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背景技术：
本申请涉及化学、生物化学和医学领域。更具体地讲，本文公开了egfr抑制剂化合物连同药物组合物及其合成方法。本文还公开了使用本文所述的化合物中的一种或多种改善和/或治疗癌症的方法。
背景描述
已在多种癌症中鉴定出egfr基因的过表达，包括头颈癌、脑癌、乳腺癌、结肠癌和肺癌。除过表达之外，在一部分非小细胞肺癌(nsclc)肿瘤中也检测到egfr活化突变。大多数对第一代和第二代egfr抑制剂反应良好的患者最终产生对这些抑制剂的抗性。最常见的抗性机制是egfr基因中的苏氨酸到甲硫氨酸的获得性守门员突变(t790m)。egfr过表达或活化以及获得性egfrt790m突变在人癌症中被观察到，并且与癌细胞的高增殖速率和耐药性相关联。
技术实现要素：
本文所公开的一些实施方案涉及式(i)的化合物或其药学上可接受的盐。
本文所述的一些实施方案涉及药物组合物，该药物组合物可包含有效量的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐。
本文所述的一些实施方案涉及用于改善和/或治疗本文所述的癌症的方法，该方法可包括向患有本文所述的癌症的受试者施用有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。本文所述的其它实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于改善和/或治疗本文所述的癌症的药物中的用途。本文所述的其它实施方案涉及用于改善和/或治疗本文所述的癌症的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。
本文所述的一些实施方案涉及用于抑制恶性生长或肿瘤的复制的方法，该方法可包括使所述生长或肿瘤与有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物接触，其中所述恶性生长或肿瘤由本文所述的癌症引起。本文所述的其它实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于抑制恶性生长或肿瘤的复制的药物中的用途，其中所述恶性生长或肿瘤由本文所述的癌症引起。本文所述的其它实施方案涉及用于抑制恶性生长或肿瘤的复制的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物，其中所述恶性生长或肿瘤由本文所述的癌症引起。
本文所述的一些实施方案涉及用于改善和/或治疗本文所述的癌症的方法，该方法可包括针对患有本文所述的癌症的受试者，使恶性生长或肿瘤与有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物接触。本文所述的其它实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于改善或治疗本文所述的癌症的药物中的用途，所述改善或治疗可包括接触恶性生长或肿瘤，其中所述恶性生长或肿瘤由本文所述的癌症引起。本文所述的其它实施方案涉及用于改善或治疗本文所述的癌症的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物，所述改善或治疗可包括接触恶性生长或肿瘤，其中所述恶性生长或肿瘤由本文所述的癌症引起。
本文所述的一些实施方案涉及用于抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)的方法，该方法可包括为包含来自本文所述的癌症的癌细胞的样品提供有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。本文所述的其它实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)的药物中的用途。本文所述的其它实施方案涉及用于抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。
本文所述的一些实施方案涉及使用有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物改善或治疗本文所述的癌症的方法，该方法可包括抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)。本文所述的其它实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于通过抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)来改善或治疗本文所述的癌症的药物中的用途。本文所述的其它实施方案涉及用于通过抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)来改善或治疗本文所述的癌症的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。
具体实施方式
在癌症的治疗中，egfr的抑制可具有治疗效果。已证实，egfr可以突变并活化，从而促使肿瘤生长。表皮生长因子受体(egfr)具有细胞外配体结合结构域、跨膜部分、以及细胞内酪氨酸激酶和调节结构域。在结合特异性配体后，egfr经历构象变化，并且细胞内结构域发生磷酸化，导致调控细胞增殖的下游信号转导。egfr的组成型活化导致细胞内通路活性增加，最终导致细胞增殖、血管生成、侵袭和/或转移。
已在多种癌症中鉴定出egfr基因的过表达，包括头颈癌、脑癌、乳腺癌、结肠癌和肺癌。在非小细胞肺癌中，测得egfr过表达的频率为40％至80％。除过表达之外，在一部分非小细胞肺癌(nsclc)肿瘤中也检测到egfr活化突变，占所有nsclc的10％至30％。突变发生在egfr基因的酪氨酸激酶结构域的外显子18、19和21中。外显子21中的大多数突变是点突变，而外显子19的突变几乎全是框内缺失。l858r点突变和外显子19中的缺失占所有egfr突变的高达86％。在不存在生长因子的情况下，这些突变导致egf受体的激酶活性增大。egf受体的上述突变被证实为响应于egfr酪氨酸激酶抑制剂的功效预测生物标志物。这些研究结果带来了全新的疗法，其中使用egfr抑制剂治疗具有激活的egfr突变的nsclc患者。egfr抑制剂、埃罗替尼和吉非替尼(被认为是第一代egfr抑制剂)最初在美国获得批准作为二线疗法。然而，包括第一代egfr抑制剂(吉非替尼)和第二代egfr抑制剂阿法替尼在内的egfr抑制剂的后续临床试验表明，在前线环境(frontlinesetting)中具有egfr活化突变的nsclc患者的总体响应率显著改善。
大多数对第一代和第二代egfr抑制剂响应良好的患者最终产生对这些抑制剂的抗性。在约50％的患者中观察到的最常见的抗性机制是egfr基因中的苏氨酸到甲硫氨酸的获得性守门员突变(t790m)。该突变增加了受体对atp的亲和力，并且降低了第一代egfr抑制剂的有效性。因此，在第一代和第二代egfr抑制剂上未获得成效的nsclc患者需要能够克服与t790m突变相关的获得性抗性的新疗法。
本文提供了可抑制egfr的激酶活性的化合物。作为egfr抑制剂，本文所述的化合物可用于改善和/或治疗各种癌症(包括具有获得性egfrt790m突变或野生型egfr的那些，并且其中egfr被过表达或活化)，例如非小细胞肺癌、头颈癌、脑癌、乳腺癌和结肠癌。
定义
除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语的含义与本领域的普通技术人员通常理解的含义相同。除非另行指出，否则本文引用的所有专利、专利申请、已公布的专利申请以及其它出版物均全文以引用方式并入。在本文的术语具有多个定义的情况下，除非上下文另行指出，否则将以本节的定义为准。
如本文所用，任何“r”基团诸如但不限于，r1、r2、r3、r4、r1a、r1b、r2a和r2b表示可连接至指定原子的取代基。r基团可以是取代或未取代的。如果两个“r”基团被描述为“合在一起”，则r基团和它们所连接的原子可形成环烷基、环烯基、芳基、杂芳基或杂环。例如，但不限于，如果nrarb基团的ra和rb被指明为“合在一起”，则意味着它们彼此共价键合形成环：
此外，作为替代，如果两个“r”基团被描述为与它们所连接的原子“合在一起”形成环，则r基团不限于此前所定义的变量或取代基。
每当将基团描述为“任选地取代的”时，该基团可以是未被取代的或者被所指定的取代基中的一个或多个取代。同样，当基团被描述为“未取代或取代的”时，如果被取代，则取代基可选自一个或多个所指定的取代基。如果未指定取代基，则意味着所述“任选地取代的”或“取代的”基团可以被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团单独且独立地选自烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、酰烷基、羟基、烷氧基、烷氧基烷基、氨基烷基、氨基酸、芳基、杂芳基、杂环基、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)、杂环基(烷基)、羟基烷基、酰基、氰基、卤素、硫代羰基、o-氨基甲酰基、n-氨基甲酰基、o-硫代氨基甲酰基、n-硫代氨基甲酰基、c-酰氨基、n-酰氨基、s-亚磺酰氨基、n-亚磺酰氨基、c-羧基、o-羧基、异氰酸基、硫氰基、异硫氰基、叠氮基、硝基、甲硅烷基、氧硫基、亚磺酰基、磺酰基、卤代烷基、卤代烷氧基、三卤代甲磺酰基、三卤代甲磺酰氨基、氨基、单取代氨基和二取代氨基。
如本文所用，“ca至cb”(其中“a”和“b”为整数)是指烷基、烯基或炔基基团中的碳原子数，或者环烷基、环烯基、芳基、杂芳基或杂脂环基基团的环中的碳原子数。也就是说，烷基、烯基、炔基、环烷基的环、环烯基的环、芳基的环、杂芳基的环或杂脂环基的环可包含“a”至“b”(包括端值在内)个碳原子。因此，例如，“c1至c4烷基”基团是指具有1至4个碳的所有烷基基团，即ch3-、ch3ch2-、ch3ch2ch2-、(ch3)2ch-、ch3ch2ch2ch2-、ch3ch2ch(ch3)-和(ch3)3c-。如果未相对于烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基或杂脂环基基团指定“a”和“b”，则假定这些定义中所述的最宽范围。
如本文所用，“烷基”是指包含完全饱和(无双键或三键)的烃基团的直链或支链的烃链。烷基基团可具有1至20个碳原子(在本文中无论何时出现，诸如“1至20”的数值范围均是指给定范围内的每个整数；例如，“1至20个碳原子”意味着烷基基团可包含1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等等，至多20个碳原子并且包括20个碳原子，但本定义也涵盖未指定数字范围的术语“烷基”的发生率。烷基基团也可以是具有1至10个碳原子的中等大小的烷基。烷基基团也可以是具有1至6个碳原子的低级烷基。化合物的烷基基团可被称为“c1-c4烷基”或类似名称。仅举例来讲，“c1-c4烷基”是指烷基链中存在一至四个碳原子，即，烷基链选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。典型的烷基基团包括但决不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基和己基。烷基基团可以是取代或未取代的。
如本文所用，“烯基”是指直链或支链烃链中含有一个或多个双键的烷基基团。烯基基团的示例包括丙二烯基、乙烯基甲基和乙烯基。烯基基团可以是未取代或取代的。
如本文所用，“炔基”是指直链或支链烃链中含有一个或多个三键的烷基基团。炔基的示例包括乙炔基和丙炔基。炔基基团可以是未取代或取代的。
如本文所用，“环烷基”是指完全饱和(无双键或三键)的单环或多环烃环系。当由两个或更多个环构成时，环可以稠合或桥联的方式接合在一起。环烷基基团可在环中含有3至10个原子或在环中含有3至8个原子。环烷基基团可以是未取代或取代的。典型的环烷基基团包括但决不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、二环[1.1.1]戊烷、二环[2.1.1]庚烷、金刚烷基和降冰片基。
如本文所用，“环烯基”是指在至少一个环中含有一个或多个双键的单环或多环烃环体系；但如果存在多于一个，双键就不能在所有环中形成完全离域的π电子系统(否则该基团将是“芳基”，如本文所定义)。环烯基基团可在环中含有3至10个原子或在环中含有3至8个原子。当由两个或更多个环构成时，环可以稠合或桥联的方式连接在一起。环烯基基团可以是未取代或取代的。
如本文所用，术语“稠合”是指两个环之间的连接，其中在环之间共享两个相邻原子和一个键(饱和或不饱和)。例如，在以下结构中，环a和环b稠合
如本文所用，术语“桥联”是指其中在两个环之间共享三个或更多个原子的连接。以下结构
如本文所用，“芳基”是指在所有环中具有完全离域的π电子系统的碳环(全碳)单环或多环芳环体系(包括其中两个碳环共享化学键的稠环体系)。芳基基团中的碳原子数可以是变化的。例如，芳基基团可以是c6-c14芳基基团、c6-c10芳基基团或c6芳基基团。芳基基团的示例包括但不限于苯、萘和薁。芳基基团可以是取代或未取代的。
如本文所用，“杂芳基”是指单环、二环和三环芳环体系(具有完全离域的π-电子系统的环系)，其包含一个、两个、三个或更多个杂原子(例如，1、2、3、4或5个杂原子)，即，除碳之外的元素，包括但不限于氮、氧和硫。杂芳基基团的环中的原子数可以是变化的。例如，杂芳基基团可在环中包含4至14个原子、在环中包含5至10个原子或在环中包含5至6个原子。此外，术语“杂芳基”包括稠环体系。杂芳基环的示例包括但不限于本文和下文所述的那些：呋喃、呋咱、噻吩、苯并噻吩、酞嗪、吡咯、噁唑、苯并噁唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、噻唑、1,2,3-噻二唑、1,2,4-噻二唑、苯并噻唑、咪唑、苯并咪唑、吲哚、吲唑、吡唑、苯并吡唑、异噁唑、苯并异噁唑、异噻唑、三唑、苯并三唑、噻二唑、四唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、嘌呤、蝶啶、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉和三嗪。杂芳基基团可以是取代或未取代的。
如本文所用，“杂环基”或“杂脂环基”是指三元、四元、五元、六元、七元、八元、九元、十元、至多十八元的单环、二环和三环体系，其中碳原子与1至5个杂原子一起构成所述环系。然而，杂环可任选地包含一个或多个不饱和键，所述一个或多个不饱和键以这样一种方式定位，使得不会在所有环中产生完全离域的π-电子系统。杂原子是除碳之外的元素，包括但不限于氧、硫和氮。杂环还可包含一个或多个羰基或硫代羰基官能团，以便使得该定义包括氧代体系和硫代体系，诸如内酰胺、内酯、环状酰亚胺、环状硫代酰亚胺和环状氨基甲酸酯。当由两个或更多个环构成时，环可以稠合方式接合在一起。另外，杂环基中的任何氮可被季铵化。杂环基或杂脂环基基团可以是未取代或取代的。此类“杂环基”或“杂脂环基”基团的示例包括但不限于本文和下文所述的那些：1,3-二氧杂环己烯、1,3-二氧杂环己烷、1,4-二氧杂环己烷、1,2-二氧戊环、1,3-二氧戊环、1,4-二氧戊环、1,3-氧硫杂环己烷、1,4-氧硫杂环己二烯、1,3-氧硫杂环戊烷、1,3-二硫杂环戊二烯、1,3-二硫戊环、1,4-氧硫杂环己烷、四氢-1,4-噻嗪、1,3-噻嗪烷、2h-1,2-噁嗪、马来酰亚胺、琥珀酰亚胺、巴比妥酸、硫代巴比妥酸、二氧代哌嗪、乙内酰脲、二氢尿嘧啶、三噁烷、六氢-1,3,5-三嗪、咪唑啉、咪唑烷、异噁唑啉、异噁唑烷、噁唑啉、噁唑烷、噁唑烷酮、噻唑啉、噻唑烷、吗啉、环氧乙烷、哌啶n-氧化物、哌啶、哌嗪、吡咯烷、吡咯烷酮、吡咯烷酮、4-哌啶酮、吡唑啉、吡唑烷、2-氧代吡咯烷、四氢吡喃、4h-吡喃、四氢噻喃、硫吗啉、硫吗啉亚砜、硫吗啉砜，以及它们的苯并稠合类似物(例如，苯并咪唑烷酮、四氢喹啉和3,4-亚甲基二氧苯基)。桥联的杂环化合物的示例包括但不限于1,4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷和1,4-二氮杂二环[3.1.1]庚烷。
