具有改善的玻璃体内半衰期的组合物及其用途的制作方法

本申请要求2016年2月8日提交的美国临时申请号62/292,817的权益，该申请通过引用并入本文。发明背景视网膜疾病和病况影响美国的大量人口。视网膜疗法的玻璃体内(ivt)施用是治疗视网膜疾病的常用施用方式。治疗眼后段的疾病需要将治疗剂以治疗浓度在眼后房(即玻璃体液)中保留足够长的时间，以便以可忍受的给药间隔递送有效的靶标抑制持续时间，同时还能够充分扩散到病变组织内的靶标处，从而提供足够的靶标占据来提供治疗效果。对于视网膜疾病，治疗剂通常必须通过玻璃体-视网膜界面扩散以接近病变组织中的预定靶标，并且根据具体的适应症，治疗剂可能需要深入穿透至视网膜组织中，包括到达视网膜色素上皮(rpe)层，以到达疾病部位的预定靶标处。具有紧凑形状和8-15kda的典型分子量范围的适体具有对于视网膜穿透而言理想的分子量，但其由于分子量和重量较低而迅速从玻璃体中被清除。为了增加玻璃体保留，适体通常与高分子量peg(例如40kda)缀合，高分子量peg由于其较大的流体动力学半径而降低了适体的清除速率，且不会过大损害适体穿透视网膜组织的能力。然而，peg确实大大增加了药物制剂的粘度，这限制了药物可以存在于合适制剂中的最大浓度。鉴于通过玻璃体内注射仅可施用较小的体积，使用高分子量peg限制了在单次注射中可施用于眼睛的潜在最大剂量。本文公开的组合物和方法提供了这样的分子，其通过减慢清除速率而展现出改善的ivt半衰期，同时保持允许良好的视网膜组织穿透的分子大小。在一些实例中，本文公开的组合物和方法提供了玻璃体清除速率通过与玻璃体组分结合而降低的分子。技术实现要素：本公开内容提供了寡核苷酸和其他分子，其特异性结合玻璃体的组分，从而降低这些分子的清除速率并使玻璃体内保留时间增加。玻璃体结合寡核苷酸可以与治疗剂缀合，并且随后可用于将治疗剂运送和对接(dock)在眼睛的玻璃体组分上，从而增强治疗剂的玻璃体内保留。玻璃体结合寡核苷酸还可以在具有最小粘度的液体溶液中配制，从而增加可通过单次玻璃体内注射递送至受试者的最大剂量。在一些方面，提供了一种组合物，其包含与玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂，其中所述玻璃体组分结合部分不是肽标签。在一些方面，提供了一种组合物，其包含与玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂，其中所述玻璃体组分结合部分包含适体。在其他方面，提供了一种组合物，其包含与玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂，其中所述玻璃体组分结合部分包含小分子。在一些情况下，前述组合物中任一种的玻璃体组分结合部分与玻璃体液的组分结合。在一些情况下，所述玻璃体液的组分选自胶原蛋白、透明质酸(hyaluronan)、肌原纤蛋白、玻连蛋白、旋光蛋白(opticin)、硫酸软骨素蛋白聚糖、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖及其任何组合。在一个实例中，所述玻璃体液的组分为透明质酸。在另一个实例中，所述玻璃体液的组分为胶原蛋白或胶原纤维。在又一个实例中，所述玻璃体液的组分为玻连蛋白或玻连蛋白纤维。在一些情况下，所述玻璃体组分结合部分与所述玻璃体液的组分结合，其kd小于约1mm。在一些情况下，所述玻璃体组分结合部分与所述玻璃体液的组分结合，其kd小于约100μm。在其他情况下，所述玻璃体组分结合部分与所述玻璃体液的组分结合，其kd小于约10μm。在其他情况下，所述玻璃体组分结合部分与所述玻璃体液的组分结合，其kd小于约1μm。在其他情况下，所述玻璃体组分结合部分与所述玻璃体液的组分结合，其kd小于约100nm。在一些情况下，任何前述的组合物在人体内具有至少6天的玻璃体内半衰期。在一些情况下，任何前述的组合物在人体内具有至少8天的玻璃体内半衰期。在其他情况下，任何前述的组合物在人体内具有至少10天的玻璃体内半衰期。在其他情况下，任何前述的组合物在人体内具有至少12天的玻璃体内半衰期。在其他情况下，任何前述的组合物在人体内具有至少14天的玻璃体内半衰期。在一些情况下，任何前述的组合物在人体内具有至少16天的玻璃体内半衰期。在一些情况下，任何前述的组合物在人体内具有至少18天的玻璃体内半衰期。在其他情况下，任何前述的组合物在人体内具有至少20天的玻璃体内半衰期。在一些情况下，前述组合物中任一种的治疗剂为用于治疗视网膜疾病的治疗剂。在一些实例中，所述视网膜疾病选自：年龄相关性黄斑变性、糖尿病性黄斑水肿、糖尿病性视网膜病、视网膜静脉阻塞和葡萄膜炎。在一些情况下，年龄相关性黄斑变性为湿性年龄相关性黄斑变性、干性年龄相关性黄斑变性或地图样萎缩。在一些情况下，前述组合物中任一种的治疗剂为针对低氧诱导因子-1α(hif-1α)、血管内皮生长因子(vegf)、血小板衍生生长因子(pdgf)、血管生成素-2(ang-2)、白细胞介素-6(il-6)、白细胞介素-2(il-2)、白细胞介素-8(il-8)、因子d、因子p、补体成分5(c5)、补体成分3(c3)或整联蛋白的抑制剂。在一些情况下，前述组合物中任一种的治疗剂选自：适体、抗体或其衍生物、肽、蛋白质、小分子以及它们的任何组合。在一些情况下，任何前述的组合物具有约1kda至约210kda的分子量。在一些情况下，任何前述的组合物进一步包含聚乙二醇(peg)聚合物。在一些情况下，前述组合物中任一种的治疗剂经过一段时间与玻璃体组分结合部分解离。在另一方面，提供了一种用于治疗受试者的视网膜疾病的方法，所述方法包括：向所述受试者施用治疗有效量的组合物，该组合物包含与玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂，其中所述玻璃体组分结合部分不是肽标签。在另一方面，提供了一种用于治疗受试者的视网膜疾病的方法，所述方法包括：向所述受试者施用治疗有效量的组合物，该组合物包含与玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂，其中所述玻璃体组分结合部分为适体。在另一方面，提供了一种用于治疗受试者的视网膜疾病的方法，所述方法包括：向所述受试者施用治疗有效量的组合物，该组合物包含与玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂，其中所述玻璃体组分结合部分为小分子。在一些情况下，前述方法中任一种的视网膜疾病选自：年龄相关性黄斑变性、糖尿病性黄斑水肿、糖尿病性视网膜病、视网膜静脉阻塞和葡萄膜炎。在一些实例中，年龄相关性黄斑变性为湿性年龄相关性黄斑变性、干性年龄相关性黄斑变性或地图样萎缩。在一些情况下，前述方法中任一种的施用包括玻璃体内施用。在一些情况下，前述方法中任一种的玻璃体组分结合部分与玻璃体液的组分结合。在一些实例中，所述玻璃体液的组分选自：胶原蛋白、透明质酸、肌原纤蛋白、玻连蛋白、旋光蛋白、硫酸软骨素蛋白聚糖、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖及其任何组合。在一个实例中，所述玻璃体液的组分为透明质酸。在另一个实例中，所述玻璃体液的组分为胶原蛋白或胶原纤维。在又一个实例中，所述玻璃体液的组分为玻连蛋白或玻连蛋白纤维。在一些情况下，所述玻璃体组分结合部分与玻璃体液的组分结合，其kd小于约1mm。在一些情况下，所述玻璃体组分结合部分与玻璃体液的组分结合，其kd小于约100μm。在其他情况下，所述玻璃体组分结合部分与玻璃体液的组分结合，其kd小于约10μm。在其他情况下，所述玻璃体组分结合部分与玻璃体液的组分结合，其kd小于约1μm。在其他情况下，所述玻璃体组分结合部分与玻璃体液的组分结合，其kd小于约100nm。在一些情况下，前述方法中任一种的组合物在人体内具有至少6天的玻璃体内半衰期。在一些情况下，前述方法中任一种的组合物在人体内具有至少8天的玻璃体内半衰期。在其他情况下，前述方法中任一种的组合物在人体内具有至少10天的玻璃体内半衰期。在其他情况下，前述方法中任一种的组合物在人体内具有至少12天的玻璃体内半衰期。在一些情况下，前述方法中任一种的组合物在人体内具有至少14天的玻璃体内半衰期。在一些情况下，前述方法中任一种的组合物在人体内具有至少16天的玻璃体内半衰期。在一些情况下，前述方法中任一种的组合物在人体内具有至少18天的玻璃体内半衰期。在其他情况下，前述方法中任一种的组合物在人体内具有至少20天的玻璃体内半衰期。在一些情况下，前述方法中任一种的治疗剂为针对低氧诱导因子-1α(hif-1α)、血管内皮生长因子(vegf)、血小板衍生生长因子(pdgf)、血管生成素-2(ang-2)、白细胞介素-6(il-6)、白细胞介素-2(il-2)、白细胞介素-8(il-8)、因子d、因子p、补体成分5(c5)、补体成分3(c3)或整联蛋白的抑制剂。在一些情况下，前述方法中任一种的治疗剂选自：适体、抗体或其衍生物、肽、蛋白质、小分子以及它们的任何组合。在一些情况下，前述方法中任一种的组合物每2周施用一次。在一些情况下，前述方法中任一种的组合物每月施用一次。在一些情况下，前述方法中任一种的组合物每2个月施用一次。在其他情况下，前述方法中任一种的组合物每3个月施用一次。在其他情况下，前述方法中任一种的组合物每4个月施用一次。在其他情况下，前述方法中任一种的组合物每5个月施用一次。在其他情况下，前述方法中任一种的组合物每6个月施用一次。在一些情况下，前述方法中任一种的治疗有效量为每只眼睛在约15μl至约100μl中的约0.1mg至约50mg。在一些情况下，任何前述的方法进一步包括向所述受试者共同施用至少一种另外的治疗剂。在一些情况下，前述方法中任一种的组合物进一步包含一种或多种聚乙二醇(peg)聚合物。在一些情况下，前述方法中任一种的组合物具有约1kda至约210kda的分子量。在一些情况下，前述方法中任一种的治疗剂经过一段时间与玻璃体组分结合部分解离。在另一方面，提供了一种组合物，其包含与玻璃体组分特异性结合的寡核苷酸。在一些情况下，所述寡核苷酸为适体。所述适体可以为rna适体或修饰的rna适体。所述适体可以为dna适体或修饰的dna适体。在一些情况下，所述适体包含选自下组的核酸中的至少两种类型：dna、修饰的dna、rna和修饰的rna。在任一种前述组合物中，所述寡核苷酸可以与治疗剂缀合。在任一种前述组合物中，所述组合物可以为双特异性适体。在任一种前述组合物中，所述寡核苷酸可包含根据seqidno2-7中任一个的序列，或包含与seqidno2-7中的任一个具有至少80％序列同一性的序列。在任一种前述组合物中，所述玻璃体组分为透明质酸、胶原蛋白或玻连蛋白。在另一方面，提供了一种组合物，其包含与玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂，其中所述玻璃体组分结合部分不是肽标签。所述玻璃体组分结合部分可以与玻璃体液的组分结合。在任一种前述组合物中，所述玻璃体液的组分可选自：胶原蛋白、透明质酸、肌原纤蛋白、玻连蛋白、旋光蛋白、硫酸软骨素蛋白聚糖、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖及其任何组合。在一些实例中，所述玻璃体液的组分可以为透明质酸、胶原蛋白或玻连蛋白。在任一项前述权利要求中，所述玻璃体组分结合部分可以与玻璃体液的组分结合，其kd小于约1mm。在任一种前述组合物中，所述组合物在人体中具有至少6天的玻璃体内半衰期、在兔中具有至少2天的玻璃体内半衰期或在非人灵长类动物中具有至少3天的玻璃体内半衰期。在任一种前述组合物中，所述治疗剂可以为用于治疗视网膜疾病的治疗剂。所述视网膜疾病可以选自：湿性年龄相关性黄斑变性、干性年龄相关性黄斑变性、地图样萎缩、糖尿病性黄斑水肿、糖尿病性视网膜病、视网膜静脉阻塞和葡萄膜炎。在任一种前述组合物中，所述治疗剂可以为针对低氧诱导因子-1α(hif-1α)、血管内皮生长因子(vegf)、血小板衍生生长因子(pdgf)、血管生成素-2(ang-2)、白细胞介素-6(il-6)、白细胞介素-2(il-2)、白细胞介素-8(il-8)、因子d、因子p、补体成分5(c5)、补体成分3(c3)或整联蛋白的抑制剂。在任一种前述组合物中，所述组合物可包含抑制血小板衍生生长因子(pdgf)的适体。在任一种前述组合物中，所述治疗剂可选自：适体、抗体或其衍生物、肽、蛋白质、小分子以及它们的任何组合。在任一项前述权利要求中，所述组合物可具有约1kda至约210kda的分子量。在任一项前述权利要求中，所述组合物不包含分子量大于30kda的聚乙二醇(peg)聚合物。在任一种前述组合物中，所述治疗剂可经过一段时间与玻璃体组分结合部分解离。在任一种前述组合物中，所述玻璃体组分结合部分可包含根据seqidno2-7中任一个的寡核苷酸序列或与seqidno2-7中的任一个具有至少80％序列同一性的寡核苷酸序列。在任一种前述组合物中，所述组合物可包含根据seqidno9-11、13或15中任一个的寡核苷酸序列或与seqidno9-11、13或15中的任一个具有至少80％序列同一性的寡核苷酸序列。在任一种前述组合物中，所述组合物可具有小于40kda的分子量，并且其玻璃体内保留时间与包含40kdapeg聚合物的组合物的玻璃体内保留时间相当。当所述组合物被各自配制成适合于玻璃体内施用的液体制剂时，所述组合物的粘度可以不超过所述包含40kdapeg聚合物的组合物的一半。在另一方面，提供了一种液体制剂，其包含任一种前述组合物中的组合物，其中当被配制用于玻璃体内施用时，所述组合物在所述液体制剂中的浓度为至少40mg/ml。