一种改进的三磷酸腺苷二钠的生产方法_3

文档序号:8539276阅读:来源:国知局
时,停止加酒精,搅拌半小时,然后继续加酒精至料液体积的1.5-2.0倍,保持温度搅拌半小时,然后开夹套冷却水,将料液冷至室温,静止I小时;
[0059]离心分离结晶液,湿品先用95% (v/v)酒精洗涤,再用无水乙醇浸泡,最后用干送去干燥;母液调PH至6.0-7.0后送蒸馏工段进行回收酒精;
[0060]4)干燥包装
[0061](I)干燥:将湿品放入真空干燥箱中,真空度彡一 0.lOMpa,控制温度在40_42°C,干燥2个小时,然后,调整真空度彡一 0.08Mpa,控制温度在37-38 °C,干燥4个小时,水分(8%时可出料;
[0062](2)包装:将合格的产品按规定的批量放入混合器中混合15-20分钟,然后按进行包装送检,合格入库;
[0063]所用原料的用量按重量份计为:腺苷38份、速冻酵母920份、磷酸二氢钾38份、磷酸氢二钾235份、硫酸镁18份、蔗糖210份、苯扎溴铵溶液22份、反渗透水1950份。
[0064]实施例2:
[0065]—种改进的三磷酸腺苷二钠的生产方法,包括如下步骤:
[0066]I)生化反应
[0067](I)硫酸镁溶液、腺苷溶液、苯扎溴铵溶液的制备:
[0068]①用少量反渗透水溶解硫酸镁制成硫酸镁溶液;
[0069]②用适量室温的反渗透水溶解腺苷制成腺苷溶液;
[0070]③用适量的反渗透水溶解苯扎溴铵稀释成5%苯扎溴铵溶液;
[0071](2)投放速冻酵母:加反渗透水于反应锅中,开动搅拌用夹套热水加热至40-450C,投放蔗糖及磷酸二氢钾和磷酸氢二钾,使其溶解,待其全部溶解后,停止加热,开循环水降温,当温度降至40°C以下时,投放速冻酵母,并用夹套热水缓慢升温;
[0072](3) ATP生化反应:当反应锅内温度升至20°C ± I时,依次投放硫酸镁溶液、苯扎溴铵溶液、腺苷溶液,反应开始计时,将反应液继续加热至36-39°C,保温,待有气泡溢出,开始取样测定ATP转化率,当反应达到ATP —条带时,反应结束;
[0073](4)灭活、调酸碱:反应结束,立即放掉夹套热水,迅速投放大量冰于反应锅内,并通冷却水降温,当温度降至4°C以下,用磷酸调pH至2.5-3.0,I小时后,再用液碱调pH至5.5-6.0,调好碱后30分钟开始压榨,压榨完毕,再用反渗透水顶洗滤饼,水顶液合并压榨液,检验含量、透光度,合格送分离工段处理;
[0074]2)树脂分离
[0075](I)串柱上样:将压榨液及水顶液稀释至0.2-0.45%,上D296树脂柱,流速为4-6L/min,定时检测流出液,查看是否有ATP漏出;当流出液中ATP浓度多0.03%时,停止上样,用反渗透水正顶至流出液ATP浓度< 0.01 %后,继续上样,如此反复直至上样结束;
[0076](2)水洗杂质:串柱上样结束,用反渗透水正进洗涤至流出液A257miS 0.2 ;然后反进水洗至树脂上层无浑浊机械杂质且流出液A257nmS 0.2后结束;流速控制在4-6L/min ;
[0077](3)稀盐洗杂质:水洗结束,用 ρΗ2.0-2.2 的 0.04mol/LNaCl—0.01mol/L HCl 稀盐液反进流洗,流速为6-10L/min ;每小时取样,测流出液中ATP浓度,当流出液中ATP浓度^ 0.03%时,反进洗杂质结束;改正进,正进流速不变,每小时取样一次,测流出液中ATP的浓度,当流出液中ATP浓度多0.025 %时,每半小时取样一次监测;当流出液pH跳至2-4,且ADP基本洗尽或只有ATP时,洗涤结束,开始洗脱;
[0078](4)洗脱:用 ρΗ3.5-3.8 的 lmol/LnaCl-0.01mol/L HCl 浓盐液进行洗脱,当洗脱流出液ATP浓度>0.38%时,收集洗脱液,送脱色;当洗脱流出液ATP浓度〈0.38%时,即停止收集;
[0079]3)精制
