本发明涉及多肽合成领域，具体涉及(s)-1-(叔丁氧羰基)-5-氧吡咯烷-2-羧酸乙酯的制备方法。
背景技术
(s)-1-(叔丁氧羰基)-5-氧吡咯烷-2-羧酸乙酯（别名：n-叔丁氧羰基-焦谷氨酸乙酯，cas:144978-12-1）用于各种药理化合物的合成。它被用于合成hcv保护酶抑制剂和烷基肾素抑制剂，是一种非常有前景的有机分子。
目前现有技术中，按照传统工艺及经验做法是由h-glu-oh出发，先做成z-glu-oh，再经过缩合做成z-pyr-oh.dch再经过重结晶做的z-pyr-oh，之后和乙醇反应做的z-pyr-oet，再经过催化氢化脱除z-基团得到h-pyr-oet，再和boc-基团供体反应制得boc-pyr-oet；或有h-pyr-oh出发，经过和乙醇混合并滴加氯化亚砜反应制得h-pyr-oet.hcl，再经脱盐制得h-pyr-oet，再与boc-基团供体反应制得boc-pyr-oet。上述方法或类似方案制备boc-pyr-oet操作周期长，得率很低，成本高，不适宜工业化生产。
技术实现要素：
本发明目的在于克服原工艺中的复杂性，成本高，收率低、产品质量不达标等技术问题，提供(s)-1-(叔丁氧羰基)-5-氧吡咯烷-2-羧酸乙酯的制备方法，
为了达到上述发明目的，本发明采用的技术方案是：(s)-1-(叔丁氧羰基)-5-氧吡咯烷-2-羧酸乙酯的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
第一步，制备boc-glu-oet：将h-glu-oet与boc-基团的保护试剂混合，制备得到boc-glu-oet；或将boc-glu-oh和醋酸乙酯混合及在重氮烷的作用下反应后处理得到boc-glu-oet；
第二步，boc-glu-oet的羧基活化酯的制备：将boc-glu-oet和羧基活化试剂混合，在碱液的作用下，低温反应，制得boc-glu-oet的羧基（碳端）活化物；
第三步，boc-pyr-oet的制备，将boc-glu-oet的羧基活化物进行分子内环化，制得粗产品，后经萃取，提纯、结晶，制得理想的目标产物，检测合格。
所述将h-glu-oet的制备成boc-glu-oet的具体步骤为：将h-glu-oet和boc-酸酐保护剂混合，在碳酸钠的作用下反应，后经酸化萃取制得boc-glu-oet，其中h-glu-oet、boc-酸酐的摩尔比为：1:1-1.5，反应时间为6-12小时，反应温度为15-25℃，溶剂用量为：1gboc-酸酐溶解在4ml的丙酮中。其合成路线如下：
所述制备成boc-glu-oet的具体步骤为：将boc-glu-oh和醋酸乙酯混合及在重氮烷的作用下反应，之后用二环己胺调节ph，再脱除二环己胺盐得到纯的boc-glu-oet，其中boc-glu-oh、乙酸乙酯及重氮烷的摩尔比为：1:20:1.5。合成路线如下：
所述反应温度为：-5℃，所述反应时间为：24小时；所述二环己胺用量以调节ph为7.5-8为宜，优选调节ph为7.5。实施例四中未涉及柠檬酸，故删除；实施例也只有7.5，故增加优选值。
所述第二步的具体步骤为：将boc-glu-oet和羧基活化试剂混合于thf中，之后加入缩合剂，充分反应后，经醋酸乙酯萃取、水洗、盐水洗、干燥浓缩制得boc-glu-oet的内酸酐硬酯，其中boc-glu-oet、羧基活化剂、缩合剂的物质的量比为：1:1-2:0.8-1.2。合成路线如下：
所述boc-glu-oet和hosu的反应温度为-10-0℃，反应时间为12-24小时；
所述羧基活化剂为氯甲酸乙酯、氯甲酸异丁酯、n-羟基琥珀酰亚胺中的一种，优选n-羟基琥珀酰亚胺。
所述第三步中具体步骤为：boc-glu-oet羧基活化酯在酰化催化作用试剂与碱的催化作用下进行成环的sn2反应，后经萃取、洗涤、结晶，得到boc-pyr-oet，合成路线如下：
所述boc-glu-oet羧基活化酯、催化试剂、碱的摩尔比为：1:0.5-1:1-1.5；
所述酰化催化作用试剂为：dmap、dbu或醋酸钯中的一种，优选dmap。
所述的碱为：三乙胺、diea或碳酸钠中的一种。优选diea。
所述反应温度为：10-20℃，反应时间为：6-12小时。
本发明的有益效果：本发明通过boc-glu-oet制备boc-pyr-oet，方法简单易控制，得率高，尤其一步达到了产品的性质，得到了合格产品，大大提升了经济效益，且适宜于规模化生产。产品质量也得到大大的提高。
附图说明
图1为本发明产品的核磁共振图谱。
图2为本发明产品的质谱。
具体实施方式
下面结合实例对本发明进一步详细描述，但是他不是对本发明的进一步限制