在一些情况下，当被配制用于玻璃体内施用时，所述组合物在所述液体制剂中的浓度为至少30mg/ml、至少40mg/ml、至少50mg/ml、至少60mg/ml、至少70mg/ml、至少80mg/ml、至少90mg/ml、至少100mg/ml或更高。在一些情况下，当以50μl体积配制并用1/2英寸27号针头施用时，所述液体制剂可具有约38,800厘泊至约194,100厘泊、约97,000厘泊至约485,500厘泊或约194,100厘泊至约970,800厘泊的动态粘度。在一些情况下，当以50μl体积配制并用1/2英寸30号针头施用时，所述液体制剂可具有约13,100厘泊至约65,000厘泊、约32,700厘泊至约164,000厘泊或约65,000厘泊至约325,000厘泊的动态粘度。在一些情况下，当以50μl体积配制并用1/2英寸33号针头施用时，所述液体制剂可具有约2,800厘泊至约14,500厘泊、约7,300厘泊至约36,500厘泊或约14,500至约75,000厘泊的动态粘度。在另一方面，提供了一种用于治疗受试者的视网膜疾病的方法，所述方法包括：向所述受试者施用治疗有效量的根据任一种前述组合物的组合物。所述施用可包括通过玻璃体内施用将所述组合物施用于所述受试者。任一种前述方法中的施用可包括每8周施用至少一次所述组合物。任一种前述方法中的施用可包括使用27-33号针头施用所述组合物。所述27-33号针头可具有1/2英寸或更小的长度。任一种前述方法中的施用可包括在单次玻璃体内施用中向所述受试者施用至少2mg剂量的所述组合物。在任一种前述方法中，所述治疗有效量为每只眼睛在约15μl至约100μl中的约0.1mg至约50mg。在任一种前述方法中，所述方法可进一步包括向所述受试者共同施用至少一种另外的治疗剂。在一些实施方案中，任何前述的组合物具有小于40kda的分子量。在一些实施方案中，任何前述的组合物具有小于30kda的分子量。援引并入本说明书中所提到的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文，其程度如同特别地且单独地指出每个单独的出版物、专利或专利申请通过引用而并入。附图说明本发明的新颖特征在所附的权利要求书中具体阐述。通过参考以下对利用本发明原理的说明性实施方案加以阐述的详细描述和附图，将会获得对本发明的特征和优点的更好的理解，在这些附图中：图1描绘了8号适体以及9、10和11号适体(8号适体作为其一部分)对pdgf依赖性细胞增殖的抑制。图2描绘了被选择的适体所抑制的tsg-6与ha的结合。图3描绘了如通过荧光素血管造影术测量的，通过用单独或与抗vegfmab联合的聚乙二醇化8号适体治疗对由pdgfb攻击诱导的血管渗漏的抑制。图4描绘了如通过荧光素血管造影术测量的，通过用抗vegfmab治疗对由vegf攻击诱导的血管渗漏的抑制。图5描绘了如通过伊文思蓝(eb)测量的，通过用单独或组合施用的聚乙二醇化8号适体和抗vegfmab治疗对由pdgfb或vegf攻击诱导的血管渗漏的抑制。具体实施方式本公开内容提供了靶向寡核苷酸(例如，适体)，其可用于将治疗剂运送和对接到眼睛中的区室，如玻璃体液。由于寡核苷酸对玻璃体组分的亲和力，组合物通常展现出改善的或增强的玻璃体内(ivt)半衰期。通常，本文提供的寡核苷酸容易渗入眼睛并且可以以具有最小粘度的液体制剂提供。因此，组合物可用于在单次施用如单次玻璃体内注射中递送治疗有效剂量的药物。本文公开的组合物和方法可用于治疗视网膜疾病。该组合物可包含治疗剂。在一些情况下，该治疗剂为用于治疗视网膜疾病或病症的治疗剂。该治疗剂可以与玻璃体组分结合部分缀合。该玻璃体组分结合部分对玻璃体液的组分如透明质酸、胶原蛋白或玻连蛋白具有结合亲和力。该玻璃体组分结合部分与玻璃体组分的结合可以减缓缀合的治疗剂在玻璃体中的扩散速率，从而降低其从玻璃体中的清除速率。在一些情况下，如本文设想的缀合的治疗剂相对于未缀合的治疗剂具有增加的玻璃体内半衰期。除非另有说明，否则本文公开的一些实施方案的实践采用免疫学、生物化学、化学、分子生物学、微生物学、细胞生物学、基因组学和重组dna的常规技术，这些技术在本领域的技术范围内。参见例如sambrook和green,molecularcloning:alaboratorymanual,第4版(2012)；theseriescurrentprotocolsinmolecularbiology(f.m.ausubel等人编)；theseriesmethodsinenzymology(academicpress,inc.),pcr2:apracticalapproach(m.j.macpherson,b.d.hames和g.r.taylor编(1995)),harlow和lane编(1988)antibodies,alaboratorymanual,andcultureofanimalcells:amanualofbasictechniqueandspecializedapplications,第6版(r.i.freshney编(2010))。如本文所用的，术语“适体”是指可以与特定靶分子结合的寡核苷酸和/或核酸类似物。适体可包括rna、dna、dna/rna、任何核酸类似物和/或其组合。适体可以是单链寡核苷酸。不希望受理论束缚，适体被认为与靶分子的三维结构结合。适体可以是单体的(由单个单元组成)或多聚体的(由多个单元组成)。多聚体适体可以是同源的(由多个相同的单元组成)或异源的(由多个不相同的单元组成)。术语“受试者”和“患者”在本文中可互换使用以指脊椎动物，优选指哺乳动物，更优选指人。哺乳动物包括但不限于鼠、猿猴、人、农场动物、经济动物和宠物。还包括在体内获得或在体外培养的生物实体的组织、细胞及其后代。玻璃体液(在本文中也称为“玻璃体”)是填充人和其他脊椎动物的眼球的晶状体与视网膜之间的空间的胶状物质。玻璃体液大部分由水(其体积的约98-99％)组成，而其余部分由无机盐、脂质、胶原纤维、透明质酸(hyaluronicacid)和玻璃体细胞(向玻璃体提供透明质酸和胶原蛋白的细胞)构成。玻璃体液的其他组分包括肌原纤蛋白、玻连蛋白、旋光蛋白、硫酸软骨素蛋白聚糖、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、球蛋白、凝结蛋白质(coagulationprotein)、补体因子和低分子量蛋白质。与眼睛的其他流体如眼睛前部的房水不同，玻璃体液是停滞的并且保持不变。由于玻璃体液与视网膜直接接触，治疗剂的玻璃体内施用(即，直接施用于玻璃体液)通常是用于治疗视网膜疾病的施用选择。在本公开内容的一些方面，提供了与玻璃体的组分结合的组合物，如玻璃体组分结合部分。该组分可以是如上所述的玻璃体的任何组分，并且在一些情况下，其为玻璃体的结构组分。在一些情况下，该组分为透明质酸或透明质酸。透明质酸是一种阴离子型非硫酸化的糖胺聚糖，其广泛分布于整个玻璃体。在其他情况下，该组分为胶原蛋白。至少有27种不同类型的胶原蛋白分子，并且它们可以组装成原纤维或片状结构。在玻璃体中，几乎所有的胶原蛋白都处于薄、均匀且异型的含有i、ii、ix和v/xi型胶原蛋白的原纤维中。然后，本文的组合物可以与由i、ii、ix或v/xi型胶原蛋白或其组合组成的胶原纤维结合。在其他情况下，该组分为玻连蛋白。玻连蛋白是可以作为单体存在的高度糖基化蛋白质，或是存在于玻璃体中的纤维状多聚体。本文的组合物可以与玻连蛋白原纤维的单体玻连蛋白结合。在一些情况下，该组分为肌原纤蛋白、旋光蛋白、硫酸软骨素蛋白聚糖或硫酸乙酰肝素蛋白聚糖，并且所述组合物与这些组分中的一种或多种结合。术语“玻璃体内半衰期”或“ivt半衰期”可互换使用，并且是指玻璃体中物质(例如，治疗剂)的量下降至一半量所需的时间量。例如，注射至玻璃体中的治疗剂8天降至其注射量的50％将具有8天的ivt半衰期。ivt半衰期可受到多种因素影响，非限制性实例包括药剂的稳定性、药剂从玻璃体中的清除以及药剂与玻璃体环境的相互作用。本文设想的是具有改善的ivt半衰期的组合物。该组合物可以为被修饰或改变以改善ivt半衰期的治疗剂，在一些情况下，为用于治疗视网膜疾病的治疗剂。修饰或改变可涉及向治疗剂添加一种或多种玻璃体组分结合部分。如本文所用的，术语“玻璃体组分结合部分”是指对玻璃体的组分具有结合亲和力的任何分子。在一些情况下，该玻璃体组分结合部分为适体(例如，dna或rna适体)。在一些情况下，该玻璃体组分结合部分为小分子。玻璃体组分结合部分还可包括肽、蛋白质、抗体或其衍生物、脂质、设计的锚蛋白重复蛋白(darpin)等。在一些情况下，该玻璃体组分结合部分对透明质酸(透明质酸)具有结合亲和力。在一些情况下，该玻璃体组分结合部分对胶原蛋白或胶原纤维具有结合亲和力。在一些情况下，该玻璃体组分结合部分对肌原纤蛋白、玻连蛋白、旋光蛋白、硫酸软骨素蛋白聚糖或硫酸乙酰肝素蛋白聚糖具有结合亲和力。结合亲和力可以指两个结合配偶体之间(如受体与其配体之间)的相互作用的强度。在一些情况下，结合亲和力可以指玻璃体组分结合部分与其结合的玻璃体组分之间的相互作用的强度。结合亲和力可以表示为解离常数(kd)——两个结合配偶体彼此结合的紧密程度(例如，玻璃体组分结合部分(vbm)结合玻璃体组分(vc)的紧密程度)的量度。通常，较低的kd等同于更紧密的结合。解离常数可以被定义为：kd＝[vc][vbm]/[vc*vbm]，其中[vc]是玻璃体组分的摩尔浓度，[vbm]是玻璃体组分结合部分的摩尔浓度，而[vc*vbm]是由玻璃体组分结合部分结合的玻璃体组分的摩尔浓度。因此，kd值是玻璃体组分结合部分(m)的这样的浓度，在该浓度下玻璃体组分的一半浓度与玻璃体组分结合部分结合而玻璃体组分的一半浓度未结合。本文提供的组合物可具有mm至μm范围内的kd值。尽管可以使用nm至pm范围内的kd值，但必须考虑改善组合物的ivt半衰期与允许组合物最终从玻璃体清除之间的平衡。具有pm范围内的kd的组合物与玻璃体组分的结合可能过于紧密，从而阻碍组合物接近视网膜表面。因此，在一些情况下，可以使用具有较高kd值的组合物来克服这一点。在一些情况下，该组合物与玻璃体组分结合的kd小于约1mm、小于约100μm、小于约10μm、小于约1μm、小于约100nm或小于约10nm。所述玻璃体组分结合部分基本上可以是对玻璃体组分具有结合亲和力的任何分子。在一些情况下，该玻璃体组分结合部分为适体。如本文所用的，术语适体是指通过非watson-crick碱基配对相互作用以高亲和力和特异性与靶标(例如，蛋白质)结合的寡核苷酸分子(例如，rna、dna、rna/dna)。尽管许多天然存在的寡核苷酸如mrna在其线性碱基序列中编码信息，但适体可以与这些天然存在的寡核苷酸区分开，原因在于适体与靶分子的结合依赖于适体的二级和三级结构而不是保守的线性碱基序列与其互补物的结合，并且适体通常不在其线性碱基序列中编码信息。通常，本文所述的适体为分离的非天然存在的寡核苷酸(即，合成产生的)。当适体用作玻璃体组分结合部分时，它们可以被设计成与玻璃体的组分结合。例如，适体可以与透明质酸结合(例如，抗透明质酸适体)。在其他情况下，适体可以与胶原蛋白或胶原纤维结合(例如，抗胶原蛋白适体)。在其他情况下，适体可以与玻连蛋白或玻连蛋白纤维结合。在一些情况下，所述玻璃体组分结合部分为与玻璃体组分特异性结合的适体。在一些情况下，所述玻璃体组分结合部分为与透明质酸特异性结合的适体。在一些实例中，所述玻璃体组分结合部分为包含如下表1中所述的序列的适体。表1.透明质酸适体在一些情况下，本公开内容的适体包含具有根据seqidno2-7中任一个的序列的寡核苷酸或与seqidno2-7中的任一个具有至少80％序列同一性的寡核苷酸序列。应当理解，在记载了dna主链的情况下，所述dna可以用选自下组的一种或多种类型的核酸取代：修饰的rna和修饰的dna。在一些情况下，本公开内容的适体可以与本文所述的任何适体具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性。例如，本公开内容的适体可以与表1中所述的任何适体具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性。在一些情况下，本公开内容的适体可以与本文所述的任何适体具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同源性。例如，本公开内容的适体可以与表1中所述的任何适体具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同源性。在记载了特定核苷酸修饰的这种情况下，应当理解，可以取代任何数目和类型的核苷酸修饰。本文提供了核苷酸修饰的非限制性实例。在一些情况下，本公开内容的适体的所有核苷酸都被修饰。在一些情况下，可以修饰本公开内容的适体的至少25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的核苷酸。在一些情况下，所述玻璃体组分结合部分为小分子。在一些情况下，该小分子可以与透明质酸结合。在其他情况下，该小分子可以与胶原蛋白或胶原纤维结合。这类分子的非限制性实例包括：美国专利号7,488,792中描述的任一种；以及含没食子酰基的化合物，如鞣酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯和没食子酸。如本文所述的适体可包括任何数目的修饰，可能影响适体的功能或亲和力的修饰除外。例如，适体可以是未经修饰的，或者适体可含有经修饰的核苷酸以改善稳定性、核酸酶抗性或递送特征。