时，添加10倍发酵液处理，其玉米种 子发芽率为89%，较CK的69%提高了 20个百分点；其白菜种子的发芽率为93%，较CK的 76%提高了 17个百分点。以上数据表明，解钾菌发酵液稀释10倍后可有效提高种子发芽 率。
[0080] 实施例2
[0081] 实施例2与实施例1基本相同、效果接近，区别在于：
[0082] -、本实施例以胶质芽孢杆菌NGW1发酵液：麦麸=1 : 2的体积配比制成解钾微 生物制剂，具体步骤包括：
[0083] 活化：将胶质芽孢杆菌NGW1接种于保藏培养基中活化，于30°C恒温培养箱内培养 20h。上述保藏培养基成分为：蔗糖5 %，磷酸氢二钾0. 5 %，硫酸镁0. 5 %，碳酸钙0. 5 %，琼 脂1.5%邛!17.5，115°(：下灭菌2〇1^11后使用。
[0084] 种子液制备：挑取平板上活化的胶质芽孢杆菌NGW1的单菌落接种至液体种子培 养基中，25 °C下培养10h至菌体浓度0D_达到0. 5-0. 6,获得菌株种子液。上述种子培养基 成分为：蔗糖〇. 5 %，酵母粉1 %，磷酸氢二钾1 %，硫酸镁1 %，碳酸钙1 %，蒸馏水1000mL， pH7. 2,115°C下灭菌20min后使用。
[0085] 摇瓶发酵：将种子液以5%接种量接入发酵培养基中，在37°C、240r/min下培养 36h至90%以上芽孢时结束发酵。上述发酵培养基成分为：糖蜜5%，葡萄糖10%，豆柏 2 %，磷酸氢二钾2 %，硫酸镁2 %，碳酸钙2 %，氯化钠0. 1 %，pH7. 2,121°C下灭菌30min后 使用。
[0086] 解钾微生物制剂的制备：将麦麸在121°C、30min条件下灭菌3次。将上述步骤所 得发酵液、麦麸以1:5的体积比混合，得到解钾微生物制剂，总芽孢数可达2X10sCFU/g。
[0087] 二、一种提高作物产量的肥料施用方法
[0088] -种提高作物产量的肥料施用方法，其步骤包括：将本实施例第一部分制备的解 钾微生物制剂施用于作物根围，肥料用量为每根施5g;追施白云母替代化学钾肥施用质量 的15 %，并保证所施白云母的钾含量与被白云母替代的化学钾肥的钾含量相等。
[0089] 具体的，所述作物为烟草，且在烟草的旺长期、打顶期施用胶质芽孢杆菌NGW1经 种子培养、发酵得到的发酵液，将发酵液用水稀释50倍后灌根，剂量为50mL/株。所述种子 培养、发酵步骤与本实施例第一部分中种子培养、发酵步骤相同。
[0090] 三、一种提高作物发芽率的方法
[0091] -种提高作物发芽率的方法，其步骤包括：将作物种子加至胶质芽孢杆菌NGW1经 种子培养、发酵得到的发酵液中，在25°C，70%湿度的条件下培养10d。所述作物为玉米、白 菜，所述发酵液用水稀释5倍后使用。
[0092] 实施例3
[0093] 实施例3与实施例1基本相同、效果接近，区别在于：
[0094] 本实施例以胶质芽孢杆菌NGW1发酵液：麦麸=1 : 10的体积配比制成解钾微生 物制剂，具体步骤包括：
[0095] 活化：将胶质芽孢杆菌NGW1接种于保藏培养基中活化，于35°C恒温培养箱内培 养15h。上述保藏培养基成分为：蔗糖3 %，磷酸氢二钾1 %，硫酸镁1 %，碳酸钙1 %，琼脂 1. 8%，ρΗ7· 5,115°C下灭菌 20min后使用。
[0096] 种子液制备：挑取平板上活化的胶质芽孢杆菌NGW1的单菌落接种至液体种子培 养基中，35 °C下培养9h至菌体浓度0D_达到0. 5-0. 6，获得菌株种子液。上述种子培养基 成分为：蔗糖2. 5 %，酵母粉0. 1 %，磷酸氢二钾0. 1 %，硫酸镁0. 1 %，碳酸钙0. 1 %，蒸馏水 lOOOmL，ρΗ7· 5,115°C下灭菌 20min后使用。
[0097] 摇瓶发酵：将种子液以2%接种量接入发酵培养基中，在35°C、220r/min下培养 40h至90%以上芽孢时结束发酵。上述发酵培养基成分为：糖蜜2. 5%，葡萄糖5%，豆柏 1%，磷酸氢二钾1%，硫酸镁1%，碳酸钙1%，氯化钠0. 05 %，pH7.5,121°C下灭菌30min后 使用。
[0098] 解钾微生物制剂的制备：将麦麸在121°C、30min条件下灭菌3次。将上述步骤所 得发酵液、麦麸以1:10的体积比混合，得到解钾微生物制剂，总芽孢数可达1Xl〇sCFU/g。
[0099] 二、一种提高作物产量的肥料施用方法
[0100] -种提高作物产量的肥料施用方法，其步骤包括：将本实施例第一部分制备的解 钾微生物制剂施用于作物根围，解钾微生物制剂用量为每根施l〇g;追施白云母替代化学 钾肥施用质量的20%，并保证所施白云母的钾含量与被白云母替代的化学钾肥的钾含量相 等。
[0101] 具体的，所述作物为烟草，且在烟草的旺长期、打顶期施用胶质芽孢杆菌NGW1经 种子培养、发酵得到的发酵液，将发酵液用水稀释80倍后灌根，剂量为80mL/株。所述种子 培养、发酵步骤与本实施例第一部分中种子培养、发酵步骤相同。