如本文所用，“芳烷基”和“芳基(烷基)”是指作为取代基经由低级亚烷基基团连接的芳基基团。芳烷基的低级亚烷基和芳基基团可以是取代或未取代的。示例包括但不限于苄基、2-苯基烷基、3-苯基烷基和萘基烷基。
如本文所用，“杂芳烷基”和“杂芳基(烷基)”是指作为取代基经由低级亚烷基基团连接的杂芳基基团。杂芳烷基的低级亚烷基和杂芳基基团可以是取代或未取代的。示例包括但不限于2-噻吩基烷基、3-噻吩基烷基、呋喃基烷基、噻吩烷基、吡咯基烷基、吡啶基烷基、异噁唑基烷基、咪唑基烷基以及它们的苯并稠合类似物。
“杂脂环基(烷基)”和“杂环基(烷基)”是指作为取代基经由低级亚烷基基团连接的杂环或杂脂环基团。杂脂环基(烷基)的低级亚烷基和杂环基可以是取代或未取代的。示例包括但不限于四氢-2h-吡喃-4-基(甲基)、哌啶-4-基(乙基)、哌啶-4-基(丙基)、四氢-2h-噻喃-4-基(甲基)和1,3-噻嗪-4-基(甲基)。
“低级亚烷基基团”是直链的-ch2-连接基团，能够形成键以经由其末端碳原子连接分子片段。示例包括但不限于亚甲基(-ch2-)、亚乙基(-ch2ch2-)、亚丙基(-ch2ch2ch2-)和亚丁基(-ch2ch2ch2ch2-)。低级亚烷基基团可通过用在“取代的”的定义下列出的取代基置换低级亚烷基基团的一个或多个氢而被取代。
如本文所用，“烷氧基”是指式-or，其中r为本文所定义的烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。烷氧基的非限制性列表是甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-甲基乙氧基(异丙氧基)、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、苯氧基和苯甲酰氧基。烷氧基可以是取代或未取代的。
如本文所用，“酰基”是指作为取代基经由羰基基团连接的氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。示例包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、苯甲酰基和丙烯酰基。酰基可以是取代或未取代的。
如本文所用，“酰基烷基”是指作为取代基经由低级亚烷基基团连接的酰基。示例包括芳基-c(＝o)-(ch2)n-和杂芳基-c(＝o)-(ch2)n-，其中n为1至6范围内的整数。
如本文所用，“烷氧基烷基”是指作为取代基经由低级亚烷基基团连接的烷氧基基团。示例包括c1-4烷基-o-(ch2)n-，其中n为1至6范围内的整数。
如本文所用，“氨基烷基”是指作为取代基经由低级亚烷基基团连接的任选取代的氨基基团。示例包括h2n(ch2)n-，其中n为1至6范围内的整数。
如本文所用，“羟烷基”是指其中氢原子中的一个或多个被羟基基团置换的烷基基团。示例性羟烷基基团包括但不限于2-羟乙基、3-羟丙基、2-羟丙基和2,2-二羟乙基。羟烷基可以是取代或未取代的。
如本文所用，“卤代烷基”是指其中氢原子中的一个或多个被卤素置换的烷基基团(例如，单卤代烷基、二卤代烷基和三卤代烷基)。此类基团包括但不限于氯甲基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯-氟烷基、氯-二氟烷基和2-氟异丁基。卤代烷基可以是取代或未取代的。
如本文所用，“卤代烷氧基”是指其中氢原子中的一个或多个被卤素置换的烷氧基基团(例如，单卤代烷氧基、二卤代烷氧基和三卤代烷氧基)。此类基团包括但不限于氯甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、氯-氟烷基、氯-二氟烷氧基和2-氟异丁氧基。卤代烷氧基可以是取代或未取代的。
“氧硫基”基团是指“-sr”基团，其中r可以是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。氧硫基可以是取代或未取代的。
“亚磺酰基”基团是指“-s(＝o)-r”基团，其中r可以相对于氧硫基定义相同。亚磺酰基可以是取代或未取代的。
“磺酰基”基团是指“so2r”基团，其中r可以相对于氧硫基定义相同。磺酰基可以是取代或未取代的。
“o-羧基”基团是指“rc(＝o)o-”基团，其中r可以是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)，如本文所定义。o-羧基可以是取代或未取代的。
术语“酯”和“c-羧基”是指“-c(＝o)or”基团，其中r可以相对于o-羧基定义相同。酯和c-羧基可以是取代或未取代的。
“硫代羰基”基团是指“-c(＝s)r”基团，其中r可以相对于o-羧基定义相同。硫代羰基可以是取代或未取代的。
“三卤代甲磺酰基”基团是指“x3cso2-”基团，其中每个x为卤素。
“三卤代甲磺酰氨基”是指“x3cs(o)2n(ra)-”基团，其中每个x为卤素，并且ra为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。
如本文所用，术语“氨基”是指-nh2基团。
如本文所用，术语“羟基”是指-oh基团。
“氰基”基团是指“-cn”基团。
如本文所用，术语“叠氮基”是指-n3基团。
“异氰酸酯基”基团是指“-nco”基团。
“硫氰基”基团是指“-cns”基团。
“异硫氰基”基团是指“-ncs”基团。
“羰基”基团是指c＝o基团。
“s-亚磺酰氨基”基团是指“-so2n(rarb)”基团，其中ra和rb可以独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。s-亚磺酰氨基可以是取代或未取代的。
“n-亚磺酰氨基”基团是指“rso2n(ra)-”基团，其中r和ra可以独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。n-亚磺酰氨基可以是取代或未取代的。
“o-氨基甲酰基”基团是指“-oc(＝o)n(rarb)”基团，其中ra和rb可以独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。o-氨基甲酰基可以是取代或未取代的。
“n-氨基甲酰基”基团是指“roc(＝o)n(ra)-”基团，其中r和ra可以独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。n-氨基甲酰基可以是取代或未取代的。
“o-硫代氨基甲酰基”基团是指“-oc(＝s)-n(rarb)”基团，其中ra和rb可以独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。o-硫代氨基甲酰基可以是取代或未取代的。
“n-硫代氨基甲酰基”基团是指“roc(＝s)n(ra)-”基团，其中r和ra可以独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。n-硫代氨基甲酰基可以是取代或未取代的。
“c-酰氨基”基团是指“-c(＝o)n(rarb)”基团，其中ra和rb可以独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。c-酰氨基可以是取代或未取代的。
“n-酰氨基”基团是指“rc(＝o)n(ra)-”基团，其中r和ra可以独立地为氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基(烷基)、芳基(烷基)、杂芳基(烷基)或杂环基(烷基)。n-酰氨基可以是取代或未取代的。
如本文所用，术语“卤素原子”或“卤素”意指元素周期表第7列的放射稳定原子中的任一个，诸如氟、氯、溴和碘。
“活化烯基”在本文中如本领域的技术人员所理解的那样使用，并且是指被至少一个吸电子基团取代的烯基。合适的吸电子基团的示例是任选取代的酰基、任选取代的c-羧基、任选取代的c-酰氨基、任选取代的n-酰氨基、任选取代的磷酸根、任选取代的亚磺酰基以及任选取代的磺酰基、氰基和硝基。活化烯基的示例是michael受体。
如本文所用，除非另行指出，否则“------”表示单键或双键。
在未指定取代基(例如，卤代烷基)数目的情况下，可存在一个或多个取代基。例如，“卤代烷基”可包括相同或不同卤素中的一个或多个。又如，“c1-c3烷氧基苯基”可包括含有一个、两个或三个原子的相同或不同烷氧基基团中的一个或多个。
如本文所用，除非另行指出，否则任何保护基团、氨基酸和其它化合物的缩写符合其常见用法、公认缩写或iupac-iub生物化学命名委员会(iupac-iubcommissiononbiochemicalnomenclature)(参见biochem.11:942-944(1972年))。
如本文所用，术语“保护基团”和“多个保护基团”是指加入到分子中以防止分子中的现有基团经历不需要的化学反应的任何原子或原子团。保护基团部分的示例在t.w.greene和p.g.m.wuts，protectivegroupsinorganicsynthesis，第3版，johnwiley&sons，1999年以及j.f.w.mcomie，protectivegroupsinorganicchemistryplenumpress，1973年中有所描述，这两篇文献据此均以引用方式并入以用于公开合适的保护基团的有限目的。保护基团部分可以这样的方式选择，使得其对于某些反应条件是稳定的，并且能在方便的阶段使用本领域已知的方法容易地去除。保护基团的非限制性列表包括苄基；取代的苄基、烷基羰基和烷氧基羰基(例如，叔丁氧基羰基(boc)、乙酰基或异丁酰基)；芳基烷基羰基和芳基烷氧基羰基(例如，苄氧基羰基)；取代的甲醚(例如，甲氧基甲醚)；取代的乙醚；取代的苄基醚；四氢吡喃基醚；甲硅烷基(例如，三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅氧基甲基、[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基或叔丁基二苯基甲硅烷基)；酯(例如，苯甲酸酯)；碳酸酯(例如，甲氧基甲基碳酸酯)；磺酸酯(例如，甲苯磺酸酯或甲磺酸酯)；非环状缩酮(例如，二甲基缩醛)；环状缩酮(例如，1,3-二氧杂环己烷、1,3-二氧戊环和本文所述的那些)；非环状缩醛；环状缩醛(例如，本文所述的那些)；非环状半缩醛；环状半缩醛；环状二硫代缩酮(例如，1,3-二噻烷或1,3-二硫戊环)；原酸酯(例如，本文所述的那些)以及三芳基甲基基团(例如，三苯甲基；单甲氧基三苯甲基(mmtr)；4,4'-二甲氧基三苯甲基(dmtr)；4,4',4"-三甲氧基三苯甲基(tmtr)；以及本文所述的那些。
如本文所用，术语“离去基团”是指在化学反应中能够被另一个原子或部分置换的任何原子或部分。更具体地讲，在一些实施方案中，“离去基团”是指在亲核取代反应中被置换的原子或部分。在一些实施方案中，“离去基团”是作为强酸的共轭碱的任何原子或部分。合适的离去基团的示例包括但不限于甲苯磺酸酯、甲磺酸酯、三氟乙酸酯和卤素(例如，i、br和cl)。离去基团的非限制性特征和示例可见于例如organicchemistry，第2版，franciscarey(1992年)，第328-331页；introductiontoorganicchemistry，第2版，andrewstreitwieserandclaytonheathcock(1981年)，第169-171页；以及organicchemistry，第5版，johnmcmurry(2000年)，第398和408页；这些文献均以引用方式并入本文以用于公开离去基团的特征和示例的有限目的。
术语“药学上可接受的盐”是指对其所施用的生物体不引起显著炎症并且不会消除化合物的生物活性和特性的化合物的盐。在一些实施方案中，所述盐是化合物的酸加成盐。药用盐可通过使化合物与无机酸诸如氢卤酸(例如，盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸和磷酸反应而获得。药用盐也可通过使化合物与有机酸诸如脂族或芳族羧酸或磺酸(例如，甲酸、乙酸、琥珀酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、烟酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸或萘磺酸)反应而获得。药用盐也可通过使化合物与碱反应形成盐而获得，所述盐诸如铵盐、碱金属盐诸如钠盐或钾盐、碱土金属盐诸如钙盐或镁盐、有机碱(诸如，二环己胺、n-甲基-d-葡糖胺、三(羟甲基)甲胺、c1-c7烷基胺、环己胺、三乙醇胺、乙二胺)的盐以及与氨基酸诸如精氨酸和赖氨酸的盐。
除非另外明确说明，否则本申请中使用的术语和短语及其变体，尤其是在所附权利要求书中，应被理解为开放式的，而非限制性的。作为上述内容的示例，术语“包括”应被理解为意指“包括，不限于”、“包括但不限于”等等；如本文所用，术语“包含”与“包括”、“含有”或“特征在于”同义，并且是包容性或开放式的，不排除另外的、未述及的要素或方法步骤；术语“具有”应被解释为“至少具有”；术语“包括”应被解释为“包括但不限于”；术语“示例”用于提供讨论中的项目的示例性情况，而不是其穷举性或限制性的列表；并且如“优选地”、“优选的”、“所需的”或“期望的”的术语以及类似含义的字词的使用不应被理解为暗示某些特征对于结构或功能是关键甚至重要的，而是仅仅旨在强调在特定实施方案中可使用或可不使用的替代或附加特征。此外，术语“包括”将与短语“至少具有”或“至少包括”同义地解释。当在方法的上下文中使用时，术语“包括”意味着该方法至少包括所述的步骤，但可包括附加的步骤。当在化合物、组合物或设备的上下文中使用时，术语“包括”意味着该化合物、组合物或设备至少包括所述的特征或组分，但也可包括附加的特征或组分。同样，除非上下文另有说明，否则与连词“和”相连的一组项目不应被视为要求这些项目中的每一个都存在于分组中，而是应被视为“和/或”。类似地，除非上下文另有说明，否则与连词“或”相连的一组项目不应被视为该组中需要相互排他性，而是应被视为“和/或”。
对于本文中使用的基本上任何复数和/或单数术语，本领域的技术人员可从复数转换成单数和/或从单数转换成复数，只要适合于上下文和/或应用即可。为清楚起见，各种单数/复数的排列可在本文中明确表述。不定冠词“一个”或“一种”不排除多个。单个处理器或其它单元可实现权利要求中所述的若干项目的功能。在互相不同的从属权利要求中述及某些措施的事实并不表示这些措施的组合不能有利地使用。权利要求书中的任何附图标记不应理解为限制范围。
应当理解，在本文所述的具有一个或多个手性中心的任何化合物中，如果没有明确指定绝对立体化学，则每个中心可以独立地具有r构型或s构型或它们的混合物。因此，本文提供的化合物可以是对映体纯的、对映体富集的外消旋混合物，非对映体纯的、非对映体富集或立体异构混合物。此外，应当理解，在本文所述的具有一个或多个可被定义为e或z的双键生成几何异构体的任何化合物中，每个双键可以独立地为e或z或它们的混合物。
同样，应当理解，在所述的任何化合物中，所有互变异构体形式也旨在包括在内。
应当理解，如果本文所公开的化合物具有未填满的化合价，则化合价将用氢或其同位素填充，例如氢-1(氕)和氢-2(氘)。
应当理解，本文所述的化合物可进行同位素标记。用同位素诸如氘进行取代可提供由更大的代谢稳定性所带来的某些治疗优势，诸如例如体内半衰期延长或剂量需求减少。以化合物结构表示的每个化学元素可包括所述元素的任何同位素。例如，在化合物结构中，氢原子可明确地公开或理解为存在于化合物中。在化合物中可存在氢原子的任何位置处，氢原子可以是氢的任何同位素，包括但不限于氢-1(氕)和氢-2(氘)。因此，除非上下文另外明确规定，否则本文中对化合物的提及涵盖所有潜在的同位素形式。
应当理解，本文所述的方法和组合包括晶体形式(也称为多晶型物，其包括化合物的相同元素组成的不同晶体堆积排列)、非结晶相、盐、溶剂化物和水合物。在一些实施方案中，本文所述的化合物以溶剂化形式与药学上可接受的溶剂诸如水、乙醇等一起存在。在其它实施方案中，本文所述的化合物以非溶剂化形式存在。溶剂化物包含化学计量或非化学计量的溶剂，并且可在与药学上可接受的溶剂诸如水、乙醇等的结晶过程中形成。当溶剂为水时形成水合物，或者当溶剂为醇时形成醇盐。此外，本文提供的化合物可以非溶剂化形式和溶剂化形式存在。通常，为了本文提供的化合物和方法的目的，溶剂化形式被认为等同于非溶剂化形式。
在提供值的范围的情况下，应当理解，上限和下限以及范围的上限和下限之间的每个中间值都涵盖在实施方案中。