此类修饰的实例可包括在糖和/或磷酸酯和/或碱基位置(例如在核糖的2’位、嘧啶的5位和嘌呤的8位)的化学取代、各种2'修饰的嘧啶和用2'-氨基(2'-nh2)、2'-氟代(2'-f)和/或2'-o-甲基(2'-ome)取代基的修饰。在一些情况下，本文所述的适体包含2’-ome修饰，以增加体内稳定性。在一些情况下，本文所述的适体含有经修饰的核苷酸，以改善适体对玻璃体组分的亲和力和特异性。经修饰的核苷酸的实例包括用胍、吲哚、胺、酚、羟甲基或硼酸修饰的那些核苷酸。在其他情况下，嘧啶核苷酸三磷酸类似物或ce-亚磷酰胺可以在5位置处被修饰以生成，例如，5-苄基氨基羰基-2’-脱氧尿苷(bndu)；5-[n-(苯基-3-丙基)甲酰胺]-2'-脱氧尿苷(ppdu)；5-(n-噻吩基甲基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(thdu)；5-(n-4-氟代苄基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(fbndu)；5-(n-(1-萘基甲基)甲酰胺)-2′-脱氧尿苷(napdu)；5-(n-2-萘基甲基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(2napdu)；5-(n-1-萘基乙基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(nedu)；5-(n-2-萘基乙基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(2nedu)；5-(n-色胺基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(trpdu)；5-异丁基氨基羰基-2’-脱氧尿苷(ibdu)；5-(n-酪氨酰基羧基酰胺)-2′-脱氧尿苷(tyrdu)；5-(n-异丁基氨基羰基-2’-脱氧尿苷(ibudu)；5-(n-苄基羧基酰胺)-2'-o-甲基尿苷、5-(n-苄基羧基酰胺)-2'-氟尿苷、5-(n-苯乙基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(pedu)、5-(n-3,4-亚甲二氧基苄基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(mbndu)、5-(n-咪唑基乙基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(imdu)、5-(n-异丁基羧基酰胺)-2'-o-甲基尿苷、5-(n-异丁基羧基酰胺)-2'-氟尿苷、5-(n--r-苏氨酰基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(thrdu)、5-(n-色氨基羧基酰胺)-2'-o-甲基尿苷、5-(n-色氨基羧基酰胺)-2'-氟尿苷、5-(n-[1-(3-三甲基铵)丙基]羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷氯化物、5-(n-萘基甲基羧基酰胺)-2'-o-甲基尿苷、5-(n-萘基甲基羧基酰胺)-2'-氟尿苷、5-(n-[1-(2,3-二羟基丙基)]羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷)、5-(n-2-萘基甲基羧基酰胺)-2'-o-甲基尿苷、5-(n-2-萘基甲基羧基酰胺)-2'-氟尿苷、5-(n-1-萘基乙基羧基酰胺)-2'-o-甲基尿苷、5-(n-1-萘基乙基羧基酰胺)-2'-氟尿苷、5-(n-2-萘基乙基羧基酰胺)-2'-o-甲基尿苷、5-(n-2-萘基乙基羧基酰胺)-2'-氟尿苷、5-(n-3-苯并呋喃基乙基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(bfdu)、5-(n-3-苯并呋喃基乙基羧基酰胺)-2'-o-甲基尿苷、5-(n-3-苯并呋喃基乙基羧基酰胺)-2'-氟尿苷、5-(n-3-苯并噻吩基乙基羧基酰胺)-2'-脱氧尿苷(btdu)、5-(n-3-苯并噻吩基乙基羧基酰胺)-2'-o-甲基尿苷、5-(n-3-苯并噻吩基乙基羧基酰胺)-2'-氟尿苷；5-[n-(1-吗啉代-2-乙基)甲酰胺]-2'-脱氧尿苷(moedu)；r-四氢呋喃基甲基-2’-脱氧尿苷(rtmdu)；3-甲氧基苄基-2’-脱氧尿苷(3mbndu)；4-甲氧基苄基-2’-脱氧尿苷(4mbndu)；3,4-二甲氧基苄基-2’-脱氧尿苷(3,4dmbndu)；s-四氢呋喃基甲基-2’-脱氧尿苷(stmdu)；3,4-亚甲基二氧基苯基-2-乙基-2’-脱氧尿苷(mpedu)；4-吡啶基甲基-2’-脱氧尿苷(pyrdu)；或1-苯并咪唑-2-乙基-2’-脱氧尿苷(bidu)；5-(氨基-1-丙烯基)-2′-脱氧尿苷；5-(吲哚-3-乙酰氨基-1-丙烯基)-2′-脱氧尿苷；或5-(4-新戊酰基苯甲酰氨基-1-丙烯基)-2′-脱氧尿苷。本公开内容中考虑的对适体的修饰包括但不限于提供其他化学基团的那些修饰，所述化学基团将额外的电荷、极化性、疏水性、氢键、静电相互作用和功能性并入核酸适体碱基或作为整体的核酸适体。生成对核酸酶具有抗性的寡核苷酸群体的修饰还可包括一个或多个替代核苷酸间键、改变的糖、改变的碱基或其组合。此类修饰包括但不限于2'-位糖修饰、5-位嘧啶修饰、8-位嘌呤修饰、环外胺处的修饰、4-硫代尿苷取代、5-溴-尿嘧啶或5-碘-尿嘧啶取代；主链修饰、硫代磷酸酯或烷基磷酸酯修饰、甲基化和不寻常的碱基配对组合如异碱基——异胞苷与异鸟苷。修饰还可包括3'和5'修饰如加帽，例如添加3'-3'-dt帽以增加外切核酸酶抗性。适体的长度可以是可变的。在一些情况下，适体的长度小于100个核苷酸。在一些情况下，适体的长度大于10个核苷酸。在一些情况下，适体的长度为10至90个核苷酸。适体的长度可以是但不限于约10、约15、约20、约25、约30、约35、约40、约45、约50、约55、约60、约65、约70、约75、约80、约85或约90个核苷酸。在一些情况下，为了使玻璃体组分结合适体能够与治疗性适体缀合，可以将具有反应性部分的连接体附接至适体以提供用于缀合的特定位点。多种连接体和附接化学物质是本领域已知的。在一个非限制性实例中，6-(三氟乙酰氨基)己醇(2-氰基乙基-n,n-二异丙基)亚磷酰胺可用于将己氨基连接体添加至合成的适体的5'端。该连接体与本文提供的其他氨基连接体一样，一旦去除保护胺的基团，就可以与peg-nhs酯反应以产生共价连接的peg-适体。连接体亚磷酰胺的其他非限制性实例可包括：具有以下结构的tfa-氨基c4ced亚磷酰胺：具有以下结构的5'-氨基修饰剂c3tfa：具有以下结构的mt氨基修饰剂c6ced亚磷酰胺：具有以下结构的5'-氨基修饰剂5：具有以下结构的5'-氨基修饰剂c12：以及具有以下结构的5'巯基-修饰剂c6：例如，5'-巯基修饰的连接体可以与peg-马来酰亚胺、peg-乙烯基砜、peg-碘乙酰胺和peg-邻二硫吡啶一起使用。在一个实例中，适体可以通过马来酰亚胺或乙烯基砜官能团与5'-巯基键合。由共价键合至治疗性(tx)适体的玻璃体组分结合(vb)适体组成的双特异性适体组合物可以通过使用标准亚磷酰胺化学法的固相寡核苷酸合成来产生。在一个实例中，该vb适体在固体支持物上以3’至5’方向合成，随后同样以3’至5’方向合成连接体(l)和tx适体。该策略产生几何形状为5’-tx-l-vb-3’的双特异性适体。或者，首先在固体支持物上以3’至5’方向合成tx适体，随后同样以3’至5’方向合成连接体和vb适体。该策略产生几何形状为5’-vb-l-tx-3’的双特异性适体。本公开内容的连接体通常是由碳原子或<5,000da的六乙二醇重复组成的惰性连接体。在一个非限制性实例中，用于连接tx适体和vb适体的连接体为下式的3-(4,4'-二甲氧基三苯甲基氧基)丙基-1-[(2-氰基乙基)-(n,n-二异丙基)]-亚磷酰胺：其在掺入双特异性适体时产生3-碳连接体。在另一个非限制性实例中，用于连接tx适体和vb适体的连接体为下式的6-(4,4'-二甲氧基三苯甲基氧基)己二醇-1-[(2-氰基乙基)-(n,n-二异丙基)]-亚磷酰胺：其在掺入双特异性适体时产生6-碳连接体。在另一个非限制性实例中，用于连接tx适体和vb适体的连接体为下式的8-(4,4'-二甲氧基三苯甲基氧基)三乙烯氧化物-1-[(2-氰基乙基)-(n,n-二异丙基)]-亚磷酰胺：其在掺入双特异性适体时产生三乙二醇连接体。在另一个非限制性实例中，用于连接tx适体和vb适体的连接体为下式的17-(4,4'-二甲氧基三苯甲基氧基)六乙烯氧化物-1-[(2-氰基乙基)-(n,n-二异丙基)]-亚磷酰胺：其在掺入双特异性适体时产生六乙二醇连接体。由共价键合至治疗性(tx)适体的玻璃体组分结合(vb)适体组成的双特异性适体组合物可通过使用双官能团连接体的位点特异性缀合产生。在一个实例中，在vb适体的5’端掺入反应性部分如巯基，并在tx适体的5’端掺入不同的反应性部分如伯胺。使用双官能团连接体缀合两个这样的适体产生几何形状为3’-tx-l-vb-3’的双特异性适体。在另一个实例中，在vb适体的5’端掺入反应性部分如巯基，并在tx适体的3’端掺入不同的反应性部分如伯胺。使用双官能团连接体缀合两个这样的适体产生几何形状为5’-tx-l-vb-3’的双特异性适体。在又一个实例中，在vb适体的3’端掺入反应性部分如巯基，并在tx适体的3’端掺入不同的反应性部分如伯胺。使用双官能团连接体缀合两个这样的适体产生几何形状为5’-tx-l-vb-5’的双特异性适体。这些实施方案仅作为示例提供。可以根据需要采用多种变化、改变和替代。在一些情况下，可以用c6-二硫化物连接体产生玻璃体组分结合适体，并且可以用c6-氨基连接体产生治疗性适体并如下进行缀合。具有c6-氨基连接体的tx适体可以与由通式nhs(n-羟基琥珀酰亚胺)-[peg]n-马来酰亚胺组成的连接体缀合，可以通过透析或类似方法去除剩下的基团和未反应的连接体，并且随后可以减少玻璃体结合适体上的连接体的二硫化物，并与tx-[peg]n-mal反应以产生tx-[peg]n-vb双特异性适体，其随后可以通过色谱法和脱盐进行纯化。在一些情况下，该反应在约ph6至约ph10之间或在ph7至9之间或在约ph8下进行，以促进nhs酯与适体上的伯胺反应，同时保持马来酰亚胺的完整性。或者，可以将c6-氨基连接体掺入vb适体，并将c6-二硫化物连接体掺入tx适体，并且以类似的方式进行缀合。在一个非限制性实例中，用于缀合tx适体和vb适体的连接体为下式的马来酰亚胺-peg2-琥珀酰亚胺酯：其在形成双特异性适体时产生二乙二醇连接体。在另一个非限制性实例中，用于缀合tx适体和vb适体的连接体为下式的马来酰亚胺-peg4-琥珀酰亚胺酯：其在形成双特异性适体时产生四乙二醇连接体。在另一个非限制性实例中，用于缀合tx适体和vb适体的连接体为下式的马来酰亚胺-peg8-琥珀酰亚胺酯：其在形成双特异性适体时产生八乙二醇连接体。在另一个非限制性实例中，用于缀合tx适体和vb适体的连接体为下式的马来酰亚胺-peg12-琥珀酰亚胺酯：其在形成双特异性适体时产生十二乙二醇连接体。在另一个非限制性实例中，用于缀合tx适体和vb适体的连接体为下式的马来酰亚胺-peg24-琥珀酰亚胺酯：其在形成双特异性适体时产生二十四乙二醇连接体。这些实施方案仅作为示例提供。可以根据需要采用多种变化、改变和替代。在一些方面，所述治疗剂和玻璃体组分结合部分直接缀合(例如，在不存在连接体的情况下)。在其他方面，所述治疗剂和玻璃体组分结合部分通过如本文所述的连接体缀合。在一些情况下，本文所述的玻璃体组分结合适体可与一种或多种具有所需生物学特性的分子结合或缀合。可以使任何数目的分子与适体结合或缀合，非限制性实例包括抗体、肽、蛋白质、碳水化合物、酶、聚合物、药物、小分子、金纳米颗粒、放射性标记、荧光标记、染料、半抗原(例如，生物素)、其他适体或核酸(例如，sirna)。在一些情况下，适体可与增加其稳定性、溶解度或生物利用度的分子缀合。非限制性实例包括聚乙二醇(peg)聚合物、碳水化合物和脂肪酸。在一些情况下，可以使用改善适体的转运或递送的分子，如细胞穿透肽。细胞穿透肽的非限制性实例可包括来源于tat的肽、penetratin、聚精氨酸肽arg8序列、转运蛋白、来自单纯疱疹病毒(hsv)的vp22蛋白、抗微生物肽如buforini和synb、聚脯氨酸sweetarrow肽分子、pep-1和mpg。在一些实施方案中，所述适体与亲脂性化合物如胆固醇、二烃基甘油、二酰基甘油或非免疫原性水溶性药学上可接受的聚合物缀合。在一些情况下，根据本公开内容配制的适体还可以通过包封在脂质体内来修饰。在其他情况下，根据本公开内容配制的适体还可以通过包封在胶束内来修饰。脂质体和胶束可以由任何脂质组成，并且在一些情况下，该脂质可以是磷脂，包括磷脂酰胆碱。在一些实例中，所述组合物被设计为丧失其玻璃体结合能力，例如，通过玻璃体组分结合部分的降解。在其他实例中，所述组合物被设计为使得治疗剂可以与玻璃体组分结合部分解离。这可以通过在治疗剂与玻璃体组分结合部分之间引入一个或多个可切割键来实现。所述一个或多个可切割键可以由例如酶、化学物质切割，或者可以天然降解以从玻璃体中释放治疗剂。本文的组合物通常包括一种或多种治疗剂。所述一种或多种治疗剂可以与一种或多种玻璃体组分结合部分缀合。缀合可以意指共价结合或非共价结合。该治疗剂可以是用于治疗疾病的任何治疗剂。在一些情况下，该治疗剂用于治疗视网膜疾病。通常，本文所述的组合物通常具有小于50kda的分子量。例如，所述组合物可具有小于10kda、小于20kda、小于25kda、小于30kda、小于35kda、小于40kda或小于45kda的分子量。