施例三：产品性质测定及对比分析
[0137] 1、试验样品
[0138] 样品1-6 :本发明实施例1-6制备方法得到；
[0139] 对比样品1 :采用专利EP0324154实施例1a方法制得的洛钼，具体制备方法如下：
[0140] 3.8g(0.01mol)顺式-[反式-1，2-环丁基双（甲胺）-N，N']_二氯钼（II)悬浮于 20ml水中，加热至40°C，向其中加入3. 39g(0. 02mol)硝酸银。搅拌I. 5小时后，于冰箱冷 却，滤除析出的氯化银沉淀，并用IOml水洗涤，滤液通过含100mL碱性离子交换柱，用150ml 水洗涤。然后滴加到4. 5g(0. 01mol，20%水溶液）的L-乳酸中。室温下搅拌3天后，将反 应混合物浓缩，后溶解于甲醇中并加入活性炭搅拌脱色。再将活性炭滤去，滤液中加入乙 醚，快速浓缩得固体，即为无定型态洛钼。
[0141] 对比样品2 :采用专利EP0611303实施例方法制得的洛钼三水合物，具体制备方法 如下：
[0142] 3.8g(0.01mol)顺式-[反式-1，2-环丁基双（甲胺）-N，N']_二氯钼（II)悬浮于 20ml水中，加热至40°C，向其中加入3. 39g(0. 02mol)硝酸银。搅拌1. 5小时后，于冰箱冷 却，滤除析出的氯化银沉淀，并用IOml水洗涤，滤液通过含100mL碱性离子交换柱，用150ml 水洗涤。然后滴加到4. 5g(0. 01mol，20%水溶液）的L-乳酸中。室温下搅拌3天后，将反 应混合物浓缩至大约20ml，冰箱中放置过夜。吸滤析出的结晶，滤液浓缩，冰箱放置过夜，又 析出结晶，再滤集，合并结晶后，用20ml水/丙酮（1/1，V/V)重结晶，所得晶体即为洛钼三 水合物。
[0143] 2、形态鉴定
[0144] 对比样品1 :得到的洛钼为无定形态；
[0145] 对比样品2 :通过X-射线衍射，PXRD图谱在2 Θ值约为6. 71、8. 35、12. 89、15. 14、 16. 74、17. 45、19. 01、19. 40、22. 07、22. 76、23. 16、24. 30、25. 21、25. 74、27. 08、30. 26、30. 79 处有衍射峰，其2 Θ值误差范围小于〇. 2,专利EP0611303中描述其熔点为210°C (分解）；
[0146] 本发明样品1-6 :如前所述，通过X-射线衍射，PXRD图谱在2 Θ值约为6. 61、8. 09、 12. 38、13. 03、15. 40、16. 66、17. 47、19. 07 处有衍射峰，其 2 Θ 值误差范围小于 〇. 2 ;DSC 图 谱显示在214±5°C处有放热峰，结合TGA及文献熔点数据判断，该峰为熔融分解峰，表明样 品1-6为同一晶型，也即为洛钼的新晶型E。
[0147] 3、溶解度考察
[0148] 分别配制浓度为 60 μ g/ml、80 μ g/ml、200 μ g/ml、400 μ g/ml、800 μ g/ml 的洛钼 三水合物溶液，通过HPLC法制造标准曲线，所得标准曲线方程为Y = 4. 8641X+20. 5794, R =0. 9998。将洛钼新晶型的样品1及对比样品2制成饱和水溶液（悬浮液），置25°C摇床 震荡6h，然后过滤，稀释适当倍数，进行HPLC分析。溶解度结果如下表8 :
[0149] 表8溶解度考察结果
[0151] 结果表明：本发明制得的洛铂化合物溶解性优于洛铂三水合物。
[0152] 4、洛钼新晶型质量对比研究
[0153] 取样品1-6、对比样品1-2各20mg，以产品水分、杂质含量、活性成分含量、收率等 为指标，考察产品质量和收率。结果见下表9:
[0154] 表9洛钼新晶型质量对比研究
[0155]
[0156] 上述结果表明，与洛钼无水物及洛钼三水合物相比，本发明获得的洛钼新晶型E 具有含量高、杂质低、收率好的特点。
[0157] 注1 :含量测定方法：照高效液相色谱法测定：色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅 胶为填充剂，以磷酸二氢钾溶液：乙腈=92:8为流动相，检测波长为210nm，柱温40°C，理论 板数按洛钼峰计算应补低于1000,洛钼峰与杂质峰分离度符合要求；对照品溶液的制备： 取洛钼三水合物对照品10mg，精密称定置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得；供试品 溶液的制备：取样品各20mg，精密称定，分别置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得； 测定及结果：精密量取对照品及样品溶液各10 μ 1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按 外标法以峰面积计算，按无水物计算即得，标准范围为97. 0% -102%。