化合物
式(i)
本文所公开的一些实施方案涉及式(i)的化合物或其药学上可接受的盐，其具有以下结构：
其中：环z可选自：
环z可为含有若干氮原子的各种二环体系。在一些实施方案中，环z可为
具有结构
在一些实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1a可为氢。在其它实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1a可为卤素。在其它实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1a可为任选取代的c1-4烷基，诸如本文所述的那些。在一些实施方案中，r1a可为未取代的c1-4烷基。在其它实施方案中，r1a可为取代的c1-4烷基。在一些实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1a可为任选取代的环烷基，诸如任选取代的单环c3-8环烷基或任选取代的二环c3-8环烷基。在其它实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1a可为任选取代的烷氧基，例如任选取代的c1-4烷氧基。在其它实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1a可为任选取代的单取代胺。在其它实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1a可为任选取代的二取代胺。
各种取代基可连接到环z。在一些实施方案中，r3可为氢。在其它实施方案中，r3可为卤素。在其它实施方案中，r3可为任选取代的c1-4烷基。c1-4烷基基团的示例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。在一些实施方案中，r3可为未取代的c1-4烷基。在其它实施方案中，r3可为取代的c1-4烷基。
在一些实施方案中，r3可为未取代的c3-c10环烷基。在其它实施方案中，r3可为取代的c3-c10环烷基。c3-c10环烷基可为单环c3-c10环烷基或二环c3-c10环烷基，诸如稠合的c3-c10环烷基。c3-c10环烷基基团的示例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、二环[1.1.1]戊基和二环[2.1.1]庚基。在一些实施方案中，c3-c10环烷基可为二环[1.1.1]戊基部分。
在一些实施方案中，r3可为未取代的烷氧基。在其它实施方案中，r3可为取代的烷氧基。在一些实施方案中，r3可为任选取代的c1-4烷氧基。例如，r3可为未取代的甲氧基。在一些实施方案中，r3可为任选取代的单取代氧硫基。在其它实施方案中，r3可为任选取代的单取代胺。例如，r3可为-nhr”，其中r”可为任选取代的c1-4烷基。在其它实施方案中，r3可为任选取代的二取代胺。
如本文所提供，环z可具有结构
在一些实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1b可为氢。在其它实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1b可为卤素。在其它实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1b可为任选取代的c1-4烷基，诸如本文所述的那些。在一些实施方案中，r1b可为未取代的c1-4烷基。在其它实施方案中，r1b可为取代的c1-4烷基。在一些实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1b可为任选取代的环烷基，诸如任选取代的单环c3-8环烷基或任选取代的二环c3-8环烷基。在其它实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1b可为任选取代的烷氧基，例如任选取代的c1-4烷氧基。在其它实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1b可为任选取代的单取代胺。在其它实施方案中，包括先前段落的那些实施方案，r1b可为任选取代的二取代胺。
在一些实施方案中，r4可为氢。在其它实施方案中，r4可为卤素。在其它实施方案中，r4可为任选取代的c1-4烷基。c1-4烷基基团的示例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。在一些实施方案中，r4可为未取代的c1-4烷基。在其它实施方案中，r4可为取代的c1-4烷基。
在一些实施方案中，r4可为未取代的c3-c10环烷基。在其它实施方案中，r4可为取代的c3-c10环烷基。c3-c10环烷基可为单环c3-c10环烷基或二环c3-c10环烷基，诸如稠合的c3-c10环烷基。c3-c10环烷基基团的示例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、二环[1.1.1]戊基和二环[2.1.1]庚基。在一些实施方案中，c3-c10环烷基可为二环[1.1.1]戊基部分。
在一些实施方案中，r4可为未取代的烷氧基。在其它实施方案中，r4可为取代的烷氧基。在一些实施方案中，r4可为任选取代的c1-4烷氧基。例如，r4可为未取代的甲氧基。在一些实施方案中，r3可为任选取代的单取代氧硫基。在其它实施方案中，r4可为任选取代的单取代胺。例如，r4可为-nhr”，其中r”可为任选取代的c1-4烷基。在其它实施方案中，r4可为任选取代的二取代胺。
在一些实施方案中，r1可为任选取代的芳基。例如，r1可为任选取代的苯基。芳环可以用多种取代基取代一次或多次。例如，芳环可被2个、3个或多于3个取代基取代。取代基可以彼此相同或不同。在其它实施方案中，r1可为任选取代的杂芳基。任选取代的杂芳基可以是任选取代的单环杂芳基或任选取代的二环杂芳基。各种任选取代的杂芳基基团包括但不限于任选取代的吡唑、任选取代的吡啶、任选取代的嘧啶、任选取代的咪唑、任选取代的噻唑、任选取代的异噁唑、任选取代的噁唑和任选取代的三唑。杂芳基基团可以是单取代的、二取代的或被3个或更多个取代基取代。当r1被取代时，可存在以下取代基中的一个或多个：卤素、任选取代的c1-4烷基、任选取代的c3-8环烷基、任选取代的单环杂环基、任选取代的c1-4烷氧基、任选取代的c1-4卤代烷基、任选取代的单取代胺和任选取代的二取代胺，其中当前述中的任一个被取代时，可存在以下取代基中的一个或多个：卤素、未取代的c1-4烷基、未取代的c1-4烷基卤代烷基以及被一个至两个未取代的c1-4烷基基团取代的胺。当r1被任选取代的单环杂环基取代时，任选取代的单环杂环基可以是任选取代的含氮单环杂环基，诸如任选取代的吡咯烷基和任选取代的哌啶基。
在一些实施方案中，r2可为取代的c4-c10环烷基。取代的c4-c10环烷基可以是例如取代的单环c4-6环烷基或取代的二环c5-10环烷基。二环c5-10环烷基可以是稠合的c5-10环烷基，诸如二环[1.1.1]戊基或二环[2.1.1]庚基。
在一些实施方案中，r2可为取代的芳基。例如，r2可为取代的苯基。在一些实施方案中，r2可以是在邻位、间位或对位取代的单取代苯基基团。在其它实施方案中，r2可以是具有2个、3个或多于3个取代基的取代的芳基基团。当存在2个或更多个取代基时，取代基可以彼此相同或不同。在一些实施方案中，r2可为取代的杂芳基。取代的杂芳基的示例包括取代的单环杂芳基和取代的二环杂芳基。在其它实施方案中，r2可为取代的杂环基。取代的杂环基可以是取代的单环杂环基或取代的二环杂环基。在一些实施方案中，r2可选自取代的吡咯烷基、取代的哌啶和3-氮杂二环[3.1.0]己烷基。
连接到r2的活化烯基可具有多种结构。在一些实施方案中，活化烯基可以是可包含选自以下的部分的c2-6烯基：任选取代的酰基、任选取代的c-羧基、任选取代的c-酰氨基、氰基和硝基。在一些实施方案中，活化烯基可以是任选取代的-c(＝o)-c2-4烯基。在其它实施方案中，活化烯基可以是任选取代的-nr5-c(＝o)-c2-4烯基，其中r5可为氢或任选取代的c1-4烷基。合适的活化烯基的示例包括但不限于
除存在于r2上的活化烯基之外，r2上可存在以下取代基中的一个或多个：卤素、任选取代的c1-4烷基、任选取代的c3-8环烷基、任选取代的c1-4烷氧基、任选取代的c1-4卤代烷基、任选取代的单取代胺和任选取代的二取代胺。
在一些实施方案中，z1可为o(氧)。在其它实施方案中，z1可为s(硫)。在其它实施方案中，z1可为nh。在一些实施方案中，m可为0。在其它实施方案中，m可为1。
在一些实施方案中，z2可为(cr2ar2b)n，并且r2a和r2b可独立地选自氢、卤素、任选取代的c1-4烷基、任选取代的c1-4烷氧基和任选取代的c1-4卤代烷基。在一些实施方案中，r2a和r2b中的一者可为氢。在其它实施方案中，r2a和r2b均可为氢，使得z2可为(ch2)n。在一些实施方案中，n可为0。在其它实施方案中，n可为1。在其它实施方案中，n可为2。在其它实施方案中，n可为3。
式(i)的化合物或其药学上可接受的盐的示例包括但不限于：
式(i)的化合物或其药学上可接受的盐的其它示例包括以下：
在一些实施方案中，环z不可为
合成
式(i)的化合物和本文所述的那些化合物可通过各种方式制备。一些式(i)的化合物可商购获得和/或使用已知的合成工序制备。式(i)的化合物的通用合成路线以及用于合成式(i)的化合物的起始物质的一些示例在本文中示出并描述。本文所示和所述的路线仅仅是示例性的，并非旨在也不被理解为以任何方式限制权利要求的范围。本领域的技术人员将能够基于本文的公开内容来识别本文所公开的合成的修改形式并设计备选路线；所有此类修改形式和备选路线都在权利要求的范围内。
方案1
如方案1所示，化合物(a)可使用化合物(b)和本领域的技术人员已知的一种或多种方法进行烷基化。在方案1中，lg1可为合适的离去基团，r1、z1、z2和m可与本文所述相同；环za1可以与本文所述的环z相同，不同的是化合物(b)所连接的氮是-nh或受保护的氮；并且r2a1可以与本文所述相同或包含受保护的氮。环za1和具有受保护的氮的r2a1的示例示于方案1中。化合物(a)和化合物(b)可经由亲核取代反应或pd催化的偶联反应(诸如，buchwald-hartwig反应和/或环钯偶联催化剂)偶联在一起。如果保护基团存在于r2a1的氮上，则可使用本领域的技术人员已知的方法去除保护基团。可形成酰胺基以提供式(i)的化合物或其药学上可接受的盐。例如，可使用酸(例如，hcl)去除方案1中所示的boc基团，并且可将酰卤(例如，丙烯酰氯)与胺组合以形成酰胺。
方案2
式(i)的化合物或其药学上可接受的盐也可以如方案2所示获得。在方案2中，lg2可为合适的离去基团，r1、z1、z2、环z和m可与本文所述相同；并且r2a2可以与本文所述相同或包含受保护的氮。化合物(c)的更详细的示例也在方案2中提供。化合物(d)和化合物(c)可经由亲核取代反应或pd催化的交叉偶联反应(例如，buchwald-hartwig反应)偶联在一起。如果保护基团存在于r2a2的氮上，则可使用本领域的技术人员已知的方法去除保护基团，并且可形成酰胺以提供式(i)的化合物或其药学上可接受的盐。如先前所述，可使用酸去除boc基团，并且可将酰卤与胺组合以形成酰胺。关于路线和材料的其它细节在本文中诸如在方案a-f中提供。
合适的离去基团和保护基团的示例是本领域的技术人员已知和本文所述的。在一些实施方案中，lg1可为卤化物，诸如氯化物。在一些实施方案中，lg2可为卤化物(例如，氯化物)或烷基-so2。
药物组合物
本文所述的一些实施方案涉及药物组合物，该药物组合物可包含有效量的一种或多种本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)以及药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或它们的组合。
术语“药物组合物”是指本文所公开的一种或多种化合物与其它化学组分诸如稀释剂或载体的混合物。药物组合物有利于将化合物施用于生物体。药物组合物也可通过使化合物与无机酸或有机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸和水杨酸反应而获得。药物组合物通常将根据具体的预期给药途径进行定制。
术语“生理上可接受的”定义了不会消除化合物的生物活性和特性也不会对预期组合物所递送至的动物造成明显的损害或损伤的载体、稀释剂或赋形剂。
如本文所用，“载体”是指促进将化合物掺入细胞或组织中的化合物。例如但不限于，二甲基亚砜(dmso)是促进将许多有机化合物摄入到受试者的细胞或组织中的常用载体。
如本文所用，“稀释剂”是指药物组合物中缺乏明显的药理活性但可能是药学上必需或期望的成分。例如，可使用稀释剂增加质量过小的有效药物的体积以供制造和/或施用。它也可以是用于溶解将通过注射、摄取或吸入而施用的药物的液体。本领域中通用形式的稀释剂是缓冲水溶液，诸如但不限于模拟人血液的ph和等渗性的磷酸盐缓冲盐水。
如本文所用，“赋形剂”是指添加到药物组合物中以便为组合物提供但不限于体积、稠度、稳定性、结合能力、润滑性、崩解能力等的基本上惰性的物质。“稀释剂”是一种类型的赋形剂。
本文所述的药物组合物可施用于人类患者本身，或用于所述药物组合物与其它活性成分(如在组合疗法中)或载体、稀释剂、赋形剂或它们的组合混合的药物组合物中。适当的配方取决于所选择的给药途径。用于配制和施用本文所述的化合物的技术是本领域的技术人员已知的。
本文所公开的药物组合物可以本身已知的方式制造，例如通过常规混合、溶解、制粒、糖衣丸制备、研磨、乳化、包封、包埋或制片工艺。另外，活性成分以能够实现其预期目的的有效量包含在内。本文所公开的药物组合物中使用的许多化合物可以与药学上相容的抗衡离子的盐的形式提供。
本领域存在多种施用化合物的技术，包括但不限于口服、直肠给药、肺部给药、局部给药、气雾剂、注射和肠胃外递送，包括肌内、皮下、静脉内、髓内注射、鞘内、直接心室内、腹膜内、鼻内和眼内注射。
也可以局部而非全身的方式施用化合物，例如通过将化合物直接注入或植入受影响的区域中，通常在贮库或缓释制剂中。此外，可在靶向药物递送体系中施用化合物，例如在包覆有组织特异性抗体的脂质体中。脂质体将被靶向到器官并被器官选择性地吸收。例如，可期望鼻内或肺部递送以靶向呼吸道感染。
如本文所述，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐可通过多种方法施用。在本文所述的一些方法中，可在1分钟、5分钟、10分钟、30分钟、1小时、2小时、6小时、12小时、24小时或更长时间、或任何中间时间的过程中通过注射、输注和/或静脉内施用来给药。本文所述的其它方法可包括口服、静脉内和/或腹膜内施用于对其有需要的受试者，例如，施用于受试者以响应于egfr抑制剂而治疗本文所述的癌症。
如果需要，组合物可存在于可包含含有活性成分的一种或多种单位剂型的包装或分配器设备中。包装可例如包含金属或塑料箔，诸如泡罩包装。包装或分配器设备可附有施用说明。包装或分配器也可附有与管理生产的政府机构所规定形式的容器、药品使用或销售有关的注意事项，其中注意事项是人用或兽用药物形式通过政府机构批准的反映。例如，此类注意事项可以是经美国食品与药物管理局批准的处方药的标签或批准的产品插页。还可制备可包含在相容的药用载体中配制的本文所述的化合物的组合物，将其置于合适的容器中并且标记用于治疗指定的病症。
使用方法
本文所述的一些实施方案涉及用于改善和/或治疗本文所述的癌症的方法，该方法可包括向患有本文所述的癌症的受试者施用有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。本文所述的其它实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于改善和/或治疗本文所述的癌症的药物中的用途。本文所述的其它实施方案涉及用于改善和/或治疗本文所述的癌症的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。