在一些情况下，本文所述的组合物可具有大于至少1kda的分子量并且通常基本上大于1kda。例如，所述组合物可具有至少10kda、至少20kda、至少30kda、至少40kda、至少50kda、至少60kda、至少70kda、至少80kda、至少90kda、至少100kda、至少120kda、至少140kda、至少160kda、至少180kda、至少200kda或大于200kda的分子量。平均保留时间可以指本公开内容的组合物在注射后保留在玻璃体中的平均时间量。所述组合物的平均保留时间可取决于多种因素，包括ivt半衰期。在一些方面，所述组合物相对于未缀合的治疗剂具有增加的或改善的ivt平均保留时间。与如本文所述的一种或多种玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂可展现出比其未缀合的等同物长10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或者长超过99％的平均保留时间。在一些情况下，本文的组合物的平均保留时间为大约至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天、至少15天、至少16天、至少17天、至少18天、至少19天、至少20天、至少25天、至少30天或大于30天。在一些情况下，本文所述的适体在非人动物(例如，啮齿动物/兔/非人灵长类动物)中具有至少1天的眼内半衰期。在一些情况下，本文所述的适体在非人动物如啮齿动物、兔或非人灵长类动物中具有至少1天、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、至少8天、至少9天、至少10天或更长的眼内半衰期。在具体实例中，本文所述的适体在兔中具有至少2天的眼内半衰期。在另一个具体实例中，本文所述的适体在非人灵长类动物中具有至少3天的眼内半衰期。在一些方面，本文提供的组合物可具有优于使用高分子量分子(例如，40kda或大于40kda的聚乙二醇(peg)聚合物)来促进玻璃体内保留的制剂的性质。在一些情况下，本文提供的组合物与包含peg分子的组合物相比具有相似或更好的眼内保留时间，但当类似配制时比包含peg分子的组合物具有更低的粘度(例如，低10％、20％、30％、40％、50％或低超过50％)。在一些情况下，本文提供的组合物在哺乳动物系统中具有至少2天、至少3天、至少4天、至少5天、至少6天或至少7天的眼内半衰期，还提供了粘度低于含有40kdapeg的类似制剂的50％的制剂。在一些方面，所述组合物相对于未缀合的治疗剂具有增加的或改善的ivt半衰期。例如，与如本文所述的一种或多种玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂可展现出比其未缀合的等同物长10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或者长超过99％的ivt半衰期。在一些情况下，本文的组合物的ivt半衰期为大约至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少13天、至少14天、至少15天、至少16天、至少17天、至少18天、至少19天、至少20天、至少25天、至少30天或大于30天。在一些情况下，本文所述的组合物包括与一种或多种玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂。所述治疗剂可以是，但不限于小分子、抗体或其衍生物、肽、适体等。在一些情况下，所述治疗剂为适体。在其他情况下，所述治疗剂为抗体。在一些情况下，所述治疗剂可具有拮抗活性(例如，抑制蛋白质的功能)。在其他情况下，所述治疗剂可具有激动活性(例如，增强或增加蛋白质的功能)。所述治疗剂可调节或改变生物细胞(例如，视网膜细胞)的功能。所述治疗剂可调节或改变蛋白质或玻璃体的其他组分的功能。在一些情况下，所述治疗剂为血管内皮生长因子(vegf)或vegf信号传导的抑制剂。所述治疗剂可以是降低vegf发挥其正常生物作用的能力的任何类型的分子。例如，所述化合物可结合并抑制vegf本身(或减少vegf本身的产生)、其受体，或在vegf结合后的vegf受体激活时激活和/或合成的细胞内信号传导蛋白或转录因子。在一些情况下，所述治疗剂为抗vegf或抗vegfr适体或抗体。可用于本文所述组合物中的治疗剂的非限制性实例包括vegf的喹唑啉衍生物抑制剂(如美国专利公开号2007/265286、2003/199491和美国专利号6,809,097中所述)、槲皮素(如wo02/057473中所述)、vegfr酪氨酸激酶的喹唑啉衍生物抑制剂(如美国专利公开号2007/027145中所述)、vegfr酪氨酸激酶的氨基苯甲酸衍生物抑制剂(如美国专利号6,720,424中所述)、vegfr酪氨酸激酶的吡啶衍生物抑制剂(如美国专利公开号2003/158409中所述)、西地尼布(cediranib，如wo07/060402中所述)、舒尼替尼(sunitinib，描述于wo08/031835和美国专利号6,573,293)、哌加他尼(pegaptanib，描述于美国专利号6,051,698)、阿西替尼(axitinib，如wo2004/087152中所述)、索拉非尼(sorafenib，描述于wo07/053573)、vegfr-1结合肽(描述于美国专利公开号2005/100963)、阻断vegf与受体结合的富含精氨酸的抗血管内皮生长因子肽(描述于美国专利号7,291,601)、vegf-trap(如由regeneronpharmaceuticals销售和美国专利公开号2005/032699中所述)、可溶性vegf受体(如美国专利公开号2006/110364和tseng等人,2002中所述)、vegf-c和vegf-d拟肽抑制剂(如美国专利公开号2002/065218中所述)、pai-i(如美国专利公开号2004/121955中所述)，以及描述于美国专利公开号2002/068697、wo02/081520、美国专利公开号20060234941和美国专利公开号2002/058619的抑制剂。在一些情况下，所述治疗剂为抗体或抗体相关分子或其片段，包括但不限于抗vegf-a抗体如贝伐珠单抗(bevacizumab，如美国专利号6,054,297中所述)、雷珠单抗(ranibizumab，如美国专利号6,407,213中所述)以及美国专利号5,730,977和美国专利公开号2002/032315中描述的那些；抗vegf-b抗体，包括美国专利公开号2004/005671和wo07/140534中描述的那些；抗vegf-c抗体，包括美国专利号6,403,088中描述的那些；抗vegf-d抗体，包括美国专利号7,097,986中描述的那些；抗vegfr-1抗体，包括美国专利公开号2003/088075中描述的那些；抗vegfr-2抗体，包括美国专利号6,344,339、wo99/40118和美国专利公开号2003/176674中描述的那些；以及抗vegfr-3抗体，包括美国专利号6,824,777中描述的那些。在一些方面，本公开内容的组合物为双特异性适体，其包含与抗透明质酸适体偶联的抗vegf适体。在一些情况下，ha-vegf双特异性适体包含如下表2中所述的序列。表2.适体序列在一些情况下，所述治疗剂为血小板衍生生长因子(pdgf)、pdgf受体(pdgfr)或与二者中任一种相关的信号传导途径的抑制剂。在一些情况下，所述治疗剂为抗pdgf适体或抗体。这些类型的治疗剂的非限制性实例包括伊马替尼(imatinib)、甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate)、酪氨酸磷酸化抑制剂(tyrphostin)a23、酪氨酸磷酸化抑制剂ag1295、酪氨酸磷酸化抑制剂9、ag494、马赛替尼(masitinib)、ap24534、二磷酸莫替沙尼(motesanibdiphosphate)、dmpq二盐酸化物、羟吲哚i、ag-370、rg-13022、3-(4-异丙基亚苄基)-吲哚-2-酮、tivozanib、pp121、(5-羟基-1h-吲哚-2-基)-(1h-吲哚-2-基)甲酮；(5-丁酸酯-1h-2-吲哚基)(1h-2-吲哚基)-甲酮；苹果酸舒尼替尼(sunitinibmalate)、4-(6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)-n-(4-苯氧基苯基)哌嗪-1-甲酰胺；司马沙尼(semaxanib)；盐酸帕唑帕尼(pazopanibhydrochloride)；帕唑帕尼(pazopanib)；pd161570；多韦替尼(dovitinib)；酪氨酸磷酸化抑制剂47；以及4,4'-双(4-氨基苯氧基)联苯。在一些方面，本公开内容的组合物为双特异性适体，其包含与抗透明质酸适体偶联的抗pdgf适体。在一些情况下，ha-pdgf双特异性适体包含如下表3中所述的序列。表3.适体序列在一些情况下，所述治疗剂为低氧诱导因子1(hif-1)的抑制剂。在一些情况下，所述治疗剂为hif-1α(hif-1的诱导型亚基)的抑制剂。在一些情况下，所述治疗剂为抗hif-1适体或抗体。靶向hif-1的治疗剂的非限制性实例可包括棘霉素；bddf-1(如wo08/004798中所述)；s-2-氨基-3-[4'-n,n,-双(2-氯乙基)氨基]苯基丙酸n-氧化物二盐酸化物(px-478)(如美国专利公开号2005049309中所述)；毛壳菌素(chetomin)；3-(5'-羟甲基-2'-呋喃基)-1-苄基吲唑(yc-i)；103d5r；quinocarmycinmonocitrate及其衍生物；3-(5'-羟甲基-2'-呋喃基)-1-苄基吲唑(如美国专利公开号2004198798中所述)；nsc-134754；nsc-643735；地高辛；雷帕霉素(rapamycin)；2-甲氧基雌二醇；托泊替康(topotecan)；laq824；17-aag；环孢菌素；吖啶黄；多柔比星(doxorubicin)；硼替佐米(bortezomib)；两性霉素b；伊马替尼；布洛芬；厄洛替尼(erlotinib)；吉非替尼(gefitinib)和曲妥珠单抗(trastuzumab)。在其他实例中，所述治疗剂为补体旁路途径组分的抑制剂。例如，所述治疗剂可以为补体因子d、因子p、补体成分3(c3)或补体成分5(c5)的抑制剂。在一些实例中，所述治疗剂为抗因子d适体或抗因子p适体。在其他实例中，所述治疗剂为抗因子d适体或抗因子p抗体或其抗体衍生物或片段。所述补体旁路途径的抑制剂可适用于治疗例如年龄相关性黄斑变性，包括干性年龄相关性黄斑变性和包括地图样萎缩在内的晚期类型。在一些情况下，所述治疗剂为补体途径组分如因子h或因子i的激动剂。在一些方面，本公开内容的组合物为双特异性适体，其包含与抗透明质酸适体偶联的抗c5适体。在一些情况下，ha-c5双特异性适体包含如下表4中所述的序列。表4.适体序列在一些情况下，本公开内容的适体包含具有根据seqidno8-15中任一个的序列的寡核苷酸或与seqidno8-15中的任一个具有至少80％序列同一性的寡核苷酸序列。应当理解，在记载了dna主链的情况下，所述dna可以用选自下组的一种或多种类型的核酸取代：修饰的rna和修饰的dna；并且在记载了rna主链的情况下，所述rna可以用选自以下的一种或多种类型的核酸取代：修饰的rna、dna和修饰的dna。在一些情况下，本公开内容的适体可与本文所述的任何适体具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性。例如，本公开内容的适体可与表2-4中所述的任何适体具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性。在一些情况下，本公开内容的适体可与本文所述的任何适体具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同源性。例如，本公开内容的适体可与表2-4中所述的任何适体具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同源性。治疗剂可以针对用于治疗视网膜疾病的基本上任何生物学靶标。生物学靶标的其他非限制性实例可包括血管生成素-2(ang2)、包括il-2、il-6和il-8在内的白细胞介素以及整联蛋白。