本发明属于制药领域，提供一种4-N-(2-羟基-3，5-二氯苄基)氨基水杨酸的二氢烟酸酯衍生物及其药物用途。
背景技术：
脑卒中具有高死亡率、高致残率、高复发率等特点，严重危害人类健康。由于脑组织结构精细复杂，对缺血缺氧损伤特别敏感且脆弱，迄今临床上少见疗效确切的治疗药物。研究显示：脑缺血条件下，兴奋性氨基酸(如谷氨酸)过度释放，引起N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDAR)过度激活，通过NMDAR-PSD-95-nNOS的信号途径病理性释放一氧化氮(NO)(Science,1999,284,1845-1848；Nature Medicine 2010,16,1439-1443)。NO本身具有较强的氧化性，释放过多或清除功能不足时，会直接损伤周围细胞表面脂质和内部结构。另一方面，脑缺血再灌注过程中生成了大量的氧阴离子自由基(O2-.)，和NO反应生成超氧亚硝酸阴离子自由基(ONOO-.)，后者作为稳定的强氧化物，将对细胞造成更为严重的损伤(Cell.Mol.Life Sci.,2004,61,657-668)。因此，NMDAR介导的nNOS激活是神经元兴奋性毒性发生的关键事件，围绕这两个靶分子开发了许多药物，但由于NMDAR和nNOS均具有非常重要的生理功能，对它们的直接干预往往导致严重的副作用(Curr.Opin.Pharmacol.,2006,6,53-60)。如果不直接干预NMDAR或nNOS，选择性阻断NMDAR与PSD-95(Science,2002,298,846-850)或者nNOS与PSD-95的偶联(Nature Medicine 2010,16,1439-1443)，可以在不影响NMDAR和nNOS生理功能的前提下抑制脑缺血后NO的病理性释放，可能获得没有明显副作用的安全有效的抗脑卒治疗药物，而nNOS与PSD-95的偶联处在整个信号通路的下游，是更为理想药物作用靶点(Neuropharmacology,2003,45,738-754)。
nNOS-PSD-95解偶联剂苄基苯胺衍生物4-N-(2-羟基-3，5-二氯苄基)氨基水杨酸(ZL006，化合物2)，能够在不影响NMDAR、nNOS生理功能的前提下，减少NMDAR介导的NO的病理性释放，对谷氨酸刺激下的神经细胞损伤显示出明显的神经保护作用，改善大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注引起的动物神经缺陷症状、缩小梗死容积(Nature Medicine 2010,16,1439–1443)。ZL006避免了直接干预NMDAR或/和nNOS可能引起的学习记忆障碍、行为异常等副作用，具有更好的安全性，对于脑缺血损伤相关疾病的治疗具有重要意义(Nature.Rev.Neurol.,2011,7,61)。
ZL006为代表的nNOS-PSD-95解偶联剂的作用靶点在中枢神经系统，该类药物需要具有较好的中枢神经系统分布。但由于这类解偶联剂具有较高的亲水性，不利于药物中枢神经系统分布。ZL006乙酯(化合物3)虽然能够增加药物在中枢神经系统分布，但是在脑组织中产生的ZL006没有明显增加(Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters 2016,158:494-506)。二氢烟酸酯前药能够改善药物中枢神经系统分布。本发明人研究发现，如果只是将ZL006简单的与二氢烟酸以酰胺键连接，获得的化合物(化合物4)在体内无法释放出ZL006，而将ZL006简单的与二氢烟酸以酯键连接，获得的化合物(化合物5)缺乏稳定性，在体内迅速释放出ZL006，无法达到改善药物中枢神经系统分布的目的。为此，本发明人通过乙二醇为联结基团，将ZL006与二氢烟酸以酯键连接，获得的化合物(1)既能够在体内具有一定的稳定性，又能够在中枢释放出ZL006，与ZL006乙酯相比，能够明显增加ZL006在脑组织中的浓度，显示了良好的脑靶向作用。
技术实现要素：
本发明的目的：本发明提供一种二氢烟酸酯衍生物及其应用，该衍生物具有良好的脑靶向作用，可用于制备治疗脑卒中药物。
技术方案：一种二氢烟酸酯衍生物，为4-N-(2-羟基-3，5-二氯苄基)氨基水杨酸的二氢烟酸酯衍生物，结构如式1所示：
上述二氢烟酸酯衍生物或其药学上可接受的盐在制备治疗脑卒中药物中的应用。
上述二氢烟酸酯衍生物或其药学上可接受的盐在制备治疗慢性病理性疼痛药物中的应用。
上述二氢烟酸酯衍生物或其药学上可接受的盐在制备治疗神经退行性疾病药物中的应用。
一种治疗脑卒中的药物，有效成分为上述的二氢烟酸酯衍生物。
一种治疗慢性病理性疼痛的药物，有效成分为上述的二氢烟酸酯衍生物。
一种治疗神经退行性疾病的药物，有效成分为上述的二氢烟酸酯衍生物。
本发明的化合物或其药学上可接受的盐还可制成各种制剂，包含但不限于片剂、胶囊、注射液、冻干粉等。
