技术特征：
1.一种重组人iii型胶原蛋白，其特征在于，其氨基酸序列包括基本重复单元，基本重复单元为：gppgppgaigpsgpagkdgesgrpgrpgerglpgppgikgpagipgfpgmkghrgfdgrngekgetgapglkgenglpgengapgpmgprgapgergrpglpgaagargndgargsdgqp。2.根据权利要求1所述的一种重组人iii型胶原蛋白，其特征在于，所述重组人iii型胶原蛋白重复单元的dna序列如下：ggtccacccggacctcccggggctataggcccgagcggtccagcgggcaaggacggcgagtccggtcgtccgggccggccgggcgaacgcggtcttccaggcccgcctggcatcaagggtccggctggcatcccgggttttccggggatgaagggtcaccgcggctttgatggtcgtaatggtgagaaaggagaaaccggtgccccaggtctgaaaggcgagaatggtctgccgggcgagaacggcgctccgggtccgatgggtccacgtggcgcgccgggtgaacgtggtagaccgggactgccgggtgcagcgggagcgcgtggtaatgatggcgcgcgtggtagcgacggccagccggg。3.根据权利要求1所述的一种重组人iii型胶原蛋白，其特征在于，所述基本重复单元的重复次数为3~10。4.根据权利要求1所述的一种重组人iii型胶原蛋白，其特征在于，所述基本重复单元的重复次数为5，其氨基酸序列如seq id no:1。5.根据权利要求4所述的一种重组人iii型胶原蛋白，其特征在于，所述基本重复单元的重复次数为5，其核苷酸序列如seq id no:2。6.一种如权利要求1-5任一项所述的重组人iii型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：蛋白序列设计根据人iii型胶原蛋白全长氨基酸序列为参考，选取两个gppgppg之间并包含前端gppgppg的氨基酸序列为重复单元，重复串联3~10次形成重组人iii型胶原蛋白的氨基酸序列；（2）基因设计和合成根据步骤（1）中所述的重组人iii型胶原蛋白的重复单元氨基酸序列反向设计编码核酸序列，并进行密码子优化，得到编码重组人iii型胶原蛋白重复单元的核苷酸序列，然后进行全基因合成，得到编码所述重组人iii型胶原蛋白片段的核酸片段，并通过ndei和xhoi多克隆位点连接到pet30a(+)质粒上，得到表达质粒；（3）表达菌株的构建和筛选：将步骤（2）中所述质粒通过热激法转入宿主细胞感受态中，涂布在含有卡那霉素的抗性板上，挑取单克隆菌株获得表达菌株；（4）诱导表达对步骤（3）得到的表达菌株进行诱导表达，收集菌液；（5）纯化对步骤（4）收集的菌液进行菌体破碎，使用ni亲和层析柱和离子交换层析柱进行重组人iii型胶原蛋白的纯化。7.根据权利要求6所述的重组人iii型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌bl21(de3)。8.一种如权利要求1-5任一项所述的重组人iii型胶原蛋白在医疗器械领域的用途。
技术总结
本发明属于优化编码基因技术领域，公开了一种重组人III型胶原蛋白及其制备方法和应用，其氨基酸序列包括基本重复单元，基本重复单元为：GPPGPPGAIGPSGPAGKDGESGRPGRPGERGLPGPPGIKGPAGIPGFPGMKGHRGFDGRNGEKGETGAPGLKGENGLPGENGAPGPMGPRGAPGERGRPGLPGAAGARGNDGARGSDGQP，本发明提供的重组人III型胶原蛋白具备较为理想的稳定性，并适用于工业化放大生产。产。产。
技术研发人员：徐兰举 齐磊 沈娟 刘鑫 李华
受保护的技术使用者：河北纳科生物科技有限公司
技术研发日：2021.12.24
技术公布日：2022/6/28