治疗剂的其他非限制性实例(其中任一种均适用于在本文所述组合物中使用)包括：凝血酶抑制剂；抗血栓形成剂；溶栓剂(如纤溶酶原激活剂，或tpa和链激酶)；纤维蛋白溶解剂；血管痉挛抑制剂；钙通道阻断剂；血管扩张剂；抗高血压剂；凝血级联因子(例如，蛋白s)；抗凝血化合物(例如，肝素和那屈肝素，或低分子量肝素)；抗微生物剂，如抗生素(如四环素、氯四环素、杆菌肽、新霉素、多粘菌素、短杆菌肽、头孢氨苄、氧四环素、氯霉素、利福平、环丙沙星、妥布霉素、庆大霉素、红霉素、青霉素、磺胺类药物、磺胺嘧啶、磺胺醋酰、磺胺甲二唑、磺胺异恶唑、呋喃西林、丙酸钠、米诺环素、多西环素、万古霉素、卡那霉素、头孢菌素，如头孢噻吩、头孢吡硫、头孢唑啉、头孢氨苄、头孢拉定、头孢羟氨苄、头孢孟多、头孢西丁、头孢克洛、头孢呋辛、头孢尼西、头孢雷特、头孢噻肟(cefitaxime)、拉氧头孢、头孢唑肟(cetizoxime)、头孢曲松、头孢哌酮)、格尔德霉素和类似物、抗真菌剂(如两性霉素b和咪康唑)和抗病毒剂(如碘苷三氟胸苷、阿昔洛韦、更昔洛韦、干扰素、α-甲基-p-金刚烷甲胺、羟基-乙基甲基-鸟嘌呤、金刚烷胺、5-碘-脱氧尿苷、三氟胸苷、干扰素、腺嘌呤阿拉伯糖苷)；表面糖蛋白受体抑制剂；抗血小板剂(例如，噻氯匹定)；抗有丝分裂剂；微管抑制剂；抗分泌剂；活性抑制剂；重塑抑制剂；反义核苷酸(如吗啉基二氨基磷酸寡聚物)；抗代谢物；抗增殖剂(包括抗血管生成剂、紫杉醇(taxol)、西罗莫司(雷帕霉素)、雷帕霉素类似物(“rapalog”)、他克莫司、来自abbott的abt-578、依维莫司、紫杉酚、紫杉烷、长春瑞滨)；抗癌化疗剂；抗炎药(如氢化可的松、醋酸氢化可的松、地塞米松21-磷酸盐、氟轻松、甲羟松、甲泼尼龙、泼尼松龙21-磷酸酯、醋酸泼尼松龙、氟米龙、倍他米松、曲安西龙、曲安奈德)；非甾体类抗炎药(如水杨酸盐、吲哚美辛、布洛芬、双氯芬酸、氟比洛芬、吡罗昔康)；抗过敏症药(如色甘酸钠、安他唑啉、美沙吡林(methapyriline)、氯苯那敏、西替利嗪、吡拉明、非尼拉敏)；抗增殖剂(如1,3-顺式维甲酸)；减充血剂(如去氧肾上腺素、萘甲唑啉、四氢唑啉)；缩瞳剂和抗胆碱酯酶(如毛果芸香碱、水杨酸盐、卡巴胆碱、氯化乙酰胆碱、毒扁豆碱、衣色林、氟磷酸二异丙酯、碘化二乙氧磷酰硫胆碱(phospholineiodine)、地美溴铵)；散瞳剂(如阿托品、环喷托酯、后马托品、东莨菪碱、托吡卡胺、尤卡托品、羟基苯丙胺)；拟交感神经药(如肾上腺素)；抗肿瘤药(如卡莫司汀、顺铂、氟尿嘧啶)；免疫药物(如疫苗和免疫刺激剂)；激素剂(如雌激素、雌二醇、黄体素(progesterol)、黄体酮、胰岛素、降钙素、甲状旁腺激素、肽和血管加压素下丘脑释放因子)；β肾上腺素能阻断剂(如马来酸噻吗洛尔、盐酸左布诺洛尔、盐酸倍他洛尔)；免疫抑制剂、生长激素拮抗剂、生长因子(如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子、转化生长因子β、生长激素、纤连蛋白、胰岛素样生长因子(igf))；碳酸酐酶抑制剂(如二氯苯磺胺、乙酰唑胺、甲醋唑胺)；血管生成抑制剂(如血管抑制素、醋酸阿奈可他、血小板反应蛋白、抗vegf抗体如抗vegf片段-雷珠单抗)；多巴胺激动剂；放疗剂；肽；蛋白质；酶；核酸和核酸片段；细胞外基质组分；ace抑制剂；自由基清除剂；螯合剂；抗氧化剂；抗聚合酶；光动力治疗剂；基因治疗剂；以及其他治疗剂如前列腺素、抗前列腺素、前列腺素前体等。在一些情况下，所述治疗剂为防腐剂。防腐剂的非限制性实例包括磺胺嘧啶银、氯己定、戊二醛、过乙酸、次氯酸钠、酚、酚类化合物、碘伏化合物、季铵化合物和氯化合物。在一些情况下，所述治疗剂为酶抑制剂。酶抑制剂的非限制性实例包括chrophoniumchloride；n-甲基毒扁豆碱；溴化新斯的明；硫酸毒扁豆碱；盐酸他克林；他克林；1-羟基马来酸盐；碘代杀结核菌素；对-溴四咪唑；10-(α-二乙基氨基丙酰基)-吩噻嗪盐酸盐；卡米达佐氯化物(calmidazoliurnchloride)；密胆碱-3,3,5-二硝基邻苯二酚；二酰基甘油激酶抑制剂1；二酰基甘油激酶抑制剂ii；3-苯基炔丙基胺；n-单甲基-l-精氨酸乙酸酯；卡比多巴；3-羟基苄基肼盐酸盐；盐酸肼苯哒嗪；盐酸氯吉兰；盐酸司立吉林；盐酸l(-)司立吉林；磷酸异丙烟肼；6-meo-四氢-9h-吡啶并吲哚；尼亚拉胺；盐酸帕吉林；盐酸奎纳克林；盐酸氨基脲；反苯环丙胺盐酸盐；n,n-二乙基氨基乙基-2,2-二苯基戊酸盐酸盐；3-异丁基-1-甲基黄嘌呤；盐酸罂粟碱、吲哚美辛；2-环辛基-2-羟乙胺盐酸盐；2,3-二氯-α-甲基苄胺(dcmb)；8,9-二氯-2,3,4,5-四氢-1h-2-苯并氮杂卓盐酸盐；对-氨鲁米特；对氨鲁米特酒石酸盐；r(+)对氨鲁米特酒石酸盐；s(-)3-碘酪氨酸；α-甲基酪氨酸；l(-)α甲基酪氨酸；d,l(-)乙酰唑胺；二氯苯磺酸；6-羟基-2-苯并噻唑磺酰胺；以及别嘌呤醇。在一些情况下，所述治疗剂为退热剂或抗炎剂。退热剂或抗炎剂的非限制性实例包括阿司匹林(水杨酸)、吲哚美辛、吲哚美辛钠三水合物、水杨酰胺、萘普生、秋水仙碱、非诺洛芬、舒林酸、二氟尼柳、双氯芬酸、吲哚布洛芬和水杨酰胺钠。在一些情况下，所述治疗剂为局部麻醉剂，例如，在局部区域具有麻醉作用的物质。局部麻醉剂的非限制性实例包括普鲁卡因、利多卡因、丁卡因和二丁卡因。药物组合物本文的组合物可包括用于治疗视网膜疾病的任何数目的药物组合物。该药物组合物可包含治疗有效量的如本文所述的任何组合物(例如，与一种或多种玻璃体组分结合部分缀合的治疗剂)。术语“治疗有效量”是指在受试者中引起治疗或期望的反应的组合物的量。该药物组合物可进一步包含任何数目的赋形剂、媒介物或载体。例如，该药物组合物可包含单独或与一种或多种媒介物(例如，药学上可接受的组合物或例如药学上可接受的载体)组合的有效量的组合物。赋形剂可包括任何和所有溶剂、润滑剂、防腐剂、稀释剂和媒介物(或载体)。通常，该赋形剂与本文所述的组合物相兼容。该药物组合物还可含有少量无毒辅助物质如润湿剂或乳化剂、ph缓冲剂和其他物质如乙酸钠和油酸三乙醇胺。本文的药物组合物通常可通过向玻璃体注射来施用(即玻璃体内(ivt)施用)。如果仅一只眼睛受到视网膜疾病的影响，则可以对一只眼睛进行ivt施用，或者如果两只眼睛均受到影响，则对两只眼睛进行ivt施用。本文的药物组合物可以在适合于玻璃体内施用的制剂中。例如，所述药物组合物可以被制备在液体制剂中以用于向玻璃体内注射。本文提供的液体制剂可具有低粘度，例如适于玻璃体内注射的粘度，但同时可含有相对高浓度的适体或双特异性适体(例如，大于5mg/ml、大于10mg/ml、大于20mg/ml、大于30mg/ml、大于40mg/ml、大于80mg/ml、大于100mg/ml、大于150mg/ml或更高)。在具体实例中，当被配制用于玻璃体内施用时，本文提供的液体制剂的适体或双特异性适体的浓度可大于30mg/ml。当以50μl体积配制并用1/2英寸27号针头施用时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约38,800厘泊至约194,100厘泊、约97,000厘泊至约485,500厘泊或约194,100厘泊至约970,800厘泊。例如，当以50μl体积配制并用1/2英寸27号针头施用时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约25,000；50,000；75,000；100,000；150,000；200,000；250,000；300,000；350,000；400,000；450,000；500,000；550,000；600,000；650,000；700,000；750,000；800,000；850,000；900,000；950,000或1,000,000厘泊。当以50μl体积配制并用1/2英寸30号针头施用时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约13,100厘泊至约65,000厘泊、约32,700厘泊至约164,000厘泊或约65,000厘泊至约325,000厘泊。例如，当以50μl体积配制并用1/2英寸30号针头施用时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约10,000；20,000；30,000；40,000；50,000；60,000；70,000；80,000；90,000；100,000；150,000；200,000；250,000；300,000或350,000厘泊。类似地，当以50μl体积配制并用1/2英寸33号针头施用时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约2,800厘泊至约14,500厘泊、约7,300厘泊至约36,500厘泊或约14,500至约75,000厘泊。例如，当以50μl体积配制并用1/2英寸33号针头施用时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约2,000；3,000；4,000；5,000；6,000；7,000；8,000；9,000；10,000；15,000；20,000；25,000；30,000；35,000；40,000；45,000；50,000；55,000；60,000；65,000；70,000或75,000厘泊。在一些情况下，将本文提供的液体制剂配制在预填充的注射器中。在一些情况下，将液体制剂配制成10μl、20μl、30μl、40μl、50μl、60μl、70μl、80μl、90μl、100μl或大于100μl的体积。适合于递送本文所述的药物组合物的其他制剂可包括持续释放凝胶或聚合物制剂，其通过可生物降解的微小尺寸聚合物系统(例如，微装置、微粒或海绵，或其他缓释经巩膜装置)的手术植入而在治疗眼科疾病期间植入或通过眼部递送装置(例如聚合物接触镜持续递送装置)递送。在一些情况下，所述制剂为聚合物凝胶、自组装凝胶、耐用植入物、洗脱植入物、可生物降解的基质或可生物降解的聚合物。在一些情况下，所述制剂可以通过离子透入法使用电流将组合物从眼睛的表面驱动到眼睛的后部来施用。在一些情况下，所述制剂可以通过具有玻璃体内储器、玻璃体外储器或其组合的手术植入的端口来施用。植入式眼部装置的实例可包括但不限于由bausch&lomb开发的duraserttm技术、由ondemandtherapeutics开发的odtx装置、由forsightvision4开发的端口递送系统和由replenish,inc开发的replenishmicropumptm系统。在一些情况下，纳米技术可用于递送药物组合物，包括纳米球、纳米颗粒、纳米胶囊、脂质体、纳米胶束和树枝状大分子。本文提供的制剂可含有浓度为至少0.1mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、25mg/ml、50mg/ml、60mg/ml、70mg/ml、80mg/ml、90mg/ml、100mg/ml、110mg/ml、120mg/ml、130mg/ml、140mg/ml、150mg/ml、200mg/ml或更大的本文提供的组合物(例如，双特异性适体)。本文提供的制剂可含有浓度为至少5μm、10μm、20μm、30μm、40μm、50μm、60μm、70μm、80μm、90μm、100μm、200μm、300μm、400μm、500μm、600μm、700μm、800μm、900μm、1mm、2mm、3mm、4mm、5mm、6mm、7mm、8mm、9mm、10mm或大于10mm的本文提供的组合物(例如，双特异性适体)。在一些情况下，将制剂施用于受试者，使得受试者在单次施用中接受治疗有效剂量，即使向眼睛施用的体积相对较低。在一些情况下，将治疗有效剂量(例如，大于2mg、大于3mg、大于5mg、大于10mg、大于20mg或更多)以15μl至约100μl(例如15μl、25μl、30μl、40μl、50μl、60μl、70μl、80μl、90μl、100μl)的总体积施用于受试者。在一些情况下，该总体积为小于150μl、小于125μl、小于100μl、小于90μl、小于80μl、小于70μl、小于60μl、小于50μl、小于40μl、小于30μl或小于20μl。本文所述的治疗剂通过与一种或多种玻璃体组分结合部分缀合可展现出与其未缀合的对应物相比改善的玻璃体内半衰期。因此，包含这些治疗剂的药物组合物的施用频率可能比未缀合的治疗剂更低。本文的药物组合物的施用可以为每周一次、每2周一次、每3周一次、每4周一次、每5周一次、每6周一次、每7周一次、每8周一次、每9周一次、每10周一次、每11周一次、每12周一次、每4个月一次、每5个月一次、每6个月一次、每7个月一次、每8个月一次、每9个月一次、每10个月一次、每11个月一次、每12个月一次或甚至一年少于一次。在一些方面，施用治疗有效量的组合物。“治疗有效量”或“治疗有效剂量”在本文中可互换使用，并且是指在受试者中引起治疗或期望的反应的治疗剂的量。在一些情况下，该治疗或期望的反应是减轻与疾病或病症相关的一种或多种症状。在一些情况下，治疗或期望的反应是疾病或病症的预防性治疗。药物组合物可以以足以对受试者产生治疗益处的剂量施用。该剂量可以根据多种因素而变化，包括选择使用的治疗剂和玻璃体组分结合部分。在一些情况下，本文所述的缀合的治疗剂的治疗有效量可小于未修饰或未缀合的治疗剂，因为本文的组合物可具有更长的ivt半衰期或平均保留时间。在一些情况下，本公开内容的组合物以每只眼睛约0.1mg至约50mg的量和约15μl至约100μl的体积施用。本文所述的组合物可与一种或多种另外的治疗剂共同施用。所述一种或多种另外的治疗剂可以与如本文所述的玻璃体组分结合部分缀合，或者可以是未缀合的。所述一种或多种另外的治疗剂可以选自全文所述的治疗剂，并且可以增强本文提供的组合物或与之联合起到协同作用。适应症向有需要的受试者施用本文所述的组合物。在一些情况下，该有需要的受试者为罹患眼部疾病的患者。在一些情况下，该眼部疾病为视网膜疾病。