有益效果：本发明所述的4-N-(2-羟基-3，5-二氯苄基)氨基水杨酸的二氢烟酸酯衍生物，具有良好的脑靶向作用。可用于制备治疗脑卒中、神经病理性疼痛、炎性病理性疼痛的药物。同时，由于该类药物独特的作用机制，还可用于制备治疗癫痫、情感障碍性疾病以及各种神经退行性疾病的药物。
附图说明
图1：尾静脉注射ZL006衍生物的脑组织中ZL006浓度比较图。式1化合物的脑组织中ZL006浓度明显高于其他ZL006衍生物。
图1小鼠尾静脉给药化合物1、化合物2(ZL006)、化合物3(ZL006乙酯)、化合物4、化合物5后15分钟、30分钟、60分钟，脑组织中ZL006的浓度。
具体实施方式
以下实施例详细描述了尾静脉注射本发明的目标化合物和其他ZL006衍生物的脑组织中ZL006浓度比较，可使本专业技术人员可全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1 4-N-(2-羟基-3，5-二氯苄基)氨基水杨酸的二氢烟酸酯衍生物(化合物1)的合成
目标化合物的合成路线如下：
1)4-[N-(3,5-二氯-2-羟基苄)-N-叔丁氧羰基]氨基-2-羟基苯甲酸(Boc-ZL006)的合成
在50mL茄形瓶中加入5-(3,5-二氯-2-羟基苄)氨基-2-羟基苯甲酸(1.0g,3.0mmol)，4-二甲氨基吡啶(0.37g,3.0mmol)，二碳酸二叔丁酯(0.65g,3.0mmol)以及二氯甲烷(3.0mL)，室温搅拌6h。反应结束后，加水(20mL)，乙酸乙酯(20mL)萃取3次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到白色的5-[N-(3,5-二氯-2-羟基苄基)-N-叔丁氧羰基]氨基-2-羟基苯甲酸(1.2g，产率91％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.83(s,1H),7.77(d,J＝8.43Hz,1H),7.69(s,1H),6.93(s,1H),6.84(d,J＝7.69Hz,1H),5.72(s,1H),5.68(s,1H),4.85(s,2H),1.26(s,9H).
MS(ESI):m/z 427.1[M–H]-.
2)4-[N-(3,5-二氯-2-羟基苄)-N-叔丁氧羰基]氨基-2-羟基苯甲酸2-(N-甲基二氢烟酸酯基)乙酯(Boc-ZL006二氢烟酸酯)的合成
在100mL茄形瓶中，加入化合物Boc-ZL006 1.07g(2.5mmol),碳酸钾1.66g(12mmol)，碘化钾1.66g(10.0mmol)，N,N-二甲基甲酰胺50mL，55℃搅拌30min后，加入N-甲基二氢烟酸2-溴乙醇2.9g(16.0mmol)，55℃回流8h。反应结束后，过滤，滤液加三氟醋酸(1.7g,15mmol)，室温下搅拌1h。加水用500mL乙酸乙酯多次萃取，收集乙酸乙酯，分别用饱和碳酸氢钠溶液洗2次，水洗1次，饱和氯化钠溶液1次。加入无水硫酸钠，过滤，旋干，经硅胶柱层析分离，得到黄色状物0.30g，产率24.3％。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)7.80(s,1H),7.74(d,J＝8.43Hz,1H),7.67(s,1H),7.43(d,1H),6.91(s,1H),6.47(m,1H),6.84(d,J＝7.68Hz,1H),5.75(s,1H),5.67(s,1H),4.86(s,2H),4.95-4.85(m,1H),3.29(s,2H).
实施例2脑组织中ZL006的浓度测定
1.样品溶液的配制
称取ZL006二氢烟酸酯(化合物1)样品20mg，溶于极少量DMSO中(少于总体积1％)，加入吐温80(少于总体积5％)，于热水浴中后加入生理盐水定容至20mL，配制成浓度为1mg·mL-1溶液。
2.试验方法
取ICR小鼠18只，体重20g左右，随机分成3组，每组6只，尾静脉给药ZL006二氢烟酸酯(化合物1)，剂量为20mg·kg-1。小鼠禁食不禁水12h，实验期间自由饮水。给药后分别于15min、30min、1h处死小鼠。解剖取出脑组织，用生理盐水漂洗组织表面的血渍，用滤纸将组织表面的水分吸干，称重。加入重量比提及1:3的生理盐水(即1g脑组织加入3mL生理盐水)，电动匀浆器将组织制备成匀浆液。超声10min，排除气泡。于1.5mL的离心管中精密吸取100μL脑组织匀浆液，随后加入精密吸取的10μL内标溶液以及300μL甲醇作为沉淀剂，于涡旋振荡器上混匀涡1min，于离心机中12000r·min-1，离心10min，精密吸取上清液150μL加入50μL超纯水，取10μL溶液进样，采用Agilent 1200SL/6410B高效液相色谱/质谱仪检测，记录其色谱图像。应用色谱工作站得到ZL006和内标的峰面积比值，代入随行标准曲线中，求得ZL006的脑组织浓度。
同法测定小鼠尾静脉给药ZL006(化合物2)、ZL006乙酯(化合物3)、化合物4、化合物5脑组织中ZL006的浓度。测定结果见图1。小鼠尾静脉注射本发明的目标化合物1后脑组织中ZL006的浓度明显高于其他ZL006衍生物。