[0080](I)脱色:洗脱液根据色泽加入0.1-0.5%活性炭和0.1-0.3%硅藻土搅拌I小时脱色,离心分离过滤后,脱色液经检验合格后送超滤除蛋白;
[0081](2)超滤:将脱色液用〈I万分子量的超滤膜进行超滤除蛋白,合格后送去结晶;
[0082](3)结晶:超滤液先用CP级HCl调pH至2.5-3.3,再用> I万分子量的超滤膜进行超滤除蛋白,合格后放入结晶釜,开动搅拌,开始加入95% (v/v)乙醇,出现白色混浊前酒精加入速度控制在100L/h ;出现白色混浊时,停止加酒精,搅拌半小时,然后继续加酒精至料液体积的1.5-2.0倍,保持温度搅拌半小时,然后开夹套冷却水,将料液冷至室温,静止I小时;
[0083]离心分离结晶液,湿品先用95% (v/v)酒精洗涤,再用无水乙醇浸泡,最后甩干送去干燥;母液调PH至6.0-7.0后送蒸馏工段进行回收酒精;
[0084]4)干燥包装
[0085](I)干燥:将湿品放入真空干燥箱中,真空度彡一 0.lOMpa,控制温度在40_42°C,干燥2个小时,然后,调整真空度彡一 0.08Mpa,控制温度在37-38 °C,干燥4个小时,水分(8%时可出料;
[0086](2)包装:将合格的产品按规定的批量放入混合器中混合15-20分钟,然后按进行包装送检,合格入库;
[0087]所用原料的用量按重量份计为:腺苷42份、速冻酵母880份、磷酸二氢钾42份、磷酸氢二钾230份、硫酸镁22份、蔗糖190份、苯扎溴铵溶液18份、反渗透水2050份。
[0088]实施例3:
[0089]—种改进的三磷酸腺苷二钠的生产方法,包括如下步骤:
[0090]I)生化反应
[0091](I)硫酸镁溶液、腺苷溶液、苯扎溴铵溶液的制备:
[0092]①用少量反渗透水溶解硫酸镁制成硫酸镁溶液;
[0093]②用适量室温的反渗透水溶解腺苷制成腺苷溶液;
[0094]③用适量的反渗透水溶解苯扎溴铵稀释成5%苯扎溴铵溶液;
[0095](2)投放速冻酵母:加反渗透水于反应锅中,开动搅拌用夹套热水加热至40-450C,投放蔗糖及磷酸二氢钾和磷酸氢二钾,使其溶解,待其全部溶解后,停止加热,开循环水降温,当温度降至40°C以下时,投放速冻酵母,并用夹套热水缓慢升温;
[0096](3) ATP生化反应:当反应锅内温度升至20°C ± I时,依次投放硫酸镁溶液、苯扎溴铵溶液、腺苷溶液,反应开始计时,将反应液继续加热至36-39°C,保温,待有气泡溢出,开始取样测定ATP转化率,当反应达到ATP —条带时,反应结束;
[0097](4)灭活、调酸碱:反应结束,立即放掉夹套热水,迅速投放大量冰于反应锅内,并通冷却水降温,当温度降至4°C以下,用磷酸调pH至2.5-3.0,I小时后,再用液碱调pH至5.5-6.0,调好碱后30分钟开始压榨,压榨完毕,再用反渗透水顶洗滤饼,水顶液合并压榨液,检验含量、透光度,合格送分离工段处理;
[0098]2)树脂分离
[0099](I)串柱上样:将压榨液及水顶液稀释至0.2-0.45%,上D296树脂柱,流速为4-6L/min,定时检测流出液,查看是否有ATP漏出;当流出液中ATP浓度多0.03%时,停止上样,用反渗透水正顶至流出液ATP浓度< 0.01 %后,继续上样,如此反复直至上样结束;
[0100](2)水洗杂质:串柱上样结束,用反渗透水正进洗涤至流出液A257miS 0.2 ;然后反进水洗至树脂上层无浑浊机械杂质且流出液A257nmS 0.2后结束;流速控制在4-6L/min ;
[0101](3)稀盐洗杂质:水洗结束,用 ρΗ2.0-2.2 的 0.04mol/LNaCl—0.01mol/L HCl 稀盐液反进流洗,流速为6-10L/min ;每小时取样,测流出液中ATP浓度,当流出液中ATP浓度^ 0.03%时,反进洗杂质结束;改正进,正进流速不变,每小时取样一次,测流出液中ATP的浓度,当流出液中ATP浓度多0.
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