抗流感病毒化合物的制作方法

1.本发明涉及一类抗流感病毒化合物，及其在制备治疗与流感病毒相关药物中的应用。具体涉及式(ⅰ)所示化合物及其药学上可接受的盐。


背景技术：

2.流行性感冒病毒，即流感病毒(influenza virus,ifv)，是一种能够导致人和动物患流行感冒的分节状单链反义rna病毒。流感大爆发导致成千上万人死亡，引起巨大社会恐慌并增加社会不稳定因素。
3.流感病毒为正黏液病毒科的rna病毒，常见的包括：甲型流感病毒属、乙型流感病毒属、丙型流感病毒属等。
4.甲型流感病毒属可以引起季节性流感及世界流感大流行。其具有一个物种—甲型流感病毒，且野生水鸟为多种甲型流感的天然宿主，病毒也会传播到其它物种且随后可能在家禽中引起破坏性爆发或引起人类流感大流行。甲型病毒为三种流感类型之中最具毒性的人类病原体，且引起最严重的疾病。甲型流感病毒可以基于抗体对这些病毒的反应再分为不同的血清型。确认存在于人类、通过已知人类大流行性死亡的数目排序的血清型为：h1n1(其于1918年引起西班牙型流感)、h2n2(其于1957年引起亚洲流感)、h3n2(其于1968年引起香港流感)、h5n1(2007到2008年流感季节的大流行性威胁)、h7n7(其具有罕见人畜共生潜能)、h1n2(存在于人类及猪的地方病)、h9n2、h7n2、h7n3及h10n7。
5.乙型流感病毒属引起季节性流感，且具有一个物种—乙型流感病毒。乙型流感几乎完全感染人类且与甲型流感相比较不普遍。已知的易受乙型流感感染影响的唯一一种其它动物为海豹。这种类型的流感以相比甲型慢2到3倍的速率突变，且因此基因多样性较低，仅具有一种乙型流感血清型。由于这种抗原多样性缺乏，通常在早期就获得对乙型流感的一定程度的免疫性。然而，乙型流感充分突变使得具有持续免疫性不太可能。抗原变化的这种降低速率与其受限宿主范围(抑制交叉物种抗原转移)的结合确保不会发生乙型流感的大流行。
6.丙型流感病毒属具有一个物种—丙型流感病毒，其感染人类及猪且可能引起严重疾病及局部流行。然而，丙型流感相比其它类型较不普遍，且似乎通常引起儿童的轻度疾病。
7.目前的流感治疗选择包括接种疫苗和用抗病毒药物进行化疗和化学预防。抗病毒药物也可以用于治疗流感，其中神经氨酸酶抑制剂，如奥司他韦(达菲)，对于甲型流感病毒效果明显，但是经过临床观察发现，对于该类神经氨酸酶抑制剂已经出现了耐药的病毒株。在抗流感病毒领域，临床上亟需全新作用机制的抗流感病毒药物，能够支持单药使用治疗甲型流感，或者通过和已上市的其他作用机制的抗流感病毒药物联用，用于甲型流感的预防和治疗。
8.近年来,随着结构生物学和生物信息学的发展,药物靶标的结构信息越来越清晰的被研究者掌握,尤其是具有双作用中心和多作用中心的靶标被发现。基于此,簇合效应已
成为新医药品种创制的一种新趋势,在抗感染、抗病毒、抗hiv药物的开发中发挥了重要的作用(brana等,2004；harrison,1995；shen等,2004)。簇合效应是指通过一些连接体将不同或者相同的药效团有机结合形成二效价或者多效价的化合物，使之能够与不同的受体或者相同受体的不同结合位点相互作用产生协同效应。