[0102] 三、一种提高作物发芽率的方法
[0103] -种提高作物发芽率的方法，其步骤包括：将作物种子加至胶质芽孢杆菌NGW1经 种子培养、发酵得到的发酵液中，在30°C，75%湿度的条件下培养8d。所述作物为玉米、白 菜，所述发酵液用水稀释2倍后使用。
[0104] 以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和 原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种解钾微生物，其特征在于：所述解钾微生物为胶质芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus)NGWl菌株，该菌株于2015年3月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保 藏编号为CCTCCNO:M2015175。2. -种解钾微生物制剂，其特征在于：所述解钾微生物制剂为胶质芽孢杆菌NGW1经种 子培养、发酵得到发酵液后，将发酵液与麦麸按体积比1:1-1:10混合所得。3. 如权利要求2所述的解钾微生物制剂，其特征在于：所述种子培养的步骤包括：将胶 质芽孢杆菌NGW1接种于保藏培养基中，于30-37 °C下培养8-20h后，挑菌接种至种子培养基 中，在25-40°C、180-240r/min下培养9-10h得种子液。4. 如权利要求3所述的解钾微生物制剂，其特征在于：所述保藏培养基的组分包括： 以质量百分比计，蔗糖〇. 1-5%，磷酸氢二钾0. 1-1%，硫酸镁0. 1-1%，碳酸钙0. 1-1%， 琼脂1. 5% -2. 0%，余量为蒸馏水；所述种子培养基的组分包括：以质量百分比计，蔗糖 0. 1-5 %，酵母粉0. 1-1 %，磷酸氢二钾0. 1-1 %，硫酸镁0. 1-1 %，碳酸钙0. 1-1 %，余量为蒸 馏水。5. 如权利要求3所述的解钾微生物制剂，其特征在于：所述发酵为将种子液以 2 % -5 %的接种比例接种至发酵培养基中，在30-37°C、180-240r/min下培养36-44h得发酵 液。6. 如权利要求5所述的解钾微生物制剂，其特征在于：所述发酵培养基的组分包括：以 质量百分比计，糖蜜〇. 1-5%，葡萄糖0. 1-10%，豆柏0. 1-2%，磷酸氢二钾0. 1-2%，硫酸镁 0. 1-2%，碳酸钙0. 1-2%，氯化钠0.01-0. 1%，余量为蒸馏水。7. -种提高作物产量的肥料施用方法，其步骤包括：将权利要求2所述的解钾微生物 制剂施用于作物根围，施用量为每根施l-l〇g;追施白云母替代化学钾肥的10% -20%，其 中，所施白云母的钾含量与被白云母替代的化学钾肥的钾含量相等。8. 如权利7所述的提高作物产量的肥料施用方法，其特征在于：所述作物为烟草，且在 烟草的旺长期、打顶期施用胶质芽孢杆菌NGW1经种子培养、发酵得到的发酵液，将发酵液 用水稀释50-100倍后灌根，用量为50-1OOmL/株。9. 一种提高作物发芽率的方法，其步骤包括：将作物种子加至胶质芽孢杆菌NGW1经种 子培养、发酵得到的发酵液中，在25-37°C，50% -80%湿度的条件下培养4-10d。10. 如权利要求9所述的提高作物发芽率的方法，其特征在于：所述作物包括玉米、白 菜，所述发酵液用水稀释1-10倍后使用。
【专利摘要】本发明提供了一种胶质芽孢杆菌，其保藏号为CCTCC？NO：M2015175，命名为胶质芽孢杆菌(Bacillus？mucilaginosus)NGW1，解决了现有生物钾肥中微生物解钾效果、促生效果不稳定，定殖能力欠缺的问题。进一步将胶质芽孢杆菌NGW1发酵并与可以促进胶质芽孢杆菌NGW1发挥功效的麦麸载体进行复配得到解钾微生物制剂，施用于作物后增产效果稳定、菌种在土壤中存活能力强、土壤改良效果佳。进一步提供了提高作物产量的肥料施用方法，利用细菌以载体为营养物质进行繁殖来进一步分解矿物，从而促进土壤固结、钾素释放及作物对钾的吸收，该方法可减少化学钾肥的使用，节约资源，改良土壤，提升作物产量、品质。还提供了显著提高作物发芽率的方法，有利于作物育苗。CCTCC NO：M201517520150327
【IPC分类】C12R1/07, A01N63/02, C05F11/08, A01P21/00, C12N1/20
【公开号】CN105274026
【申请号】CN201510729377
【发明人】陈守文, 张健行, 徐迪红, 余君, 王瑞, 王昌军, 曾衡, 杨欢, 陈建刚, 马昕, 李进平, 杨勇
【申请人】湖北大学
【公开日】2016年1月27日
【申请日】2015年10月30日