉醇注射液中紫杉醇 的含量时，要求系统适用性试验至少满足:紫杉醇与三尖杉宁碱及7-表-10-去乙酰基紫杉 醇的分离度不低于1.0。
[0004]相关技术中的HPLC方法测定紫杉醇注射液时，无论是采用十八烷基-硅烷柱，还 是采用氰基柱或苯基柱，对紫杉醇与7-表-10-去乙酰基紫杉醇的分离度仅能达到1.0左 右，即仅能满足《中国药典》的要求，而无法达到更高的分离度，因此，使得HPLC测定紫杉醇 注射液的准确度受限。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，以解决上述的问题。
[0006]在本发明的实施例中提供了紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，包括下列步骤:
[0007]采用超高效合相色谱仪检测待测样品，得到待测样品中紫杉醇的质量浓度C ；
[0008]超高效合相色谱仪的检测条件为:色谱柱的直径为3.0mm、柱长为100mm、填料粒 径为1.7pm，填料为亚乙基桥杂化颗粒；流动相为超临界二氧化碳和甲醇的混合液，采用 梯度洗脱的方式进行洗脱，其中，超临界二氧化碳在不同时间段的体积百分比为:0-0.2min 为90%-94%之间的某一点值，2.5-4.0min为80%_84%之间的某一点值，0.2-2.5min为 0-0.2min所用的点值与2.5-4.0min所用的点值形成的梯度；检测波长为227nm。
[0009]本发明上述实施例的紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，在检测紫杉醇时，不仅 可以将紫杉醇与三尖杉宁碱有效地分离，而且可以将紫杉醇与7-表-10-去乙酰基紫杉醇 有效地分离。并且经试验证明，本发明对紫杉醇与以上两个伴生物的分离度均可达到4.7 以上，远远高于中国药典上分离度应大于1.0的要求。
【专利附图】
【附图说明】
[0010]图1示出了本发明的试验例中系统适用性的色谱图；[0011]图2示出了本发明的试验例中紫杉醇注射液的色谱图；
[0012]图3示出了本发明的试验例中紫杉醇标样浓度与峰面积线性关系。
【具体实施方式】
[0013]下面通过具体的实施例子并结合附图对本发明做进一步的详细描述。
[0014]本发明的一个实施例提供了一种紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，包括下列步骤:
[0015]采用超高效合相色谱仪检测待测样品，得到待测样品中紫杉醇的质量浓度C。
[0016]超高效合相色谱仪的检测条件为:色谱柱的直径为3.0mm、柱长为100mm、填料粒径为1.7 y m，填料为亚乙基桥杂化颗粒；流动相为超临界二氧化碳和甲醇的混合液，采用梯度洗脱的方式进行洗脱，其中，超临界二氧化碳在不同时间段的体积百分比为:0-0.2min 为90%-94%之间的某一点值，2.5-4.0min为80%_84%之间的某一点值，0.2-2.5min为 0-0.2min所用的点值与2.5-4.0min所用的点值形成的梯度；检测波长为227nm。
[0017]其中，紫杉醇的分子结构式为:
[0018]
【权利要求】
1.紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，其特征在于，包括下列步骤:采用超高效合相色谱仪检测待测样品，得到所述待测样品中紫杉醇的质量浓度C ；所述超高效合相色谱仪的检测条件为:色谱柱的直径为3.0mm、柱长为100mm、填料粒径为1.7 y m，填料为亚乙基桥杂化 颗粒；流动相为超临界二氧化碳和甲醇的混合液，且采用梯度洗脱的方式进行洗脱，其 中，超临界二氧化碳在不同时间段的体积百分比为:0-0.2min为90%_94%之间的某一 点值，2.5-4.0min为80%_84%之间的某一点值，0.2-2.5min为0-0.2min所用的点值与2.5-4.0min所用的点值形成的梯度；检测波长为227nm。
2.根据权利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，其特征在于，所述超高 效合相色谱仪检测时:补偿范围为300-400nm。
3.根据权利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，其特征在于，所述超高 效合相色谱仪检测时:备压为 1500-3000psi。
4.根据权利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，其特征在于，所述超高 效合相色谱仪检测时:流速为 1.8-2.5mL/min。
5.根据权利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，其特征在于，所述超高 效合相色谱仪检测时:柱温为50°C。
6.根据权利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，其特征在于，所述超高 效合相色谱仪检测时:进样体积为0.5-10 u L0
7.根据权利要求1所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，其特征在于，所述流 动相中，超临界二氧化碳在不同时间段的体积百分比为:0-0.2min为92% ；0.2-2.5min为 92-82% 的梯度；2.5-4.0min 为 82%。
8.根据权利要求6所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，其特征在于，所述进样 体积为2.0 u L。
9.根据权利要求3所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，其特征在于，所述备压 为 2200psi。
10.根据权利要求4所述的紫杉醇注射液中紫杉醇的测定方法，其特征在于，所述流速 为 2.2mL/min。
【文档编号】G01N30/02GK103558314SQ201310591217
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年11月20日 优先权日:2013年11月20日
【发明者】齐宁利, 李普旺, 龚霄, 孔令学, 杨子明 申请人:中国热带农业科学院农产品加工研究所