[0158] 注2 :杂质检查方法：用薄层层析测定洛钼、1，2_二氨甲基环丁烷（CBM)、乳酸等 已知的和未知的杂质含量。展开剂：乙醇：氯仿：25%氨水：水=53 :39 :15 :1. 5(体积比）， 薄层层析板：硅胶60F254 1 0X 10薄层板。展开后至碘蒸气中用0. 3%茚三酮试剂和对亚硝基 二甲苯胺试剂显色，检查杂质CBM以及未知杂质。
[0159] 注3 :水分测定方法：采用KarlFischer方法测定。二水合物含水分理论量为 8. 77 %，三水合物含水分理论量为11. 96 %。
[0160] 5、稳定性考察
[0161] 将本发明实施例制得的样品1、对比样品2分别置于60°C烘箱内、相对湿度约为 95%的环境下、照度约为45001UX的光稳定试验箱内，分别于5天、10天后将样品取出进行 PXRD测试及HPLC分析，以考察样品在高温条件下的稳定性。结果见下表10 :
[0162] 表10稳定性评价结果
[0163]
[0164] 上述试验结果表明，本发明的洛钼为新晶型，溶解度高于洛钼三水合物，收率和 纯度非常理想，从高温、高湿、光照考察结果来看，洛钼新晶型稳定性好，无转晶现象发生， HPLC结果表明有效成分含量优于洛钼三水合物，且未发生明显变化，说明本发明洛钼新晶 型稳定性好。
【主权项】
1. 一种洛钼化合物晶体，其特征在于，其晶型为E，PXRD图谱在2 0角值约为6. 61、 8. 09、12. 38、13. 03、15. 40、16. 66、17. 47、19. 07 处有衍射峰，其中 2 0 值误差范围为 0? 2。2. 如权利要求1所述的洛钼晶体，其特征在于，熔点Tnkp.. = 214±5°C。3. 制备权利要求1或2所述洛钼晶体的方法，其特征在于，包括如下步骤b): 在洛钼二水合物中，加入乙二醇二甲醚，悬浮搅拌，析出结晶，分离出该结晶，干燥后得 白色粉末，即为洛钼的晶型E。4. 如权利要求3所述的方法，其中，所述的洛钼二水合物的制备方法包括如下步骤 a)： 在洛钼三水合物中加入悬浮结晶溶剂，悬浮搅拌，析出结晶，去除溶剂后，用乙醚洗涤， 真空干燥得到该洛钼二水合物结晶。5. 如权利要求4所述的方法，其中，步骤a)中，所述的结晶溶剂选自甲基叔丁基醚、甲 苯、乙醚、乙酸丁酯、1，4-二氧六环或正庚烷，所述洛钼三水合物与结晶溶剂的质量体积比 为洛钼三水合物：结晶溶剂=1:15-30。6. 如权利要求3-5任一项所述的方法，其中，步骤b)中，分离出结晶后，在干燥之前用 乙醚洗涤，所述干燥为真空干燥。7. 如权利要求3-6任一项所述的方法，其中，步骤b)中，所述悬浮于室温下进行，优选 悬浮 45_50h。8. 如权利要求3-7任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤b)中洛钼二水合物与乙 二醇二甲醚的质量体积比为洛钼二水合物：乙二醇二甲醚=1:15-30。9. 一种药物组合物，其特征在于，以权利要求1或2所述的洛钼晶体作为活性成分。10. 如权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物最小单元中含有洛 钼晶体的量为5mg、10mg或50mg。11. 如权利要求9或10所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物是任何临床上 可接受的药物剂型。12. 如权利要求9-11任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述剂型为注射用冻干 制剂。13. 权利要求1或2所述的洛钼晶体，或者权利要求9-12任一项所述的药物组合物在 制备抗癌药中的应用。14. 权利要求1或2所述的洛钼晶体或者权利要求9-12任一项所述的药物组合物，其 用于治疗乳腺癌、小细胞肺癌或慢性粒细胞性白血病。
【专利摘要】本发明涉及一种洛铂晶体、制备方法及药物应用，其晶型为E，其熔点Tm.p..＝214±5℃，其X-射线粉末衍射PXRD图谱中在2θ角值为6.61、8.09、12.38、13.03、15.40、16.66、17.47、19.07处有衍射峰，其中2θ值误差范围为0.2。该晶型E是在在洛铂二水合物中，加入乙二醇二甲醚，悬浮搅拌，析出结晶，分离出该结晶，干燥后得白色粉末，即为洛铂的新晶型E。与现有洛铂及洛铂三水合物相比，本发明的新晶型具有更好的稳定性、溶解性，更适于制备各种形式的药物制剂及贮存、使用，能够更好地用于治疗癌症如治疗乳腺癌、小细胞肺癌或慢性粒细胞白血病。
【IPC分类】A61P35/02, A61P35/00, C07F15/00, A61K31/282
【公开号】CN105218587
【申请号】CN201410279550
【发明人】窦啟玲, 隋东虎, 张圣贵
【申请人】贵州益佰制药股份有限公司
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2014年6月20日