适于使用本文所述组合物和方法治疗的眼部疾病和/或视网膜疾病的非限制性实例包括：炎性结膜炎，包括变应性结膜炎和巨乳头状结膜炎、黄斑水肿、葡萄膜炎、眼内炎、巩膜炎、角膜溃疡、干眼综合症、青光眼、缺血性视网膜疾病、角膜移植排斥反应、与眼内手术如人工晶状体植入有关的并发症，以及与白内障手术相关的炎症、白塞病(behcet'sdisease)、stargardt病、免疫复合物性血管炎、fuch病、vogt-koyanagi-harada病、视网膜下纤维化、角膜炎、玻璃体-视网膜炎症、眼部寄生虫感染/迁移、色素性视网膜炎、巨细胞病毒性视网膜炎、脉络膜炎症、睑外翻、兔眼、眼睑皮肤松垂症、上睑下垂、眼睑黄斑瘤、眼睑寄生虫感染、眼睑皮炎、泪腺炎、溢泪、甲状腺机能障碍性眼球突出、结膜炎、巩膜炎、角膜炎、角膜溃疡、角膜磨损、雪盲、电弧眼(arceye)、thygeson浅层点状角膜病变、角膜新血管形成、fuchs营养不良、圆锥角膜、干燥性角膜结膜炎、虹膜炎、葡萄膜炎、交感性眼炎、白内障、脉络膜视网膜炎症、局灶性脉络膜视网膜炎症、局灶性脉络膜视网膜炎、局灶性脉络膜炎、局灶性视网膜炎、局灶性视网膜脉络膜炎、播散性脉络膜视网膜炎症、播散性脉络膜视网膜炎、播散性脉络膜炎、播散性视网膜炎、播散性视网膜脉络膜炎、渗出性视网膜病变、后睫状体炎、睫状体扁平部炎、harada病、脉络膜视网膜瘢痕、后极部黄斑瘢痕、日光性视网膜病变、脉络膜变性、脉络膜萎缩、脉络膜硬化、血管样条纹症、遗传性脉络膜营养不良、无脉络膜、脉络膜营养不良(中央晕轮状(centralarealor))、环状萎缩(脉络膜)、鸟氨酸血症、脉络膜出血和破裂、脉络膜出血(未另行说明)、脉络膜出血(排出性(expulsive))、脉络膜脱离、视网膜劈裂症、视网膜动脉阻塞、视网膜静脉阻塞、高血压性视网膜病变、糖尿病视网膜病变、视网膜病变、早产儿视网膜病变、黄斑变性、牛眼黄斑病变、视网膜外膜、周边视网膜变性、遗传性视网膜营养不良、色素性视网膜炎、视网膜出血、视网膜层分离、中心性浆液性视网膜病变、视网膜脱离、黄斑水肿、青光眼-视神经病变、可疑性青光眼-高眼压症、原发性开角型青光眼、原发性闭角型青光眼、飞蚊症(floater)、leber遗传性视神经病变、视盘玻璃疣、斜视、眼肌瘫痪、进行性外眼肌麻痹、内斜视、外斜视、屈光和调节障碍、远视、近视、散光、屈光参差、老花眼、内眼肌麻痹、弱视、leber先天性黑朦、暗点、上斜视、色盲、全色盲、maskun、夜盲症、失明、河盲症、小眼、眼缺损、红眼、阿-罗瞳孔(argyllrobertsonpupil)、角膜真菌病、干眼症、无虹膜、镰状细胞性视网膜病变、眼部新血管形成、视网膜新血管形成、视网膜下新血管形成；虹膜发红炎性疾病(rubeosisiritisinflammatorydiseases)、慢性后葡萄膜炎和全葡萄膜炎(chronicposteriorandpanuveitis)、赘生物、视网膜母细胞瘤、假神经胶质瘤、新生血管性青光眼；玻璃体切割术-2联合晶状体切割术后导致的新血管形成、血管疾病、视网膜缺血、脉络膜血管功能不全、脉络膜血栓形成、视神经的新血管形成、糖尿病性黄斑水肿、黄斑囊样水肿、增生性玻璃体视网膜病变，以及由于眼睛渗透和眼部损伤导致的新血管形成。在一些情况下，所述药物组合物可用于治疗视网膜疾病。在一些情况下，该视网膜疾病为年龄相关性黄斑变性。在一些情况下，该视网膜疾病为年龄相关性黄斑变性的渗出性(“湿性”)形式。在一些情况下，该视网膜疾病为年龄相关性黄斑变性的非渗出性(“干性”)形式。在一些情况下，该视网膜疾病为年龄相关性黄斑变性的晚期形式，如地图样萎缩。例如，用于治疗地图样萎缩的药物组合物可包括与玻璃体组分结合部分缀合的靶向补体因子d或因子p的治疗剂。在一些情况下，所述药物组合物可用于治疗糖尿病性黄斑水肿。在一些情况下，所述药物组合物可用于治疗糖尿病性视网膜病。在一些情况下，所述药物组合物可用于治疗视网膜静脉阻塞。在一些情况下，所述药物组合物可用于治疗葡萄膜炎。实施例以下实施例是出于说明本发明的各个实施方案的目的而给出的，并不意味着以任何方式限制本发明。本发明实施例以及本文所述的方法是目前优选实施方案的代表，均是示例性的，并非旨在限制本发明的范围。本领域技术人员将会想到包含在由权利要求的范围所限定的本发明精神内的变化以及其他用途。实施例1.针对透明质酸(ha)的适体的鉴定使用表5中列出的dna文库(seqidno.1)对分子量为0.6-1.1mda的透明质酸(ha)钠盐(sigmaaldrich)进行标准dna适体选择。从总共12轮选择的第3轮开始，在预清除步骤中使用分子量为485kda的大麦衍生的β-d-葡聚糖，以促进选择对ha具有特异性的适体。在模拟玻璃体环境的盐缓冲液中进行该选择，该盐缓冲液由10mmhepes(ph7.4)、120mmnacl、5mmmgcl2和5mmkcl组成。表5.适体序列提交所述选择的第9轮至第12轮以用于下一代测序(ngs)，并对所得序列数据进行分析以鉴定具有最高富集率的序列，该富集率被定义为来自第9轮至第10轮、第10轮至第11轮和第11轮至第12轮的每个序列的频率增加。相对于总适体群体展现出高富集率的序列包括表5中列出的适体2、4和6(seqidno2、4和6)。通过表面等离子体共振(spr)测量适体2、4和6对ha的亲和力，以及仅由这些适体的随机区域衍生部分组成的相关适体3、5和7(seqidno3、5和7)对ha的亲和力。简言之，将生物素-ha(20kda)固定在高密度c7葡聚糖芯片上，并使适体在10℃下以25μm至0.39nm的浓度流过具有含固定化ha的表面和不含ha的对照表面。ha结合蛋白tsg-6和聚集蛋白聚糖在spr测定中用作特异性ha结合的对照。当在不含ha的表面流过时，针对适体、tsg-6或聚集蛋白聚糖没有观察到高于背景的共振。假定为1:1结合模型来分析ha固定化表面的所得spr信号，并测定适体2-7的亲和力(表6)。表6中呈现的适体对ha的亲和力可以通过适体长度的减少、对脱氧核糖的2’位、嘧啶的5位或嘌呤核苷酸的8位的化学修饰而进一步改善。表6.通过spr分析所得的选定ha适体对ha的亲和力适体编号kd(avg±std)(μm)适体230±1适体338±1适体4nd适体535±2适体630±2适体738±3除了适体4之外，每个适体均结合ha，如通过spr所测定的，其表观亲和力(kd)在30至40μm之间。由于选择是在5’和3’固定区域被阻断的情况下进行，预期一些全长序列可能不结合ha，而来源于随机区域的适体可结合ha，这解释了观察到适体5与ha的结合，而衍生出适体5的全长序列却不存在明显ha结合。实施例2.ha适体的眼部保留治疗眼后段的疾病需要将治疗剂以治疗浓度在眼后房(即玻璃体液)中保留足够长的时间，以便以可忍受的给药间隔递送有效的靶标抑制持续时间，同时还能够充分扩散到病变组织内的靶标处，从而提供足够的靶标占据来提供治疗效果。对于视网膜疾病，治疗剂通常必须通过玻璃体-视网膜界面扩散以接近病变组织中的预定目标，并且根据具体的适应症，可能需要深入渗透到视网膜组织，包括到达视网膜色素上皮(rpe)层以到达疾病部位的预定靶标。玻璃体内施用后药物在玻璃体内的保留时间或半衰期是与药物代谢相关的药物从玻璃体中清除的函数。对于具有相似代谢速率的治疗剂，清除速率对治疗剂达到足够浓度和半衰期的能力影响最大(delamo,e.m,k.-s.vellonen,h.kidron和a.urtti,2015,eur.j.ofpharmaceuticsandbiopharmaceutics,95:215-226)。从玻璃体的清除速率是分子大小的函数，其中较低分子量的较小分子比较高分子量的分子清除更快(shatz,w.,p.e.hass,m.mathieu,h.s.kim,k.leach,m.zhou,y.crawford,a.shen,k.wang,d.p.chang,m.maia,s.r.crowell,l.dickman,j.mscheer和r.f.kelley,2016,molecularpharmaceutics,13:2996-3003)。例如，<50kda的分子在兔的眼睛中可具有3天或更短的半衰期，而>80kda的分子在兔的眼睛中可具有6天或更长的半衰期(shatz,w.,等人,2016)。分子穿透视网膜并接合在视网膜组织中运行的靶标的能力也是分子大小的函数，其中较低分子量分子展现出比较高分子量分子更大的视网膜穿透(l.,v.-p.ranta,h.moilanen和a.urtti,2005,inv.ophthandvis.sci,46:641-646)。典型的实例是分子量约50kda的fab抗体片段与分子量约150kda的全长mab的视网膜穿透的比较，其中该fab抗体片段容易地深入渗透到视网膜组织中从而有效地达到rpe，而该全长mab在视网膜中的内界膜上展现出较差的扩散(mordenti,j.,a.cuthbertson,n.ferrara,k.thomsen,l.berleau,v.licko,p.c.allen,c.r.,valverde,y.g.meng,d.t.w.fei,k.m.fourre和a.m.ryan,1999,toxicologicpathology,27:536-544)。具有紧凑形状和8-15kda的典型分子量范围的适体具有视网膜穿透的理想分子量，但由于其分子大小和分子量降低而迅速从玻璃体中清除。为了增加玻璃体保留，可将适体与高分子量peg(例如40kda或更高)缀合，高分子量peg由于有较大的流体动力学半径，降低了适体的清除速率而不会过大损害适体穿透视网膜组织的能力。然而，peg确实大大增加了药物制剂的粘度，这限制了药物在合适制剂中的最大浓度，由于粘度对注射能力造成的限制，这极大地限制了施用于眼睛的潜在最大剂量，特别是给予可通过玻璃体内注射施用的小体积时。由与治疗性适体偶联的ha适体组成的双特异性适体可具有20至30kda的分子量。因此，由于它们的紧凑尺寸和相对低的分子量，这些分子可以容易地穿透视网膜，但是仅仅基于它们的大小和分子量可能会展现出较高的清除速率。然而，适体与玻璃体内的ha之间的相互作用可以降低适体在玻璃体液内的扩散速率，并因此与分子量相似但不与玻璃体组分相互作用的适体相比，所述适体在玻璃体内施用后从眼睛的清除速率降低。为了测试这一点，合成了在5’端上具有6-碳胺连接体的5号适体，并用nhs激活的荧光染料--s680(perkinelmer)标记，以产生可通过荧光分子断层扫描(fmt)在眼睛中定量的分子。类似地用-s680标记具有末端胺的高分子量peg(40kda支化peg)，以用作在玻璃体内注射后大大增强适体和相关分子的玻璃体内保留的已知载体的基准。以使每组中的平均体重维持在总平均值的10％以内的方式，将大鼠分配至荧光染料标记的5号适体或40kdapeg的治疗组中。在治疗当天，用腹膜内注射氯胺酮(80mg/kg)和甲苯噻嗪(6mg/kg)将大鼠麻醉。一旦完全麻醉，将无菌盐酸丙美卡因(0.5％)溶液局部施加至双眼以进行局部麻醉和镇痛。将大鼠定位成使得眼睛在手术显微镜下可见。用附接至10μl玻璃注射器的33g可移动针头抽取测试物。将针头以与巩膜呈45度角插入至刚好在睫状体上方。基于3μl总体积的玻璃体内给药体积中的-s680染料浓度，以0.2至2nmol的测试物剂量向大鼠的右眼和左眼施用单次玻璃体内注射。注射后，移除针头，并使用棉签拭子吸收任何渗漏。使用荧光分子断层扫描(fmt)评估单次玻璃体内注射后在眼睛中的保留随时间的变化。该方法能够通过进行连续fmt测量并将每个经处理的眼睛中感兴趣区域的荧光强度相对于在测试物施用后0至5分钟所测量的荧光强度进行归一化来计算每个经处理的眼睛中剩余的剂量百分比随时间的变化。在perkin-elmerfmt2500tmlx定量断层扫描成像系统(perkinelmer,hopkinton,ma)上进行体内fmt。临成像之前，使用在空气中的2％异氟烷气体麻醉将大鼠麻醉，并在整个成像期间维持在2％异氟烷下。将麻醉的大鼠以侧卧位置于成像盒中，确保眼睛位于成像系统的扫描区域内。将每只大鼠横向放置于左侧以使右眼成像并且横向放置于右侧以对左眼进行成像。然后将成像盒插入fmt成像室中的加热对接系统(调节在37℃下)。在整个成像期间，将每只大鼠维持在2％异氟烷麻醉下。在荧光扫描之前将扫描区域手动定位在受试者头部上方。每个扫描点的激光功率和曝光时间由系统自动调整，以提供高信噪比，同时避免饱和。每次扫描的总扫描时间为大约2-4分钟。在扫描期间，针对每个源位置在激发波长和荧光波长两者处捕获透照动物的图像。用近红外染料(-s680)评估fmt系统的定量准确度。通过fmt系统软件(truquanttm；perkinelmer)重建所收集的荧光数据图像以用于定量眼内的荧光信号。在眼睛周围绘制了感兴趣的三维区域(roi)。相对于用已知浓度的适当荧光染料生成的内部标准自动计算荧光染料的总量(以皮摩尔计)。对于每个研究，给药后0或5分钟时的平均荧光等于100％，随后相应地对研究中的每只大鼠进行归一化。表7中示出了在施用0.8nmol剂量的每种测试物后0和48小时，与peg相比，5号适体的保留。选择48小时时间点作为比较时间点，因为它提供了相当大的清除窗口，在该窗口处剩余的peg浓度能够在成像系统的定量下限之上可靠地定量。如表7中所示，通过5号适体的ha结合提供了与40kdapeg相当的对所施用玻璃体内剂量的保留，证明适体与ha的结合增加了其在玻璃体中的保留时间，且该保留时间增加与大得多的更高分子量peg载体分子相当。预期5号适体的玻璃体内保留可以通过增加其代谢稳定性(通过例如，用2’o甲基或2’氟代核苷酸代替dna核苷酸，或引入主链修饰如硫代磷酸酯和双硫醇酯)来进一步改善。而且可以通过增加其对ha的亲和力的化学取代来获得对5号适体的玻璃体内保留的进一步改善，如实施例1中所述。表7.注射后48hr时与40kdapeg相比，ha适体的保留实施例3.双特异性ha-pdgf适体本实施例描述了确定这类分子的活性的测定，该分子结合并抑制具有生物活性的蛋白质，例如诸如生长因子等蛋白质，并且还与玻璃体细胞外基质组分例如ha结合。例如，该分子可以是小分子、蛋白质或核酸。在一些实例中，该分子是形成三级结构的核酸，其可以直接结合pdgf并抑制pdgf对细胞增殖的激活，并且还直接结合ha。在一个实例中，这两种活性存在于连续核酸序列上，该连续核酸序列以产生结合pdgf和ha的两个栓系的三级结构的方式合成。