本文所述的一些实施方案涉及用于抑制恶性生长或肿瘤的复制的方法，该方法可包括使所述生长或肿瘤与有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物接触，其中所述恶性生长或肿瘤由本文所述的癌症引起。本文所述的其它实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于抑制恶性生长或肿瘤的复制的药物中的用途，其中所述恶性生长或肿瘤由本文所述的癌症引起。本文所述的其它实施方案涉及用于抑制恶性生长或肿瘤的复制的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物，其中所述恶性生长或肿瘤由本文所述的癌症引起。
本文所述的一些实施方案涉及用于改善和/或治疗本文所述的癌症的方法，该方法可包括针对患有本文所述的癌症的受试者，使恶性生长或肿瘤与有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物接触。本文所述的其它实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于改善或治疗癌症的药物中的用途，所述改善或治疗可包括接触恶性生长或肿瘤，其中所述恶性生长或肿瘤由本文所述的癌症引起。本文所述的其它实施方案涉及用于改善或治疗癌症的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物，所述改善或治疗可包括接触恶性生长或肿瘤，其中所述恶性生长或肿瘤由本文所述的癌症引起。
本文所述的一些实施方案涉及用于抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)的方法，该方法可包括为包含来自本文所述的癌症的癌细胞的样品提供有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。本文所述的其它实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)的药物中的用途。本文所述的其它实施方案涉及用于抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。
本文所述的一些实施方案涉及用于使用有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物来改善或治疗本文所述的癌症的方法，该方法可包括抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)。本文所述的其它实施方案涉及有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物在制造用于通过抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)来改善或治疗本文所述的癌症的药物中的用途。本文所述的其它实施方案涉及用于通过抑制egfr的活性(例如，利用获得性egfrt790m突变或野生型egfr抑制egfr的活性，并且其中egfr被过表达或活化)来改善或治疗本文所述的癌症的有效量的本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物。
合适的癌症的示例包括但不限于：肺癌(例如，肺腺癌和非小细胞肺癌)、胰腺癌(例如，胰腺肿瘤，诸如例如外分泌胰腺肿瘤)、结肠癌(例如，结直肠癌，诸如例如结肠腺癌和结肠腺瘤)、乳腺癌、前列腺癌，头颈癌(例如，头颈部鳞状细胞癌)、卵巢癌、脑癌(例如，神经胶质瘤，诸如多形性胶质母细胞瘤)和肾癌。
如本文所述，癌症可变得对一种或多种抗癌剂具有抗性。在一些实施方案中，本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)或包含本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)的药物组合物可用于治疗和/或改善已变得对一种或多种抗癌剂(诸如，一种或多种egfr抑制剂)具有抗性的癌症。受试者可能已发展出抗性的抗癌剂的示例包括但不限于第一代egfr抑制剂(诸如，吉非替尼和埃罗替尼)和第二代egfr抑制剂(例如，阿法替尼)。在一些实施方案中，已变得对一种或多种抗癌剂具有抗性的癌症可以是本文所述的癌症。
若干已知的egfr抑制剂可引起被治疗的受试者的一种或多种不期望的副作用。这些副作用的两个示例是高血糖和皮疹。皮疹的特征可在于轻度鳞屑、丘疹、粗糙、紧绷感、瘙痒和灼热。在一些实施方案中，本文所述的化合物(例如，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐)可降低与已知egfr抑制剂相关的一种或多种副作用的数量和/或严重性。在一些实施方案中，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐导致副作用(诸如，本文所述的那些之一)的严重性比接受已知egfr抑制剂的受试者所经历的相同副作用的严重性小25％。在一些实施方案中，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐导致副作用的数量比接受已知egfr抑制剂的受试者所经历的副作用的数量少25％。在一些实施方案中，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐导致副作用(诸如，本文所述的那些之一)的严重性比接受已知egfr抑制剂的受试者所经历的相同副作用的严重性小约10％至约30％范围。在一些实施方案中，式(i)的化合物或其药学上可接受的盐导致副作用的数量比接受已知egfr抑制剂的受试者所经历的副作用的数量少约10％至约30％范围。
可使用的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐可以是段落[0081]-[0102]所述的实施方案中的任一个实施方案。
如本文所用，“受试者”是指作为治疗、观察或实验的对象的动物。“动物”包括冷血和温血脊椎动物和无脊椎动物，诸如鱼、贝类、爬行动物，特别是哺乳动物。“哺乳动物”包括但不限于小鼠、大鼠、兔、豚鼠、狗、猫、绵羊、山羊、牛、马、灵长类，诸如猴子、黑猩猩和猿，特别是人。在一些实施方案中，受试者可以是人。在一些实施方案中，受试者可以是儿童和/或婴儿，例如发烧的儿童或婴儿。在其它实施方案中，受试者可以是成年人。
如本文所用，术语“治疗”、“治疗的”和“疗法”不一定意味着完全治愈或消除疾病或病症。疾病或病症的任何不期望的病征或症状在任何程度上的任何缓解均可视为治疗和/或疗法。此外，治疗可包括可能使受试者的健康或外观整体感觉恶化并且可能对疾病的一个或多个症状或方面产生正面影响，同时对疾病的其它方面或可能被认为不期望的无关系统产生影响的行为。
术语“治疗有效量”和“有效量”用于表示引起指定生物或药物响应的活性化合物或药剂的量。例如，化合物的治疗有效量可以是治疗、缓解或改善疾病的一种或多种症状或病症或延长被治疗的受试者的生存期所需的量。该响应可发生在组织、系统、动物或人类中，并且包括缓解所治疗疾病的病征或症状。根据本文所提供的公开内容，确定有效量完全在本领域技术人员的能力范围内。
例如，化合物或辐射的有效量是导致以下的量：(a)由癌症引起的一种或多种症状的减轻、缓解或消失，(b)肿瘤尺寸的减小，(c)肿瘤的消除，和/或(d)肿瘤的长期疾病稳定(生长停滞)。在肺癌(诸如，非小细胞肺癌)的治疗中，治疗有效量是缓解或消除咳嗽、气促和/或疼痛的量。又如，egfr抑制剂的有效量或治疗有效量是导致egfr活性和/或磷酸化减少的量。egfr活性的减少是本领域技术人员已知的，并且可通过分析egfr固有激酶活性和下游底物磷酸化来确定。
作为剂量所需的本文公开的化合物的治疗有效量将取决于给药途径、被治疗的动物(包括人)的类型以及所考虑的特定动物的物理特征。可调整剂量以实现期望的效果，但将取决于诸如体重、饮食、并发药物的因素以及医学领域技术人员将认识到的其它因素。
用于确定治疗癌症的方法的有效性的各种指标是本领域技术人员已知的。合适指标的示例包括但不限于由癌症引起的一种或多种症状的减轻、缓解或消失，肿瘤尺寸的减小，肿瘤的消除，和/或肿瘤的长期疾病稳定(生长停滞)。
如对于本领域的技术人员将显而易见的那样，待施用的可用体内剂量和具体的施用模式将根据年龄、体重、病痛的严重性、被治疗的哺乳动物物种、采用的具体化合物以及这些化合物所用于的特定用途而变化。有效剂量水平(即，实现期望结果所需的剂量水平)的测定可以由本领域的技术人员使用常规方法如人临床试验和体外研究来完成。
剂量可具有广泛范围，具体取决于期望的效果和治疗适应症。或者，如本领域技术人员所理解的那样，剂量可基于患者的表面积并由患者的表面积进行计算。虽然确切的剂量将以药物为基础确定，但在大多数情况下，可进行关于剂量的一些归纳法。成人患者的日剂量方案可以是例如介于0.01mg和3000mg之间的每种活性成分、优选介于1mg和700mg之间的口服剂量，例如5mg至200mg。剂量可以是在一天或多天过程中的单次给药或一系列两次或更多次给药，如受试者所需。在一些实施方案中，化合物将被施用持续治疗的时间段，例如一周或更长时间，或者数月或数年。
在已针对至少一些条件确立化合物的人类剂量的情况下，可使用那些相同的剂量，或者介于所建立的人类剂量的约0.1％和500％之间、更优选介于约25％和250％之间的剂量。如果未建立人类剂量，如新发现的药物组合物的情况，可从ed50或id50值或由体外或体内研究得到的其它适当值推断合适的人类剂量，如通过动物的毒性研究和功效研究所限定。
在施用药学上可接受的盐的情况下，剂量可以游离碱计算。如本领域的技术人员将理解的那样，在某些情况下，可能需要以超过或甚至远超上述优选剂量范围的量施用本文所公开的化合物，以便有效且积极地治疗特别是侵袭性疾病或感染。
可单独调整剂量和间隔以提供足以维持调节作用或最小有效浓度(mec)的活性部分的血浆水平。每种化合物的mec将不同，但可从体外数据估计。实现mec所需的剂量将取决于个体特征和给药途径。然而，hplc测定或生物测定可用于测定血浆浓度。也可使用mec值测定剂量间隔。组合物应使用在10％-90％、优选介于30％-90％之间、最优选介于50％-90％之间的时间维持血浆水平高于mec的方案来施用。在局部施用或选择性吸收的情况下，药物的有效局部浓度可能与血浆浓度无关。
应当指出的是，主治医师将知道如何以及何时终止、中断或调整由于毒性或器官功能障碍引起的给药。相反，如果临床响应不足(排除毒性)，主治医师也知道将治疗调整到更高水平。在管理所关注的障碍时，所施用剂量的大小将随待治疗的病症的严重性和给药途径而变化。病症的严重性可例如部分地通过标准预后评估方法来评估。此外，剂量和可能的剂量频率也将根据单个患者的年龄、体重和响应而变化。与上述相似的程序可用于兽医学。
可使用已知方法评估本文所公开的化合物的功效和毒性。例如，具体化合物或者共享某些化学部分的化合物的子集的毒性可通过测定对于细胞系(诸如，哺乳动物、优选人类的细胞系)的体外毒性来建立。此类研究的结果通常预测动物诸如哺乳动物或更具体地说人类的毒性。或者，可使用已知方法测定动物模型(诸如，小鼠、大鼠、兔或猴)中特定化合物的毒性。具体化合物的功效可使用若干公认方法建立，诸如体外方法、动物模型或人体临床试验。当选择模型以确定功效时，技术人员可在现有技术状态指导下选择适当的模型、剂量、给药途径和/或方案。
实施例
在以下实施例中更详细地公开了另外的实施方案，这些实施方案不以任何方式旨在限制权利要求的范围。
方案a：咪唑并吡啶酮的一般合成方法
方案b：咪唑并嘧啶酮的一般合成方法
方案c：咪唑并吡嗪的一般合成方法
方案d：咪唑并三嗪的一般合成方法
方案e：咪唑并三嗪的一般合成方法
方案f：嘌呤的一般合成方法
实施例1
n-((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)丙烯酰胺
步骤1：向1h-咪唑-2-羧酸乙酯(5.0g，35.6mmol)在nmp(100ml)中的搅拌溶液中逐滴加入叔丁醇钾(1mthf溶液，39.3ml，39.3mmol)，并且将混合物搅拌15分钟。逐滴加入o-(4-硝基苯甲酰基)羟胺(7.14g，39.3mmol)在nmp(50ml)中的溶液。在室温(rt)下将混合物搅拌2小时。在室温下向混合物中加入2mhcl的二乙醚(7ml)溶液。10分钟后，用二乙醚(100ml)稀释混合物，然后在室温下搅拌30分钟。过滤沉淀的固体并用二乙醚(50ml)洗涤，得到灰白色固体状的乙基1-氨基-1h-咪唑-2-羧酸二盐酸盐(8.12g，35.61mmol，99％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ7.80(s,1h),7.60(s,1h),6.56(brs,2h),4.40(q,j＝7.2hz,2h),1.30(t,j＝7.2hz,3h)；ms(esi)m/z156.02[m+h]+。
步骤2：在室温下向乙基1-氨基-1h-咪唑-2-羧酸二盐酸盐(8.1g，35.61mmol)在thf(100ml)和水(100ml)中的搅拌溶液中加入碳酸氢钠(21.37g，254.4mmol)和氯甲酸乙酯(13.84g，127.5mmol)，并且将混合物搅拌2小时。用乙酸乙酯(2×100ml)稀释混合物。分离有机层，用盐水(50ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱(100-200目，硅胶柱)纯化，使用1％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到黄色浆液状的1-(双(乙氧基羰基)氨基)-1h-咪唑-2-羧酸乙酯(7.8g，26.08mmol，74％)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.21(d,j＝1.6hz,1h),7.11(d,j＝0.8hz,1h),4.40-4.27(m,6h),1.39(t,j＝6.8hz,3h),1.27(t,j＝7.2hz,6h)；ms(esi)m/z300.85[m+h]+。
步骤3：向1-(双(乙氧基羰基)氨基)-1h-咪唑-2-羧酸乙酯(7.9g，26.42mmol)在ipa(50ml)中的搅拌溶液中加入nh4oh溶液(25％，150ml)。在钢制反应釜中将混合物加热至120℃并保持16小时。将混合物浓缩并用甲醇和二乙醚(1:10，100ml)研磨，得到灰白色固体状的咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2,4(1h,3h)-二酮(3.1g，13.15mmol，77％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ7.20(s,1h),7.05(s,1h),5.40(brs,2h)；ms(esi)m/z153.2[m+h]+。
步骤4：在0℃下向咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2,4(1h,3h)-二酮(5.2g，34.2mmol)在水(235ml)中的搅拌溶液中加入nbs(4.26g，23.94mmol)，并在室温下将混合物搅拌1小时。过滤混合物以去除不溶物质，并且用dcm(100ml)洗涤水层。然后将水层浓缩并用甲苯(100ml)蒸馏(共沸)。将所得的固体用甲醇(15ml)研磨，得到灰白色固体状的7-溴咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2,4(1h,3h)-二酮(5.0g，21.74mmol，64％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ7.01(s,1h),5.4(s,2h)。1hnmr(300mhz,dmso-d6,d2oexchange)δ7.18(s,1h)。
步骤5：在室温下向7-溴咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2,4(1h,3h)-二酮(7.5g，32.60mmol)在pocl3(125ml)中的搅拌溶液中加入三乙胺盐酸盐(8.9g，65.206mmol)，然后在密封管中将混合物加热至120℃并保持16小时。将混合物浓缩并用甲苯(2×50ml)蒸馏(共沸)。用乙酸乙酯(2×250ml)稀释残余物，并倾注到nahco3水溶液(600ml)中。分离有机层，在硫酸钠上干燥并减压浓缩。使用5％乙酸乙酯的己烷溶液通过柱色谱(100-200目，硅胶柱)纯化残余物，得到浅黄色固体状的7-溴-2,4-二氯咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪(3g，11.27mmol，34％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.01(s,1h)。