技术实现要素：

9.本发明提供了式(ⅰ)所示化合物、其立体异构体、溶剂合物或其药学上可接受的盐，结构如式i所示：
10.a-b(式i)，
11.其中a表示r1、r2、r3独立选择cr4、n、o、s，r4为h、烷基、烷氧基、硝基、氰基、羟基、卤素、氨基、羧基、酯基、酰胺、芳基、杂芳基、环烷基、杂环基等；
12.b表示三芳环的稠合环系，并可以被烷基、烷氧基、硝基、氰基、羟基、卤素、氨基、羧基、酯基、酰胺、芳基、杂芳基、环烷基、杂环基等进一步取代。
13.作为优选，b选自
14.作为优选，a-b的连接形式为以下方式中的一种：
[0015][0016]
[0017]
作为更优选的化合物包括：作为更优选的化合物包括：
[0018]
本发明还提供了一种组合物，包括以上的化合物，以及常见的药学可用的载体和/或赋形剂。
[0019]
本发明还提供了上述化合物、其立体异构体、溶剂合物或其药学上可接受的盐在制备治疗抗流感病毒药物中的应用。其中流感病毒为甲型流感病毒、乙型流感病毒，包括h1n1、h2n2、h3n2、h5n1、h7n7、h1n2、h9n2、h7n2、h7n3及h10n7型等流感病毒。
[0020]
技术效果：
[0021]
本发明化合物主要用于预防和治疗由甲型流感病毒引起的流行性感冒，和现有临床用药相比，具有安全性高、口服生物利用度佳，并且具有对现有临床用药发生耐药的甲型
流感病毒株仍然具有明显抗病毒活性的潜力。
[0022]
本文所用的术语“烷基”意指饱和、直链或支链烃。如本文所用的术语“烯基”意指包括一或多个双键的直链或支链烃。如本文所用的术语“炔基”意指包括一或多个三键的直链或支链烃。如本文所用的“烷基”、“烯基”或“炔基”中的每一个可以任选地如下文所阐述经取代。在一些实施例中，“烷基”为c1-c6烷基或c1-c4烷基。在一些实施例中，“烯基”为c2-c6烯基或c2-c4烯基。在一些实施例中，“炔基”为c2-c6炔基或c2-c4炔基。
[0023]
术语“环脂肪族基”(或“碳环”或“碳环基”或“碳环的”)是指可饱和或含有不饱和的一或多个单元的非芳香族的仅含碳的环系统，具有3到14个环碳原子。在一些实施例中，碳原子数为3到10。在其它实施例中，碳原子数为4到7。在其它实施例中，碳原子数为5或6。所述术语包含单环、双环或多环融合螺接或桥连碳环系统。所述术语还包含多环系统，其中碳环可以与一或多个非芳香族碳环或杂环或一或多个芳香族环或其组合“稠合”，其中基团或连接点处于所述碳环上。“稠合”双环系统包括共享两个毗连环原子的两个环。桥连双环基团包括共享3或4个相邻环原子的两个环。螺接双环系统共享一个环原子。环脂肪族基的实例包含(但不限于)环烷基及环烯基。具体实例包含(但不限于)环己基、环戊烯基、环丙基及环丁基。
[0024]
术语“杂环”(或“杂环基”)是指可饱和或含有不饱和的一或多个单元的非芳香族环系统，具有3到14个环原子，其中一或多个环碳经例如n、s或o的杂原子置换，且所述系统中的各环含有3到7个成员。在一些实施例中，非芳香族杂环在环内包括选自n、s及o的最多三个杂原子。“碳环芳环”基团仅具有碳环原子(通常6到14个或6到10个)且包含例如苯基的单环芳香族环及稠合多环芳香族环系统，其中两个或大于两个碳环芳香族环彼此稠合。实例包含1-萘基、2-萘基、1-蒽基及2-蒽基。术语“杂芳基”、是指具有5到14个成员的杂芳香族环基团，包含单环杂芳香族环及多环芳香族环，其中单环芳香族环与一或多个其它芳香族环稠合。杂芳基具有一或多个环杂原子。本文所使用的术语“杂芳基”的范围内还包含芳香族环与一或多个非芳香族环(碳环或杂环)“稠合”的基团，其中基团或连接点处于芳香族环上。
[0025]
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机氨或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐，所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸，碳酸氢根，磷酸、磷酸一氢根、磷酸二氢根、硫酸、硫酸氢根、氢碘酸、亚磷酸等；以及有机酸盐，所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸；还包括氨基酸(如精氨酸等)的盐，以及如葡糖醛酸等有机酸的盐。
[0026]
本发明中涉及化合物的制备方法，可以采用常用的偶联反应、缩合反应等方式进行合成得到，反应通式如下：a-x和b-b(oh)2进行suzuki反应得到产物，或a-b(oh)2和b-x进行suzuki反应得到产物，对于其中的原料，可以购买自商业产品，或是以相应的芳环母体为
原料进行简单的取代反应得到。
[0027]
以下以具体实施例的方式给出化合物的具体制备方式及其活性测试结果。
[0028]
实施例1
[0029]
取原料各1mol，加入三口反应瓶中，在氮气保护条件下，加入甲苯做溶剂，加入pd(pph3)4、k2co3，加热回流，监控反应进行至反应原料耗尽，停止反应，加入乙酸乙酯稀释(80ml)，然后饱和食盐水(40ml
×
3)洗涤，分液后有机相用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压旋干，得到产物1ms(esi,pos.ion)m/z:308.6[m+1]+；
[0030]
1h nmr(600mhz,cdcl3)6.967.087.317.077.547.928.088.338.337.927.407.407.92(s，1h，ch)，3.23(s，2h，ch2)，6.95(1h，nh)
[0031]
13cnmr(150mhz,cdcl3)127.5125.7126.4135.4135.4129.1117.3134.437.7134.1122.5128.4131.3131.7126.7125.9131.7132.1
[0032]
实施例2-15
[0033]
按照如上述实施例的方法制备产物2-15
[0034]
[0035]
[0036][0037]
实施例16化合物体外抗h5n1活性：
[0038]
通过病毒蚀斑数减少分析来评估化合物的抗病毒活性。铺满mdck细胞的6孔板按照70pfu/孔接入流感病毒(h5n1)，40分钟后除去含病毒培养基并加入含有特定浓度待测药物的培养基，培养基含有终浓度为0.001％deae-dextran、2μg/ml tpck-trypsin和0.5％agarose。在37℃5％co2条件下培养48-72小时后，用3％的福尔马林固定细胞，用0.5％结晶紫对细胞进行染色并计算病毒蚀斑数。ec50是指特定药物有效抑制病毒产生蚀斑数至对照孔的50％所需的浓度。本发明以金刚烷胺为对照，结果见表。
[0039]
本发明的化合物抗h5n1活性结果
[0040]
序号ec50(μm)序号ec50(μm)11.3699.7420.271013.9734.901150.5543.33120.59511.79130.2060.25148.5370.981537.89825.77金刚烷胺0.39
[0041]
上述实验结果表明：合成的化合物都具有很好抗h5n1活性，可作为备选药物用于治疗h5n1流感引起的相关疾病。
[0042]
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。