1.一种嵌合抗原受体t细胞,其特征在于,所述嵌合抗原受体t细胞同时表达靶向cd19和pd-l1的嵌合抗原受体。
2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体t细胞,其特征在于,所述cd19嵌合抗原受体包括:cd19抗原结合结构域、铰链结构域、跨膜结构域和胞内共刺激信号传导结构域;
优选地,所述cd19抗原结合结构域包括如seqidno.1所示的氨基酸序列;
优选地,所述cd19嵌合抗原受体的胞内共刺激信号传导结构域包括cd28胞内结构域、cd3ζ、tlr1、tlr2、4-1bb或cd27中的任意一种或至少两种的组合;
优选地,所述cd19嵌合抗原受体的胞内共刺激信号传导结构域包括4-1bb共刺激结构域和cd3ζ胞内信号传导结构域;
优选地,所述cd19嵌合抗原受体包括如seqidno.2所示的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的嵌合抗原受体t细胞,其特征在于,所述pd-l1嵌合抗原受体包括:pd-l1抗原结合结构域、铰链结构域、跨膜结构域和胞内共刺激信号传导结构域;
优选地,所述pd-l1抗原结合结构域包括如seqidno.3、seqidno.4或seqidno.5所示的任意一种氨基酸序列,优选为seqidno.3;
优选地,所述pd-l1嵌合抗原受体的胞内共刺激信号传导结构域包括cd28胞内结构域、cd3ζ、tlr1、tlr2、4-1bb或cd27中的任意一种或至少两种的组合;
优选地,所述pd-l1嵌合抗原受体的胞内共刺激信号传导结构域包括cd28胞内结构域;
优选地,所述pd-l1嵌合抗原受体包括如seqidno.6、seqidno.7或seqidno.8所示的氨基酸序列。
4.根据权利要求1-3任一项所述的嵌合抗原受体t细胞,其特征在于,所述cd19嵌合抗原受体和pd-l1嵌合抗原受体通过2a或ires进行连接;
优选地,所述2a的氨基酸序列包括如seqidno.9所示的氨基酸序列。
5.一种表达载体,其特征在于,所述表达载体用于制备如权利要求1-4任一项所述的嵌合抗原受体t细胞;
优选地,所述表达载体包括编码cd19嵌合抗原受体的核酸分子、编码2a肽的核酸分子和编码pd-l1嵌合抗原受体的核酸分子;
优选地,所述编码cd19嵌合抗原受体的核酸分子包括如seqidno.10所示的核酸序列;
优选地,所述编码pd-l1嵌合抗原受体的核酸分子包括如seqidno.11、seqidno.12或seqidno.13所示的核酸序列。
6.根据权利要求5所述的表达载体,其特征在于,所述编码cd19嵌合抗原受体和编码pd-l1嵌合抗原受体的核酸分子共用一个启动子;
优选地,所述启动子为ef1α;
优选地,所述表达载体包括病毒载体;
优选地,所述病毒载体包括慢病毒载体、逆转录病毒载体或腺相关病毒载体中的任意一种,优选为慢病毒载体。
7.一种重组慢病毒,其特征在于,所述重组慢病毒采用如权利要求5或6所述的表达载体与包装辅助质粒共转染哺乳细胞制备得到;
优选地,所述哺乳细胞包括293细胞、293t细胞或293e细胞中的任意一种或至少两种的组合。
8.一种如权利要求1-4任一项所述的嵌合抗原受体t细胞的制备方法,其特征在于,所述方法包括将如权利要求5或6所述的表达载体或如权利要求7所述的重组慢病毒导入t细胞的步骤。
9.一种组合物,其特征在于,所述组合物包括如权利要求1-4任一项所述的嵌合抗原受体t细胞、如权利要求5或6所述的表达载体或如权利要求7所述的重组慢病毒中的任意一种或至少两种的组合。
10.一种如权利要求1-4任一项所述的嵌合抗原受体t细胞、如权利要求5或6所述的表达载体、如权利要求7所述的重组慢病毒或如权利要求9所述的组合物在制备治疗肿瘤的药物中的应用;
优选地,所述肿瘤为血液相关的肿瘤疾病;
优选地,所述血液相关的肿瘤疾病为白血病和/或淋巴瘤。