步骤6：向7-溴-2,4-二氯咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪(3.4g，12.73mmol)和3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-胺(2.75g，21.64mmol)在thf(170ml)中的搅拌溶液中加入dipea(7.75ml，43.29mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时。浓缩混合物，并且加入水(100ml)。将所得固体过滤并干燥，得到灰白色固体状的7-溴-2-氯-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(2.8g，7.84mmol，62％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ10.50(brs,1h),7.80(s,1h),7.79(s,1h),3.81(s,3h),3.73(s,3h)；ms(esi)m/z357.86[m+h]+(对于79br)和ms(esi)m/z359.81[m+h]+(对于81br)。
步骤7：向7-溴-2-氯-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(900mg，2.52mmol)在dmf(70ml)中的搅拌且脱气的溶液中加入碳酸铯(4.09g，12.6mmol)，并且将混合物脱气10分钟。向该混合物中加入三甲基环三硼氧烷(1.4ml，10.08mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(230mg，0.252mmol)，然后加入三环己基膦(71mg，0.252mmol)。将混合物进一步脱气10分钟，然后在110℃下加热48小时。将混合物冷却至室温，并通过硅藻土垫过滤。向滤液中加入冷水，并用乙酸乙酯(3×100ml)萃取混合物。将合并的有机层用水(2×50ml)和盐水(1×100ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩。使用55％乙腈的甲酸水溶液(0.1％)通过revelerisc-18反相柱纯化所得残余物，得到2-氯-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(300mg，1.023mmol，41％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ10.18(brs,1h),7.74(s,1h),7.49(s,1h),3.80(s,3h),3.72(s,3h),2.40(s,3h)；ms(esi)m/z294.18[m+h]+。
步骤8：向2-氯-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(400mg，1.365mmol)在nmp(2ml)中的搅拌溶液中加入叔丁基3-氨基二环[1.1.1]戊-1-基氨基甲酸酯(417mg，2.047mmol)，并在140℃下将混合物搅拌3小时。向混合物中加入水(25ml)。将所得固体过滤并干燥，得到灰白色固体状的((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(370mg，0.802mmol，59％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.00(brs,1h),7.84(s,1h),7.36(brs,1h),7.22(s,1h),5.08(d,j＝51.6hz,1h),4.13(brd,j＝5.1hz,1h),3.83(s,3h),3.79-3.64(m,6h),3.51(brd,j＝12.1hz,1h),2.33(s,3h),1.39(s,9h)；ms(esi)m/z462.00[m+h]+。
步骤9：向((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(220mg，0.477mmol)在1,4-二氧杂环己烷(5ml)中的搅拌溶液中加入4mhcl的1,4-二氧杂环己烷(5ml)溶液，并在室温下将该混合物搅拌1小时。将混合物浓缩，用水(25ml)溶解并用乙酸乙酯(25ml)萃取。将水层用nahco3水溶液碱化，并用乙酸乙酯(2×30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并减压浓缩。用戊烷(5ml)研磨所得残余物，得到灰白色固体状的2-((3r,4r)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(120mg，0.332mmol，70％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ7.85(s,1h),7.21(s,1h),4.94(d,j＝53.4hz,1h),3.84(s,3h),3.72-3.56(m,7h),3.40(brd,j＝10.3hz,1h),2.33(s,3h)；ms(esi)m/z362.25[m+h]+。
步骤10：向2-((3r,4r)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(0.12g，0.332mmol)在thf:h2o(1:1，20ml)中的搅拌溶液中加入dipea(0.115ml，0.664mmol)，然后在0℃下加入丙烯酰氯(0.021ml，0.394mmol)的thf(1ml)溶液。在0℃下将混合物搅拌1小时。将混合物用水(30ml)稀释，并用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并减压浓缩。使用55％乙腈的甲酸水溶液(0.1％)通过revelerisc-18反相柱纯化所得残余物，得到灰白色固体状的n-((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)丙烯酰胺(55mg，0.022mmol，40％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.04(brs,1h),8.45(brd,j＝6.6hz,1h),7.85(s,1h),7.23(s,1h),6.35-6.04(m,2h),5.63(dd,j＝2.9,9.2hz,1h),5.13(d,j＝53.4hz,1h),4.58-4.40(m,1h),3.88-3.55(m,10h),2.34(s,3h)；ms(esi)m/z416.32[m+h]+。
实施例2
n-((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)丙烯酰胺
步骤1：按照与实施例1所述相同的工序，并在步骤6中使用(s)-3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-胺以得到(s)-7-溴-2-氯-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(50％收率)，从而合成(s)-7-溴-2-氯-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ10.45(brs,1h),7.90(s,1h),7.80(s,1h),4.68-4.65(m,1h),3.81(s,3h),2.80-2.71(m,3h),2.43-2.41(m,1h),2.35-2.32(m,4h),2.11-2.01(m,1h)；ms(esi)m/z427.11[m+h]+(对于79br)。
步骤2：向二氧杂环己烷(2338μl)(已脱气)中的(s)-7-溴-2-氯-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(100mg，0.234mmol)、乙酸钯(ii)在二氧化硅(5.25mg，0.023mmol)中的离子液体的混合物中加入三甲基环三硼氧烷(176mg，1.403mmol)在脱气二氧杂环己烷(0.2ml)中的溶液，随后加入用氩气脱气的碳酸铯水溶液(234μl，0.351mmol，1.5m)，然后加入1,1'-双(二异丙基膦基)二茂铁(19.56mg，0.047mmol)。将小瓶密封并用氩气脱气3-4次。在90℃下将混合物加热16小时。通过硅藻土垫过滤混合物，并且用甲醇洗涤硅藻土垫。收集滤液，浓缩并使用10％-80％乙腈(含有0.1％甲酸)的水溶液(含有0.1％甲酸)通过反相hplc纯化，冻干后得到(s)-2-氯-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(32mg，0.088mmol，37％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.42(brs,1h),8.15(s,1h),7.35(s,1h),4.93-4.91(m,1h),3.98(s,3h),3.86-3.82(m,1h),3.46-3.41(m,1h),3.25-3.18(m,2h),2.79(s,3h),2.56-2.53(m,1h),2.49(s,3h),2.32-2.30(m,1h)；ms(esi)m/z363.10[m+h]+。
步骤3：向(s)-2-氯-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(50mg，0.138mmol)的nmp(689μl)溶液中加入((3s,4s)-4-氟吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(84mg，0.413mmol)。在140℃的密封管中将混合物加热3小时。将混合物冷却至室温，并使用10％-80％乙腈(含有0.1％甲酸)的水溶液(含有0.1％甲酸)通过反相hplc纯化，得到((3s,4s)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(27mg，0.051mmol，36.9％)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.01(s,1h),8.13(s,1h),7.38(s,1h),7.20(s,1h),5.17-5.04(d,1h),4.73-4.72(m,1h),4.16-4.14(m,1h),3.84(s,3h),3.80-3.51(m,4h),2.83-2.76(m,2h),2.66-2.62(m,1h),2.38-2.36(m,5h),2.33(s,3h),1.98-1.95(m,1h),1.37(s,9h)；ms(esi)m/z531.30[m+h]+。
步骤4：在室温下将((3s,4s)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(24mg，0.045mmol)在4mhcl的二氧杂环己烷(1.5ml，6.00mmol)溶液中的溶液搅拌1小时。蒸发溶剂，并且用乙醚超声处理残余物。过滤混合物，并且收集沉淀，得到盐酸盐形式的2-((3s,4s)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-n-(3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(16mg，0.037mmol，76％)，其无需进一步纯化直接用于下个步骤。ms(esi)m/z431.20[m+h]+。
步骤5：在n2气氛下，于0℃向2-((3s,4s)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-n-(3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(32mg，0.074mmol)的thf(2.47ml)溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(78μl，0.446mmol)。向该混合物中加入丙烯酰氯(6.73mg，0.074mmol)的thf(0.2mlthf)溶液。在0℃下将混合物搅拌10分钟。用二氯甲烷:水稀释混合物。分离有机层，在na2so4上干燥，浓缩并使用10％-80％乙腈(含有0.1％甲酸)的水溶液(含有0.1％甲酸)通过反相hplc纯化，得到n-((3s,4s)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)丙烯酰胺(10mg，0.021mmol，28％)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.07(s,1h),8.47-8.45(m,1h),8.13(s,1h),7.23(s,1h),6.21-6.15(m,2h),5.64-5.61(m,1h),5.21(d,1h),4.70(brs,1h),4.50-4.40(m,1h),3.84(s,3h),3.81-3.61(m,4h),2.82-2.75(m,2h),2.65-2.64(m,1h),2.36-2.26(m,8h),1.98-1.95(m,1h)；ms(esi)m/z485.30[m+h]+。
中间产物1
7-甲基-2,4-双(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪
向3,5-双(甲硫基)-1,2,4-三嗪-6-胺(10.0g，53.19mmol)和2-溴-1,1-二甲氧基丙烷(19.6g，319.14mmol，2次添加)在ch3cn(120ml)中的搅拌溶液中加入(+/-)-樟脑-10-磺酸(3.70gm，15.95mmol)和ms-
实施例3
n-((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)丙烯酰胺
步骤1：在0℃下，向diad(25.42g，125.8mmol)在thf(200ml)中的搅拌溶液中分批加入pph3(33g，125.8mmol)，并在0℃下将混合物搅拌5分钟。在0℃下向该混合物中分批加入3-甲氧基-4-硝基-1h-吡唑(10g，69.93mmol)的thf(300ml)溶液，然后在0℃下加入(r)-1-甲基吡咯烷-3-醇(7.78g，76.92mmol)的thf(100ml)溶液。在室温下将混合物搅拌16小时。将混合物减压浓缩，并且在sio2(5％-10％meoh的ch2cl2溶液)上通过柱色谱纯化残余物，得到浅黄色固体状的(s)-3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-4-硝基-1h-吡唑(13g，82％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ8.72(s,1h),4.82-4.72(m,1h),3.94(s,3h),2.89-2.70(m,3h),2.45-2.25(m,5h),2.18-2.05(m,1h)；ms(esi)m/z227.03[m+h]+。
步骤2：向(s)-3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-4-硝基-1h-吡唑(5g，22.12mmol)在meoh(150ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(10％润湿；2.5g)，并在氢气球(1atm)下将混合物在室温下搅拌3小时。将混合物通过硅藻土垫过滤，并且蒸发滤液，得到粘性浅棕色液体状的(s)-3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-胺(3.46g，80％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ6.99(s,1h),4.55-4.48(m,1h),3.74(s,3h),3.65-3.45(bs,2h),2.73-2.50(m,3h),2.47-2.35(m,1h),2.25-2.13(m,4h),1.93-1.85(m,1h)。
