本发明涉及一种容器，尤其涉及一种培养细胞的容器，以增大细胞培养面积。
背景技术：
小规模的动物细胞或组织体外培养的容器主要采用细胞培养瓶。商品细胞培养瓶材质主要为玻璃和塑料两种，瓶子的底部形状有正方形、长方形、三角形、梯形等；细胞贴壁培养面积为25cm2～175cm2，培养瓶容积有5ml至500ml。由于细胞瓶多横卧放置二氧化碳培养箱，为了吸液或者收获方便，瓶颈样式也有多种设计，有直颈、斜颈、角度颈、三角形、矩形等。目前大多数细胞培养器皿多为单层器皿，如常规的容量50ml(培养面积为25cm2)和容量250ml(培养面积75cm2)塑料细胞培养瓶。
对于贴壁生长的动物细胞进行大规模细胞培养时，有多种策略。一种是采用玻璃或不锈钢生物反应器，细胞需要贴附载体圆盘片进行生长，需要搅拌通气，这类细胞培养目的主要以收集细胞分泌的产品为主，如单克隆抗体生产。第二种是定制的更大规格的培养瓶，增大细胞瓶底部贴壁面积，以赛默飞世尔科技公司(thermofisherscientifictmnunctm)和康宁公司(corningincoporated)为代表的细胞工厂系统，采用多层细胞瓶叠加。第三种是采用传统的筒形的细胞培养滚瓶。
在实际生产中，筒形的细胞培养滚瓶用来扩增贴壁或悬浮生长的细胞，有许多优势。采用滚瓶培养的好处是成本低，技术成熟，操作简便。生产上根据需要增大滚瓶数量，增加细胞的培养量。
技术实现要素：
本发明的一个目的在于提供一种增大细胞培养面积的细胞培养滚瓶，提高贴壁细胞培养量。
本发明的另一个目的在于提供一种增大细胞培养面积的细胞培养滚瓶，适用于干细胞和其它种类细胞的扩增培养。
一种增大细胞培养面积的细胞培养滚瓶，包括瓶体和瓶颈，瓶体包括瓶底、瓶内壁、瓶内腔和瓶顶。瓶内腔设置至少1片导流板，至少一处导流板的周沿与瓶底、瓶内壁或瓶顶相连。
瓶颈内腔与瓶体内腔连通。
导流板由聚苯乙烯，聚乙烯，或聚对苯二甲酸类塑料等制成，厚度为1毫米～4毫米，长度为瓶内腔深度的1/2以上，尤其是瓶内腔深度的80％～90％，宽度小于瓶体的半径，其板面沿瓶体的径向铺展。
导流板的一侧与瓶内腔壁相接，其两端分别与瓶底和瓶顶形成间隙，间隙的宽度为瓶内腔深度的5％～10％，使得瓶体内各处的流体准数为2500～3000之间。
导流板的板面优先选择扇形板，以产生稳定的流体准数。
导流板数量为2件以上，如：但不限于2、4、6、8和10等，两两成对，沿瓶体的直径设置，分布于瓶体轴向的两侧，优先选择4件导流板。
本发明提供的滚瓶应用于干细胞培养，尤其是神经干细胞的培养中，能显著提高细胞活力，细胞存活率亦显著提高。
本发明技术方案实现的有益效果：
本发明提供的增大细胞培养面积的细胞培养滚瓶是在现有滚瓶的基础上，沿瓶体的径向，在瓶体内腔增加导流板，尤其是具有扇形面的导流板，实现细胞于立体空间生长，不仅扩大了细胞生长面积，节约细胞培养空间，显著提高了细胞培养量，提高细胞培养效率。
本发明提供的增大细胞培养面积的细胞培养滚瓶显著提高了细胞活力，细胞存活率亦显著提高。
附图说明
图1为本发明增大细胞培养面积的细胞培养滚瓶一实施例的结构示意图；
图2为图1所示增大细胞培养面积的细胞培养滚瓶另一角度的结构示意图。
具体实施方式
以下结合附图详细描述本发明的技术方案。本发明实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。
图1为本发明增大细胞培养面积的细胞培养滚瓶一实施例的结构示意图，图2为图1所示增大细胞培养面积的细胞培养滚瓶另一角度的结构示意图。如图1和图2所示，本实施例的增大细胞培养面积的细胞培养滚瓶，包括一体连接的塑料瓶体1和瓶颈2。瓶体1包括瓶底、瓶内壁、瓶内腔和瓶顶。瓶体内腔设置至少1片导流板，至少一处导流板的周沿与瓶底、瓶内壁或瓶顶相连。
本实施例中，瓶内壁均匀分布4件导流板3，两两成对，沿瓶体的直径设置，分布于瓶体轴向的两侧。各个导流板厚度为1毫米～4毫米，长度为瓶内腔深度的1/2以上，尤其是瓶内腔深度的80％～90％，宽度小于瓶体的半径，其板面沿瓶体的径向铺展。各个导流板一侧均与瓶体内腔壁相接，其两端分别与瓶底和瓶顶设置间隙，间隙的宽度为瓶内腔深度的5％～10％，使得瓶体内各处的流体准数为2500～3000之间，以此提高所培养的细胞活力，细胞存活率显著提高。
本实施例的导流板，还扩大了细胞生长面积，节约细胞培养空间，显著提高了细胞培养量，提高细胞培养效率。
以康宁2000ml(850cm2)聚苯烯滚瓶大小为例(
使用本实施例提供的滚瓶，瓶身内按轮扇形，间隔90度，增加对称性4件导流板，大小60mm×210mm，由于培养板两面都可以提供细胞生长面，因此额外增大的细胞生长面积为1008cm2，相当于增加了一个滚瓶的细胞生长面积，活细胞数量显著增加。
将10ml含有约100万个小鼠神经干细胞c17.2的dmem培养基(10％胎牛血清(gibico)，5％马血清(gibico)，加入到康宁2000ml(850cm2)聚苯烯滚瓶中，添加约160ml上述dmem培养基。神经干细胞经过5～7天滚瓶培养后，经0.25％胰蛋白酶-edta溶液(invitrogen)洗脱收获神经干细胞。离心，洗涤后的神经干细胞重悬于10mldmem培养基中，经0.4％台盼蓝(invitrogen)染色法检测细胞存活率，细胞存活力达到95％，细胞数量约170万。这表明神经干细胞c17.2可以在滚瓶中生长良好。