在另一个实例中，这两种活性存在于两个独立的核酸序列中，该独立的核酸序列独立地合成，并随后以产生结合pdgf和ha的两个栓系的三级结构的方式化学连接。本公开内容提供了在pdgf依赖性细胞增殖测定中对血小板衍生生长因子-b(pdgf-b)抑制剂的鉴定。开发了抗pdgf适体(seq.idno:8，表8)，其直接结合pdgf-b并选择性地抑制pdgf-b活性(floegej.t.ostendorf,u.janssen,m.burg,hhradeke,c.vargeese,scgill,l.s.green和n.janjic,1999,am.j.pathol154:169-179)。在一个实例中，该抗pdgf结合适体通过固相寡核苷酸合成而合成，然后是作为连接体的六亚乙基间隔区，再然后是ha适体，从而产生ha-pdgf双特异性适体，该双特异性适体可以将抗pdgf适体栓系到玻璃体内的ha以产生具有低玻璃体清除的治疗剂，并由此增强玻璃体内施用后的玻璃体半衰期。表8.适体序列含有ha结合模块并紧接着是抗pdgf模块的适体的三个实例是9号适体(seqidno:9)、10号适体(seqidno:10)和11号适体(seqidno:11)，它们分别包括3、5和7号适体与8号适体组合的双特异性(表8)。为了确定具有栓系的第二结构域的这些适体是否保留pdgf-b活性，就抑制pdgf-b刺激的细胞增殖的能力将它们与8号适体进行比较(图1)。9、10和11号适体均保留了与8号适体相似的pdgf-b抑制活性。通过活细胞中的线粒体琥珀酸脱氢酶将mtt(roche11-465-007-001)还原为甲(formozan)来定量小鼠3t3细胞系(atcccrl-1658)中pdgf-b(r&dsystems220-bb)对细胞增殖的刺激。将平底96孔板以在100μldmem/10％fbs中的15,000个3t3细胞/孔接种，并在37℃下用5％co2温育过夜。用90μl预热的dmem/0.8％fbs替换细胞培养基，并将细胞在37℃下温育3小时。将5μl适体与5μlpdgf-b混合以产生2nm的最终pdgf-b浓度和80、40、20、10、5、2.5、1.25、0.625或0μm的最终适体浓度，并添加至每个孔中的90μl培养基中。将细胞在37℃下用5％co2温育3天，然后添加10μlmtt溶液并在37℃下用5％co2再温育1.5小时。然后去除培养基并向每个孔添加200μl的100％异丙醇，然后通过甲(formozan)在570nm处的光学吸光度来定量甲(formozan)形成。本公开内容提供了如通过在tr-fret测定中与结合ha的肿瘤坏死因子刺激的基因-6(tsg-6)竞争而确定的，结合ha的分子的鉴定。tsg-6是通过tsg-6的link模块结合ha的蛋白质(higman,v.a.,d.c.briggs,d.j.mahoney,c.dblundell,b.m.sattelle,d.p.dyer,d.e.green.p.ldeangelis,a.almond,c.m.milner和a.j.day,2014,j.biol.chem.289:5619-5634.)。tsg-6与ha的八糖单元最佳结合，该八糖单元是一种由d-葡糖醛酸和n-乙酰基-d-葡糖胺的重复二糖组成的高分子量的细胞外基质多糖(higman等人,2014)。使用mab抗6his-tb穴状化合物(cryptate)gold(cisbio#61h12tla)和链霉亲和素-xlent(cisbio#611saxla)通过时间分辨荧光共振能量转移(tr-fret)或均相时间分辨荧光(htrf)检测10x-his-tsg6与20kda单生物素化ha的结合。当tb穴状化合物标记的抗-his抗体与10x-his-tsg6结合时，以及当xlent标记的链霉亲和素与生物素化的ha结合时，xlent供体与tb穴状化合物接受体的接近使htrf信号更高。在两个波长(620nm供体荧光和665nm接受体荧光)下测量该信号，并计算接受体荧光与供体荧光的比率以确定所形成的复合物的相对量。该htrf信号与结合ha的tsg-6的量成比例，并且与tsg-6对ha的结合相竞争的非his标记的分子导致htrf信号减少。在平底384孔板中，将以下试剂添加至ph7.4的pbs缓冲液(10mm磷酸盐缓冲液、137.5mmnacl、5.7mmkcl、1mmmgcl2、1mmcacl2、0.1％bsa和0.05％吐温)中：抗6xhis-tb穴状化合物(cryptate)gold+tsg6+单生物素标记的透明质酸+至多125μm适体，总体积为15μl。在室温下温育30分钟后，添加链霉亲和素-xlent，并在665/620nm处读取htrf信号。在一个方面，采取结合ha的构象的核酸在空间上抑制tsg-6并行地与同一ha分子结合，从而导致htrf信号减少。结合ha的示例性修饰的核酸序列为9、10和11号适体，它们在125μm下将tsg-6与ha的结合分别降低至30％、32％和27％(表9和图2)。表9.ha-pdgf双特异性适体对ha结合的抑制适体9号10号11号ha-抑制活性(％)3032279、10和11号适体是具有pdgf抑制结构域和ha结合结构域的双特异性分子。鉴于实施例2中5号适体所展现的玻璃体内保留增加，9、10和11号适体是这样的ha-pdgf双特异性适体，预期其相对于分子量相当的分子在玻璃体中展现出增加的保留，并因此展现出延长的玻璃体内半衰期和pdgf抑制作用的持续时间。实施例4.在啮齿动物攻击模型中对ha-pdgf和vegf双特异性适体的效果持续时间的评估可以在啮齿动物攻击模型中评估ha-治疗性双特异性适体的作用持续时间。在该实施例中，使用大鼠pdgf-bb攻击模型和大鼠vegf攻击模型来分别评估ha-pdgfb分子或ha-vegf双特异性适体减少或防止由pdgf-bb或vegf向大鼠眼睛中的玻璃体内(ivt)施用而诱导的血管渗漏的功效。通过荧光素血管造影术(fa)测定和伊文思蓝渗漏(eb)测定来量化pdgf-bb或vegf诱导血管渗漏后的眼部血管渗漏浓度和时间响应。对于pdgf-bb攻击模型，30ng/眼睛的pdgf-bb的ivt施用诱导出眼睛中的血管渗漏。对于vegf攻击模型，1ng/眼睛的vegf的ivt施用诱导出眼睛中的血管渗漏。通过荧光素血管造影测定和伊文思蓝渗漏测定评估眼睛中的血管渗漏。在这些研究中，可以通过在施用pdgf-bb或vegf攻击之前的不同天数施用ha-治疗性双特异性适体来确定治疗剂的效果持续时间。例如，该ha-治疗性双特异性适体可以在攻击前的3、7、14、21或28天施用，以评估在施用生长因子攻击时有效量的治疗剂是否保留在眼睛中。还可以包括使用聚乙二醇化和非缀合形式的治疗性适体的比较组，以证明当治疗性适体与ha适体缀合时效果持续时间的增加。在该实施例中，为了验证pdgf-bb和vegf攻击模型，使用聚乙二醇化8号适体进行初步研究以确定血管渗漏对pdgf-bb活性的依赖性，并且使用抗vegffab来确定血管渗漏对vegf疗法的依赖性，其中每种药剂单独和组合测试。用氯胺酮/甲苯噻嗪(约75mg/kg:10mg/kg)将大鼠麻醉，并向大鼠的左眼和右眼玻璃体内施用聚乙二醇化8号适体(3μl中73μg)，或抗vegf疗法(1μl中10μg)，或聚乙二醇化8号适体和抗vegf疗法，或盐水/pbs。对于接受单一疗法的组，施用1或3μl的第二次pbs注射以对应pdgf+vegf治疗组中的多次注射。在第3天，用1μl的30ng/μlpdgf-bb或1ng/μlvegf-a121(1μl)或1μl盐水诱导血管渗漏。在显微镜下使用具有30号针头的10或25μlhamilton注射器进行玻璃体内注射。通过荧光素血管造影术(fa)评估血管渗漏。临施用测试物或pbs之前，临施用pdgf-bb或vegf之前，以及在给药后24、48、72和96h时，进行荧光素血管造影术。对于定性荧光素渗漏评分，用氯胺酮/甲苯噻嗪(约75mg/kg:10mg/kg)将动物麻醉，并随后腹膜内施用0.5ml/kg10％荧光素钠以使视网膜脉管系统可视化。在注射后1-6分钟用microniii眼底照相机记录视网膜的照片和视频，以便对早期和晚期的血管造影片进行记录和评分。图像评估是随机化的，并相应地对掩蔽图像的渗漏进行评分：0分-没有视网膜血管渗漏的迹象；1分-模糊地暗示视网膜血管荧光渗漏；如果感知到的渗漏是轻微的，则可以使用弯曲度的增加来确认评分为1；2分-在大多数或所有视网膜血管上清晰的荧光素渗漏。fa渗漏评分被确定为早期个体fa评分与晚期个体fa评分的差异。如图3所示，聚乙二醇化8号适体的单独施用或与抗vegf疗法联合施用减少了如通过fa所测量的血管渗漏，验证了该模型中血管渗漏对pdgf活性的依赖性。同样地，如图4所示，抗vegf疗法的施用减少了如通过fa所测量的血管渗漏，验证了该模型中血管渗漏对vegf活性的依赖性。将伊文思蓝(eb)染料与白蛋白共价连接，并用作白蛋白从脉管系统渗漏到视网膜中的敏感定量指示剂。在深度麻醉下，通过尾静脉静脉内注射无菌肝素化盐水中的eb(30mg/ml；30mg/kg)。1小时后，采用温和的注射器灌注，通过使用在预热至37℃的无菌肝素化柠檬酸缓冲液(ph3.5)中的1％多聚甲醛灌注脉管系统来洗掉eb，摘出眼睛，并取下视网膜。在染料提取后通过分光光度法测定eb含量。如图5所示，用单独或与抗vegf疗法联合的聚乙二醇化8号适体以及单独的抗vegf疗法的治疗定量地减少了由pdgf-bb或vegf诱导的血管渗漏，进一步证明该模型中血管渗漏对各自的pdgf-bb和vegf活性的依赖性。使用大鼠pdgf-bb攻击模型来证明ha适体增加治疗性适体的治疗效果的持续时间的能力。将大鼠分配至用聚乙二醇化8号适体(3μl中75μg)或ha-pdgf双特异性9号适体(3μl中75μg)或pbs治疗。对于每次治疗，在施用30ngpdgf-bb之前28、21、14、7或3天时用聚乙二醇化8号适体或9号适体或pbs治疗各组大鼠。然后如上所述确定血管渗漏。对于在pdgf-bb攻击前3天治疗的组，聚乙二醇化8号和9号适体显示出相当的功效。对于在第7天或第14天治疗的组，9号适体显示出比用聚乙二醇化8号适体治疗的动物显著更大的治疗效果，从而证明相比于与peg缀合，通过将治疗性适体与ha适体缀合所提供的治疗效果的持续时间得到增加。类似地，在21天和28天给药组中，与聚乙二醇化8号适体没有治疗效果相比，9号适体的一些治疗效果持续存在。使用大鼠vegf攻击模型来证明ha适体增加治疗性适体的治疗效果的持续时间的能力。将大鼠分配至用聚乙二醇化12号适体(3μl中5μg，)或ha-vegf双特异性13号适体(3μl中5μg)或pbs治疗。对于每次治疗，在施用1ngvegf-a165之前28、21、14、7或3天时用聚乙二醇化12号适体或13号适体或pbs治疗各组大鼠。然后如上所述确定血管渗漏。对于在vegf攻击前3天治疗的组，聚乙二醇化12号和13号适体显示出相当的功效。对于在第7天或第14天处理的组，13号适体显示出比用聚乙二醇化12号适体治疗的动物显著更大的治疗效果，从而证明相比于与peg缀合，通过将治疗性适体与ha适体缀合所提供的治疗效果的持续时间得到增加。类似地，在21天和28天给药组中，与聚乙二醇化12号适体没有治疗效果相比，13号适体的一些治疗效果持续存在。实施例5.用ha-pdgf双特异性适体对湿性年龄相关性黄斑变性(wamd)的治疗与40kdapeg缀合的8号适体(e10030)为抗pdgf-b适体，其在与抗vegf疗法联合治疗湿性年龄相关性黄斑变性(wamd)的2期研究中显示出对pdgf的有效抑制和临床功效。然而，在wamd治疗的3期研究中，e10030在添加至抗vegf标准治疗(standardofcare)时未能显示出超过单独的抗vegf标准治疗的改善。在该实施例中，通过固相合成将8号适体(e10030的适体组分)栓系到3号适体，以产生由ha结合结构域和pdgf抑制剂结构域组成的双特异性适体，从而产生9号适体，该9号适体具有大约22,750da的分子量(表8)。或者，产生具有c6-二硫化物连接体的3号适体，并通过首先使8号适体与马来酰亚胺-peg8-nhs连接体反应并随后还原3号适体上的二硫化物并且使其与马来酰亚胺-peg8-c6-8号适体反应而将该3号适体与8号适体缀合，从而产生双特异性构建体，该构建体由3号适体的5’端经由peg8连接体与8号适体的5’端栓系而组成。e10030呈现为在基于寡核苷酸分子量30mg/ml的浓度下的等渗中性ph制剂，并且通过27号针头以50μl体积玻璃体内施用，最大剂量为1.5mg/眼睛。e10030的最大剂量被药物产品溶液的粘度限制为在通过27号针头的50μl注射体积中1.5mg。将e10030与更大号针头一起使用将进一步降低最大可施用剂量。相比之下，在一个实施方案中，9号适体以100mg/ml的浓度存在于预填充注射器中，其可通过27-33号针头在50μl注射体积中施用5mg的剂量。当在具有1/2英寸27号针头的50μl预填充注射器中配制时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约38,800厘泊至约194,100厘泊、约97,000厘泊至约485,500厘泊或约194,100厘泊至约970,800厘泊。当在具有1/2英寸30号针头的50μl预填充注射器中配制时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约13,100厘泊至约65,000厘泊、约32,700厘泊至约164,000厘泊或约65,000厘泊至约325,000厘泊。