步骤3：将7-甲基-2,4-双(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪(3.0g，13.27mmol，中间产物1)和(s)-3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-胺(3.33g，17.25mmol)的混合物加热至100℃并保持20小时。在sio2(10％-15％甲醇的dcm溶液)上通过柱色谱纯化混合物，得到浅黄色固体状的(s)-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(2.0g，40％)。1hnmr(300mhz,cd3od)δ8.18(s,1h),7.31(s,1h),5.19-5.08(m,1h),4.02(s,3h),3.80-3.66(m,3h),3.50-3.34(m,1h),3.01(s,3h),2.69-2.59(m,1h),2.57(s,3h),2.46(s,3h),2.45-2.33(m,1h)；ms(esi)m/z375.19[m+h]+。
步骤4：向(s)-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(2.0g，5.34mmol)在丙酮:水(2:1，75ml)中的搅拌溶液中加入过硫酸氢钾(3.6g，5.874mmol)，并在0℃下将混合物搅拌1小时。减压去除丙酮。用nahco3水溶液(50ml)淬灭反应，并用etoac(2×50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。在sio2(12％-16％meoh的dcm溶液)上通过柱色谱纯化所得残余物，得到灰白色固体状的n-(3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲基亚磺酰基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(700mg，34％)。1hnmr(300mhz,cd3od)δ8.33(s,1h),7.48(s,1h),4.93-4.90(m,1h),4.01(s,3h),3.51-3.45(m,1h),3.24-3.20(m,1h),3.10-3.02(m,4h),2.88-2.82(m,1h),2.54-2.41(m,7h),2.32-2.22(m,1h)；ms(esi)m/z391.33[m+h]+。
步骤5：向n-(3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲基亚磺酰基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(700mg，1.79mmol)在nmp(1ml)中的搅拌溶液中加入(3r,4r)-4-氟吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(548mg，2.68mmol)，并在密封管中于140℃将该混合物搅拌3小时。向混合物中加入h2o(25ml)，然后用etoac(2×50ml)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。在sio2(8％-12％meoh的dcm溶液)上通过色谱纯化所得残余物，得到浅棕色固体状的((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(250mg，26％)。ms(esi)m/z531.37[m+h]+。
步骤6：在0℃下向((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(250mg，0.471mmol)在1,4-二氧杂环己烷(10ml)中的搅拌溶液中加入4mhcl的1,4-二氧杂环己烷(10ml)溶液，并在室温下将混合物搅拌1小时。将混合物浓缩，用水(25ml)溶解并用etoac(15ml)洗涤。将水层用nahco3水溶液碱化，并用etoac(2×30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。用戊烷(3ml)研磨所得残余物，得到灰白色固体状的2-((3r,4r)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-n-(3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(130mg，64％)。ms(esi)m/z431.37[m+h]+。
步骤7：向2-((3r,4r)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-n-(3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(0.13g，0.302mmol)在thf(5ml)中的搅拌溶液中加入dipea(0.158ml，0.906mmol)，然后在0℃下加入丙烯酰氯(24.5mg，0.272mmol)的thf(1ml)溶液。在0℃下将混合物搅拌5分钟。向混合物中加入h2o(30ml)，然后用etoac(2×50ml)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。通过用ch3cn(0.5ml)研磨，纯化所得残余物，得到灰白色固体状的n-((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)丙烯酰胺(30mg，21％)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.08(brs,1h),8.46(d,j＝6.8hz,1h),8.12(s,1h),7.24(s,1h),6.25-6.10(m,2h),5.63(dd,j＝2.4,9.2hz,1h),5.14(d,j＝50.8hz,1h),4.79-4.71(m,1h),4.52-4.44(m,1h),3.85(s,3h),3.80-3.60(m,4h),2.90-2.80(m,3h),2.35-2.31(m,8h),2.01-1.92(m,1h)；ms(esi)m/z484.85[m+h]+。
实施例4
n-((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)丙烯酰胺
步骤1：在0℃下，向diad(35.3g，174.8mmol)在thf(200ml)中的搅拌溶液中分批加入pph3(46g，174.8mmol)，并在0℃下搅拌5分钟。在0℃下向该混合物中逐滴加入3-甲氧基-4-硝基-1h-吡唑(10g，69.93mmol)的thf(300ml)溶液，然后在0℃下加入1-甲基吡咯烷-3-醇(12.1g，104.9mmol)的thf(100ml)溶液。在室温下将混合物搅拌16小时。将混合物减压浓缩，并且在sio2(5％-10％meoh的ch2cl2溶液)上通过柱色谱纯化所得残余物，得到浅黄色固体状的4-(3-甲氧基-4-硝基-1h-吡唑-1-基)-1-甲基哌啶(7g，41％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ8.73(s,1h),4.10-3.98(m,1h),3.94(s,3h),2.90-2.80(m,2h),2.19(s,3h),2.07-1.87(m,6h)；ms(esi)m/z241.2[m+h]+。
步骤2：向4-(3-甲氧基-4-硝基-1h-吡唑-1-基)-1-甲基哌啶(5g，20.83mmol)在meoh(150ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(10％，2.5g)，并在氢气(1atm)下于室温下将混合物搅拌3小时。将混合物通过硅藻土垫过滤，并且蒸发所得滤液，得到浅棕色粘性液体状的3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-胺(3.5g，80％)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ6.98(s,1h),3.78-3.67(m,4h),3.60-3.30(brs,2h),2.87-2.77(m,2h),2.20(s,3h),2.07-1.74(m,6h)；ms(esi)m/z211.26[m+h]+。
步骤3：将3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-胺(2.8g，13.33mmol)和7-甲基-2,4-双(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪(2.5g，17.25mmol，中间产物1)的混合物加热至100℃并保持20小时。在sio2(10％-15％meoh的ch2cl2溶液)上通过柱色谱纯化混合物，得到浅黄色固体状的n-(3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(1.5g，31％)。1hnmr(300mhz,cd3od)δ8.18(s,1h),7.31(s,1h),4.12-4.03(m,1h),3.97(s,3h),3.14-3.06(m,2h),2.57(s,3h),2.48-2.36(m,8h),2.18-2.08(m,4h)；ms(esi)m/z389.38[m+h]+。
步骤4：在0℃下向n-(3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(1.4g，3.60mmol)在丙酮:水(2:1，120ml)中的搅拌溶液中加入过硫酸氢钾(2.43g，3.96mmol)，并在0℃下将混合物搅拌1小时。减压蒸馏去除丙酮。用nahco3水溶液(50ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。在sio2(12％-16％meoh的ch2cl2溶液)上通过柱色谱纯化所得残余物，得到灰白色固体状的n-(3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲基亚磺酰基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(400mg，27％)。1hnmr(300mhz,cd3od)δ8.30(s,1h),7.48(s,1h),4.20-4.07(m,1h),3.98(s,3h),3.21-3.10(m,2h),3.02(s,3h),2.58-2.42(m,8h),2.23-2.10(m,4h)；ms(esi)m/z405.32[m+h]+。
步骤5：向n-(3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲基亚磺酰基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(400mg，1.79mmol)在nmp(0.2ml)中的搅拌溶液中加入(3r,4r)-4-氟吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(303mg，2.68mmol)，并在密封管中于140℃将该混合物搅拌3小时。向混合物中加入水(25ml)，然后用乙酸乙酯(2×50ml)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。在sio2(8％-12％meoh的ch2cl2溶液)上通过柱色谱纯化所得残余物，得到浅棕色固体状的((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，28％)。ms(esi)m/z545.44[m+h]+。
步骤6：在0℃下向((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.275mmol)在1,4-二氧杂环己烷(5ml)中的搅拌溶液中加入4mhcl的1,4-二氧杂环己烷(5ml)溶液，并在室温下将混合物搅拌1小时。将混合物浓缩，用h2o(15ml)溶解并用etoac(15ml)洗涤。将水层用nahco3水溶液碱化，并用etoac(2×30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并减压浓缩。用戊烷(2ml)研磨所得残余物，得到灰白色固体状的2-((3r,4r)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(70mg，57％)。ms(esi)m/z445.40[m+h]+。
步骤7：向2-((3r,4r)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(0.13g，0.321mmol)在thf(5ml)中的搅拌溶液中加入dipea(0.285ml，1.605mmol)，然后在0℃下加入丙烯酰氯(26.06mg，0.288mmol)的thf(1ml)溶液。在0℃下将混合物搅拌5分钟。用h2o(30ml)稀释混合物，并用etoac(2×50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。通过用ch3cn(0.5ml)研磨，纯化所得残余物，得到灰白色固体状的n-((3r,4r)-4-氟-1-(4-((3-甲氧基-1-(1-甲基哌啶-4-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)吡咯烷-3-基)丙烯酰胺(56mg，35％)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.06(brs,1h),8.44(d,j＝6.8hz,1h),7.93(s,1h),7.23(s,1h),6.26-6.10(m,2h),5.63(dd,j＝2.4,9.2hz,1h),5.15(d,j＝52hz,1h),4.50-4.42(m,1h),4.05-3.92(m,1h),3.84(s,3h),3.82-3.55(m,4h),2.89-2.80(m,2h),2.35(s,3h),2.19(s,3h),2.08-1.84(m,6h)；ms(esi)m/z499.05[m+h]+。
实施例5
n-((3r,4r)-1-(4-((1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)丙烯酰胺
步骤1：向3-甲氧基-4-硝基-1h-吡唑(10g，69.93mmol)在dmf(100ml)中的搅拌溶液中加入k2co3(29g，210mmol)，然后在室温下分批加入2-氯-n,n-二甲基乙胺.hcl(12.1g，83.9mmol)，并在70℃下将混合物搅拌16小时。向该混合物中加入h2o(25ml)，然后用etoac(2×250ml)萃取该混合物。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。在sio2(50％etoac的己烷溶液)上通过柱色谱纯化所得残余物，得到浅黄色固体状的2-(3-甲氧基-4-硝基-1h-吡唑-1-基)-n,n-二甲基乙醇-1-胺(9.1g，61％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ8.45(s,1h),4.10(t,j＝6.3hz,2h),3.93(s,3h),2.63(t,j＝6.3hz,2h),2.16(s,6h)。ms(esi)m/z215.03[m+h]+。
步骤2：向2-(3-甲氧基-4-硝基-1h-吡唑-1-基)-n,n-二甲基乙醇-1-胺(4g，18.69mmol)在meoh(120ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(10％，2.0g)，并在h2(1atm)下于室温下将混合物搅拌3小时。将混合物通过硅藻土垫过滤，并且蒸发所得滤液，得到浅棕色粘性液体状的1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-胺(2.6g，75％)。ms(esi)m/z185.15[m+h]+。