实施例1：在2000ml的三口瓶中加入87.5g（0.5mol）h-glu-oet，加入500ml的水，外用冰盐浴降温，并用质量百分浓度10%的碳酸钠水溶液调节体系ph值为8-9，之后加入boc-酸酐的丙酮溶液（108.6g（0.5mol）x433ml丙酮），之后在25℃下反应6h，tlc跟踪反应，反应好后，经过萃取洗涤浓缩结晶得72.3g（0.263mol）boc-glu-oet；
在1000ml的三口瓶中加入723mlthf,再加入72.3gboc-glu-oet，之后加入60.5g（0.526mol）hosu、43.4g（0.21mol）dcc降温至0℃，反应12小时，之后用乙酸乙酯萃取，经水洗，盐水洗，干燥浓缩结晶，得干品75.1g（0.22mol）；
在2000ml的三口瓶中加入751mlthf,再加入75.1gboc-glu(ocooc2h5)-oet，之后加入13.4g（0.11mol）dmap、42.6g（0.33mol）diea,升温至20℃，反应12小时，之后用乙醚萃取，经盐酸水洗、水洗，盐水洗，干燥浓缩、冷却结晶，得油23.9g（0.093mol），经nmr、ms检测结构正确,参见图1、2。
实施例2：在3000ml的三口瓶中加入100g（0.57mol）h-glu-oet，加入1000ml的水，外用冰盐浴降温，并用质量百分浓度10%的碳酸钠水溶液调节体系ph值为8-9，之后加入boc-酸酐的丙酮溶液（155.2g（0.71mol）x620ml丙酮），之后在20℃下反应9h，tlc跟踪反应，反应好后，经过萃取洗涤浓缩结晶得101.9g（0.37mol）boc-glu-oet；
在2000ml的三口瓶中加入1020mlthf,再加入101.9gboc-glu-oet，之后加入63.8g（0.555mol）hosu、76.33g（0.37mol）dcc,降温至-5℃，反应18小时，之后用乙酸乙酯萃取，经水洗，盐水洗，干燥浓缩，得油112.7g（0.324mol）；
在2000ml的三口瓶中加入1127mlthf,再加入112.7gboc-glu(ocooc2h5)-oet，之后加入29.7g（0.243mol）dmap、52.3g（0.405mol）diea,升温至15℃，反应6小时，之后用乙醚萃取，经盐酸水洗、水洗，盐水洗，干燥浓缩、冷却结晶，得油46.75g（0.18mol）,经nmr、ms检测结构正确,参见图1、2。
实施例3：在2000ml的三口瓶中加入87.5g（0.5mol）h-glu-oet，加入800ml的水，外用冰盐浴降温，并用质量百分浓度10%的碳酸钠水溶液调节体系ph值为8-9，之后加入boc-酸酐的丙酮溶液（163.7g（0.75mol）x620ml丙酮），之后在15℃下反应12h，tlc跟踪反应，反应好后，经过萃取洗涤浓缩结晶得85.4g（0.324mol）boc-glu-oet；
在2000ml的三口瓶中加入854mlthf,再加入85.4gboc-glu-oet，之后加入37.3g（0.324mol）hosu、80.4g（0.39mol）dcc,降温至-10℃，反应24小时，之后用乙酸乙酯萃取，经水洗，盐水洗，干燥浓缩，得油91.7g（0.264mol）（83.4%）；
在2000ml的三口瓶中加入917mlthf,再加入91.7gboc-glu(ocooc2h5)-oet，之后加入32.25g（0.264mol）dmap、34.1g（0.264mol）diea,升温至10℃，反应8小时，之后用乙醚萃取，经盐酸水洗、水洗，盐水洗，干燥浓缩、冷却结晶，得油34g（0.132mol）,经nmr、ms检测结构正确,参见图1、2。
实施例4：在3000ml的三口瓶中加入61.8g（0.25mol）boc-glu-oh，之后加入经过干燥的新蒸的醋酸乙酯440.55g，降温至-5℃后加入15.75g重氮烷，保持-5℃反应24小时，之后用二环己胺调节ph值为7.5，之后抽滤的boc-glu-oet.dcha，之后重结晶，再脱除二环己胺，得到20.4g（0.074mol）boc-glu-oet纯品。
本发明所使用的缩写或英文全称的含义如下：
boc-pyr-oet：(s)-1-(叔丁氧羰基)-5-氧吡咯烷-2-羧酸乙酯（n-叔丁氧羰基-焦谷氨酸乙酯）
h-glu-oet:l-谷氨酸-1-乙酯
boc-glu-oh:n-叔丁氧羰基-谷氨酸
boc-glu-oet：n-叔丁氧羰基-谷氨酸-1-乙酯
boc-glu(osu)-oet：n-叔丁氧羰基-谷氨酸-5-琥珀酰亚胺基-1-乙酯
hosu：n-羟基琥珀酰亚胺
dcha：二环己胺
dcc:n’n-二环己基碳二亚胺
hcv:丙型肝炎病毒
thf:四氢呋喃
dbu:1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯
dmap:4-二甲氨基吡啶
diea:n,n-二异丙基乙胺
nmr：核磁共振（氢谱）
ms：质谱。