类似地，当在具有1/2英寸33号针头的50μl预填充注射器中配制时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约2,800厘泊至约14,500厘泊、约7,300厘泊至约36,500厘泊或约14,500至约75,000厘泊。在另一个实施方案中，鉴于9号适体相对于e10030的较低粘度，预期200至250mg/ml或更高的呈现将具有足够低的粘度，从而能在27-33号针头中施用以在50μl注射体积中提供10至15mg或更高的剂量。通常，与ha适体结合模块缀合的适体在ph7.4或接近ph7.4的稀磷酸盐缓冲液(例如，在5至10mm磷酸盐的范围内)或在调节至ph7.4或接近ph7.4的纯水中配制。如果可以，可根据usp和fda最近的出版物少量使用添加剂，包括缓冲盐。预期治疗性适体如9号适体的呈现会相比于与高分子量peg(如用于和的支化40kdapeg)缀合的相同适体，为玻璃体内施用提供了更有利的呈现。虽然peg与适体的缀合赋予了延长玻璃体内半衰期的预期效果，但它还显著促进溶液的粘度。peg是众所周知的剪切增稠剂，意味着给定浓度的溶液的粘度不是固定的参数，而是随着施加到溶液的剪切力的增加而增加。这种现象在peg化适体的施用中导致严重的限制，因为必须在给药溶液的浓度与施用药物所使用的针头的直径之间实现折衷。治疗性适体与ha适体的缀合(双特异性ha-治疗性适体)提供了在不遭遇剪切增稠的情况下实现药物产品的所需临床浓度的机会。另外，双特异性ha-治疗性适体的较小的总体大小和分子量仅为与40千道尔顿peg缀合的适体的约40％。因此，预期双特异性ha-治疗性适体会是比可比的peg化适体更为紧凑的结构，从而使分子间相互作用更少。双特异性ha-治疗性适体临床产品更有可能在允许通过28、30或甚至33号针头施用的粘度下达到所需的临床浓度。因此，使患者的不适以及施用期间严重受损伤的风险最小化。可以使用上述制剂，通过由50μl注射剂与1/2英寸30-33号针头组成的预填充注射器，以5至15mg/眼睛的剂量向患有wamd的患者施用9号适体。9号适体可以与抗vegf疗法联合施用，该抗vegf疗法可以由1.25mg的0.5mg的或2mg的组成，其注射可以独立地进行。预期9号适体在玻璃体中会具有10至28天的半衰期，从而支持每3至6个月施用，而抗vegf疗法可基于针对所选择的抗vegf疗法的包装插页每1或2个月施用。预期9号适体与抗vegf疗法联合施用会在12个月的疗法后改善视敏度(etdrs字母)相对于基线的平均变化。可以监测9号适体与抗vegf疗法联合施用的不良事件，包括在眼科检查、眼内压、荧光血管造影术、光学相干断层扫描、ecg和实验室变量中的变化。总体而言，预期9号适体与抗vegf疗法的联合会比e10030与抗vegf疗法的联合疗法更有效，因为所施用的抗pdgfb治疗剂的剂量增加。此外，鉴于9号适体与e10030相比具有更长的效果持续时间，还可以预期9号适体治疗可以产生较少的副作用，因为在治疗期间使用更大号针头，注射次数更少。实施例6.用ha-vegf双特异性适体对wamd的治疗与40kdapeg缀合的12号适体(ruckman,j.,l.s.green,j.beeson,s.waugh,w.l.gillette,d.d.henninger,l.claesson-welsh和n.janjic,1998,j.biol.chem.273:20556-20567)(nx1838，)是一种与vegf的肝素结合结构域结合的抗vegf适体，其表现出vegf的有效抑制和治疗湿性年龄相关性黄斑变性(wamd)的临床功效。在该实施例中，通过固相合成将nx1838的适体组分(12号适体)栓系到5号适体，以产生由ha结合结构域和vegf抑制剂结构域组成的双特异性适体，从而得到具有大约22,100da的分子量的13号适体(表10)。或者，产生具有c6-二硫化物连接体的5号适体，并通过首先使12号适体与马来酰亚胺-peg8-nhs连接体反应，随后还原5号适体上的二硫化物并使其与马来酰亚胺-peg8-c6-12号适体反应而将其与12号适体缀合，从而产生双特异性构建体，该构建体由5号适体的5’端经由peg8连接体与12号适体的5’端栓系而组成。表10.适体序列呈现为在基于寡核苷酸分子量3.5mg/ml的浓度下的等渗中性ph制剂，并且通过30号1/2英寸长的针头以90μl体积玻璃体内施用，最大剂量为0.3mg/眼睛。的最大剂量被药物产品溶液的粘度限制为在通过30号针头的90μl注射体积中的0.3mg。将哌加他尼(pegaptinib)与更大号的针头一起使用将进一步降低最大可施用剂量。相比之下，在一个实施方案中，13号适体以100mg/ml的浓度存在于预填充注射器中，其可通过27-33号针头在50μl注射体积中施用5mg的剂量。当在具有1/2英寸27号针头的50μl预填充注射器中配制时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约38,800厘泊至约194,100厘泊、约97,000厘泊至约485,500厘泊或约194,100厘泊至约970,800厘泊。当在具有1/2英寸30号针头的50μl预填充注射器中配制时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约13,100厘泊至约65,000厘泊、约32,700厘泊至约164,000厘泊或约65,000厘泊至约325,000厘泊。类似地，当在具有1/2英寸33号针头的50μl预填充注射器中配制时，本文中提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约2,800厘泊至约14,500厘泊、约7,300厘泊至约36,500厘泊或约14,500至约75,000厘泊。在另一个实施方案中，鉴于13号适体相对于哌加他尼的较低粘度，预期200至250mg/ml或更高的呈现将具有足够低的粘度，从而能在27-33号针头中施用以在50μl注射体积中提供10至15mg或更高的剂量。通常，与ha适体结合模块缀合的适体可在ph7.4或接近ph7.4的稀磷酸盐缓冲液(例如，在5至10mm磷酸盐的范围内)或在调节至ph7.4或接近ph7.4的纯水中配制。如果可以，将根据usp和fda最近的出版物少量使用添加剂，包括缓冲盐。预期治疗性适体如12号适体的呈现会相比于与高分子量peg(如用于和的支化40kdapeg)缀合的相同适体，为玻璃体内施用提供更有利的呈现。虽然peg与适体的缀合赋予了延长玻璃体内半衰期的预期效果，但它还显著促进溶液的粘度。peg是众所周知的剪切增稠剂，意味着给定浓度的溶液的粘度不是固定的参数，而是随着施加到溶液的剪切力的增加而增加。这种现象在peg化适体的施用中导致严重的限制，因为必须在给药溶液的浓度与施用药物所使用的针头的直径之间实现折衷。治疗性适体与ha适体的缀合(双特异性ha-治疗性适体)提供了在不遭遇剪切增稠的情况下实现药物产品的所需临床浓度的机会。另外，双特异性ha-治疗性适体的较小的总体大小和分子量仅为与40千道尔顿peg缀合的适体的约40％。因此，预期双特异性ha-治疗性适体会是比可比的peg化适体更为紧凑的结构，从而使分子间相互作用更少。双特异性ha-治疗性适体临床产品更有可能在允许通过28、30或甚至33号针头施用的粘度下达到所需的临床浓度。因此，使患者的不适以及施用期间严重受损伤的风险最小化。可以使用上述制剂，通过由50μl注射剂与1/2英寸30-33号针头组成的预填充注射器，以最高5至15mg/眼睛的剂量向患有wamd的患者施用13号适体。与每月施用一次的或每6周施用一次的或者可以每月一次或两月一次(每两个月一次)施用的相比，13号适体每2至6个月施用一次。预期13号适体的施用与现有的基于抗体的vegf疗法相当，在经12个月疗法后会改善或维持视敏度(etdrs字母)相对于基线的平均变化，并且由于所施用的剂量增加，预期会比更有效。可以监测13号适体施用的不良事件，包括在眼科检查、眼内压、荧光血管造影术、光学相干断层扫描、ecg和实验室变量中的变化。此外，鉴于13号适体与其他vegf疗法相比具有更长的效果持续时间，还可以预期13号适体治疗可以产生较少的副作用，因为在治疗期间使用更大号针头，注射次数更少。实施例7.用ha-c5双特异性适体对地图样萎缩(ga)的治疗与40kdapeg缀合的14号适体(arc-1905，)为抗补体c5适体(biesecker,g.,l.dihel,k.enney和r.a.bendele,1999,immunopharmacology,42:219-230)，其在ga的治疗中表现出有效的补体活性抑制和治疗效果。在该实施例中，通过固相合成将的适体组分(14号适体)栓系到7号适体，以产生由ha结合结构域和c5抑制剂结构域组成的双特异性适体，从而得到具有大约24,750da的分子量的15号适体(表11)。或者，产生具有c6-二硫化物连接体的7号适体，并通过首先使14号适体与马来酰亚胺-peg8-nhs连接体反应，随后还原7号适体上的二硫化物并使其与马来酰亚胺-peg8-c6-14号适体反应而将其与14号适体缀合，从而产生双特异性构建体，该构建体由7号适体的5’端经由peg8连接体与14号适体的5’端栓系而组成。表11.适体序列呈现为在基于寡核苷酸分子量30-40mg/ml的浓度下的等渗中性ph制剂，并且以50-75μl体积玻璃体内施用，最大剂量为2.0mg/眼睛。的最大剂量受到药物产品溶液的粘度的限制。相比之下，在一个实施方案中，15号适体以100mg/ml的浓度存在于预填充注射器中，其可通过27-33号针头在50μl注射体积中施用5mg的剂量。当在具有1/2英寸27号针头的50μl预填充注射器中配制时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约38,800厘泊至约194,100厘泊、约97,000厘泊至约485,500厘泊或约194,100厘泊至约970,800厘泊。当在具有1/2英寸30号针头的50μl预填充注射器中配制时，本文提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约13,100厘泊至约65,000厘泊、约32,700厘泊至约164,000厘泊或约65,000厘泊至约325,000厘泊。类似地，当在具有1/2英寸33号针头的50μl预填充注射器中配制时，本文中提供的剂型(或浓度)的动态粘度可以为约2,800厘泊至约14,500厘泊、约7,300厘泊至约36,500厘泊或约14,500至约75,000厘泊。在另一个实施方案中，鉴于15号适体相对于的较低粘度，预期200至250mg/ml或更高的呈现将具有足够低的粘度，从而能在27-33号针头中施用以在50μl注射体积中提供10至15mg或更高的剂量。通常，与ha适体结合模块缀合的适体可以在ph7.4或接近ph7.4的稀磷酸盐缓冲液(例如，在5至10mm磷酸盐的范围内)或在调节至ph7.4或接近ph7.4的纯水中配制。如果可以，可根据usp和fda最近的出版物少量使用添加剂，包括缓冲盐。预期治疗性适体如15号适体的呈现会相比于与高分子量peg(如用于和的支化40kdapeg)缀合的相同适体，为玻璃体内施用提供更有利的呈现。虽然peg与适体的缀合赋予了延长玻璃体内半衰期的预期效果，但它还显著促进溶液的粘度。peg是众所周知的剪切增稠剂，意味着给定浓度的溶液的粘度不是固定的参数，而是随着施加到溶液的剪切力的增加而增加。这种现象在peg化适体的施用中导致严重的限制，因为必须在给药溶液的浓度与施用药物所使用的针头的直径之间实现折衷。治疗性适体与ha适体的缀合(双特异性ha-治疗性适体)提供了在不遭遇剪切增稠的情况下实现药物产品的所需临床浓度的机会。另外，双特异性ha-治疗性适体的较小的总体大小和分子量仅为与40千道尔顿peg缀合的适体的约40％。因此，预期双特异性ha-治疗性适体会是比可比的peg化适体更为紧凑的结构，从而使分子间相互作用更少。双特异性ha-治疗性适体临床产品更有可能在允许通过28、30或甚至33号的针头给药的粘度下达到所需的临床浓度。因此，使患者的不适以及施用期间严重受损伤的风险最小化。可以使用上述制剂，通过由50μl注射剂与1/2英寸30-33号针头组成的预填充注射器，以5至15mg/眼的剂量向患有ga的患者施用15号适体。15号适体可以单独施用或与抗vegf疗法联合施用，该抗vegf疗法可以由1.25mg的0.5mg的或2mg的组成，其注射可以独立地进行。预期15号适体会具有10至28天的半衰期，从而支持每3至6个月施用，而抗vegf疗法可基于针对所选择的抗vegf疗法的包装插页每1或2个月施用。预期单独或与抗vegf疗法联合施用15号适体会在经12个月疗法后改善视敏度(etdrs字母)相对于基线的平均变化、改善最佳矫正视敏度、减少如通过oct测量的玻璃膜疣体积和视网膜增厚。可以监测单独或与抗vegf疗法联合施用15号适体的不良事件，包括在眼科检查、眼内压、荧光血管造影术、光学相干断层扫描、ecg和实验室变量中的变化。总体而言，预期使用单独或与抗vegf疗法联合的15号适体会比单独或与抗vegf疗法联合的更有效，因为所施用的抗c5治疗剂的剂量增加。此外，鉴于15号适体与相比具有更长的效果持续时间，还可以预期15号适体治疗可以产生较少的副作用，因为在治疗期间使用更大号针头，注射次数更少。尽管本文中已经示出和描述了本发明的优选实施方案，但对于本领域技术人员将显而易见的是，这些实施方案仅以示例的方式提供。本领域技术人员在不脱离本发明的情况下现将想到多种变化、改变和替代。应当理解，本文中所述的本发明实施方案的各种替代方案均可用于实施本发明。旨在以下述权利要求限定本发明的范围，并由此涵盖这些权利要求范围内的方法和结构及其等同物。当前第1页12