步骤3：将1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-胺(2.6g，11.5mmol)和7-甲基-2,4-双(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪(2.75g，14.95mmol)的混合物加热至100℃并保持16小时。在sio2(5％meoh的ch2cl2溶液)上通过柱色谱纯化混合物，得到浅黄色固体状的n-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(1.5g，36％)。1hnmr(400mhz,cd3od)δ8.12(s,1h),7.30(s,1h),4.18(t,j＝6.4hz,2h),3.98(s,3h),2.91(t,j＝6.4hz,2h),2.57(s,3h),2.46(s,3h),2.39(s,6h)；ms(esi)m/z363.34[m+h]+。
步骤4：在0℃下向n-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(1.45g，4mmol)在丙酮:水(2:1，70ml)中的搅拌溶液中加入过硫酸氢钾(2.7g，4.4mmol)，并在0℃下将混合物搅拌1小时。减压去除丙酮。用nahco3水溶液(50ml)淬灭反应，并且过滤所得固体。将固体溶解于冷1nnaoh溶液中，并用10％meoh的dcm(2×100ml)溶液萃取。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩，得到灰白色固体状的n-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲基亚磺酰基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(500mg，28％)。1hnmr(400mhz,cd3od)δ8.26(s,1h),7.47(s,1h),4.16(t,j＝6.8hz,2h),3.99(s,3h),3.03(s,3h),2.80(t,j＝6.8hz,2h),2.53(s,3h),2.30(s,6h)；ms(esi)m/z379.28[m+h]+。
步骤5：向n-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-基)-7-甲基-2-(甲基亚磺酰基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(500mg，1.32mmol)在nmp(0.25ml)中的搅拌溶液中加入(3r,4r)-4-氟吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(408mg，1.98mmol)，并在140℃下将混合物搅拌4小时。向混合物中加入h2o(25ml)，然后用etoac(2×50ml)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。在sio2(8％-12％meoh的ch2cl2溶液)上通过柱色谱纯化所得残余物，得到浅黄色固体状的((3r,4r)-1-(4-((1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(230mg，34％)。ms(esi)m/z519.41[m+h]+。
步骤6：在0℃下向((3r,4r)-1-(4-((1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(230mg，0.44mmol)在1,4-二氧杂环己烷(10ml)中的搅拌溶液中加入4mhcl的1,4-二氧杂环己烷(10ml)溶液，并在室温下将混合物搅拌1小时。过滤所得固体，并用et2o(5ml)洗涤。将所得固体溶解于h2o(25ml)中。将混合物用nahco3水溶液碱化，并用etoac(2×30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并减压浓缩。用戊烷(3ml)研磨所得残余物，得到灰白色固体状的2-((3r,4r)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-n-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(95mg，51％)。1hnmr(400mhz,cd3od)δ8.17(s,1h),7.17(s,1h),5.01(d,j＝52.8hz,1h),4.15(t,j＝6.4hz,2h),4.13-3.93(m,4h),3.90-3.78(m,2h),3.72-3.52(m,2h),2.80(t,j＝6.4hz,2h),2.40(s,3h),2.30(s,6h)；ms(esi)m/z419.31[m+h]+。
步骤7：向2-((3r,4r)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-n-(1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(95mg，0.227mmol)在thf(5ml)中的搅拌溶液中加入dipea(0.12ml，0.681mmol)，然后在0℃下加入丙烯酰氯(0.019g，0.204mmol)在thf(1ml)中的溶液，并在0℃下将混合物搅拌5分钟。用h2o(30ml)稀释混合物，并用etoac(2×30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。通过用ch3cn(0.5ml)研磨，纯化所得残余物，得到白色固体状的n-((3r,4r)-1-(4-((1-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-甲氧基-1h-吡唑-4-基)氨基)-7-甲基咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)丙烯酰胺(35mg，32％)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.03(brs,1h),8.46(d,j＝6.8hz,1h),7.97(s,1h),7.23(s,1h),6.26-6.10(m,2h),5.63(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),5.13(d,j＝50.4hz,1h),4.52-4.43(m,1h),4.06(d,j＝6.4hz,2h),3.84(s,3h),3.83-3.70(m,3h),3.60(d,j＝11.2hz,1h),2.60(brs,2h),2.35(s,3h),2.17(s,6h)；ms(esi)m/z472.96[m+h]+。
实施例6
n-((3r,4r)-1-(9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-6-((3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)氨基)-9h-嘌呤-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)丙烯酰胺
步骤1：在-78℃下向2,4,6-三氯-5-硝基嘧啶(2.0g，8.810mmol)在异丙醇(60ml)中的搅拌溶液中加入二环[1.1.1]戊-1-胺盐酸盐(1.04g，8.810mmol)的异丙醇溶液，并且在-78℃下将混合物搅拌30分钟。使混合物温热至室温，然后在室温下加入n,n-二异丙基乙胺(2.27g，17.62mmol)。将混合物再搅拌30分钟。反应完成后，减压去除溶剂并干燥，得到粘性固体状的n-(二环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氯-5-硝基嘧啶-4-胺(2.0g，7.29mmol，84％)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.96(s,1h),2.60(s,1h),2.25(s,6h)。
步骤2：向n-(二环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氯-5-硝基嘧啶-4-胺(2.0g，7.29mmol)在乙酸(15ml)中的搅拌溶液中加入铁粉(2.03g，36.45mmol)，并且在室温下将混合物搅拌3小时。将混合物通过硅藻土过滤，并将有机部分浓缩。所得残余物用乙酸乙酯(100ml)稀释，用水(50ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)和盐水(50ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩，得到灰白色固体状的n4-(二环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氯嘧啶-4,5-二胺(1.64g，6.72mmol，92％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ5.47(s,1h),3.22(s,2h),2.54(s,1h),2.20(s,6h)。
步骤3：向n4-(二环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氯嘧啶-4,5-二胺(1.6g，6.55mmol)的三乙基原甲酸酯(40ml)溶液中加入12n盐酸水溶液(5ml)，并在室温下将混合物搅拌24小时。用冰冷的水淬灭反应，并用乙酸乙酯萃取(3×50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50ml)洗涤，干燥并浓缩，得到固体，将该固体进一步用乙醚(10ml)洗涤并干燥，得到灰白色固体状的9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氯-9h-嘌呤(1.5g，5.90mmol，91％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.01(s,1h),2.79(s,1h),2.52(s,6h)；ms(esi)m/z255.03[m+h]+(对于35cl)。
步骤4：在微波瓶中，向9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-2,6-二氯-9h-嘌呤(1.6g，6.29mmol)在n-甲基-2-吡咯烷酮(40ml)中的搅拌溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(1.62g，12.58mmol)和3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-胺(800mg，6.29mmol)。在微波照射下，将混合物在190℃下保持30分钟。用饱和氯化铵水溶液(50ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。将合并的有机层用水(50ml)和盐水(50ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩。使用0-50％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液，通过硅胶色谱纯化所得残余物，得到灰白色固体状的9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-2-氯-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)-9h-嘌呤-6-胺(1.8g，5.21mmol，83％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.0(s,1h),7.69(s,1h),7.25(s,1h),3.97(s,3h),3.78(s,3h),2.72(s,1h),2.46(s,6h)；ms(esi)m/z346.2[m+h]+(对于35cl)。
步骤5：在密封管中于140℃下向9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-2-氯-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)-9h-嘌呤-6-胺(1.8g，5.21mmol)在n-甲基-2-吡咯烷酮(30ml)中的搅拌溶液中添加4-氟吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(反式，外消旋，1.06g，5.21mmol)，并保持3小时。用饱和氯化铵溶液(100ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。将合并的有机层用水洗涤(100ml)、盐水(100ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并浓缩，得到灰白色固体状的(1-(9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-6-((3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)氨基)-9h-嘌呤-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(2.0g(粗)，3.89mmol，75％)。ms(esi)m/z514.07[m+h]+。
步骤6：向(1-(9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-6-((3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)氨基)-9h-嘌呤-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(2.0g，3.89mmol)在1,4-二氧杂环己烷(20ml)中的搅拌溶液中加入4mhcl的1,4-二氧杂环己烷(15ml)溶液，并且在室温下将该混合物搅拌2小时。将混合物浓缩并用二乙醚(10ml)研磨，得到2-(3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)-9h-嘌呤-6-胺盐酸盐。将所得残余物用水稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)碱化，并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。将合并的有机层用水(50ml)和盐水(50ml)洗涤。将有机层在硫酸钠上干燥并浓缩，得到灰白色固体状的2-(3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)-9h-嘌呤-6-胺(800mg，1.93mmol，50％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ7.94(s,1h),7.82(s,1h),7.75(s,1h),5.05-4.79(m,1h),3.84-3.76(m,5h),3.75-3.67(m,4h),3.66-3.56(s,3h),3.42(brd,j＝11.4hz,1h),2.69(s,1h),2.38(s,6h)；ms(esi)m/z414.34[m+h]+。
