一种基于circNFIX基因的胶质瘤辅助诊断试剂盒及其使用方法与流程

文档序号:20275519发布日期:2020-04-04 11:43阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于circnfix基因的胶质瘤辅助诊断试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括扩增circnfix基因的pcr引物对、扩增内参基因gapdh的pcr引物对、聚合酶链式反应体系、rna提取试剂以及mrna反转录为cdna的体系;

所述扩增circnfix基因的pcr引物对为:

正向引物序列为:5’-aggagatgcggacatcaaac-3’,如seqidno.1所示;

反向引物序列为:5’-gtgaaatacgggctcgactg-3’,如seqidno.2所示;

所述扩增内参基因gapdh的pcr引物对为:

正向引物序列为:5’-gaatgggcagccgttaggaa-3’,如seqidno.3所示;

反向引物序列为:5’-aaaagcatcacccggaggag-3’,如seqidno.4所示。

2.根据权利要求1所述的一种基于circnfix基因的胶质瘤辅助诊断试剂盒,其特征在于:所述聚合酶链式反应体系包括pcr缓冲液、dntps、荧光染料、无酶水和荧光定量加样板。

3.根据权利要求1所述的一种基于circnfix基因的胶质瘤辅助诊断试剂盒,其特征在于:所述rna提取试剂包含trizol、氯仿、异丙醇、乙醇和无酶水。

4.根据权利要求1所述的一种基于circnfix基因的胶质瘤辅助诊断试剂盒,其特征在于:所述反转录为cdna的体系包含gdnaeraser、gdnaeraserbuffer、反转录反应液、反转录酶和dntps。

5.一种根据权利要求1-4任一项所述的基于circnfix基因的胶质瘤辅助诊断试剂盒的使用方法,其特征在于:包括以下步骤:

(1)、将获取的新鲜组织经过研碎后,进行rna抽提;

(2)、将抽提出的rna反转录成对应的cdna;

(3)、将反转录后的cdna进行circnfix和gapdh基因的pcr扩增;

(4)、以gapdh作为内参,记录每个反应的ct值,检测结果以δct表示。

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