大口黑鲈生长相关的SNP位点及其应用的制作方法

技术特征：

1.大口黑鲈HSC70-1的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.权利要求1所述大口黑鲈HSC70-1的基因序列为SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列，其第821位S为碱基C或G，第2804位W为碱基A或T。

3.权利要求2所述大口黑鲈HSC70-1基因序列在判断大口黑鲈生长快慢中的应用。

4.大口黑鲈生长速度相关的SNP位点，其位于HSC70-1基因序列SEQ ID NO：2所示的第821位碱基、第2804位碱基。

5.权利要求4所述SNP位点在判断大口黑鲈生长快慢中的应用。

6.权利要求4所述SNP位点在筛选快速生长大口黑鲈中的应用。

7.一种筛选快速生长大口黑鲈的方法，其特征在于，检测大口黑鲈HSC70-1基因序列SEQ ID NO：2的第821位碱基处的SNP位点是否为CC纯合体，若是，则为快速生长的大口黑鲈；或/和，检测HSC70-1基因序列SEQ ID NO：2的第2804位碱基处的SNP位点是否为TT纯合体，若是，则为快速生长的大口黑鲈。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)提取大口黑鲈DNA；

2)以提取得到的DNA为模板，PCR检测大口黑鲈HSC70-1基因序列第821、2804位碱基处的SNP位点是否分别为CC、TT纯合体。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述PCR检测的具体操作为，分别利用引物

P1F和P1R、P2F和P2R对大口黑鲈DNA进行初次PCR扩增，得到初次PCR产物，

P1F：5'-TGAAGCCTACCTCGGAAAAGT-3'(SEQ ID NO.3)，

P1R：5'-AGCATCCTTAGTGGCCTGGCGC-3'(SEQ ID NO.4)，

P2F：5'-TCCACCAGCTTATCAGACTGT-3'(SEQ ID NO.5)，

P2R：5'-GGTCAACCCTCCAAGTAACTT-3'(SEQ ID NO.6)；

再将初次PCR产物分别用引物P1和P2进行延伸扩增，将所得产物经测序分析，确定大口黑鲈HSC70-1基因序列第821、2804位碱基处的SNP位点是否分别为CC、TT纯合体；

P1：5'-TTACTTAGCATAGCTCTGGACA-3'(SEQ ID NO.7)，

P2：5'-CTGTAGGGGGTAACTGAAGGGT-3'(SEQ ID NO.8)。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，初次PCR扩增的反应体系为：

初次PCR扩增反应程序为：94℃预变性3min；94℃变性15s，56℃退火15s，72℃延伸30s，24个循环；72℃延伸3min。