步骤7：在0℃下向2-(3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-n-(3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)-9h-嘌呤-6-胺(800mg，1.93mmol)在四氢呋喃:水(1:1，30ml)混合物中的搅拌溶液中加入丙烯酰氯(1.5ml，1.544mmol)的四氢呋喃(1.5ml)溶液。在0℃下将混合物搅拌1小时。然后将混合物用水(30ml)稀释，并用乙酸乙酯(3×30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并减压浓缩。使用55％乙腈的甲酸水溶液(0.1％)通过revelerisc-18反相柱纯化所得残余物，得到灰白色固体状的外消旋n-(1-(9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-6-((3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)氨基)-9h-嘌呤-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)丙烯酰胺(310mg，0.663mmol，34％)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.82(s,1h),7.41(s,1h),7.12(s,1h),6.36(d,j＝16.8hz,1h),6.15-6.06(m,2h),5.69(d,j＝10.2hz,1h),5.23(d,j＝51.6hz,1h),4.73(s,1h),3.96(s,3h),3.95-3.82(m,4h),3.75(s,3h),2.67(s,1h),2.41(s,6h)；ms(esi)m/z468.31[m+h]+。通过手性sfc(chiralpak-ad-h(250x4.6)mm:5微米，100％乙醇)纯化上述外消旋化合物，得到灰白色固体状的n-((3r,4r)-1-(9-(二环[1.1.1]戊-1-基)-6-((3-甲氧基-1-甲基-1h-吡唑-4-基)氨基)-9h-嘌呤-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)丙烯酰胺(92mg)。ms(esi)m/z468.31[m+h]+。
实施例7
n-((3r,4r)-1-(7-乙基-4-((3-甲氧基-1-((r)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)丙烯酰胺
步骤1：在75℃下向丁醛(100g，1.39mol)和ms
步骤2：向3,5-双(甲硫基)-1,2,4-三嗪-6-胺(5.1g，27.12mmol，参见合成中间产物1中的步骤4)和2-溴-1,1-二甲氧基丁烷(16.0g，81.38mmol)在ch3cn(50ml)中的搅拌溶液中加入(+/-)-樟脑-10-磺酸(0.630g，2.71mmol)和h2o(48ml，2.71mmol)。在85℃下将混合物加热16小时。将混合物冷却至室温，并减压浓缩，得到粗残余物。将残余物用etoac稀释，并用h2o(2×15ml)洗涤。将有机层在na2so4上干燥，减压浓缩，并且在sio2(40％etoac的己烷溶液)上通过柱色谱纯化所得残余物，得到浅棕色固体状的7-乙基-2,4-双(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪(2.9g，44％)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.42(s,1h),2.94(q,j＝7.8hz,2h),2.66(s,3h),2.60(s,3h),1.36(t,j＝7.8hz,3h)，ms(esi)m/z241.52[m+h]+。
步骤3：将7-乙基-2,4-双(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪(2.9g，12.08mmol)和(r)-3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-胺(5.32g，27.0mmol，按照实施例3所述的工序合成)的混合物在100℃下加热20小时。在sio2(10％-15％meoh的dcm溶液)上通过柱色谱纯化混合物，得到浅黄色固体状的(r)-7-乙基-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-2-(甲硫基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(1.25g，27％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.78(s,1h),7.91(s,1h),7.39(s,1h),4.95-4.80(m,1h),4.08(q,j＝5.1hz1h),3.83(s,3h),3.16(d,j＝5.1hz,2h),3.20-2.95(m,2h),2.84(q,j＝7.2hz,2h),2.49(s,3h),2.48(s,3h),2.20-2.11(m,1h),1.28(t,j＝7.2hz,3h)；ms(esi)m/z389.45[m+h]+。
步骤4：向(r)-7-乙基-n-(3-甲氧基-1-(1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-2-(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(1.25g，3.22mmol)在丙酮:水(2:1，50ml)中的搅拌溶液中加入过硫酸氢钾(1.58g，2.58mmol)，并在0℃下将混合物搅拌1小时。减压去除丙酮。用nahco3水溶液(15ml)淬灭反应，并用etoac(2×50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩，得到灰白色固体状的7-乙基-n-(3-甲氧基-1-((r)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-2-(甲基亚磺酰基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(700mg，54％粗产物)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.29(d,j＝3.0hz,1h),8.10(brs,1h),7.41(s,1h),4.74-4.69(m,1h),3.98(s,3h),3.03-2.95(m,2h),3.00(s,3h),2.91-2.78(m,3h),2.62-2.52(m,1h),2.50-2.22(m,1h),2.40(s,3h),2.12-2.02(m,1h),1.38(t,j＝7.5hz,3h)；ms(esi)m/z405.61[m+h]+。
步骤5：向7-乙基-n-(3-甲氧基-1-((r)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)-2-(甲基亚磺酰基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(450mg，1.113mmol)在nmp(1ml)中的搅拌溶液中加入((3r,4r)-4-氟吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(568mg，2.784mmol)，并在密封管中于140℃下将混合物搅拌4小时。向混合物中加入h2o(15ml)。用etoac(2×50ml)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。在sio2(5％-10％meoh的dcm溶液)上通过柱色谱纯化所得残余物，得到浅棕色固体状的((3r,4r)-1-(7-乙基-4-((3-甲氧基-1-((r)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(250mg，41％)。ms(esi)m/z545.58[m+h]+。
步骤6：在0℃下向((3r,4r)-1-(7-乙基-4-((3-甲氧基-1-((r)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(0.520g，0.955mmol)在1,4-二氧杂环己烷(5ml)中的搅拌溶液中加入4mhcl的1,4-二氧杂环己烷(5ml)溶液，并在室温下将混合物搅拌1小时。将混合物浓缩，溶解于h2o(2.5ml)中并用etoac(15ml)洗涤。将水层用nahco3水溶液碱化，并用etoac(2×30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。在sio2(3％-5％meoh的dcm溶液)上通过柱色谱纯化所得残余物，得到灰白色固体状的2-((3r,4r)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-7-乙基-n-(3-甲氧基-1-((r)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(250mg，59％)。ms(esi)m/z445.14[m+h]+。
步骤7：向2-((3r,4r)-3-氨基-4-氟吡咯烷-1-基)-7-乙基-n-(3-甲氧基-1-((r)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺(0.250g，0.563mmol)在thf(5ml)中的搅拌溶液中加入dipea(0.58ml，3.378mmol)，然后在0℃下加入丙烯酰氯(0.0352ml，0.422mmol)溶液。在0℃下将混合物搅拌5分钟。加入h2o(10ml)，并用etoac(2×50ml)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，在na2so4上干燥并减压浓缩。在sio2(5％-10％meoh的dcm溶液)上通过柱色谱纯化所得残余物，并用etoac(0.1ml)的戊烷(5.0ml)溶液研磨，得到绿色固体状的n-((3r,4r)-1-(7-乙基-4-((3-甲氧基-1-((r)-1-甲基吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-基)氨基)咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基)-4-氟吡咯烷-3-基)丙烯酰胺(30mg，11％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.10(s,1h),8.47(d,j＝6.6hz,1h),8.12(s,1h),7.25(s,1h),6.27-6.10(m,2h),5.63(dd,j＝9.0,2.4hz,1h),5.15(d,j＝51.9hz,1h),4.62-4.39(m,1h),4.55-4.40(m,1h),3.86(s,3h),3.80-3.55(m,4h),2.82-2.65(m,5h),2.60-2.20(m,5h),2.10-1.90(m,1h),1.40-1.28(t,3h)；ms(esi)m/z499.40[m+h]+。
用于制备式(i)的化合物或其药学上可接受的盐的一般方法和条件在本文中示于方案a-f中。可使用方案a-f所示方法中的一种或多种制备的化合物包括以下：
实施例a
egfr生化酶分析规程：
使用cisbiohtrf(均相时间分辨荧光)kineasetk(#62tkopec)测定化合物对egfr(t790m/l858r)的抑制活性。酶反应含有重组n端gst标记的人egfr(t790m/l858r)，其使htrf酪氨酸激酶生物素酰化底物磷酸化。
该底物序列是cisbio专有的。将测试化合物在100％(v/v)dmso中连续稀释，然后从echo555(labcyte公司)声学分配到黑色corning1536孔测定板中。在每孔3μl的总反应体积中进行激酶活性测定。1.5μl的酶反应包含1.6nmegfr(t970m，l858r)、1mmdtt和10mmmgcl2。1.5μl底物混合物包含1μmtk底物、30μmatp、1mmdtt和10mmmgcl2。温育50分钟后，加入3μl终止混合物，该终止混合物包含稀释在试剂盒检测缓冲液中的250nmstrep-xl665和tkab-cryptate。将板温育1小时，然后使用标准htrf设置在pherastar上读数。氨基酸696端包含t790m和l858r突变的n端gst标记的重组人egf受体购自millipore公司。
式(i)的化合物在本测定中是有活性的，如表1所示，其中a＝ic50≤10nm；b＝ic50>10nm且<100nm；并且c＝ic50≥100nm。
表1
实施例b
p-egfr：靶标接合测定(基于细胞的磷酸-egfr测定)蛋白质印迹法
使用如下细胞系：a431(wt)、h1975(l858r/t790m)、pc9(e746-a750缺失)：使细胞在12孔板中生长至90％汇合度，然后在低血清(0.1％fbs)培养基中温育16-18小时。接着用在低血清(0.1％fbs)培养基中的不同浓度的测试化合物(5、1.25、0.31、0.078、0.020μm)或0.5％dmso处理细胞1小时。然后用50ng/mlegf刺激a431细胞15分钟。处理后，用冷pbs洗涤细胞单层，并通过刮到补充有完全蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的50μl冷细胞提取缓冲液中立即裂解。通过bca测定法测定裂解液蛋白质浓度，并通过4％-12％梯度sds-page分离每种裂解物约50μg，转移到硝酸纤维素膜上并用特异性抗体探测。通过蛋白质印迹检测系统可视化磷蛋白信号，或使用odysseyinfraredimaging(li-corbiosciences公司(lincoln,ne))进行定量。为评估磷酸化信号传导，用磷酸和egfr(y1068)、akt、ps6rp和erk1/2的总抗体对印迹进行免疫检测。磷酸化信号被归一化为每个生物标志物的总蛋白质表达。结果表示为％dmso对照。使用具有可变hill斜率的s形曲线分析程序(graphpadprism第5版)拟合归一化数据，以确定ec50值。
抗体：所有一抗均购自cellsignaling公司(danvers,ma)，并以1:1000的比例使用。二抗以1:20,000的比例使用。山羊抗小鼠iggirdye800cw抗体购自licorbiosciences公司(lincoln,ne)，并且山羊抗兔iggalexafluor680购自invitrogen公司(carlsbad,ca)。
实施例c
egfr细胞增殖分析
细胞系：a431(wt)、h1975(l858r/t790m)、pc9(e746-a750缺失)：使a431细胞在补充有10％fbs(hyclone公司(southlogan,ut)和1％青霉素-链霉素(p/s，lonza公司(walkersville,md))的dmem(invitrogen公司(carlsbad,ca))中生长。使h1975细胞在补充有10％fbs和1％p/s的rpmi1640(invitrogen公司)中生长。收集培养物(manassas,va)，并且pc-9细胞购自日本。将所有细胞保持为单层培养物并于37℃下在潮湿的5％co2培养箱中繁殖。所有细胞均根据建议进行培养。
为了描述egfr抑制剂在各种致瘤细胞系中的作用，在细胞增殖测定中测试表现出不同egfr突变状态的细胞系。使用celltiter-
评估的每种化合物均制备为dmso储液(10mm)。在每个平板上一式两份测试化合物，其具有11点连续稀释曲线(1:3稀释)。从化合物稀释板向细胞板添加复合治疗物(50μl)。最高化合物浓度为1μm或10μm(最终)，最终dmso浓度为0.3％(#d-5879，sigma公司(stlouis,mo))。然后将平板在37℃、5％co2下温育。复合治疗3-5天后，以两种方式之一制备celltiter-
式(i)的化合物在本测定中是有活性的，如表2所示，其中a＝ic50≤50nm；b＝ic50>50nm且<300nm；并且c＝ic50≥300nm。
表2
此外，尽管出于清楚和理解的目的已通过举例说明和实施例对上述内容进行了详细描述，但本领域的技术人员应当理解，在不脱离本发明的实质的情况下，可进行许多和各种修改。因此，应当清楚地理解，本文所公开的形式仅仅是示例性的，并非旨在限制本公开内容的范围，而是还覆盖了与本发明的真实范围和实质相关的所有修改形式和替代形式。